ലേഖനം

മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ സ്റ്റെയിനിംഗ്: മൈക്രോസ്കോപ്പി രീതികളും യഥാർഥ ചിത്രങ്ങളുടെ അറ്റ്‌ലസും

മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ സ്റ്റെയിനിംഗ്: മൈക്രോസ്കോപ്പി രീതികളും യഥാർഥ ചിത്രങ്ങളുടെ അറ്റ്‌ലസും

മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ സ്റ്റെയിനിംഗ്, സാധാരണയായി മങ്ങിയതായി കാണുന്ന കോശഘടനകൾ ബ്രൈറ്റ്-ഫീൽഡ് മൈക്രോസ്കോപ്പിയിൽ കൂടുതൽ വ്യക്തമായി വേർതിരിച്ചറിയാൻ സഹായിക്കുന്നു. കവിളിലെ ഒരു കോശത്തിന്റെ ന്യൂക്ലിയസ് കണ്ടെത്താനോ സൂക്ഷ്മജീവികളുടെ രൂപരേഖയും വിന്യാസവും പരിശോധിക്കാനോ ഇത് വിദ്യാർഥികളെ സഹായിക്കും. എന്നാൽ നീലനിറത്തിലുള്ള ഒരു വസ്തു കാണുന്നത് ഒരു നിരീക്ഷണമാണ്. ജീവിയെ തിരിച്ചറിഞ്ഞ് പേരിടുന്നതും അതിന്റെ അളവ് നിർണയിക്കുന്നതും അത് രോഗത്തെ സൂചിപ്പിക്കുന്നുണ്ടോ എന്ന് തീരുമാനിക്കുന്നതും വേറിട്ട പ്രവർത്തനങ്ങളാണ്.

കവർ ചിത്രം കോൺട്രാസ്റ്റിന്റെ തത്ത്വം ചിത്രീകരിക്കുന്നു. താഴെയുള്ള അറ്റ്‌ലസിൽ, സ്വതന്ത്രമായി രേഖപ്പെടുത്തിയ സാമ്പിളുകളുടെ യഥാർഥ ഫോട്ടോഗ്രാഫുകളും അവയുടെ യഥാർഥ സ്രോതസ്സുവിവരങ്ങളും ഉൾപ്പെടുത്തിയിരിക്കുന്നു.

മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ എന്താണ് വെളിപ്പെടുത്തുന്നത്?

മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ ഒരു ബേസിക് ഡൈ ആണ്: അതിന്റെ നിറമുള്ള അയോണിന് ധന ചാർജുണ്ട്. സാമ്പിളുകൾക്ക് സ്റ്റെയിൻ നൽകുന്നതിനെക്കുറിച്ചുള്ള വിശദീകരണത്തിൽ OpenStax പറയുന്നതുപോലെ, ബേസിക് ഡൈകൾ ഋണ ചാർജുള്ള കോശപദാർഥങ്ങളുമായി ഇടപെടുകയും ഇളംനിറമുള്ള പശ്ചാത്തലത്തിൽ കോശങ്ങളെ കൂടുതൽ വ്യക്തമായി കാണാൻ സഹായിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു. അനുയോജ്യമായി തയ്യാറാക്കിയ സാമ്പിളുകളിൽ, ന്യൂക്ലിക് ആസിഡുകൾ കൂടുതലുള്ള ഭാഗങ്ങളും സ്റ്റെയിനുമായി ബന്ധിക്കുന്ന മറ്റ് ഘടനകളും മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ കൂടുതൽ വ്യക്തമായി കാണിക്കുന്നു.

സിംപിൾ സ്റ്റെയിനിംഗിൽ, ഒരു ഡൈയാണ് കോൺട്രാസ്റ്റ് നൽകുന്നത്. അതിനാൽ പല ജീവികളും ഒരേ ജീവിവർഗത്തിൽപ്പെട്ടവയല്ലെങ്കിലും നീലനിറത്തിൽ കാണപ്പെടാം. തുടക്കത്തിൽ ഉപകാരപ്രദമായ ചോദ്യങ്ങൾ വിവരണാത്മകമാണ്: കാണുന്ന വസ്തുക്കൾ വൃത്താകൃതിയിലാണോ നീണ്ടതാണോ, ഒറ്റയ്ക്കാണോ കൂട്ടങ്ങളായാണോ, ഒരേപോലെ നിറം പിടിച്ചവയാണോ അതോ ഉള്ളിൽ വ്യത്യസ്ത ഭാഗങ്ങൾ കാണുന്നുണ്ടോ? നിറത്തെ വർഗീകരണത്തിന്റെ ഫലമായി വ്യാഖ്യാനിക്കുന്നതിനുമുമ്പ് സിംപിൾ സ്റ്റെയിനിംഗും ഗ്രാം സ്റ്റെയിനിംഗും തമ്മിലുള്ള വ്യത്യാസം നോക്കുക.

കോൺട്രാസ്റ്റും റെസല്യൂഷനും വ്യത്യസ്തമാണ്. ഒരു വസ്തുവിനെ അതിന്റെ ചുറ്റുപാടിൽനിന്ന് വേർതിരിച്ചറിയാൻ കോൺട്രാസ്റ്റ് സഹായിക്കുന്നു; അടുത്തടുത്തുള്ള സൂക്ഷ്മവിശദാംശങ്ങളെ വേർതിരിച്ചറിയുന്നതാണ് റെസല്യൂഷൻ. ഒരു ചിത്രം കൂടുതൽ ഇരുണ്ടതായതുകൊണ്ട് കൂടുതൽ ഘടനകൾ വേർതിരിഞ്ഞു കാണുമെന്ന് ഉറപ്പില്ല. അതുപോലെ, ഇരുണ്ട ഓരോ തരിയെയും കോശാംഗമായി വിശേഷിപ്പിക്കാനാവില്ല.

നിറം ചേർക്കാത്ത തയ്യാറെടുപ്പുകൾ, സ്റ്റെയിൻ നൽകിയ വെറ്റ് മൗണ്ടുകൾ, സ്മിയറുകൾ

സ്റ്റെയിൻ നൽകാത്ത, അഥവാ നേറ്റീവ്, വെറ്റ് തയ്യാറെടുപ്പ് ഡൈ ചേർക്കാത്ത ഒരു കാഴ്ച നിലനിർത്തുന്നു. എന്നിരുന്നാലും, യഥാർഥ പരിസ്ഥിതിയിൽനിന്ന് പുറത്തെടുക്കുന്നതുതന്നെ സാമ്പിളിൽ മാറ്റമുണ്ടാക്കുന്നു. സ്റ്റെയിൻ നൽകിയ വെറ്റ് മൗണ്ടിൽ, പദാർഥം കവർസ്ലിപ്പിന് കീഴിലുള്ള ദ്രാവകത്തിൽ തുടരുമ്പോഴാണ് റീയജന്റ് ചേർക്കുന്നത്. ഫിക്സ് ചെയ്ത സ്മിയറിൽ, പദാർഥം സ്ലൈഡിൽ പരത്തുകയും തുടർന്നുള്ള പ്രക്രിയകൾക്കുമുമ്പ് നിർദിഷ്ട ഫിക്സേഷൻ രീതി ഉപയോഗിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു. തയ്യാറെടുപ്പിനെക്കുറിച്ചുള്ള OpenStax-ന്റെ അവലോകനം വെറ്റ് മൗണ്ടുകളും ഫിക്സേഷനും തമ്മിലുള്ള വ്യത്യാസം വ്യക്തമാക്കുകയും ഫിക്സ് ചെയ്ത ജീവികളിൽ സാധാരണ ചലനമോ ഉപാപചയമോ ഇനി നിരീക്ഷിക്കാനാകാത്തതിന്റെ കാരണം വിശദീകരിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു.

ഈ തയ്യാറെടുപ്പുകൾ വ്യത്യസ്ത ചോദ്യങ്ങൾക്കാണ് ഉത്തരം നൽകുന്നത്:

തയ്യാറെടുപ്പ്ഉപകാരപ്രദമായ നിരീക്ഷണംചിത്രം മാത്രം ഉപയോഗിച്ച് സ്ഥിരീകരിക്കാനാകാത്തത്
നേറ്റീവ് വെറ്റ് മൗണ്ട്ചലനം, രൂപരേഖകൾ, സ്വാഭാവികമായി ദൃശ്യമാകുന്ന പദാർഥംചലനമോ ആകൃതിയോ മാത്രം അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ള തിരിച്ചറിയൽ
സ്റ്റെയിൻ നൽകിയ വെറ്റ് മൗണ്ട്സ്റ്റെയിനുമായി ബന്ധിക്കുന്ന ഘടനകളും ചുറ്റുപാടും തമ്മിലുള്ള കോൺട്രാസ്റ്റ്റീയജന്റ് സാധാരണ ശാരീരിക പ്രവർത്തനങ്ങളെ മാറ്റമില്ലാതെ നിലനിർത്തിയോ എന്നത്
ഫിക്സ് ചെയ്ത് സ്റ്റെയിൻ നൽകിയ സ്മിയർനിർദിഷ്ട തയ്യാറെടുപ്പിനുശേഷം നിലനിന്ന രൂപഘടനയഥാർഥ ജീവനുള്ള സാമ്പിൾ എങ്ങനെ പെരുമാറിയിരുന്നു എന്നത്
പേരുള്ള ഡിഫറൻഷ്യൽ രീതിഅനുയോജ്യമായ കൺട്രോളുകളോടെയുള്ള നിർദിഷ്ട സ്റ്റെയിനിംഗ് പ്രതികരണംആ രീതിയുടെ വിപുലമായ തെളിവുകളില്ലാതെയുള്ള ജീവിവർഗ തിരിച്ചറിയലോ രോഗനിർണയമോ

ക്ലാസ് മുറിയിലെ താരതമ്യത്തിനായി, അധ്യാപന പ്രോട്ടോക്കോൾ അനുസരിച്ച് പ്രത്യേകം തയ്യാറാക്കിയ സ്റ്റെയിൻ നൽകിയ സാമ്പിൾ പരിശോധിക്കുന്നതിനുമുമ്പ് സ്റ്റെയിൻ നൽകാത്ത തയ്യാറെടുപ്പിന്റെ നിരീക്ഷണം രേഖപ്പെടുത്തുക. പ്രകാശവും ചിത്രം പകർത്തുന്നതിനുള്ള ക്രമീകരണങ്ങളും താരതമ്യം ചെയ്യാവുന്ന വിധത്തിൽ നിലനിർത്തുക. രണ്ട് വ്യത്യസ്ത കോശങ്ങളാണ് ഫോട്ടോ എടുത്തതെങ്കിൽ, അവയെ ഉദാഹരണങ്ങളായി വിവരിക്കുക; ഒരേ കോശത്തിന്റെ മുമ്പും ശേഷവുമുള്ള രേഖയായി വിശേഷിപ്പിക്കരുത്.

മൈക്രോസ്കോപ്പി അറ്റ്‌ലസ്: സ്റ്റെയിൻ നൽകിയ മൂന്ന് യഥാർഥ സാമ്പിളുകൾ

തുറന്ന ലൈസൻസുകളുള്ള മൂന്ന് മൈക്രോഗ്രാഫുകളുടെ ഞങ്ങളുടേതായ തിരഞ്ഞെടുപ്പും വ്യാഖ്യാനവുമാണ് ഈ അറ്റ്‌ലസ്. സ്രോതസ്സിലെ രചയിതാക്കളാണ് സാമ്പിളുകളും സ്റ്റെയിനുകളും തിരിച്ചറിയുന്നത്. അവരുടെ സാമ്പിളുകളുടെ ആധികാരികത ഞങ്ങൾ സ്വതന്ത്രമായി സ്ഥിരീകരിച്ചിട്ടില്ല. ചിത്രങ്ങൾ ക്രോപ്പ് ചെയ്യാതെ, ഗുണനിലവാരം നഷ്ടപ്പെടാത്ത WebP പരിവർത്തനങ്ങളായി പുനഃപ്രസിദ്ധീകരിച്ചിരിക്കുന്നു; ഘടനകൾ കൂട്ടിച്ചേർക്കുകയോ നിറങ്ങൾ മാറ്റുകയോ ചെയ്തിട്ടില്ല.

പ്ലേറ്റ് 1: മനുഷ്യന്റെ കവിളിലെ കോശങ്ങൾ

കൂടുതൽ ഇരുണ്ട ന്യൂക്ലിയസുകളും പരസ്പരം മൂടുന്ന കോശരൂപരേഖകളും കാണിക്കുന്ന, മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ സ്റ്റെയിൻ നൽകിയ യഥാർഥ കവിളിലെ കോശങ്ങൾ.

സാമ്പിൾ: മനുഷ്യന്റെ കവിളിലെ കോശങ്ങൾ. സ്റ്റെയിൻ: മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ. മാഗ്നിഫിക്കേഷൻ: 400×, ഫോട്ടോഗ്രാഫർ റിപ്പോർട്ട് ചെയ്തത്. സ്കെയിൽ ബാർ: ലഭ്യമല്ല; കാലിബ്രേറ്റ് ചെയ്ത പിക്സൽ വലുപ്പം സ്രോതസ്സിൽ നൽകിയിട്ടില്ല. Fritzmann2002 എടുത്ത ഫോട്ടോഗ്രാഫ്, 2017, മനുഷ്യന്റെ കവിളിലെ കോശങ്ങൾ (മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ സ്റ്റെയിൻ) എന്നതിൽനിന്ന്, CC BY-SA 4.0 ലൈസൻസോടെ. ഈ പുനഃപ്രസിദ്ധീകരണത്തിലും അതേ ലൈസൻസ് നിലനിർത്തുന്നു.

ഒറ്റപ്പെട്ട ഒരു കോശത്തിൽനിന്ന് തുടങ്ങുക: ചുറ്റുമുള്ള നീല സൈറ്റോപ്ലാസത്തിൽനിന്ന് അതിന്റെ ഇരുണ്ട ന്യൂക്ലിയസിനെ വേർതിരിച്ചറിയാൻ എളുപ്പമാണ്. തുടർന്ന് അതിന് താഴെയുള്ള, പരസ്പരം മൂടുന്ന കോശങ്ങൾ പരിശോധിക്കുക. ഇത്തരത്തിലുള്ള മൂടൽ ഒരു അതിർത്തി പിന്തുടരുന്നത് ബുദ്ധിമുട്ടാക്കുകയും ഒരു ഭാഗത്ത് കൂടുതൽ ഇരുണ്ട പ്രദേശം സൃഷ്ടിക്കുകയും ചെയ്യാം. ഓരോ ഇരുണ്ട പാടിനെയും ന്യൂക്ലിയസായി എണ്ണാനല്ല, രൂപരേഖകൾ പിന്തുടരാൻ പരിശീലിക്കുന്നതിനാണ് ഈ പ്ലേറ്റ് ഉപയോഗിക്കേണ്ടത്. കവിളിലെ കോശങ്ങളുടെ നിരീക്ഷണ മാർഗദർശി ഈ സാമ്പിളിന് അനുയോജ്യമായ പരിശീലനം കൂടുതൽ വിശദീകരിക്കുന്നു.

പ്ലേറ്റ് 2: ഉള്ളിയുടെ കോശങ്ങൾ

നീണ്ട അറകളും അസമമായ പ്രകാശവും ഇരുണ്ട തരിരൂപത്തിലുള്ള പദാർഥവും കാണിക്കുന്ന, സ്റ്റെയിൻ നൽകിയ യഥാർഥ ഉള്ളിയുടെ കോശങ്ങൾ.

സാമ്പിൾ: സ്രോതസ്സിൽ തിരിച്ചറിഞ്ഞതനുസരിച്ച് ഉള്ളിയുടെ കോശങ്ങൾ. സ്റ്റെയിൻ: മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ. മാഗ്നിഫിക്കേഷൻ: യഥാർഥ ഫയൽനാമത്തിൽ “200x” കാണുന്നു; അത് സ്വതന്ത്രമായി സാധൂകരിച്ചിട്ടില്ല. സ്കെയിൽ ബാർ: ലഭ്യമല്ല; കാലിബ്രേഷൻ നൽകിയിട്ടില്ല. Alvy16 എടുത്ത ഫോട്ടോഗ്രാഫ്, 2019, ഉള്ളിയുടെ കോശം 200x എന്നതിൽനിന്ന്, CC BY 4.0 ലൈസൻസോടെ.

നീണ്ട അറകൾ ക്രമബദ്ധമായ ഒരു പാളി രൂപപ്പെടുത്തുന്നു. അവയുടെ നീളമുള്ള പൊതുവായ അതിർത്തികളെ പ്ലേറ്റ് 1-ലെ ക്രമരഹിതമായ രൂപരേഖകളുമായി താരതമ്യം ചെയ്യുക. വ്യക്തമായി കാണുന്ന ഇരുണ്ട പദാർഥവും ദൃശ്യപരിധിയിലെ അസമമായ പ്രകാശവും ശ്രദ്ധിക്കുക. ഓരോ ഇരുണ്ട നിക്ഷേപവും എന്താണെന്ന് ഈ ഫോട്ടോഗ്രാഫ് സ്ഥിരീകരിക്കുന്നില്ല. നിറം പിടിക്കുന്ന എല്ലാറ്റിനും പേരിടുന്നതിനു പകരം, തയ്യാറെടുപ്പിലോ ചിത്രീകരണത്തിലോ ഉണ്ടായ കൃത്രിമ സവിശേഷതകളും അനിശ്ചിതത്വവും കൂടി ഉപകാരപ്രദമായ നിരീക്ഷണരേഖയിൽ ഉൾപ്പെടുത്തേണ്ടത് എന്തുകൊണ്ടാണെന്ന് ഇത് കാണിക്കുന്നു.

പ്ലേറ്റ് 3: സ്രോതസ്സിൽ Candida spp. എന്ന് തിരിച്ചറിഞ്ഞ ഈസ്റ്റ്

ഇടതിങ്ങിയ കൂട്ടങ്ങളായുള്ള അണ്ഡാകൃതിയിലുള്ള നീല വസ്തുക്കൾ കാണിക്കുന്ന, മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ സ്റ്റെയിൻ നൽകിയ യഥാർഥ ഈസ്റ്റ് തയ്യാറെടുപ്പ്.

സാമ്പിൾ: ഫോട്ടോഗ്രാഫർ പറയുന്നതനുസരിച്ച് Candida spp. സ്റ്റെയിൻ: മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ ഉപയോഗിച്ചുള്ള സിംപിൾ പോസിറ്റീവ് സ്റ്റെയിനിംഗ്. മാഗ്നിഫിക്കേഷൻ: ലഭ്യമല്ല. സ്കെയിൽ ബാർ: ലഭ്യമല്ല; കാലിബ്രേറ്റ് ചെയ്ത പിക്സൽ വലുപ്പം നൽകിയിട്ടില്ല. Wikimedia ഉപയോക്താവ് Martunia.g ആയ Marta എടുത്ത ഫോട്ടോഗ്രാഫ്, 2021, മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ ഉപയോഗിച്ചുള്ള പോസിറ്റീവ് സ്റ്റെയിനിംഗ് 2 എന്നതിൽനിന്ന്, CC BY 4.0 ലൈസൻസോടെ.

ഇടതിങ്ങിയ നീല കൂട്ടങ്ങളെ തിരക്ക് കുറഞ്ഞ അരികുകളുമായി താരതമ്യം ചെയ്യുക. വസ്തുക്കൾ പരസ്പരം കുറച്ച് മാത്രം മൂടുന്നിടത്ത് ഓരോന്നിന്റെയും രൂപരേഖ പിന്തുടരാൻ എളുപ്പമാണ്. Candida എന്ന പേര് സ്രോതസ്സിലെ രേഖയിൽനിന്നുള്ളതാണ്; ഈ ഫോട്ടോഗ്രാഫിൽ നടത്തിയ ജീവിവർഗ തിരിച്ചറിയലിൽനിന്നുള്ളതല്ല. ഈ പ്ലേറ്റ് ജീവക്ഷമത സംബന്ധിച്ച ഫലവും നൽകുന്നില്ല. ഈസ്റ്റിന്റെ ജീവക്ഷമതയും ശ്വസനവും പരിശോധിക്കുന്ന അസ്സേകൾക്ക് അവയുടേതായ സാഹചര്യങ്ങളും കൺട്രോളുകളും വ്യാഖ്യാനവും ആവശ്യമാണ്.

സ്കെയിൽ ശരിയായി വായിക്കുക

ഈ പ്ലേറ്റുകൾ ദൃശ്യതാരതമ്യത്തിനാണ് സഹായിക്കുന്നത്; മൈക്രോമീറ്ററുകളിൽ അളക്കുന്നതിനോ പ്ലേറ്റുകൾ തമ്മിൽ കോശങ്ങളുടെ യഥാർഥ വലുപ്പം താരതമ്യം ചെയ്യുന്നതിനോ അല്ല. റിപ്പോർട്ട് ചെയ്ത മാഗ്നിഫിക്കേഷൻ ഉപയോഗിച്ച് നഷ്ടമായ ക്യാമറ കാലിബ്രേഷൻ വീണ്ടെടുക്കാനാവില്ല. ഒരു ചിത്രം പ്രദർശിപ്പിക്കുന്ന വലുപ്പം മാറ്റുമ്പോൾ അതിന്റെ ദൃശ്യമായ വലുതാക്കലും മാറുന്നു.

നിങ്ങളുടെ സ്വന്തം ചിത്രങ്ങൾക്കായി, അറിയാവുന്ന ഒരു മാനദണ്ഡവും പ്രസക്തമായ ഒപ്റ്റിക്കൽ സജ്ജീകരണവും ഉപയോഗിച്ച് അളവെടുപ്പിനുള്ള കാലിബ്രേഷൻ സ്ഥാപിക്കുക. ക്രമരഹിതമായ ചിത്രവിഭാഗങ്ങളെയോ റെറ്റിക്കിളിലെ വിഭജനങ്ങളെയോ ഒരു സ്റ്റേജ് മൈക്രോമീറ്റർ ഭൗതിക നീളങ്ങളാക്കി മാറ്റുന്നത് എങ്ങനെയെന്ന് മൈക്രോമെട്രിയെക്കുറിച്ചുള്ള Nikon-ന്റെ മാർഗദർശി വിശദീകരിക്കുന്നു. ഒബ്ജക്ടീവ്, ക്യാമറ ക്രമീകരണം, കാലിബ്രേഷൻ എന്നിവ രേഖപ്പെടുത്തുകയും ആ വിവരങ്ങളിൽനിന്ന് ഒരു സ്കെയിൽ ബാർ ചേർക്കുകയും ചെയ്യുക. പാഠപുസ്തകത്തിലെ ശരാശരി കോശവലുപ്പത്തിൽനിന്ന് ഒരു സ്കെയിൽ ബാർ അനുമാനിക്കരുത്.

കുപ്പിയിലെ ഉള്ളടക്കം രീതിക്ക് അനുയോജ്യമാണോ?

മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ എന്ന് ലേബൽ ചെയ്ത ഒരു കുപ്പി സമ്പൂർണമായ ലബോറട്ടറി സവിശേഷതാവിവരമല്ല. അതിന്റെ സാന്ദ്രതയും യൂണിറ്റുകളും, ലായകം, അധിക ചേരുവകൾ, ഉദ്ദേശിച്ച ഉപയോഗം, ബാച്ച് രേഖകൾ, നിർദേശങ്ങൾ എന്നിവ പരിശോധിക്കുക. ഒരു റീയജന്റിന്റെ സുരക്ഷാ ഡാറ്റാ ഷീറ്റ് അപകടസാധ്യതകൾ വിവരിക്കുന്നു; ഉദ്ദേശിച്ച തയ്യാറെടുപ്പിനായി അത് എങ്ങനെ ഉപയോഗിക്കണമെന്ന് രീതിയുടെ നിർദേശങ്ങളാണ് വ്യക്തമാക്കുന്നത്.

Merck-ന്റെ Löffler മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ ലായനി ഒരു വ്യക്തമായ ഉദാഹരണമാണ്. നിർമ്മാതാവ് അതിനെ മൈക്രോസ്കോപ്പിക്കുള്ള റീയജന്റായി തിരിച്ചറിയുകയും ആസിഡ്-ഫാസ്റ്റ് സ്റ്റെയിനിംഗിൽ ഒരു കൗണ്ടർസ്റ്റെയിനെന്ന നിലയിലുള്ള അതിന്റെ പങ്ക് വിവരിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു. കൈകാര്യം ചെയ്യലോ ചൂടാക്കലോ ആസൂത്രണം ചെയ്യുന്നതിന് “ഒരു നീല ദ്രാവകം” എന്ന വിവരം മാത്രം മതിയാകാത്തത് എന്തുകൊണ്ടാണെന്ന് അതിന്റെ രേഖപ്പെടുത്തിയ തീപിടിത്തസാധ്യതയും കാണിക്കുന്നു. ഈ ഗുണങ്ങൾ ആ ഫോർമുലേഷനാണ് ബാധകം; എല്ലാ ജലീയ മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ ലായനികൾക്കും സ്വയമേവ ബാധകമല്ല.

അതുപോലെ, ഇയോസിൻ മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ അഗാർ പ്രത്യേകമായി രൂപപ്പെടുത്തിയ ഒരു കൾച്ചർ മീഡിയമാണ്. ഒരു സാമ്പിളിൽ സാധാരണ മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ ചേർത്ത് ഉണ്ടാക്കുന്ന സ്ലൈഡ് സ്റ്റെയിൻ അല്ല അത്. വ്യത്യസ്തമായ ചിത്രീകരണ ലക്ഷ്യത്തിനായി, മൈക്രോസ്കോപ്പിയിൽ മെത്തിലീൻ ബ്ലൂവിന് പകരമുള്ള മാർഗങ്ങൾ താരതമ്യം ചെയ്യുക.

തുടക്കക്കാർക്കുള്ള ഒരു മൈക്രോസ്കോപ്പ് കിറ്റ് ഉപയോഗിക്കുമ്പോൾ, അതിന്റെ രേഖപ്പെടുത്തിയ വിദ്യാഭ്യാസ രീതി, വിവരങ്ങൾ അറിയാവുന്ന തയ്യാറാക്കിയ സ്ലൈഡുകൾ, നിർദിഷ്ട റീയജന്റ് എന്നിവയിൽനിന്ന് തുടങ്ങുക. ഒരു കുപ്പിയുടെ ലേബൽ നഷ്ടപ്പെട്ടിട്ടുണ്ടെങ്കിലോ അതിന്റെ ഘടന സ്ഥിരീകരിക്കാനാകുന്നില്ലെങ്കിലോ, അനുയോജ്യമായ രേഖകളുള്ള റീയജന്റ് പകരം ഉപയോഗിക്കുക. കണ്ണുകൾക്ക് സംരക്ഷണം ഉപയോഗിക്കുകയും യഥാർഥ ഫോർമുലേഷനുവേണ്ടി നൽകിയ കൈകാര്യം ചെയ്യൽ നിർദേശങ്ങൾ പാലിക്കുകയും ചെയ്യുക. മനുഷ്യരിൽനിന്നുള്ള പദാർഥങ്ങൾക്കും അജ്ഞാതമായ പരിസ്ഥിതി സാമ്പിളുകൾക്കും അധ്യാപന ലബോറട്ടറിയുടെ സാമ്പിൾ കൈകാര്യം ചെയ്യൽ, നിർമാർജനം എന്നിവയ്ക്കുള്ള നടപടിക്രമങ്ങൾ ആവശ്യമാണ്; സ്റ്റെയിനിംഗ് ആ നടപടിക്രമങ്ങൾക്ക് പകരമല്ല.

നിഗമനത്തിനുമുമ്പ് നിരീക്ഷണം എഴുതുക

“കൂട്ടങ്ങളായി കാണുന്ന നീല അണ്ഡാകൃതിയിലുള്ള വസ്തുക്കൾ” എന്നത് ഒരു ചിത്രത്തെക്കുറിച്ചുള്ള ന്യായീകരിക്കാവുന്ന വിവരണമാണ്. “ഒരു പ്രത്യേക അണുബാധ” എന്നതിന് ആ ചിത്രം നൽകിയിട്ടില്ലാത്ത തെളിവുകൾ ആവശ്യമാണ്. സാമ്പിളിന്റെ ഉറവിടവിവരം, തയ്യാറെടുപ്പ്, സ്റ്റെയിനിംഗ് പ്രതികരണം, തിരിച്ചറിയൽ രീതി എന്നിവ നോട്ട്ബുക്കിൽ വേർതിരിച്ച് രേഖപ്പെടുത്തുക. ഈ വേർതിരിവ് ലളിതമായ ഒരു ക്ലാസ് മുറി ചിത്രത്തെ ഉപകാരപ്രദമാക്കുകയും ആകർഷകമായ ഒരു മൈക്രോഗ്രാഫിന് പിന്തുണയ്ക്കാനാകാത്ത അവകാശവാദം അതിൽ ചുമത്തുന്നത് തടയുകയും ചെയ്യുന്നു.