Нийтлэл
Метилен хөхөөр будах: микроскопийн аргууд ба бодит зургийн атлас
Метилен хөхөөр будах нь тод талбайн микроскопоор ажиглахад бүдэг харагддаг эсийн шинжүүдийг ялгахад хялбар болгодог. Энэ нь суралцагчдад хацрын эсийн бөөмийг олох, эсвэл бичил биетний хүрээ болон байрлалыг ажиглахад тусалж болно. Гэхдээ хөх өнгөтэй объект харагдсан нь зөвхөн ажиглалт юм. Тухайн биетийг нэрлэх, хэмжих, өвчнийг илтгэж байгаа эсэхийг тогтоох нь тус тусдаа хийх ажил.
Нүүр зураг нь тодролын зарчмыг харуулна. Доорх атлас нь тус тусдаа баримтжуулсан сорьцын бодит гэрэл зургуудыг анхны эх сурвалжийн мэдээлэлтэй нь багтаасан.
Метилен хөх юуг тодруулдаг вэ?
Метилен хөх нь суурилаг будаг бөгөөд түүний өнгөт ион эерэг цэнэгтэй. OpenStax-ийн микроскопийн сорьцыг будах тухай тайлбарт дурдсанаар, суурилаг будаг нь эсийн сөрөг цэнэгтэй материалтай харилцан үйлчилж, эсийг цайвар дэвсгэрээс ялгаруулж чаддаг. Тохирох бэлдмэлд метилен хөх нь нуклейн хүчлээр баялаг хэсгүүд болон будагтай холбогддог бусад бүтцийг тодруулдаг.
Энгийн будалтын үед нэг будаг тодрол үүсгэдэг. Иймээс өөр өөр бичил биетэн ижил хөх өнгөтэй харагдаж болно. Эхний ээлжид дүрслэн тодорхойлох асуултууд хэрэгтэй: объектууд бөөрөнхий юу, сунасан уу, тус тусдаа юу, бөөгнөрсөн үү, жигд будагдсан уу, эсвэл доторх хэсгүүд нь ялгарч харагдаж байна уу? Өнгийг ангиллын үр дүн гэж тайлбарлахаасаа өмнө энгийн будалт ба Грамын будалтын ялгааг үзээрэй.
Тодрол ба ялгах чадвар нь өөр ойлголтууд. Тодрол нь объектыг орчноос нь ялгахад тусалдаг бол ялгах чадвар нь хоорондоо ойр нарийн хэсгүүдийг тусад нь харах боломж олгодог. Илүү бараан зурагт илүү олон бүтэц ялгарна гэсэн баталгаа байхгүй. Мөн бараан мөхлөг бүрийг эсийн эрхтэнцэр гэж нэрлэж болохгүй.
Натив бэлдмэл, будсан нойтон бэлдмэл ба түрхэц
Будаагүй буюу натив нойтон бэлдмэл нь будаг нэмээгүй байдлаар харах боломжийг хадгалдаг ч сорьцыг анхны орчноос нь авахад мөн өөрчлөгдөнө. Будсан нойтон бэлдмэлд материал бүрхүүл шилний доорх шингэнд байх үед урвалж нэмдэг. Бэхжүүлсэн түрхэц бэлтгэхдээ материалыг тавиур шилэн дээр тарааж, дараагийн боловсруулалтаас өмнө тогтоосон бэхжүүлэх аргыг хэрэглэдэг. OpenStax-ийн бэлдмэл бэлтгэх тухай тойм нь нойтон бэлдмэлийг бэхжүүлэлтээс ялгаж, бэхжүүлсэн биетээс яагаад хэвийн хөдөлгөөн, бодисын солилцоог нь ажиглах боломжгүй болдгийг тайлбарладаг.
Эдгээр бэлдмэл өөр өөр асуултад хариулна:
| Бэлдмэл | Хэрэгтэй ажиглалт | Зөвхөн зургаар тогтоох боломжгүй зүйл |
|---|---|---|
| Натив нойтон бэлдмэл | Хөдөлгөөн, хүрээ, угаасаа харагддаг материал | Зөвхөн хөдөлгөөн эсвэл хэлбэрээр нь ямар биет болохыг тогтоох |
| Будсан нойтон бэлдмэл | Будагтай холбогддог бүтэц ба орчны хоорондох тодрол | Урвалж хэвийн физиологийг өөрчлөлгүй үлдээсэн эсэх |
| Бэхжүүлж будсан түрхэц | Тодорхой бэлтгэлийн дараа хадгалагдсан хэлбэр зүй | Анхны амьд сорьц хэрхэн үйл ажиллагаа явуулж байсан |
| Нэрлэсэн ялган будах арга | Тохирох хяналттай, тодорхой будалтын урвал | Тухайн аргын бусад нотолгоогүйгээр зүйлийг тогтоох эсвэл оношлох |
Хичээлийн үеэр харьцуулахдаа сургалтын зааврын дагуу тусад нь бэлтгэсэн будсан бэлдмэлийг үзэхээс өмнө будаагүй бэлдмэлийн дүрсийг бүртгээрэй. Гэрэлтүүлэг болон зураг авах тохиргоог харьцуулах боломжтой байлга. Хэрэв хоёр өөр эсийн зургийг авсан бол тэдгээрийг нэг эсийн өмнөх ба дараах төлөвийн бүртгэл биш, жишээ гэж тодорхойлоорой.
Микроскопийн атлас: будсан гурван бодит сорьц
Энэ атлас нь нээлттэй лицензтэй гурван микрозургийн бие даасан сонголт, тайлбар юм. Эх сурвалжийн зохиогчид сорьц болон будгийг тодорхойлсон. Бид тэдний сорьцыг бие даан баталгаажуулаагүй. Зургуудыг тайралгүй, чанарын алдагдалгүй WebP хувиргалтаар, нэмэлт дүрс оруулалгүй, өнгийг өөрчлөлгүй дахин нийтэлсэн.
Зураг 1: хүний хацрын эсүүд
Сорьц: хүний хацрын эсүүд. Будаг: метилен хөх. Томруулалт: 400×, гэрэл зурагчны мэдээлснээр. Масштабын шугам: байхгүй; эх сурвалжид шалгалт тохируулгаар тогтоосон пикселийн хэмжээ өгөөгүй. Fritzmann2002-ын 2017 онд авсан гэрэл зураг, Хүний хацрын эсүүд (метилен хөхөөр будсан) эх сурвалжаас, CC BY-SA 4.0 лицензтэй. Энэхүү дахин нийтлэлт нь уг лицензийг хадгална.
.jpg){kind=link}
Тусдаа байрласан эсээс эхлээрэй: түүний бараан бөөмийг эргэн тойрны хөх цитоплазмаас ялгахад илүү хялбар. Дараа нь түүний доорх давхцсан эсүүдийг ажиглаарай. Давхцал нь заагийг даган харахад хүндрэл учруулж, зарим хэсгийг илүү бараан болгож болно. Энэ зургийг бараан толбо бүрийг бөөм гэж тоолоход бус, хүрээг даган ялгаж харах дадлага хийхэд ашиглаарай. Хацрын эсийг ажиглах гарын авлага нь энэ сорьцод зориулсан дасгалыг дэлгэрүүлнэ.
Зураг 2: сонгины эсүүд
Сорьц: эх сурвалжийн тодорхойлсноор сонгины эсүүд. Будаг: метилен хөх. Томруулалт: анхны файлын нэрэнд “200x” гэж байгаа; үүнийг бие даан баталгаажуулаагүй. Масштабын шугам: байхгүй; шалгалт тохируулгын мэдээлэл өгөөгүй. Alvy16-ын 2019 онд авсан гэрэл зураг, Сонгины эс 200x эх сурвалжаас, CC BY 4.0 лицензтэй.
Сунасан тасалгаанууд нь эмх цэгцтэй давхарга үүсгэжээ. Тэдгээрийн урт, нийтлэг заагуудыг Зураг 1-ийн жигд бус хүрээнүүдтэй харьцуулаарай. Мөн тод харагдах бараан материал, харах талбайн жигд бус гэрэлтүүлгийг анзаараарай. Энэ гэрэл зураг бараан тунадас бүр юу болохыг тогтоохгүй. Өнгө авсан бүхнийг нэрлэхийн оронд дүрсний гажуудал болон тодорхойгүй байдлыг тэмдэглэх нь ажиглалтын бүртгэлийг яагаад илүү хэрэгтэй болгодгийг харуулж байна.
Зураг 3: эх сурвалжид Candida spp. гэж тодорхойлсон хөрөнгө мөөгөнцөр
Сорьц: гэрэл зурагчны мэдээлснээр Candida spp. Будаг: метилен хөхөөр хийсэн энгийн эерэг будалт. Томруулалт: мэдээлэлгүй. Масштабын шугам: байхгүй; шалгалт тохируулгаар тогтоосон пикселийн хэмжээ өгөөгүй. Wikimedia-гийн Martunia.g хэрэглэгч Marta-гийн 2021 онд авсан гэрэл зураг, Метилен хөхөөр эерэг будах 2 эх сурвалжаас, CC BY 4.0 лицензтэй.
Нягт хөх бөөгнөрлүүдийг сийрэг захын хэсгүүдтэй харьцуулаарай. Объектууд бага давхцсан газарт тус бүрийн хүрээг даган харахад илүү хялбар. Candida гэсэн нэр нь энэ гэрэл зургаас зүйлийг тогтоосон үр дүн биш, эх сурвалжийн бүртгэлээс авсан нэр юм. Энэ зураг амьдрах чадварын үр дүнг мөн өгөхгүй. Хөрөнгө мөөгөнцрийн амьдрах чадвар ба амьсгалын сорилууд нь өөрийн гэсэн нөхцөл, хяналт, тайлбар шаарддаг.
Масштабыг зөв ойлгох нь
Эдгээр зураг нь харагдах байдлыг харьцуулахад зориулагдсан болохоос микрометрээр хэмжих, эсвэл зургуудын хооронд эсийн бодит хэмжээг харьцуулахад зориулагдаагүй. Мэдээлсэн томруулалтаар камерын дутуу шалгалт тохируулгыг нөхөх боломжгүй. Зургийг дэлгэц дээр харуулах хэмжээг өөрчлөхөд харагдах томруулалт нь өөрчлөгдөнө.
Өөрийн зургуудад хэмжилт хийхдээ хэмжээ нь мэдэгдэж буй эталон болон тухайн оптик тохиргоог ашиглан хэмжилтийн шалгалт тохируулга хийгээрэй. Nikon-ы микрометрийн хэмжилтийн гарын авлага нь тавцангийн микрометрээр зураг эсвэл окулярын хэмжих торны нөхцөлт хуваарийг хэрхэн бодит уртад хөрвүүлдгийг тайлбарладаг. Объектив, камерын тохиргоо, шалгалт тохируулгыг бүртгэж, эдгээр өгөгдлөөс масштабын шугам нэмээрэй. Сурах бичигт өгсөн эсийн дундаж хэмжээнээс масштабын шугамыг таамаглан бүү гаргаарай.
Савтай урвалж тухайн аргад тохирох уу?
Метилен хөх гэсэн шошготой сав нь лабораторийн бүрэн үзүүлэлт биш. Концентрац, нэгж, уусгагч, нэмэлт найрлага, зориулалт, цувралын баримт бичиг, зааврыг нь шалгаарай. Урвалжийн аюулгүй ажиллагааны мэдээллийн хуудас нь аюулыг тайлбарладаг бол аргын заавар нь зориулалтын бэлдмэлд хэрхэн хэрэглэхийг тогтоодог.
Тодорхой жишээ нь Merck-ийн Лёффлерийн метилен хөхийн уусмал юм. Үйлдвэрлэгч үүнийг микроскопийн урвалж гэж тодорхойлж, хүчилд тэсвэртэй будалтын аргад эсрэг будаг болгон ашиглах үүргийг тайлбарласан. Түүнчлэн тэмдэглэсэн шатамхай чанар нь харьцах эсвэл халаах ажиллагааг төлөвлөхөд “хөх шингэн” гэдэг мэдээлэл яагаад хангалтгүйг харуулдаг. Эдгээр шинж нь тухайн найрлагад хамаарах бөгөөд метилен хөхийн усан уусмал бүрд автоматаар хамаарахгүй.
Үүнтэй адил эозин-метилен хөх агар нь тодорхой найрлагатай өсгөвөрлөх тэжээлт орчин юм. Энэ нь сорьцод дан метилен хөх нэмж бэлтгэсэн шилэн дээрх будаг биш. Дүрслэх өөр зорилготой бол микроскопид метилен хөхийг орлуулах хувилбаруудыг харьцуулаарай.
Анхан шатны микроскопийн иж бүрдэл ашиглахдаа баримтжуулсан сургалтын арга, агуулга нь мэдэгдэж буй бэлэн бэлдмэлүүд, заасан урвалжаас нь эхлээрэй. Савны шошго алга болсон эсвэл найрлагыг нь тогтоох боломжгүй бол тохирох, баримтжуулсан урвалжаар солиорой. Нүдний хамгаалалт хэрэглэж, ашиглаж буй бодит найрлагад өгсөн харьцах зааврыг дагаарай. Хүний гаралтай материал болон орчны үл мэдэгдэх сорьцтой ажиллахад сургалтын лабораторийн сорьцтой харьцах, хаягдлыг зайлуулах журмыг мөрдөх шаардлагатай; будах нь эдгээр журмыг орлохгүй.
Дүгнэлтээс өмнө ажиглалтаа бичээрэй
“Бөөгнөрсөн хөх зууван объектууд” гэдэг нь зургийн үндэслэлтэй тайлбар юм. “Тодорхой нэг халдвар” гэж дүгнэхэд зурагт байхгүй нотолгоо шаардлагатай. Тэмдэглэлийн дэвтэрт сорьцын гарал үүсэл, бэлдмэл бэлтгэл, будалтын урвал, таньж тогтоох аргыг тусад нь тэмдэглээрэй. Ийнхүү ялгаж тэмдэглэх нь хичээлийн энгийн зургийг хэрэгтэй болгож, сонирхол татам микрозураг өөрөө нотолж чадахгүй дүгнэлтэд үндэслэл болохоос сэргийлнэ.