Lahatsoratra
Famantarana ny manga metilena ao amin’ny laboratoara: spektrum infrarouge sy fomba mifameno
Alao sary an-tsaina fa laboratoara telo no mandray vovoka manga iray ihany. Ny voalohany dia mandrakitra spektrum infrarouge ary milaza fa manga metilena ilay izy. Ny faharoa dia manao kromatografia ary mitatitra Azure B 0.4%. Ny fahatelo dia manao difraksiona amin’ny taratra X amin’ireo kristaly ary manondro endrika hidrata iray. Marina avokoa izy telo, nefa tsy nisy namaly ny fanontaniana novalian’ireo roa hafa. Manomboka ny fifangaroan-kevitra rehefa raisina ho mamaly azy telo ny valiny iray.
Manavaka ireo fanontaniana ireo ity lahatsoratra ity. Ny famantarana amin’ny infrarouge dia manamarina ny maha-molekiola ilay akora amin’ny fampitahana azy amin’ny akora fanondroana manara-penitra. Ny kromatografia dia mamaritra ny zavatra mandrafitra azy. Ny difraksiona dia mamaritra ny endriny amin’ny toetra mafy. Tsy taratasy fanamarinana ny fahadiovana ny fifanarahana ekena amin’ny fitsapana famantarana.
Mamaly tsara fanontaniana iray ny famantarana amin’ny infrarouge
Ny fitsapana famantarana ny manga metilena voafaritry ny farmakopea dia fampitahana spektrum amin’ny akora manara-penitra, fa tsy lisitry ny tendron’ny spektrum tokony ho hita. Araka ny topimaso amin’ny monografia USP momba ny manga metilena, ny Famantarana A dia manondro spektroskopia infrarouge mampiasa rafitra optika ATR na takelaka bromida potasioma voatsindry. Tsy maintsy mifanaraka amin’ny spektrum an’ny akora fanondroana manara-penitra USP ny spektrum an’ny santionany, ary tokony hokarakaraina sy horaketina amin’ny fepetra mitovy ny santionany sy ny akora manara-penitra. Tsy lisitra raikitra misy isa-onja famantarana no mamaritra ny fanapahan-kevitra. Ny fampifanindriana ireo spektrum no mamaritra izany.
Mifanaraka amin’ny fihetsiky ny spektrum FTIR an’ny manga metilena io safidy io. Ao amin’ny faritra mampiavaka ny spektrum no misy ireo famantarana mahery indrindra. Ny fanasokajiana ao amin’ny literatiora dia mametraka hatrany ny fehin-tspektrum lehibe an’ny peratra konjoge eo amin’ny 1590 hatramin’ny 1600 cm-1, izay ifamatoran’ny fomba fihovitrovitry ny fihenjanan’ny fatorana karbônina-karbônina sy karbônina-azota aromatika. Ny fehin-tspektrum hafa eo amin’ny 1490 sy 1390 cm-1 dia ahitana ny toetran’ny fiovan’endriky ny peratra, ny karbônina-azota ary ny karbônina-hidrôzenina. Ny fehin-tspektrum eo amin’ny 1355 sy 1330 cm-1 dia mifandray amin’ny fatorana karbônina-azota ao amin’ny dimetilamino sy ny fiovan’endriky ny metila. Ny famantarana eo amin’ny 1225 hatramin’ny 1250 cm-1 dia an’ny rafitra heterôsiklika, fa ny fehin-tspektrum eo amin’ny 1170 hatramin’ny 1130 sy 1066 cm-1 kosa dia ahitana ny toetran’ny karbônina-solifara, miaraka amin’ny fiondrehan’ny C-H aromatika eo amin’ny 880 cm-1. Miseho amin’ny isa-onja avo kokoa ny fomba fihovitrovitry ny fihenjanana: C-H aromatika eo amin’ny 3040 cm-1 ary C-H an’ny N-metila eo anelanelan’ny 2900 sy 3000 cm-1 eo ho eo. Tsy mitovy amin’ny antsipiriany ny fanasokajiana navoaka satria mihovitrovitra ho rafitra mifamatotra ny taolan’ny fenôtiazinioma, ka raiso ho fanasokajiana notaterina ny tabilao tsirairay, fa tsy ho hany fanasokajiana marina.
Misy fiantraikan’ny fikarakarana roa tokony hojerena satria manova ny spektrum IR an’ny manga metilena izy ireo nefa tsy manova ilay loko. Voalohany, ny akora hidrata dia mampiseho fehin-tspektrum O-H malalaka eo amin’ny 3300 hatramin’ny 3500 cm-1 miaraka amin’ny fiondrehan’ny rano eo amin’ny 1630 hatramin’ny 1640 cm-1, ary ny endrika hidrata samihafa dia mamindra ny fehin-tspektrum mampiavaka azy amin’ny elanelana azo refesina. Faharoa, misintona hamandoana ny matriksan’ny takelaka KBr voatsindry: ny hamandoana voaray dia miteraka fehin-tspektrum ao amin’ireo faritry ny rano ireo mihitsy ary mety hoheverina ho ranon’ny hidrata avy amin’ny santionany. Misoroka ny fampiasana matriksa KBr ny fandrefesana amin’ny ATR, saingy miova arakaraka ny halalin’ny fidiran’ny taratra, izay miankina amin’ny isa-onja, ny hamafin’ny ATR. Noho izany, tsy azo ampifanindriana mivantana ny spektrum ATR sy ny spektrum amin’ny fampitana taratra avy amin’ilay vovoka iray ihany. Avy amin’ny fepetra takin’ny farmakopea ny fitsipika azo ampiharina: ampitahao ny santionany sy ny akora fanondroana voarakitra tamin’ny teknika iray ihany, ary raketo izay teknika nampiasaina. Raha mila ny simia fototry ny katiôna, ny sira ary ny hidrata ao ambadik’ireo spektrum ireo ianao, dia jereo ny fanazavana momba ny firafitra sy ny toetran’ny manga metilena.
Tabilao hisafidianana ny fomba famakafakana
Fitaovana hisafidianana fomba ity tabilao ity. Vakio mitsivalana ny andalana iray hahitana izay fanontaniana valian’ny fomba iray, izay voaporofon’ny valiny ekena, ary izay mbola tsy voaporofo.
| Fomba | Fanontaniana valiany | Izay voaporofon’ny valiny ekena | Izay tsy azony porofoina |
|---|---|---|---|
| FTIR ampitahaina amin’ny akora fanondroana manara-penitra | Manga metilena ve ity akora ity? | Maha-molekiola mifanaraka amin’ny spektrum fanondroana | Fahadiovana, karazana sy habetsahan’ny loto, endrika hidrata amin’io fomba io irery, na fifantohana |
| Fandrefesana votoaty sy loto organika amin’ny HPLC-UV (tsanganana fenila, 246 nm) | Ohatrinona ny manga metilena ary ohatrinona ny Azure B? | Famantarana kromatografika amin’ny fifanarahan’ny fihazonana; votoaty sy habetsahan’ny loto voafaritra | Endrika amin’ny toetra mafy; famantarana ireo tendron’ny spektrum tsy nampoizina raha tsy misy akora manara-penitra |
| LC-MS/MS miaraka amin’ny akora manara-penitra voamarina | Iza amin’ireo loko nesorina vondrona metila no misy? | Fanasarahana sy famantarana ireo ao amin’ny andiana MB, Azure A, Azure B, Azure C, tionina | Fanarahana ny farmakopea; fanitarana ho an’ny fikarohana ity fa tsy fitsapana mahazatra ao amin’ny monografia |
| XRD amin’ny vovoka | Iza amin’ireo hidrata kristaly no misy? | Dingana amin’ny toetra mafy, fifangaroan’ny dingana mihoatra ny fetran’ny fahitana, ary toetra kristaly | Maha-molekiola ny loto tsy kristaly; fifantohana ao amin’ny vahaolana |
| Fandraisana taratra UV-Vis | Mandray taratra araka ny antenaina ve ny vahaolana? | Tampon’ny fandraisana taratra mampiavaka azy sy fihetsika miankina amin’ny fifantohana | Maha-izy azy na fahadiovana amin’io fomba io irery |
| Famantarana klôrida sy fihenan-danja rehefa hamainina (fanohanana) | Misy ve ny iôna mifameno aminy; ohatrinona ny lanja mety hivadika ho etona? | Endrika sira sy lanja very mandritra ny fanamainana amin’ny fepetra voafaritra | Izay molekiola manome ilay loko |
Nahoana ny fifanarahana amin’ny infrarouge no tsy taratasy fanamarinana ny fahadiovana
Ny fifanarahana amin’ny fitsapana famantarana dia manilika ny mety ho loko diso. Tsy mitanisa izay rehetra ao amin’ny santionany izany. Fetra telo no tena zava-dehibe.
Voalohany, mitovitovy amin’ny infrarouge ireo akora akaiky firafitra. Vondrona metila iray monja no maha-samihafa ny Azure B sy ny manga metilena, ka tena mitovitovy amin’ny an’ny manga metilena ny spektrum-ny. Mbola mifanaraka tsara rehefa ampifanindriana amin’ny akora fanondroana manga metilena ny fifangaroana misy Azure B vitsivitsy isan-jato. Ny fitadiavana io loto io dia asan’ny kromatografia, izay hazavaina ao amin’ny torolalana momba ny loto ao amin’ny manga metilena sy ny fomba fitsapana.
Faharoa, teknika mandrefy ny santionany manontolo ny spektroskopia infrarouge, ary voafetra ny fahatsapany ireo singa kely habetsahana. Miafina ao ambanin’ireo fehin-tspektrum lehibe ny loko mitovitovy firafitra, ny sisa tavela amin’ny solventa, na ny sisa tavela tsy organika izay kely habetsahana. Porofo malemy momba ny tsy fisian’ny loto ny tsy fisian’ny tendron’ny spektrum fanampiny.
Fahatelo, ny akora fanondroana manara-penitra no mifehy ny fampitahana manontolo. Manova ny mari-pandrefesana ny akora manara-penitra simba, na niova noho ny fiovan’ny hidrata, na tsy nokarakaraina araka ny tokony ho izy. Toy izany koa ny fampiarahana teknika tsy mifanaraka, ohatra ny fanombanana spektrum ATR an’ny santionany amin’ny akora fanondroana KBr. Raketo miaraka amin’ny fanapahan-kevitra tsirairay ny laharan’ny andiany an’ny akora manara-penitra, ny teknika ary ny fikarakarana.
Mitaky fitandremana farany ny fifangaroana. Ny spektrum izay mifanaraka amin’ny ankapobeny nefa misy soroka na hamafin’ny famantarana tsy mahazatra dia tsy valiny ekena miaraka amin’ny fanamarihana ambany pejy. Famantarana izany fa tokony hosarahina aloha ny singa ao amin’ny santionany vao hamantarana azy.
Fampiasana ireo fomba mifameno
Ny HPLC amin’ny manga metilena dia mamaly ny fanontaniana momba ny zavatra mandrafitra azy izay tsy voavalin’ny infrarouge. Ny fomba voafaritry ny farmakopea ankehitriny dia mampiasa tsanganana karazana fenila miaraka amin’ny fifangaroana rano-asetonitrila miova tsikelikely izay misy asidra trifluoroasetika, ary mandrefy amin’ny 246 nm, fa tsy ao amin’ny faritry ny taratra hita maso. Avy amin’ny fifanarahan’ny fotoana fihazonana amin’ny akora fanondroana manara-penitra ny famantarana; io fampitahana io ihany no ampiasaina handrefesana ny votoaty. Ny fitsapana loto organika dia mamantatra ny Azure B amin’ny akora fanondroana azy manokana, amin’ny fihazonana relatif eo amin’ny 0.8 raha oharina amin’ny manga metilena amin’ny 1.0, ary mitaky fanavahana avo eo amin’ireo tendrony roa. Mariho ny safidy halavan’onja: ny andian’ny loko vokatry ny fanesorana vondrona metila dia mandray taratra mihamanakaiky ny mena, manomboka amin’ny tionina eo amin’ny 600 nm, mandalo amin’ny Azure C, Azure A ary Azure B, ka hatramin’ny manga metilena eo amin’ny 670 nm. Noho izany, tsy mitovy ny fandraisan’ny mpitsikaritra apetraka eo amin’ny 660 nm ireo loko ao amin’ilay andiana, ary ambany noho ny tena izy ny habetsahan’ny homôlôga sasany asehony. Raha ilaina ny famaritana feno ny andiana manontolo, dia tokony hampiasa fomba C18 LC-MS/MS miaraka amin’ny akora manara-penitra voamarina ho an’ny akora tsirairay hodinihina.
Ny difraksiona amin’ny vovoka dia mamaly ny fanontaniana momba ny toetra mafy izay potehin’ireo fomba roa etsy ambony na tsy raharahainy: mamafa ny vaovao momba ny kristaly ny famongorana ny vovoka ho vahaolana hanaovana kromatografia, ary ny fatorana no asehon’ny fihovitrovitry ny molekiola fa tsy ny fandaminana amin’ny elanelana lavitra. Manavaka ny dingana hidrata sy ny toetra kristaly ny lamina difraksiona, ary mila izany fandinihana izany mihoatra noho ny ankamaroan’ny akora ny manga metilena. Ny fikarohana momba ny toetra mafy nataon’i Rager sy ny mpiara-miasa aminy dia nahafantatra firafitra hidrata dimy samihafa, ahitana pentahidrata iray, dihidrata roa, monohidrata iray ary hidrata anelanelany, ary tsy nahita trihidrata tena izy tamin’ireo endrika voafaritra. Zava-dehibe eto ny fikarakarana ao amin’ny laboratoara: manova ny fahamarinan-toeran’ny hidrata ny hamandoana sy ny maripana, ary mety hanova ny dingana na hanimba ny toetra kristaly ny fitotoana mafy. Noho izany, fehezo sy raketo ny hamandoana relatif sy ny maripana, ary ataovy faran’izay kely ny fitotoana. Hazavaina bebe kokoa ao amin’ny endrika hidrata sy fanamarihana amin’ny etikety an’ny manga metilena ny fanamarihana hidrata amin’ny etikety sy ny fiantraikany amin’ny lanja lanjaina.
Manana anjara asa fanohanana ny fandraisana taratra UV-Vis. Manamarina ny fihetsiky ny vahaolana andrasana ireo tampony mahazatra ary ahafahana mandrefy ny fifantohana. Saingy ny vahaolana manga izay mandray taratra amin’ny halavan’onja andrasana dia mifanaraka amin’ny manga metilena nefa tsy manaporofo fa io tokoa izy, satria mandray taratra eo akaiky eo koa ireo loko mitovitovy firafitra.
Izay tokony hanontaniana alohan’ny hividianana
Avadiho ho fanontaniana momba ny fividianana ireo fanavahana ireo. Anontanio izay andiany nanaovana fitsapana, izay teknika nampiasaina hanamarinana ny maha-izy azy, raha nampiasa akora fanondroana Azure B ny fitsapana loto tamin’ny HPLC, ary raha tena nofaritana ny endrika hidrata na noheverina fotsiny. Ambonin’izany rehetra izany, anontanio raha mandrakotra ny fepetra takina manontolo ilay taratasy fanamarinana na fitsapana voafantina ihany. Maro amin’ireo mpivarotra milaza fa manaraka ny farmakopea no mitsapa metaly mavesatra ihany, ka tsy voavaly ny fanontaniana momba ny maha-izy azy, ny votoaty, ny loto organika, ny solventa ary ny mikrôba.
Mitsapa ny fepetra takin’ny USP manontolo ny Blupreme, izay mandrakotra ny maha-izy azy, ny fahadiovana, ny loto organika, ny sisa tavela amin’ny solventa, ny loto singa simika, ny sisa tavela aorian’ny fandoroana, ny fetra mikrôbiolojika ary ny endotoksina bakteriana, miaraka amin’ny mpanamboatra manga metilena ho an’ny sehatry ny fanafody. Avoaka ao amin’ny fitsapana kalitaon’ny Blupreme ny taratasy fanamarinana ny famakafakana ho an’ny andiany tsirairay, ka azo vakina mivantana ny fototry ny fandrefesana votoaty sy ny valin’ny loto fa tsy vinavinaina. Mbola mila ambara ny fototry ny kajy na dia manakaiky ny 100% aza ny valiny, araka ny hazavain’ny torolalana momba ny votoaty voarefy mihoatra ny 100 isan-jato. Ny fifanarahana amin’ny famantarana no manokatra ny fanadihadiana. Ny antontan-kevitra feno no mamita azy.