ເມທີລີນບລູ ແລະ ເຟີຣອບໂຕຊິສ: ກົນໄກການເກີດເປີອອກຊິເດຊັນຂອງລິພິດ

ເຟີຣອບໂຕຊິສແມ່ນການຕາຍຂອງເຊລຈາກຄວາມເສຍຫາຍຂອງເຢື່ອຫຸ້ມ. ໄຂມັນບໍ່ອີ່ມຕົວຫຼາຍຕຳແໜ່ງໃນເຢື່ອຫຸ້ມເກີດອອກຊິເດຊັນເປັນປະຕິກິລິຍາລູກໂສ້, ເຢື່ອຫຸ້ມສູນເສຍໜ້າທີ່ ແລະ ເຊລຕາຍ. ປະຕິກິລິຍາເຄມີນີ້ຕ້ອງອາໄສທາດເຫຼັກ. ຂໍ້ຄວາມນັ້ນຄືແນວຄິດທັງໝົດ, ແລະ ທຸກຢ່າງໃນບົດຄວາມນີ້ແມ່ນການທົດສອບສ່ວນໃດສ່ວນໜຶ່ງຂອງແນວຄິດນັ້ນ.

ຄຳຖາມໃນທີ່ນີ້ມີຂອບເຂດແຄບກວ່າ: ເມທີລີນບລູເຮັດຫຍັງຕໍ່ລຳດັບປະຕິກິລິຍານັ້ນໃນການທົດລອງໃນເຊລ, ແລະ ຜົນທີ່ໄດ້ສະແດງຫຍັງແທ້ໆ. ຄຳຕອບສັ້ນໆແມ່ນ ໃນການສຶກສາໃນຫ້ອງທົດລອງສອງຄັ້ງ, ເມທີລີນບລູໃນລະດັບ nanomolar ຫຼຸດການເກີດເປີອອກຊິເດຊັນຂອງລິພິດໃນໄມໂຕຄອນເດຣຍ ແລະ ຮັກສາໃຫ້ເຊລມີຊີວິດຢູ່ຫຼັງຈາກໄດ້ຮັບຕົວກະຕຸ້ນທີ່ປົກກະຕິຈະເຮັດໃຫ້ເກີດເຟີຣອບໂຕຊິສ. ຄຳຕອບທີ່ລະອຽດກວ່າມີຄວາມສຳຄັນຫຼາຍກວ່າ, ເພາະແຕ່ລະຂັ້ນໃນລຳດັບນັ້ນຖືກທົດສອບດ້ວຍວິທີແຊກແຊງທີ່ແຕກຕ່າງກັນ, ແລະ ແຕ່ລະວິທີມີຂໍ້ຈຳກັດ.

ເຟີຣອບໂຕຊິສໃນໜຶ່ງວັກ

ຟອສໂຟລິພິດໃນເຢື່ອຫຸ້ມທີ່ມີຫາງເປັນກົດໄຂມັນບໍ່ອີ່ມຕົວຫຼາຍຕຳແໜ່ງມີຈຸດອ່ອນ: ອະຕອມໄຮໂດຣເຈນທີ່ຖືກດຶງອອກໄດ້ງ່າຍ. ເມື່ອອະນຸມູນອິດສະຫຼະດຶງອະຕອມໜຶ່ງອອກ, ອອກຊີເຈນຈະເຂົ້າຈັບກັບລິພິດ, ເກີດເປັນອະນຸມູນເປີອອກຊິລຂອງລິພິດ, ແລະ ອະນຸມູນນັ້ນຈະດຶງໄຮໂດຣເຈນຈາກລິພິດຕົວຕໍ່ໄປ. ປະຕິກິລິຍາຈະລາມໄປຕາມເຢື່ອຫຸ້ມ ຈົນກວ່າຈະມີບາງສິ່ງມາຢຸດມັນ.

ກົນໄກຫຼັກທີ່ຢຸດປະຕິກິລິຍານີ້ແມ່ນເອນໄຊຊື່ GPX4, ເຊິ່ງໃຊ້ກລູຕາໄທໂອນເພື່ອຣີດິວຊ໌ເປີອອກໄຊດ໌ຂອງລິພິດໃຫ້ເປັນແອລກໍຮໍຂອງລິພິດທີ່ບໍ່ເປັນອັນຕະລາຍ. ຕົວກະຕຸ້ນໃນຫ້ອງທົດລອງໂຈມຕີລະບົບປ້ອງກັນນີ້ຢູ່ຈຸດທີ່ກຳນົດໄວ້. ເອຣາສຕິນຂັດຂວາງການນຳຊິສຕີນເຂົ້າເຊລຜ່ານລະບົບ xc-minus, ເຮັດໃຫ້ເຊລຂາດຊິສເຕອີນສຳລັບການສັງເຄາະກລູຕາໄທໂອນ. ບູທີໂອນີນຊັລຟອກຊິມີນຂັດຂວາງການສັງເຄາະກລູຕາໄທໂອນໂດຍກົງ. RSL3 ຍັບຍັ້ງ GPX4 ໂດຍກົງ. ທັງສາມຢ່າງເຮັດໃຫ້ເປີອອກໄຊດ໌ຍັງຄົງຢູ່ໂດຍບໍ່ຖືກກຳຈັດ, ແຕ່ອອກລິດຢູ່ຄົນລະຂັ້ນຕອນ, ດັ່ງນັ້ນຜົນທີ່ໄດ້ຈາກຕົວກະຕຸ້ນໜຶ່ງຈຶ່ງບໍ່ສາມາດນຳໄປສະຫຼຸບໃຊ້ກັບຕົວອື່ນໄດ້ໂດຍອັດຕະໂນມັດ.

ເຟີຣອບໂຕຊິສແຕກຕ່າງຈາກອະພອບໂຕຊິສຕາມລັກສະນະທີ່ໃຊ້ກຳນົດມັນ. ບໍ່ມີລຳດັບການກະຕຸ້ນແຄສເປສ ແລະ ບໍ່ມີຊິ້ນສ່ວນເຊລແບບອະພອບໂຕຊິສ. ສານຈັບທາດເຫຼັກແບບຄີເລຊັນ ເຊັ່ນ ເດເຟີຣອກຊາມີນ ແລະ ສານດັກຈັບອະນຸມູນອິດສະຫຼະ ເຊັ່ນ ເຟີຣອສຕາຕິນ-1 ສາມາດຍັບຍັ້ງມັນໄດ້, ເຊິ່ງເປັນການທົດສອບໃນທາງປະຕິບັດທີ່ນັກວິຈັຍໃຊ້ເພື່ອລະບຸວ່າການຕາຍເປັນແບບເຟີຣອບໂຕຊິສ ບໍ່ແມ່ນພຽງແຕ່ເນໂຄຣຊິສ. ພາບລວມຂອງເສັ້ນທາງການຕາຍຂອງເຊລທີ່ມີການຄວບຄຸມຊ່ວຍໃຫ້ເຫັນຄວາມແຕກຕ່າງນີ້ໃນບໍລິບົດທີ່ກວ້າງຂຶ້ນ, ແລະ ວິທີທີ່ເຊລຈັດການກັບທາດເຫຼັກທີ່ພ້ອມເຂົ້າປະຕິກິລິຍາອະທິບາຍໄດ້ວ່າ ເປັນຫຍັງການຈັບທາດເຫຼັກແບບຄີເລຊັນຈຶ່ງເປັນຕົວຄວບຄຸມທີ່ຊີ້ຂາດໄດ້ຢ່າງຊັດເຈນ.

ໄມໂຕຄອນເດຣຍມີບົດບາດຢູ່ຈຸດໃດ ແລະ ເປັນຫຍັງຈຶ່ງເຄີຍມີຂໍ້ຖົກຖຽງ

ວຽກວິຈັຍໃນຊ່ວງຕົ້ນລາຍງານວ່າ ເຊລທີ່ບໍ່ມີ DNA ຂອງໄມໂຕຄອນເດຣຍຍັງເກີດເຟີຣອບໂຕຊິສໄດ້, ເຊິ່ງຊີ້ວ່າໄມໂຕຄອນເດຣຍອາດບໍ່ຈຳເປັນ. ວຽກວິຈັຍຕໍ່ມາພົບວ່າ ການຫຼຸດຈຳນວນໄມໂຕຄອນເດຣຍ ຫຼື ການຂັດຂວາງການຫາຍໃຈຂອງເຊລ ສາມາດຍັບຍັ້ງເຟີຣອບໂຕຊິສທີ່ເກີດຈາກການຂາດຊິສເຕອີນ, ແຕ່ບໍ່ສາມາດຍັບຍັ້ງກໍລະນີທີ່ເກີດຈາກການຍັບຍັ້ງ GPX4 ໂດຍກົງ. ຜົນທັງສອງອາດເປັນຈິງໄດ້ ຖ້າບົດບາດຂອງໄມໂຕຄອນເດຣຍຂຶ້ນກັບຕົວກະຕຸ້ນ, ຊະນິດຂອງເຊລ ແລະ ຕຳແໜ່ງທີ່ເກີດເປີອອກຊິເດຊັນທີ່ເປັນຈຸດຊີ້ຂາດ.

ການສຶກສາທີ່ເປັນພື້ນຖານຂອງບົດຄວາມນີ້ໄດ້ສຳຫຼວດຂໍ້ຖົກຖຽງດັ່ງກ່າວດ້ວຍສານກວດວັດທີ່ຈຳເພາະຕໍ່ບໍລິເວນຍ່ອຍຂອງເຊລ. MitoCLox ແມ່ນສານລາຍງານການເກີດເປີອອກຊິເດຊັນຂອງລິພິດຮຸ່ນທີ່ມຸ່ງເປົ້າໄປຫາໄມໂຕຄອນເດຣຍ: ມັນປ່ຽນການເຮືອງແສງເມື່ອພົບອະນຸມູນເປີອອກຊິລຂອງລິພິດພາຍໃນໄມໂຕຄອນເດຣຍ. ໃນເຊລໄຟໂບຣບລາສທ໌ທີ່ໄດ້ຮັບເອຣາສຕິນ, ອອກຊິເດຊັນຂອງສານກວດວັດໃນໄມໂຕຄອນເດຣຍປາກົດໃນເຊລທີ່ຍັງມີຊີວິດກ່ອນທີ່ເຊລຈະຕາຍ, ແລະ ລະດັບຂອງມັນແຕກຕ່າງກັນໃນກຸ່ມເຊລ. ລຳດັບເວລານັ້ນມີຄວາມສຳຄັນ. ເປີອອກຊິເດຊັນທີ່ເກີດກ່ອນການຕາຍອາດເປັນສາເຫດ. ເປີອອກຊິເດຊັນທີ່ວັດໄດ້ພຽງແຕ່ໃນເຊລທີ່ຕາຍແລ້ວແມ່ນຮ່ອງຮອຍຈາກຊາກເຊລ. ຄູ່ມືປະກອບກ່ຽວກັບ ການທົດສອບເປີອອກຊິເດຊັນຂອງລິພິດ ແລະ ສິ່ງທີ່ສານກວດວັດແຕ່ລະຊະນິດລາຍງານ ອະທິບາຍວ່າ ເປັນຫຍັງຕຳແໜ່ງຂອງສານກວດວັດຈຶ່ງກຳນົດຄວາມໝາຍຂອງສັນຍານ.

ຮູບແບບດຽວກັນປາກົດໃນແບບຈຳລອງທີສອງ. ເຊລໄຟໂບຣບລາສທ໌ຈາກຜູ້ປ່ວຍທີ່ມີພະຍາດເສັ້ນປະສາດຕາທາງພັນທຸກຳແບບ Leber, ເຊິ່ງມີການກາຍພັນຂອງຄອມເພລັກ I ແລະ ມີຄວາມຄຽດຈາກອອກຊິເດຊັນໃນລະດັບພື້ນຖານສູງກວ່າ, ຕາຍແບບເຟີຣອບໂຕຊິສເມື່ອກລູຕາໄທໂອນຫຼຸດລົງຈົນຂາດແຄນ, ໃນຂະນະທີ່ເຊລໄຟໂບຣບລາສທ໌ຄວບຄຸມທົນຕໍ່ສະພາບນັ້ນໄດ້. ອອກຊິເດຊັນຂອງສານກວດວັດໃນໄມໂຕຄອນເດຣຍເກີດຂຶ້ນກ່ອນອີກຄັ້ງ. ລາຍລະອຽດຢູ່ໃນ ການສຶກສາເຊລໄຟໂບຣບລາສທ໌ກ່ຽວກັບເປີອອກຊິເດຊັນຂອງລິພິດໃນໄມໂຕຄອນເດຣຍລະຫວ່າງເຟີຣອບໂຕຊິສ.

ເມທີລີນບລູປ່ຽນແປງຫຍັງໃນການທົດລອງເຫຼົ່ານີ້

ເມທີລີນບລູເປັນຕົວພາໃນປະຕິກິລິຍາຣີດອກຊ໌. ຮູບແບບທີ່ຖືກອອກຊິໄດຊ໌ຂອງມັນຮັບເອເລັກຕຣອນຈາກປະຕິກິລິຍາທີ່ເຊື່ອມກັບ NADH ຢູ່ຄອມເພລັກ I, ແລະ ຮູບແບບທີ່ຖືກຣີດິວຊ໌ຂອງມັນສົ່ງເອເລັກຕຣອນໃຫ້ໄຊໂຕໂຄຣມ c, ເຊິ່ງສົ່ງຕໍ່ໄປຍັງຄອມເພລັກ IV. ນີ້ສ້າງເສັ້ນທາງອ້ອມບາງສ່ວນເພື່ອຂ້າມຊ່ວງຂອງສາຍສົ່ງທີ່ປົກກະຕິເອເລັກຕຣອນຈະຮົ່ວໄປຫາອອກຊີເຈນ ແລະ ເກີດເປັນຊູເປີອອກໄຊດ໌. ຜູ້ອ່ານທີ່ຕ້ອງການເຫັນພາບລວມຂອງການສົ່ງຕໍ່ທັງໝົດຄວນເລີ່ມຈາກ ວິທີທີ່ເມທີລີນບລູຂົນສົ່ງເອເລັກຕຣອນຜ່ານໄມໂຕຄອນເດຣຍ.

ໃນເຊລໄຟໂບຣບລາສທ໌ຂອງປອດທີ່ໄດ້ຮັບເອຣາສຕິນ, ເມທີລີນບລູທີ່ 250 nanomolar ຮັກສາຄວາມມີຊີວິດຂອງເຊລໃນຜົນການວັດການຢູ່ລອດຂອງເຊລ, ເຊັ່ນດຽວກັບສານຕ້ານອອກຊິເດຊັນທີ່ມຸ່ງເປົ້າໄປຫາໄມໂຕຄອນເດຣຍ SkQ1 ແລະ MitoTEMPO. ຕົວຄວບຄຸມເປັນຕົວກຳນົດຂອບເຂດຂອງຂໍ້ສະຫຼຸບ. ເຟີຣອສຕາຕິນ-1, ອັລຟາ-ໂທໂຄເຟີຣອລ ແລະ ເດເຟີຣອກຊາມີນກໍປົກປ້ອງເຊລໄດ້ເຊັ່ນກັນ, ເຊິ່ງຢືນຢັນວ່າການຕາຍນັ້ນເປັນແບບເຟີຣອບໂຕຊິສ. ສານຄ້າຍຄື SkQ1 ທີ່ບໍ່ມີໝູ່ຕ້ານອອກຊິເດຊັນບໍ່ສາມາດປົກປ້ອງເຊລໄດ້, ເຊິ່ງຊີ້ໄປທີ່ປະຕິກິລິຍາຣີດອກຊ໌ ແທນທີ່ຈະເປັນການສະສົມທີ່ບໍ່ຈຳເພາະ. ການປົກປ້ອງຫຼຸດລົງເມື່ອ SkQ1 ສູງກວ່າປະມານ 200 nanomolar, ສອດຄ່ອງກັບພຶດຕິກຳສົ່ງເສີມອອກຊິເດຊັນທີ່ຮູ້ກັນຂອງສານຕ້ານອອກຊິເດຊັນກຸ່ມຄວິໂນນເມື່ອມີປະລິມານສູງຂຶ້ນ. ເມທີລີນບລູມີພຶດຕິກຳສອງດ້ານຕາມລະດັບປະລິມານເຊັ່ນດຽວກັນ: ປົກປ້ອງເຊລໃນຈານເພາະລ້ຽງເຫຼົ່ານີ້ທີ່ລະດັບ nanomolar ຕ່ຳ, ແລະ ສາມາດສ້າງໄຮໂດຣເຈນເປີອອກໄຊດ໌ຜ່ານວົງຈອນຣີດອກຊ໌ເມື່ອເພີ່ມລະດັບໃຫ້ສູງຂຶ້ນ ຫຼື ໃຫ້ຮັບແສງແຮງ. ບໍລິບົດກ່ຽວກັບລະດັບປະລິມານແບບນີ້ອະທິບາຍໄວ້ໃນ ສານອອກຊີເຈນທີ່ມີຄວາມວ່ອງໄວຕໍ່ປະຕິກິລິຍາໃນໄມໂຕຄອນເດຣຍ.

ຈາກນັ້ນ ການທົດລອງໃນໄມໂຕຄອນເດຣຍທີ່ແຍກອອກມາໄດ້ແຍກແຫຼ່ງກຳເນີດ ROS ອອກຈາກກັນ. ເມື່ອມີທາດເຫຼັກເຟີຣັສ, ສານຕັ້ງຕົ້ນທີ່ປ້ອນໃຫ້ຄອມເພລັກ I ຮ່ວມກັບໂຣເທໂນນໄດ້ກະຕຸ້ນອອກຊິເດຊັນຂອງສານກວດວັດ. ໂຣເທໂນນຂັດຂວາງການສົ່ງຕໍ່ຢູ່ຫຼັງຈຸດຟລາວິນ, ດັ່ງນັ້ນຕົວພາກ່ອນຈຸດນັ້ນຈຶ່ງຄົງຢູ່ໃນສະພາບຣີດິວຊ໌ ແລະ ປ່ອຍເອເລັກຕຣອນຮົ່ວໄປຫາອອກຊີເຈນຈາກຟລາວິນທີ່ຫັນເຂົ້າຫາເມທຣິກຊ໌. ສານຕັ້ງຕົ້ນທີ່ປ້ອນໃຫ້ຄອມເພລັກ III ຮ່ວມກັບແອນຕິໄມຊິນ A ສ້າງໄຮໂດຣເຈນເປີອອກໄຊດ໌ຢ່າງຫຼວງຫຼາຍ ແຕ່ບໍ່ໄດ້ຂັບເຄື່ອນການເກີດເປີອອກຊິເດຊັນຂອງລິພິດ. ສັນຍານ ROS ໂດຍລວມຄືກັນ, ແຕ່ຕຳແໜ່ງຕ່າງກັນ ແລະ ຜົນຕ່າງກັນ. SkQ1 ແລະ ເມທີລີນບລູຕ່າງກໍຍັບຍັ້ງເປີອອກຊິເດຊັນທີ່ຂັບເຄື່ອນໂດຍຄອມເພລັກ I ໂດຍບໍ່ໄດ້ຍັບຍັ້ງການຜະລິດໄຮໂດຣເຈນເປີອອກໄຊດ໌ເອງ, ເຊິ່ງຊີ້ວ່າພວກມັນອອກລິດຫຼັງຈາກ ROS ເກີດຂຶ້ນແລ້ວ, ຢູ່ຂັ້ນຕອນການເກີດເປີອອກຊິເດຊັນຂອງລິພິດ.

ສ່ວນການສຶກສາທາດເຫຼັກເກີນ ແລະ ເບາະແສຈາກລິໂພຟັສຊິນ

ການສຶກສາທີສອງຕັ້ງຄຳຖາມຈາກດ້ານຂອງທາດເຫຼັກ. ເຊລກ້າມເນື້ອຫົວໃຈ H9c2 ທີ່ໄດ້ຮັບເຟີຣິກແອມໂມນຽມຊິເຕຣດໃນລະດັບ submillimolar ເກີດ ROS ໃນໄມໂຕຄອນເດຣຍ, ເປີອອກຊິເດຊັນຂອງລິພິດໃນໄມໂຕຄອນເດຣຍ, ແລ້ວເກີດເຟີຣອບໂຕຊິສ, ຕາມດ້ວຍການສະສົມສານສີຄ້າຍລິໂພຟັສຊິນພາຍໃນ 24 ຊົ່ວໂມງ. ລິໂພຟັສຊິນແມ່ນສານຕົກຄ້າງຂອງລິພິດ ແລະ ໂປຣຕີນທີ່ຖືກອອກຊິໄດຊ໌, ມີທາດເຫຼັກ ແລະ ເຮືອງແສງໄດ້ເອງ, ເຊິ່ງສະສົມຂຶ້ນຕາມອາຍຸ. ການປາກົດຢ່າງໄວວາຂອງມັນໃນທີ່ນີ້ເຊື່ອມໂຍງເປີອອກຊິເດຊັນແບບສ້ວຍແຫຼມທີ່ຂັບເຄື່ອນໂດຍທາດເຫຼັກ ກັບຕົວບົ່ງຊີ້ຄວາມແກ່ຊະລາທີ່ຮູ້ຈັກກັນມາດົນ. ເມທີລີນບລູໃນລະດັບ nanomolar ແລະ SkQ1 ຕ່າງກໍປ້ອງກັນເປີອອກຊິເດຊັນ, ການຕາຍ ແລະ ການສະສົມສານສີໄດ້. ໄມໂຕຄອນເດຣຍຈາກຫົວໃຈທີ່ແຍກອອກມາຢືນຢັນຮູບແບບນີ້: ໂຣເທໂນນຮ່ວມກັບທາດເຫຼັກເຟີຣັສຂັບເຄື່ອນເປີອອກຊິເດຊັນ ແລະ ສັນຍານຄ້າຍສານສີ, ແລະ ສານທັງສອງຂັດຂວາງມັນໄດ້. ລຳດັບເຫດການທັງໝົດລາຍງານໄວ້ໃນ ການສຶກສາທາດເຫຼັກເກີນໃນເຊລກ້າມເນື້ອຫົວໃຈ H9c2. ສ່ວນທີ່ກ່ຽວກັບສານສີຄວນພິຈາລະນາຄູ່ກັບ ລິໂພຟັສຊິນ ແລະ ຕົວບົ່ງຊີ້ຄວາມແກ່ຊະລາຂອງເຊລ.

ສິ່ງທີ່ການທົດສອບການຢູ່ລອດຂອງເຊລບໍ່ໄດ້ສະແດງ

ຜົນການວັດຄວາມມີຊີວິດ ເຊັ່ນ CellTiterBlue ລາຍງານວ່າມີເຊລຈຳນວນເທົ່າໃດໃນຈານເພາະລ້ຽງທີ່ຍັງມີການເຜົາຜານທຳງານຢູ່ ຫຼັງຈາກໄດ້ຮັບຕົວກະຕຸ້ນຮ່ວມກັບສານທີ່ອາດປົກປ້ອງເຊລ. ນັ້ນແມ່ນການທົດສອບກົນໄກໃນລະບົບທີ່ກຳນົດໄວ້. ມັນບໍ່ແມ່ນຜົນການຮັກສາ. ບໍ່ມີການທົດລອງໃດໃນເຫຼົ່ານີ້ທີ່ໃຫ້ສານແກ່ຜູ້ປ່ວຍ, ວັດຜົນລັບຂອງພະຍາດ ຫຼື ກຳນົດຊ່ວງປະລິມານທີ່ເໝາະສົມສຳລັບການຮັກສາໃນຮ່າງກາຍ.

ມີຂໍ້ຈຳກັດສີ່ປະການທີ່ຄວນລະບຸຢ່າງຊັດເຈນ. ປະການທຳອິດ, ຊະນິດເຊລມີຂອບເຂດຈຳກັດ: ເຊລໄຟໂບຣບລາສທ໌ຂອງປອດທີ່ຜ່ານການປ່ຽນສະພາບ, ເຊລໄຟໂບຣບລາສທ໌ປະຖົມຈາກຜິວໜັງທີ່ລວມມີສາຍເຊລພະຍາດໄມໂຕຄອນເດຣຍໜຶ່ງສາຍ, ແລະ ສາຍເຊລກ້າມເນື້ອຫົວໃຈຂອງໜູ, ພ້ອມທັງໄມໂຕຄອນເດຣຍຈາກຫົວໃຈໜູທີ່ແຍກອອກມາ. ຄວາມໄວຕໍ່ສິ່ງກະຕຸ້ນແຕກຕ່າງກັນຕາມສາຍເຊລ, ແລະ ສາຍເຊລ LHON ຖືກເລືອກໃຫ້ມີຄວາມອ່ອນໄຫວສູງຜິດປົກກະຕິຕາມການອອກແບບການສຶກສາ. ປະການທີສອງ, ຕົວກະຕຸ້ນເປັນສະພາບຮຸນແຮງໃນຫ້ອງທົດລອງ: ການຂັດຂວາງການຂົນສົ່ງ ຫຼື ການສັງເຄາະຢ່າງສົມບູນ, ແລະ ປະລິມານທາດເຫຼັກທີ່ບໍ່ມີເນື້ອເຍື່ອໃດຈະພົບໃນສະພາບສ້ວຍແຫຼມ. ປະການທີສາມ, ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນບໍ່ສາມາດແປງໄປໃຊ້ໄດ້ດ້ວຍການຄູນ. ລະດັບ nanomolar ໃນອາຫານເພາະລ້ຽງບໍ່ແມ່ນປະລິມານສຳລັບມະນຸດ, ແລະ ການກະຈາຍຂອງເມທີລີນບລູ, ການຣີດິວຊ໌ມັນໃຫ້ເປັນຮູບແບບບໍ່ມີສີໃນເລືອດ ແລະ ເນື້ອເຍື່ອ, ການໄດ້ຮັບແສງ ແລະ ສັກໄຟຟ້າຂອງເຢື່ອຫຸ້ມ ລ້ວນເປັນປັດໄຈທີ່ແຍກຜົນໃນຈານເພາະລ້ຽງອອກຈາກຜົນໃນຄົນ. ປະການທີສີ່, ສານກວດວັດລາຍງານໄດ້ພຽງແຕ່ບໍລິເວນຂອງມັນເອງ. ອອກຊິເດຊັນຂອງ MitoCLox ສະແດງວ່າມີອະນຸມູນຂອງລິພິດເກີດຂຶ້ນໃນໄມໂຕຄອນເດຣຍ; ມັນບໍ່ໄດ້ສະແດງວ່າການແຕກຂອງເຢື່ອຫຸ້ມເຊລ, ເຊິ່ງອາດເປັນເຫດການສຸດທ້າຍ, ຖືກປ້ອງກັນໂດຍກົງ ແທນທີ່ຈະຖືກຫຼີກລ້ຽງດ້ວຍການຂັດຂວາງຂັ້ນຕອນກ່ອນໜ້າ.

ດັ່ງນັ້ນ ຂໍ້ສະຫຼຸບທີ່ກົງກັບຫຼັກຖານແມ່ນ: ໃນແບບຈຳລອງເຫຼົ່ານີ້, ROS ຈາກຄອມເພລັກ I ຮ່ວມກັບທາດເຫຼັກຂັບເຄື່ອນເປີອອກຊິເດຊັນຂອງລິພິດໃນໄມໂຕຄອນເດຣຍທີ່ເກີດກ່ອນເຟີຣອບໂຕຊິສ, ແລະ ເມທີລີນບລູໃນຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຕ່ຳຂັດຂວາງຊ່ວງນັ້ນ. ຂໍ້ສະຫຼຸບໃດໆທີ່ເກີນໄປຈາກຊ່ວງນັ້ນຕ້ອງອາໄສການທົດລອງອື່ນໃນສັດ ແລະ ຕໍ່ຈາກນັ້ນໃນມະນຸດ.