मिथिलीन ब्लू विरुद्ध NAD+ पद्धती: कार्ययंत्रणा, पुरावे आणि एकत्रित वापराचे दावे

मिथिलीन ब्लू आणि NAD+ वाढवणारी म्हणून विकली जाणारी पूरके, या दोन्हींचे वर्णन करताना मायटोकॉन्ड्रिया आणि पेशींमधील ऊर्जा हे शब्द वापरले जातात. यापैकी कोणतेही वर्णन उत्पादन प्रत्यक्षात काय करते हे सांगत नाही.

या दोन पद्धती वेगवेगळ्या चलांवर काम करतात. एक पद्धत तुमच्या पेशींमध्ये किती NAD+ आहे हे बदलण्याचा प्रयत्न करते. दुसरी त्याच्या दोन रूपांमधील गुणोत्तर बदलते. एकाच ठिकाणी पोहोचण्याचे हे दोन मार्ग नाहीत.

नेहमी गल्लत होणारी दोन परिमाणे

NAD+ हे एक सहविकर आहे. ते हायड्राइड आयनच्या स्वरूपात इलेक्ट्रॉनची एक जोडी स्वीकारते आणि NADH बनते. NADH ते इलेक्ट्रॉन पुढे हस्तांतरित करते तेव्हा ते पुन्हा NAD+ बनते. पेशी हे चक्र सतत वापरतात: अन्नातून मिळालेली ऊर्जा ATP तयार करणाऱ्या प्रथिनांच्या यंत्रणेपर्यंत याच मार्गाने पोहोचते.

NAD+ आणि NADH या एकाच रेणूच्या दोन अवस्था असल्यामुळे, पेशीमध्ये लक्ष ठेवण्याजोगी दोन स्वतंत्र परिमाणे असतात. पहिले म्हणजे एकूण साठा: NAD+ आणि NADH मिळून एकूण किती आहे. दुसरे म्हणजे त्यांच्यातील गुणोत्तर, ज्यावरून इलेक्ट्रॉन वाहकांवर सध्या किती इलेक्ट्रॉन भरलेले आहेत हे समजते.

जलाशयाचे उदाहरण हा फरक स्पष्ट करते. धरणामागील पाण्याचे एकूण प्रमाण म्हणजे साठा. वरच्या बाजूला साठवलेले पाणी आणि खालच्या बाजूला सोडलेले पाणी यांच्यातील वाटणी म्हणजे गुणोत्तर. दरवाजा उघडून, एक लिटरही पाणी न वाढवता, तुम्ही ते गुणोत्तर वाढवू शकता. मिथिलीन ब्लू काय करते यासाठी हे केवळ रूपक नाही. हे जवळजवळ त्याचे शब्दशः वर्णन आहे.

पुरवठा वाढवण्याची पद्धत

निकोटिनामाइड रायबोसाइड, निकोटिनामाइड मोनोन्यूक्लिओटाइड आणि निकोटिनामाइड यांसारखी NAD+ पूर्वद्रव्यांची पूरके ही निर्मितीसाठी लागणारा कच्चा माल आहेत. पेशी सॅल्व्हेज मार्ग नावाच्या पुनर्वापर प्रक्रियेतून NAD+ तयार करतात आणि पूर्वद्रव्ये या प्रक्रियेला पुरवली जातात. साठा वाढवणे हे यामागचे उद्दिष्ट आहे.

प्राण्यांमध्ये हे चांगले प्रस्थापित झाले आहे: अनेक प्रायोगिक मॉडेलमध्ये वय आणि चयापचयाशी संबंधित आजारांमुळे ऊतींमधील NAD+ कमी होते, आणि पूर्वद्रव्ये दिल्यावर ते वाढण्याची प्रवृत्ती दिसते. मानवांमध्ये मात्र निष्कर्ष अधिक मर्यादित आहेत. मानवी चाचण्यांत ही संयुगे रक्तात मोजली जाणारी NAD+ पातळी वाढवतात असे दिसते. मात्र त्यांनी नैदानिक परिणाममापात सातत्यपूर्ण सुधारणा दाखवलेली नाही; म्हणजे एखाद्या व्यक्तीला जाणवतील अशा गोष्टींमध्ये किंवा चाचणी ज्या गोष्टी मोजण्यासाठी आखली आहे त्यांमध्ये.

"NAD+ पातळी वाढली" हे शरीरातील एखाद्या बाबीचे मोजमाप आहे. एखाद्या व्यक्तीला कसे वाटले, तिची हालचाल कशी होती किंवा ती कशी सावरली याविषयीचा तो निष्कर्ष नाही.

त्याऐवजी मिथिलीन ब्लू काय करते

मिथिलीन ब्लू हे पूर्वद्रव्य नाही. हा एक रेडॉक्स रंजक आहे; त्याचा वैद्यकीय वापर शतकाहून अधिक काळापासून होत आला आहे, आणि त्याचे मान्यताप्राप्त उपयोग हे संशोधनाधीन उपयोगांपेक्षा मर्यादित आहेत.

पेशीच्या आत फ्लेविनवर अवलंबून असलेली विकरे त्याचे अपचयन करून रंगहीन ल्युकोमिथिलीन ब्लू तयार करतात; त्यानंतर त्याचे पुन्हा ऑक्सिडीकरण होते. जे इलेक्ट्रॉन श्वसन साखळीतील पहिला टप्पा असलेल्या कॉम्प्लेक्स I मधून गेले असते, ते त्याऐवजी मिथिलीन ब्लूमार्फत NADH मधून काढले जाऊ शकतात. NADH चे NAD+ मध्ये रूपांतर होते.

गुणोत्तर वाढते. साठा वाढत नाही.

मधुमेही हृदयावरील उंदरांच्या एका अभ्यासात हे विलग केलेल्या हृदयाच्या मायटोकॉन्ड्रियामध्ये थेट मोजले गेले. मेदाम्लांच्या ऑक्सिडीकरणादरम्यान 6 ते 18 micromolar सांद्रतेत मिथिलीन ब्लू घातल्याने NADH आणि NADH-to-NAD+ गुणोत्तरात मात्रेनुसार घट झाली. NAD+ च्या निरपेक्ष प्रमाणातील बदल NADH पेक्षा खूपच कमी होता; दोन्हीपैकी कोणत्याही रूपाची नव्याने निर्मिती करण्याऐवजी एका रूपाचे दुसऱ्यात रूपांतर करणाऱ्या संयुगाकडून अशीच अपेक्षा असते.

त्या इलेक्ट्रॉनचे अंतिम गंतव्य महत्त्वाचे असते. विलग केलेल्या मेंदूच्या मायटोकॉन्ड्रियामध्ये, श्वसन साखळीला प्रतिबंध केला असताना 100 nanomolar ते 1 micromolar सांद्रतेतील मिथिलीन ब्लूमुळे ऊर्जा निर्मिती सुधारली; त्याच वेळी, तपासलेल्या प्रत्येक परिस्थितीत हायड्रोजन पेरॉक्साइडची निर्मिती वाढली आणि त्याचे निर्मूलन कमी झाले. लेखकांच्या मते, अपचयित मिथिलीन ब्लूकडून ऑक्सिजनचे थेट अपचयन झाल्यामुळे हे हायड्रोजन पेरॉक्साइड तयार होते. या मार्गाने NADH मधून बाहेर पडणारे इलेक्ट्रॉन नाहीसे होत नाहीत. ते ऑक्सिजनपर्यंत पोहोचतात.

अकिलीस कंडरेच्या ऊतींवरील एका स्वतंत्र अभ्यासात हा मुद्दा स्पष्टपणे मांडला आहे. मिथिलीन ब्लूमुळे इजा झालेल्या कंडरापेशींमध्ये आणि उंदरांच्या कंडराविकाराच्या मॉडेलमध्ये NAD+/NADH संतुलन पूर्ववत झाले आणि ATP निर्मिती वाढली; मात्र एकूण NAD साठ्यात लक्षणीय बदल झाला नसल्याची नोंद या शोधलेखात आहे.

ऊती आणि प्राण्यांवरील प्रयोग काय सिद्ध करतात

चार दशकांतील चार प्रयोग एकाच कल्पनेचा मागोवा घेतात आणि तिची मर्यादा वारंवार दाखवतात.

उंदरांना दीर्घकाळ अल्कोहोल दिलेल्या प्रयोगात, इथेनॉलमुळे यकृतातील पेशीद्रव आणि मायटोकॉन्ड्रिया या दोन्हींमधील NAD+/NADH गुणोत्तर कमी झाले. आहारात मिथिलीन ब्लू घातल्याने हा बदल मोठ्या प्रमाणात टाळला गेला. मात्र इथेनॉलमुळे यकृतात झालेला चरबीचा संचय कमी झाला नाही. गुणोत्तर सुधारल्याने परिणाम सुधारला नाही. रेडॉक्समधील बदल ही एखाद्या फायद्यामागील कार्ययंत्रणा असल्याचा दावा स्वीकारण्यापूर्वी 1985 मधील हा निष्कर्ष लक्षात ठेवण्यासारखा आहे.

यकृताच्या पेशी आणि अधिक चरबीयुक्त आहारावरील उंदरांमध्ये, मिथिलीन ब्लूमुळे NAD+/NADH गुणोत्तर वाढले, SIRT1 वाढले, PGC-1alpha चे अॅसिटिलीकरण कमी झाले, AMPK सक्रिय झाले आणि यकृतातील चरबीचा संचय कमी झाला. येथे गुणोत्तरासोबत परिणामही बदलला. हाच शोधलेख दाखवतो की मात्रा वाढत गेल्यावर प्रभाव एकाच दिशेने बदलत नाही: दररोज तीन milligrams per kilogram दिल्यावर मायटोकॉन्ड्रियल DNA चे प्रमाण दहा दिल्यापेक्षा अधिक प्रभावीपणे वाढले, तर ऑक्सिजनचा वापर आणि AMPK संकेतप्रक्रिया मात्रेसोबत वाढली.

मधुमेही हृदयावरील प्रयोगात, अकरा आठवडे पिण्याच्या पाण्यातून दिलेल्या मिथिलीन ब्लूमुळे हृदयाच्या मायटोकॉन्ड्रियातील NADH-to-NAD+ गुणोत्तर कमी झाले आणि सर्टुइन 3 ची क्रियाशीलता वाढली. 34 प्रथिनांवरील 83 ठिकाणी लायसिनचे अॅसिटिलीकरण कमी झाले; ही ठिकाणे मुख्यतः मेदाम्लांचे वहन आणि ऑक्सिडीकरण यांच्याशी संबंधित होती. हृदयातून बाहेर पंप होणाऱ्या रक्ताचे प्रमाण, म्हणजे इजेक्शन फ्रॅक्शन, सुधारले. मात्र कॉम्प्लेक्स I वर अवलंबून असलेले श्वसन सुधारले नाही. तसेच, जनुक निष्क्रिय करण्याच्या प्रयोगाने सहज गल्लत होऊ शकणारे दोन प्रभाव वेगळे केले: सर्टुइन 3 शिवायही गुणोत्तरातील बदल मोठ्या प्रमाणात झाला, तर अॅसिटिल गट काढण्याची प्रक्रिया त्यावर अवलंबून होती.

कंडरेवरील अभ्यासात, रोटेनोन वापरून कॉम्प्लेक्स I रासायनिकरीत्या अवरोधित केलेले असताना मिथिलीन ब्लू वापरण्यात आले. तरीही त्याने NAD+ संतुलन पूर्ववत केले; आणि तरीही ते ऑक्सिडेटिव्ह ताण, मॅट्रिक्सचा ऱ्हास आणि पेशींच्या जिवंत राहण्याच्या क्षमतेतील घट रोखू शकले नाही. ऊती पूर्ववत होण्यासाठी केवळ गुणोत्तर पूर्ववत होणे पुरेसे नव्हते.

संपूर्ण संदर्भांसह छापता येणाऱ्या पत्रकात याच ओळी वापरल्या आहेत.

या युक्तिवादात सर्टुइन्स का आणली जातात

सर्टुइन्स प्रथिनांमधून अॅसिटिल गट काढतात आणि त्यासाठी NAD+ वापरतात. त्यांची क्रियाशीलता NAD+ च्या उपलब्धतेला प्रतिसाद देते; त्यामुळे उपलब्धता बदलणारे कोणतेही संयुग पुढील टप्प्यात सर्टुइन्सची क्रियाशीलताही बदलते.

"NAD+ साठी मिथिलीन ब्लू" असे म्हणणाऱ्या बहुतेक विपणनाचा हा आधार आहे. याच ठिकाणी तर्कही चुकतो. गुणोत्तर बदलल्याने सर्टुइन्सची क्रियाशीलता वाढू शकते. त्यावरून उत्पादन NAD+ पुरवते असा निष्कर्ष निघत नाही; तसेच त्याचा परिणाम पूर्वद्रव्य घेण्याइतकाच आहे असेही ठरत नाही. यापैकी कोणतीही मांडणी स्वीकारण्यापूर्वी या मोजमापांचा रेडॉक्सच्या दृष्टीने अर्थ लावताना उद्भवणाऱ्या स्वतंत्र अडचणींबद्दल वाचणे उपयुक्त ठरेल.

मानवांमध्ये कशाची चाचणी झाली आहे

मिथिलीन ब्लूचा अनेक दशकांपासून वैद्यकीय देखरेखीखालील तीव्र परिस्थितींमध्ये वापर होत आहे: मेथेमोग्लोबिनेमिया, इफोस्फामाइडशी संबंधित मज्जासंस्थेवरील विषारी परिणाम आणि शस्त्रक्रियेदरम्यान अत्यंत कमी रक्तदाब. हे मर्यादित, देखरेखीखालील उपयोग आहेत; कार्यक्षमता वाढवण्यासाठी दररोज तोंडावाटे वापर करण्याचा हा पुरावा नाही.

या लेखासाठी केलेल्या शोधात निरोगी स्वयंसेवकांना मिथिलीन ब्लू दिल्यानंतर NAD+ चे चयापचयजन्य पदार्थ मोजणारा मानवी अभ्यास आढळला नाही. वरील निष्कर्ष विलग केलेले मायटोकॉन्ड्रिया, संवर्धित पेशी, उंदरांच्या ऊती आणि शरीरातून काढलेल्या मानवी ऊतींवरील प्रयोगांतून आले आहेत. शरीरातून काढलेली कंडरेची ऊती प्रयोगशाळेतील पात्रात जिवंत ठेवणे हे पेशीवंशावरील प्रयोगापेक्षा उपयुक्त पुढचे पाऊल आहे. तरीही ती जिवंत व्यक्ती नाही.

पूर्वद्रव्यांवरील संशोधन खरोखर मानवांमध्ये झालेले आहे आणि त्याचे निष्कर्ष माफक आहेत. रक्तातील NAD+ वाढते. नैदानिक परिणाममापांवरील निष्कर्ष मिश्र आहेत आणि बदल साधारणतः लहान आहेत.

म्हणून एकत्रित वापराबाबतचा दावा हा रास्त प्रश्न आहे, पण त्याचे उत्तर समाधानकारक नाही: या लेखासाठी शोधात आढळलेल्या कोणत्याही प्रकाशित अभ्यासात, चाचणीत किंवा प्रकरणमालिकेत मिथिलीन ब्लूची निकोटिनामाइड रायबोसाइड, निकोटिनामाइड मोनोन्यूक्लिओटाइड किंवा NAD+ च्या अंतःशिरा वापरासोबत चाचणी केलेली नाही. या एकत्रित वापराला पुराव्यांचा आधार आहे किंवा दोन्ही एकमेकांचा प्रभाव वाढवतात असे सांगणारी व्यक्ती दोन स्वतंत्र पुरावासंचांवरून पुढचा अंदाज बांधत आहे.

असा अंदाज दोन्ही दिशांनी चुकू शकतो. गुणोत्तर पूर्ववत झाल्यानंतर साठा ही मुळातच मर्यादा घालणारी बाब नसेल, तर तो अतिआशावादी ठरू शकतो. तो अतिसुलभही ठरू शकतो, कारण मिथिलीन ब्लूच्या मात्रा–प्रतिसाद वक्राची दिशा एका टप्प्यावर बदलते. त्याचे संशोधकच या संयुगाचे वर्णन हॉरमेटिक असे करतात: कमी सांद्रता अपचयनाला अनुकूल असते, तर अधिक सांद्रता इलेक्ट्रॉनना श्वसन साखळीपासून दुसरीकडे वळवते आणि ऑक्सिडीकरणाला प्रोत्साहन देणाऱ्या पदार्थाप्रमाणे वागू शकते. अधिक क्रियाधार घातल्याने हा वक्र अधिक सुरक्षित होत नाही.

NAD+ शी संबंध नसलेल्या परस्परसंवादांचीही चिंता आहे. मिथिलीन ब्लू मोनोअमाइन ऑक्सिडेज A ला प्रतिबंध करते; म्हणूनच काही नैराश्यविरोधी औषधांसोबत त्याच्या वापरात सेरोटोनिनशी संबंधित धोका असतो. मध्यवर्ती मज्जासंस्थेवरील नोंदवलेल्या विषारी परिणामांच्या आढाव्यात 14 पैकी 13 प्रकरणे सेरोटोनिन विषबाधेसाठीचे Hunter निकष पूर्ण करत असल्याचे आढळले. जास्त प्रमाणात संपर्क आल्यास ते मेथेमोग्लोबिनेमियाही निर्माण करू शकते. तुम्ही डॉक्टरांनी लिहून दिलेली औषधे घेत असाल, तर एकत्रित वापराबद्दल तुमच्या डॉक्टरांना विचारायचा प्रश्न या मार्गांशी संबंधित असावा, रेडॉक्स संतुलनाशी नव्हे. साध्या जोड्यांनाही हीच शिस्त लागू होते: मिथिलीन ब्लूसोबत घेतल्या जाणाऱ्या इतर पूरकांसाठी स्वतंत्र पुरावासंच आहे, ज्यातील बराचसा भाग अजून तपासलेला नाही.

तुम्ही प्रत्यक्षात कोणता प्रयोग करत आहात हे शुद्धता का ठरवते

प्रयोगशाळेने वेगळे सिद्ध करेपर्यंत मिथिलीन ब्लू उत्पादन हे एक मिश्रण असते. येथे महत्त्वाची अशुद्धता म्हणजे Azure B; हे मिथिल गट काढलेले फेनोथायाझीन निष्क्रिय नाही. हा रेडॉक्स-सक्रिय रंजक असून त्याचे मूलभूत विद्युतरसायनशास्त्र तेच आहे. त्यामुळे लक्षणीय प्रमाणात Azure B असलेले उत्पादन हे त्याच हस्तक्षेपाचे अधिक स्वच्छ किंवा अधिक अशुद्ध रूप नसते. ते त्याच मार्गावर कार्य करणारे वेगळे मिश्रण असते, ज्यातील घटकांचे गुणोत्तर कोणीही व्यवस्थित निश्चित केलेले नसते.

USP दर्जामुळे खरेदीदाराला निश्चित ओळख व गुणधर्म असलेला पदार्थ मिळतो. USP दर्जाचे नसलेले उत्पादन बहुधा वस्त्रोद्योगासाठीचा रंजक असते; आणि अशा दर्जाच्या रंजकांमध्ये जड धातू व उरलेले विद्रावक यांसारख्या अशुद्धता असतात, ज्यामुळे ते सेवनासाठी योग्य नसतात.

फरक केवळ दर्जांमध्येच नाही. USP चे पालन केल्याचा दावा करणारे अनेक विक्रेते फक्त जड धातूंची तपासणी करतात आणि त्या एका चाचणीसंचाला संपूर्ण अनुपालन म्हणून सादर करतात. संपूर्ण विनिर्देशामध्ये पदार्थाची ओळख, शुद्धता, सेंद्रिय अशुद्धता, उरलेले विद्रावक, मूलद्रव्यीय अशुद्धता, प्रज्वलनानंतरचे अवशेष, सूक्ष्मजीव मर्यादा आणि जीवाणूजन्य एंडोटॉक्सिन यांचा समावेश असतो. अंशतः केलेला चाचणीसंच वगळलेल्या बाबींबद्दल काही सांगू शकत नाही; आणि या वगळलेल्या बाबींमध्ये संबंधित पदार्थ व विद्रावकांचे अवशेष येतात.

Blupreme मिथिलीन ब्लूच्या औषधनिर्मात्याकडून खरेदी करते आणि संपूर्ण विनिर्देश समाविष्ट करणारे विश्लेषण प्रमाणपत्र प्रकाशित करते. त्यामुळे बाटलीतील पदार्थ हाच संशोधनात वर्णन केलेला पदार्थ असतो. खरेदी करण्यापूर्वी तुम्हाला हा तर्क स्वतः तपासायचा असेल, तर मिथिलीन ब्लूवरील संशोधन कसे वाचावे हा लेख प्रत्येक प्रकारचा अभ्यास काय दाखवू शकतो आणि काय दाखवू शकत नाही हे स्पष्ट करतो.

छाननीनंतरही टिकून राहणारा फरक

NAD+ पूर्वद्रव्याची भर घातल्याने किती NAD+ आहे हे बदलते. मिथिलीन ब्लूमुळे अस्तित्वात असलेले NAD+ काय करत आहे हे बदलते. पहिला प्रश्न पुरवठ्याचा आहे, दुसरा प्रवाहाचा; आणि एकाला आधार देणारे प्रयोग दुसऱ्याबद्दल फारसे काही सांगत नाहीत.

मिथिलीन ब्लूमागे एक सुसंगत कार्ययंत्रणा आहे, जी विलग केलेल्या मायटोकॉन्ड्रियामध्ये आणि प्राण्यांच्या ऊतींमध्ये पुष्टी झाली आहे. मात्र त्यासोबत एक स्पष्ट मर्यादा वारंवार दिसते: गुणोत्तर बदलणे म्हणजे ऊतींमधील बिघाड दुरुस्त करणे नव्हे. मानवांमध्ये NAD+ वरील परिणाम मोजणाऱ्या मानवी चाचण्यांचा त्याला अभाव आहे. दोन्ही एकत्र घेतल्याची थेट चाचणी या दोन्ही श्रेणींपैकी कोणाकडेही नाही.

दोन्ही श्रेणींना एकाच निकषाने पाहायला हवे. उत्पादन कोणते चल बदलण्याचा दावा करते हे विचारा; मग मानवांमध्ये त्या चलाची कोणती मोजमापे उपलब्ध आहेत हे विचारा. उत्तर पेशींवरील अभ्यास, उंदरावरील प्रयोग किंवा संभवनीय जैविक मार्ग असेल, तर ते तितकेच आहे. तो पुराव्याने आधारलेला एकत्रित पूरक-वापर नाही.