ບົດຄວາມ

ເມທິລີນບລູສາມາດຂ້າມ Complex III ໃນໄມໂຕຄອນເດຣຍໄດ້ບໍ? ເຫດໃດການສຶກສາຈຶ່ງໃຫ້ຜົນບໍ່ກົງກັນ

ເມທິລີນບລູສາມາດຂ້າມ Complex III ໃນໄມໂຕຄອນເດຣຍໄດ້ບໍ? ເຫດໃດການສຶກສາຈຶ່ງໃຫ້ຜົນບໍ່ກົງກັນ

ຫ້ອງປະຕິບັດການສອງແຫ່ງຕັ້ງຄຳຖາມວ່າ ເມທິລີນບລູສາມາດຂ້າມ Complex III ໃນໄມໂຕຄອນເດຣຍທີ່ຖືກປິດກັ້ນໄດ້ຫຼືບໍ່. ແຫ່ງໜຶ່ງຕອບວ່າບໍ່ໄດ້. ອີກແຫ່ງໜຶ່ງຕອບວ່າໄດ້. ທັງສອງແຫ່ງມີຂໍ້ມູນຮອງຮັບ.

ການສຶກສາຊິ້ນທຳອິດ ໃນໄມໂຕຄອນເດຣຍຈາກສະໝອງໜູໄມສ໌ ພົບວ່າສີຍ້ອມນີ້ເຮັດບໍ່ໄດ້. ຊິ້ນທີສອງ ໃນໄມໂຕຄອນເດຣຍຈາກສະໝອງສັດຟັນແທະສາມຊະນິດ ພົບວ່າມັນເຮັດໄດ້ບາງສ່ວນ. ການສຶກສາຊິ້ນທີສາມ ໃນຕັບໜູໄມສ໌ ມັກຖືກອ້າງອີງຄຽງຄູ່ກັນ ແຕ່ທົດສອບຄົນລະເລື່ອງ. ຫາກແຍກບົດບາດຂອງມັນໃຫ້ຖືກຕ້ອງ ຄວາມສັບສົນກໍຈະຫາຍໄປເຄິ່ງໜຶ່ງ.

ບໍ່ມີກົນໄກສາກົນທີ່ຈະປະກາດໄດ້. ມີພຽງການທົດລອງສາມຊິ້ນ ທີ່ໃຊ້ສານປິດກັ້ນ, ປະລິມານ ແລະຕົວຊີ້ວັດຕ່າງກັນ. ອ່ານເງື່ອນໄຂກ່ອນ. ຂໍ້ສະຫຼຸບຈະຕາມມາ.

ການຂ້າມໃນທີ່ນີ້ໝາຍເຖິງຫຍັງ

ອິເລັກຕຣອນເຂົ້າສູ່ລະບົບຖ່າຍທອດຜ່ານ Complex I (ຈາກ NADH) ຫຼື Complex II (ຈາກ succinate), ຜ່ານ Complex III ໄປຫາ cytochrome c, ແລ້ວຜ່ານ Complex IV ໄປຫາອົກຊີເຈນ. ຄວາມຕ່າງທີ່ສ້າງຂຶ້ນຕາມເສັ້ນທາງນີ້ ແມ່ນສິ່ງທີ່ຈຸລັງນຳໃຊ້ເພື່ອສ້າງ ATP.

ຂໍ້ອ້າງເລື່ອງການຂ້າມລະບຸວ່າ ເມທິລີນບລູຮັບອິເລັກຕຣອນຈາກຈຸດກ່ອນຕຳແໜ່ງທີ່ຖືກປິດກັ້ນ ແລ້ວສົ່ງຕໍ່ໃຫ້ຈຸດຫຼັງຕຳແໜ່ງນັ້ນ. ສີຍ້ອມໃນຮູບອອກຊິໄດຊ໌ຮັບອິເລັກຕຣອນຈາກ NADH ຫຼືອົງປະກອບຕອນຕົ້ນຂອງລະບົບ ແລະກາຍເປັນ leucomethylene blue; ຈາກນັ້ນຮູບຣີດິວຊ໌ຈະສົ່ງອິເລັກຕຣອນໃຫ້ cytochrome c ຫຼືສົ່ງກັບເຂົ້າລະບົບ. ຖ້າການສົ່ງຕໍ່ເກີດຂຶ້ນຫຼັງຈຸດປິດກັ້ນ ການຫາຍໃຈແລະສັກໄຟຟ້າຂອງເຢື່ອຫຸ້ມຈະຟື້ນຄືນບາງສ່ວນ. ຖ້າເກີດຂຶ້ນຢູ່ຈຸດປິດກັ້ນ ຫຼືກ່ອນຈຸດນັ້ນ ກໍຈະບໍ່ມີຫຍັງຟື້ນຄືນ.

ລາຍລະອຽດຢ່າງໜຶ່ງຂອງ Complex III ເປັນຕົວກຳນົດຂໍ້ໂຕ້ແຍ້ງນີ້ຢ່າງຫຼາຍ. ຄອມເພລັກຊ໌ນີ້ດຳເນີນວົງຈອນ Q ເຊິ່ງມີຈຸດຈັບຂອງສານຍັບຍັ້ງສອງຈຸດ. Antimycin ຈັບກັບຈຸດ Qi. Myxothiazol ຈັບກັບຈຸດ Qo. ການສຶກສາທີ່ໃຊ້ພຽງສານໃດສານໜຶ່ງ ຈຶ່ງທົດສອບຄອມເພລັກຊ໌ພຽງເຄິ່ງດຽວ.

ການສຶກສາຊິ້ນທຳອິດ: ບໍ່ມີການຂ້າມໃນໄມໂຕຄອນເດຣຍຈາກສະໝອງໜູໄມສ໌

Gureev ແລະຄະນະໃຊ້ໄມໂຕຄອນເດຣຍຈາກເປືອກສະໝອງຂອງໜູໄມສ໌ C57BL/6, ແຍກດ້ວຍ digitonin ແລະທົດສອບທີ່ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນໂປຣຕີນ 0.1 mg ຕໍ່ ml. ສານຕັ້ງຕົ້ນແບ່ງເປັນສາມຊຸດ: pyruvate ຮ່ວມກັບ malate ຢ່າງລະ 5 mM, succinate 10 mM ຮ່ວມກັບ glutamate 2 mM, ແລະ L-proline 10 mM. ສານປິດກັ້ນແມ່ນ rotenone 1 micromolar (Complex I) ແລະ antimycin 1 microgram per ml (Complex III). ປະລິມານສີຍ້ອມແມ່ນ 0.5, 1 ແລະ 2 micromolar, ໂດຍໃຊ້ 1 micromolar ເປັນຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຫຼັກ. ວິທີການແລະເສັ້ນກຣາຟສັນຍານຢູ່ໃນບົດລາຍງານຂອງ FEBS Letters.

ການຂ້າມ Complex I ໄດ້ຜົນ. Rotenone ຫຼຸດການຫາຍໃຈທີ່ກະຕຸ້ນດ້ວຍ ADP ຈາກປະມານ 121 ລົງເຫຼືອປະມານ 2 nmol per minute per mg, ແລະສີຍ້ອມ 1 micromolar ເຮັດໃຫ້ມັນຟື້ນຂຶ້ນເປັນປະມານ 21. ສັກໄຟຟ້າຂອງເຢື່ອຫຸ້ມຟື້ນຄືນເມື່ອໃຊ້ pyruvate ຮ່ວມກັບ malate ແລະເມື່ອໃຊ້ L-proline.

ການຂ້າມ Complex III ບໍ່ໄດ້ຜົນ. Antimycin ຫຼຸດການຫາຍໃຈລົງເຫຼືອປະມານ 16, ແລະສີຍ້ອມເພີ່ມມັນຂຶ້ນໄດ້ພຽງປະມານ 20. ສັກໄຟຟ້າຂອງເຢື່ອຫຸ້ມບໍ່ຟື້ນຄືນໃນສານຕັ້ງຕົ້ນໃດເລີຍ ແມ່ນແຕ່ໃຊ້ສີຍ້ອມສູງເຖິງ 5 micromolar. ຂໍ້ມູນເປີອອກໄຊດ໌ກໍຊີ້ໄປໃນທິດທາງດຽວກັນ: ສີຍ້ອມຢ່າງດຽວເພີ່ມການປ່ອຍເປີອອກໄຊດ໌ຈາກອັດຕາພື້ນຖານປະມານ 76 pmol per minute per mg ຂຶ້ນເປັນປະມານ 1170, 1460 ແລະ 1945 ທີ່ປະລິມານທັງສາມ, ແຕ່ antimycin ຫຼຸດສັນຍານທີ່ສີຍ້ອມກະຕຸ້ນນັ້ນລົງປະມານ 25, 88 ແລະ 96 ເປີເຊັນ ຕາມລຳດັບ. ຖ້າສີຍ້ອມໃນຮູບຣີດິວຊ໌ເຮັດປະຕິກິລິຍາກັບອົກຊີເຈນໂດຍກົງ ການປິດກັ້ນ Complex III ກໍບໍ່ຄວນກົດສັນຍານນີ້. ຜູ້ຂຽນຈຶ່ງອະນຸມານວ່າ ສີຍ້ອມໃນຮູບຣີດິວຊ໌ຖືກອອກຊິໄດຊ໌ທີ່ຈຸດ Qo ຂອງ Complex III ເຊິ່ງຢູ່ກ່ອນຈຸດປິດກັ້ນຂອງ antimycin. ອະທິບາຍວົງຮອບສັ້ນໆໄດ້ວ່າ: ຜູ້ໃຫ້ອິເລັກຕຣອນສົ່ງໃຫ້ສີຍ້ອມ, ສີຍ້ອມສົ່ງໃຫ້ Qo, ແລ້ວໄປຕໍ່ຕາມເສັ້ນທາງປົກກະຕິ. ຂ້າມ rotenone ໄດ້. ແຕ່ຂ້າມ antimycin ບໍ່ໄດ້.

ການສຶກສາຊິ້ນທີສອງ: ຂ້າມໄດ້ບາງສ່ວນໃນສາມຊະນິດສັດ ທີ່ຈຸດຍັບຍັ້ງທັງສອງ

Svab ແລະຄະນະຂະຫຍາຍຮູບແບບການທົດລອງ. ພວກເຂົາໃຊ້ໄມໂຕຄອນເດຣຍຈາກສະໝອງໜູໄມສ໌, ໜູແຣັດ ແລະໜູຕະເພົາ, ແຍກດ້ວຍ Percoll ແລະທົດສອບທີ່ 0.1 mg per ml ເທົ່າກັນ, ໂດຍໃຊ້ pyruvate ຮ່ວມກັບ malate ຫຼື glutamate ຮ່ວມກັບ malate ຢ່າງລະ 5 mM. ພວກເຂົາໃຊ້ສານປິດກັ້ນ Complex III ສອງຊະນິດ: antimycin A 0.3 micromolar ແລະ myxothiazol 1 micromolar. ສີຍ້ອມມີຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນ 2 micromolar ໃນການທົດສອບສ່ວນໃຫຍ່ ແລະ 0.5 ໃນການທົດສອບ cytochrome c. ຂໍ້ມູນທັງສາມຊະນິດສັດທີ່ໃຊ້ຂັ້ນຕອນດຽວກັນຢູ່ໃນບົດຄວາມທີ່ເປີດໃຫ້ອ່ານໄດ້ຟຣີ.

ການປິດກັ້ນທັງສອງແບບຖືກຂ້າມໄດ້ບາງສ່ວນ ໃນທັງສາມຊະນິດສັດ. ໃນໄມໂຕຄອນເດຣຍຂອງໜູໄມສ໌, antimycin ກົດການຫາຍໃຈ ແລະສີຍ້ອມເພີ່ມມັນຂຶ້ນປະມານ 60 ເປີເຊັນ, ຈາກປະມານ 37 ເປັນ 59 nmol per minute per mg. Myxothiazol ກົດມັນລົງ 88 ເປີເຊັນ ເຫຼືອປະມານ 4.5, ແລະສີຍ້ອມເພີ່ມມັນຂຶ້ນຫ້າເທົ່າ ເປັນປະມານ 23. ສັກໄຟຟ້າຂອງເຢື່ອຫຸ້ມກັບຄືນມາບາງສ່ວນພາຍໃຕ້ສານຍັບຍັ້ງທັງສອງຊະນິດ, ໂດຍວັດດ້ວຍສີຍ້ອມສອງຊະນິດ (safranin O ແລະ TMRM ແບບວັດອັດຕາສ່ວນ) ເພື່ອຕັດຄວາມຄາດເຄື່ອນຈາກຜົນທາງແສງອອກ.

ບົດຄວາມນີ້ຍັງທົດສອບການສົ່ງຕໍ່ໂດຍກົງ ເຊິ່ງການສຶກສາຊິ້ນທຳອິດບໍ່ໄດ້ເຮັດ. Cytochrome c ທີ່ຜ່ານການເຕີມໝູ່ acetyl ແລະເຕີມຈາກພາຍນອກທີ່ 25 micromolar ບໍ່ຖືກຣີດິວຊ໌ໂດຍໄມໂຕຄອນເດຣຍທີ່ມີພະລັງງານ ບໍ່ວ່າຈະມີຫຼືບໍ່ມີສານຍັບຍັ້ງ, ແຕ່ການເຕີມສີຍ້ອມກະຕຸ້ນການຣີດິວຊ໌ໃນທັງສອງກໍລະນີ. ໃນສານລະລາຍບັຟເຟີທີ່ບໍ່ມີຈຸລັງ, NADH ຮ່ວມກັບສີຍ້ອມຣີດິວຊ໌ cytochrome c ດ້ວຍອັດຕາທີ່ເປັນສັດສ່ວນກັບ NADH. ອະທິບາຍການຂ້າມທີ່ໄກກວ່າໄດ້ວ່າ: ສົມມູນຣີດິວຊ໌ສົ່ງໃຫ້ສີຍ້ອມ, ສີຍ້ອມສົ່ງໂດຍກົງໃຫ້ cytochrome c, ແລ້ວ Complex IV ສົ່ງໃຫ້ອົກຊີເຈນ. ເສັ້ນທາງນີ້ຂ້າມ Complex III ທັງໝົດ ຈຶ່ງສາມາດຂ້າມສານປິດກັ້ນທັງສອງໄດ້.

ຕົວຊີ້ວັດເພີ່ມເຕີມສອງຢ່າງສະໜັບສະໜູນການຕີຄວາມນີ້. ການເຮືອງແສງຂອງ NAD(P)H ຫຼຸດລົງເມື່ອເຕີມສີຍ້ອມໃສ່ໄມໂຕຄອນເດຣຍທີ່ໄດ້ຮັບ myxothiazol, ໝາຍຄວາມວ່າສົມມູນຣີດິວຊ໌ໄຫຼອອກຜ່ານເສັ້ນທາງໃໝ່. ແລະຄ່າການດູດກືນແສງຂອງສີຍ້ອມທີ່ 660 nm ປ່ຽນແປງຕາມການເຕີມແຕ່ລະຄັ້ງຕາມລຳດັບ, ຂະນະທີ່ຂອງເຫຼວສ່ວນເທິງຫຼັງການປັ່ນແຍກສະແດງວ່າ ສີຍ້ອມໃນຮູບອອກຊິໄດຊ໌ສະສົມຢູ່ພາຍໃນໄມໂຕຄອນເດຣຍທີ່ມີພະລັງງານຫຼາຍກວ່າຮ້ອຍເທົ່າ ແລ້ວອອກມາເມື່ອສັກໄຟຟ້າຫາຍໄປ. ດຸນໂປຣຕອນກໍສອດຄ່ອງກັນ: ການຂ້າມຂັ້ນຕອນສູບໂປຣຕອນເຮັດໃຫ້ເຫຼືອປະມານ 2 ໂປຣຕອນຕໍ່ຄູ່ອິເລັກຕຣອນ ແທນທີ່ຈະເປັນ 10, ດັ່ງນັ້ນ ການໃຊ້ອົກຊີເຈນທີ່ໄວຂຶ້ນແຕ່ສັກໄຟຟ້າກັບຄືນພຽງບາງສ່ວນ ຈຶ່ງເປັນລັກສະນະຂອງການຂ້າມທີ່ເກີດຂຶ້ນຈິງ ບໍ່ແມ່ນຫຼັກຖານທີ່ຄັດຄ້ານມັນ.

ຕົວຢ່າງທີ່ກຽມໃນແບບດຽວກັນນີ້ໃຫ້ການຕອບສະໜອງທີ່ອາດເຮັດໃຫ້ອ່ານຜິດໄດ້ງ່າຍ. ເມື່ອມີສານຍັບຍັ້ງຮ່ວມກັບສີຍ້ອມ, ADP ຫຼຸດການຫາຍໃຈແທນທີ່ຈະເພີ່ມມັນ, ແລະການປິດກັ້ນການຂົນສົ່ງກະຕຸ້ນມັນແທນທີ່ຈະເຮັດໃຫ້ຊ້າລົງ, ຂະນະທີ່ສັກໄຟຟ້າຂອງເຢື່ອຫຸ້ມຍັງປ່ຽນແປງໃນທິດທາງປົກກະຕິ. ການໃຊ້ອົກຊີເຈນພຽງຢ່າງດຽວຈຶ່ງອາດນຳໃຫ້ຕີຄວາມຜິດໃນລະບົບນີ້.

ເສັ້ນທາງຖ່າຍທອດອິເລັກຕຣອນທີ່ແຂ່ງຂັນກັນຂອງເມທິລີນບລູອ້ອມ Complex III. ເສັ້ນທາງ A ສົ່ງອິເລັກຕຣອນເຂົ້າຈຸດ Qo ແລະຍັງໄວຕໍ່ antimycin. ເສັ້ນທາງ B ສົ່ງອິເລັກຕຣອນໂດຍກົງໃຫ້ cytochrome c ແລະຂ້າມຄອມເພລັກຊ໌ນີ້.

ການສຶກສາຊິ້ນທີສາມ: ການສຶກສາໃນຕັບທີ່ທົດສອບ Complex I ແລະ II, ບໍ່ແມ່ນ III

Lee ແລະ Boelsterli ໃຊ້ໄມໂຕຄອນເດຣຍຈາກຕັບໜູໄມສ໌ ແລະຈຸລັງຕັບທີ່ເພາະລ້ຽງ ເຊິ່ງຖືກທຳລາຍດ້ວຍ efavirenz (Complex I, IC50 ປະມານ 30 micromolar) ແລະ hydrazine ທີ່ເປັນສານເມຕາໂບໄລຕ໌ຂອງ isoniazid (Complex II, IC50 ປະມານ 30 micromolar). ສີຍ້ອມປະມານ 30 micromolar ເຮັດໃຫ້ການອອກຊິໄດຊ໌ NADH, ສັກໄຟຟ້າຂອງເຢື່ອຫຸ້ມ ແລະ ATP ຟື້ນຄືນ ພ້ອມທັງຫຼຸດສານອອກຊິແດນຕ໌ແລະການຕາຍຂອງຈຸລັງແບບເນໂຄຣຊິສ. ບົດຄວາມໃນ Redox Biology ອະທິບາຍຜົນນີ້ດ້ວຍແບບຈຳລອງທີ່ສີຍ້ອມນຳອິເລັກຕຣອນອ້ອມ Complex I ແລະ II ທີ່ຖືກທຳລາຍ.

ຜົນນັ້ນເປັນຂໍ້ມູນບໍລິບົດຂອງສ່ວນຕົ້ນລະບົບທີ່ເປັນທີ່ຍອມຮັບ ແລະບໍ່ໄດ້ບອກຫຍັງກ່ຽວກັບ Complex III ເພາະບໍ່ມີການປິດກັ້ນຢູ່ຈຸດນັ້ນໃນການທົດລອງ. ມັນຈຶ່ງບໍ່ສາມາດຢືນຢັນຫຼືຫັກລ້າງການສຶກສາໃນສະໝອງຊິ້ນໃດຊິ້ນໜຶ່ງໄດ້.

ຕາຕະລາງປຽບທຽບເງື່ອນໄຂ

ເງື່ອນໄຂGureev 2019Svab 2021Lee 2014
ຊະນິດສັດແລະເນື້ອເຍື່ອເປືອກສະໝອງໜູໄມສ໌ສະໝອງໜູໄມສ໌, ໜູແຣັດ, ໜູຕະເພົາຕັບໜູໄມສ໌, ໄມໂຕຄອນເດຣຍແລະຈຸລັງ
ປະລິມານສີຍ້ອມ0.5 ຫາ 2 micromolar, ຫຼັກ 12 micromolar, 0.5 ໃນການທົດສອບ cyt cປະມານ 30 micromolar
ສານປິດກັ້ນ Complex IIIAntimycin 1 ug per ml, ພຽງ QiAntimycin 0.3 uM ຮ່ວມກັບ myxothiazol 1 uM, Qi ແລະ Qoບໍ່ມີ
ສານຕັ້ງຕົ້ນPM, succinate ຮ່ວມກັບ glutamate, prolinePM ຫຼື GMເຊື່ອມໂຍງກັບ NADH, ການທຳລາຍ I ແລະ II
ຕົວຊີ້ວັດຫຼັກການຫາຍໃຈ, ສັກໄຟຟ້າ, ເປີອອກໄຊດ໌ການຫາຍໃຈ, ສັກໄຟຟ້າທີ່ວັດດ້ວຍສີຍ້ອມສອງຊະນິດ, NAD(P)H, ຣີດອກຊ໌ຂອງສີຍ້ອມ, ການຣີດິວຊ໌ cyt cພະລັງງານ, ສັກໄຟຟ້າ, ATP, ສານອອກຊິແດນຕ໌, ການຕາຍ
ຜົນຂ້າມ Complex I ໄດ້, III ບໍ່ໄດ້ຂ້າມໄດ້ບາງສ່ວນພາຍໃຕ້ສານປິດກັ້ນ III ທັງສອງຊະນິດຂ້າມຈຸດທີ່ຖືກທຳລາຍໃນ I ແລະ II

ຕາຕະລາງປຽບທຽບການສຶກສາທັງສາມຄຽງຂ້າງກັນ ຕາມຊະນິດສັດ, ປະລິມານສີຍ້ອມ, ສານປິດກັ້ນ ແລະຜົນ.

ສີ່ເຫດຜົນທີ່ການສຶກສາ Complex III ທັງສອງອາດຖືກຕ້ອງສຳລັບການຈັດການທົດລອງຂອງຕົນ

1. ສານປິດກັ້ນບໍ່ໄດ້ເປັນການແຊກແຊງແບບດຽວກັນ. Antimycin ຢ່າງດຽວທີ່ 1 microgram per ml ທຽບກັບ antimycin 0.3 micromolar ແລະສານປິດກັ້ນຈຸດ Qo ອີກຊະນິດໜຶ່ງແຍກຕ່າງຫາກ. ເສັ້ນທາງຂອງສີຍ້ອມທີ່ສົ່ງໃຫ້ຈຸດ Qo ລົ້ມເຫຼວຢູ່ຈຸດທີ່ເສັ້ນທາງສົ່ງໂດຍກົງໃຫ້ cytochrome c ປະສົບຜົນສຳເລັດ. ຈຸດດຽວບໍ່ສາມາດແທນທັງສອງຈຸດໄດ້.

2. ປະລິມານສີຍ້ອມແລະເວລາຕ່າງກັນ. ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຫຼັກແມ່ນ 1 ທຽບກັບ 2 micromolar, ສຳລັບສານທີ່ໝູນວຽນໃນວົງຈອນຣີດອກຊ໌ ເຊິ່ງການດູດຮັບແລະການຣີດິວຊ໌ cytochrome c ໂດຍກົງຂຶ້ນກັບຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນແລະເວລາ. ຄວາມຕ່າງຂອງປະລິມານພຽງເລັກນ້ອຍ ຮ່ວມກັບເວລາວັດທີ່ຕ່າງກັນ ອາດເຮັດໃຫ້ເຫັນຄົນລະສາຂາຂອງເຄືອຂ່າຍດຽວກັນ.

3. ການກຽມຕົວຢ່າງຕ່າງກັນ. ການແຍກດ້ວຍ digitonin ທຽບກັບການແຍກດ້ວຍຄວາມຊັນຄວາມໜາແໜ້ນຂອງ Percoll ຄັດເລືອກກຸ່ມໄມໂຕຄອນເດຣຍທີ່ຊ້ອນທັບກັນ ແຕ່ບໍ່ຄືກັນທັງໝົດ. ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນໂປຣຕີນເທົ່າກັນທີ່ 0.1 mg per ml, ຈຶ່ງຕັດຕົວແປນີ້ອອກໄດ້, ແຕ່ບໍ່ສາມາດຕັດຄວາມຕ່າງຂອງກຸ່ມຍ່ອຍແລະຄວາມສົມບູນຂອງໄມໂຕຄອນເດຣຍອອກໄດ້. ແລະຂໍ້ສົງໄສເລື່ອງຊະນິດສັດກໍຖືກຕັດອອກ: ກຸ່ມທີສອງສ້າງຜົນຕອບສະໜອງແບບດຽວກັນຊ້ຳໄດ້ໃນໜູໄມສ໌ເຊັ່ນກັນ.

4. ສະພາບຂອງສານຕັ້ງຕົ້ນກຳນົດວ່າສີຍ້ອມເຮັດຫຍັງໄດ້. ສານຕັ້ງຕົ້ນສາມຊຸດ ທຽບກັບຄູ່ສານຕັ້ງຕົ້ນທີ່ເຊື່ອມໂຍງກັບ NADH. ການມີ NADH ໃຫ້ໃຊ້ແລະສັກໄຟຟ້າຂອງເຢື່ອຫຸ້ມ ຮ່ວມກັນກຳນົດວ່າສີຍ້ອມຖືກຣີດິວຊ໌ໄວປານໃດ ແລະກະຈາຍໄປຢູ່ບ່ອນໃດ; ເສັ້ນທາງທີ່ຕ້ອງການສີຍ້ອມໃນຮູບຣີດິວຊ໌ຢູ່ໃກ້ cytochrome c ໃນຮູບອອກຊິໄດຊ໌ ຈຶ່ງຂຶ້ນກັບການເລືອກນັ້ນ.

ວິທີອ່ານຂໍ້ອ້າງເລື່ອງການຂ້າມໃນຄັ້ງຕໍ່ໄປ

ຖາມວ່າຄອມເພລັກຊ໌ໃດຖືກປິດກັ້ນ, ດ້ວຍສານຍັບຍັ້ງໃດ, ທີ່ຈຸດໃດ ແລະປະລິມານເທົ່າໃດ. ຖາມເຖິງຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງສີຍ້ອມ ແລະເວລາທີ່ວັດຜົນ. ຖາມເຖິງເນື້ອເຍື່ອ, ຊະນິດສັດ, ວິທີແຍກ, ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນໂປຣຕີນ ແລະສານຕັ້ງຕົ້ນ. ແລະຖາມວ່າສັກໄຟຟ້າ, ການຫາຍໃຈ, ສະພາບຣີດອກຊ໌ ແລະການທົດສອບການສົ່ງຕໍ່ໂດຍກົງ ໃຫ້ຜົນສອດຄ່ອງກັນຫຼືບໍ່, ເພາະການໃຊ້ອົກຊີເຈນພຽງຢ່າງດຽວຊີ້ໄປຜິດທິດທາງຫຼາຍກວ່າໜຶ່ງຄັ້ງໃນການສຶກສາເຫຼົ່ານີ້.

ຂໍ້ສະຫຼຸບໃນຂອບເຂດຈຳກັດຍັງຄົງໃຊ້ໄດ້. ການຂ້າມ Complex I ໂດຍສີຍ້ອມເປັນທີ່ຍອມຮັບ. ສຳລັບ Complex III, ໄມໂຕຄອນເດຣຍຂອງໜູໄມສ໌ທີ່ໃຊ້ antimycin 1 microgram per ml ແລະສີຍ້ອມ 1 micromolar ບໍ່ສະແດງການຂ້າມທີ່ຟື້ນການເຮັດວຽກ, ຂະນະທີ່ສາມຊະນິດສັດທີ່ໃຊ້ antimycin 0.3 micromolar ຫຼື myxothiazol 1 micromolar ແລະສີຍ້ອມ 2 micromolar ສະແດງການຂ້າມບາງສ່ວນ ພ້ອມກັບການຖ່າຍທອດໂດຍກົງຈາກສີຍ້ອມໄປຫາ cytochrome c. ຂໍ້ຄວາມທັງສອງນີ້ເປັນຈິງຄຽງຄູ່ກັນໄດ້. ຂໍ້ສະຫຼຸບໃດທີ່ກວ້າງກວ່ານີ້ ແມ່ນການອະນຸມານເກີນຂອບເຂດຂໍ້ມູນ.

ບົດອ່ານທີ່ກ່ຽວຂ້ອງຊ່ວຍໃຫ້ຂໍ້ອ້າງທີ່ຍັງມີຂໍ້ໂຕ້ແຍ້ງຢູ່ໃນກອບເຄມີທີ່ບໍ່ມີຂໍ້ໂຕ້ແຍ້ງ: ເມທິລີນບລູເຄື່ອນຍ້າຍອິເລັກຕຣອນແນວໃດ ສຳລັບການສົ່ງຕໍ່, ການທົດລອງການຂ້າມ Complex I ສຳລັບກໍລະນີສ່ວນຕົ້ນລະບົບທີ່ເປັນທີ່ຍອມຮັບ, ການວັດສັກໄຟຟ້າຂອງເຢື່ອຫຸ້ມແລະຄວາມຄາດເຄື່ອນຂອງມັນ ສຳລັບເຫດຜົນທີ່ຕ້ອງໃຊ້ສີຍ້ອມສອງຊະນິດ, ແລະການຈັດການສານທີ່ໝູນວຽນໃນວົງຈອນຣີດອກຊ໌ໃນຫ້ອງປະຕິບັດການ ສຳລັບຈຸດທີ່ອາດເຮັດໃຫ້ຜິດພາດເລື່ອງປະລິມານແລະເວລາ.