Azure B: ສິ່ງເຈືອປົນຂອງ methylene blue, ເມຕາໂບໄລຕ໌ ແລະສານປະກອບສຳລັບການວິຈັຍ

Azure B ເປັນສານທາງເຄມີທີ່ແຕກຕ່າງຈາກ methylene blue ແຕ່ມີໂຄງສ້າງກ່ຽວຂ້ອງກັນ. ມັນອາດມີຢູ່ແລ້ວໃນຕົວຢ່າງ methylene blue, ປາກົດຂຶ້ນຫຼັງຈາກຮ່າງກາຍປະມວນຜົນ methylene blue, ຫຼືຖືກຈັດຫາແຍກຕ່າງຫາກສຳລັບການທົດລອງ. ຄຳອະທິບາຍເຫຼົ່ານີ້ບໍ່ຂັດແຍ້ງກັນ. ມັນບອກວ່າສານປະກອບນີ້ມາຈາກໃສ ແລະນັກວິຈັຍກຳລັງຖາມຫຍັງກ່ຽວກັບມັນ.

ຄວາມແຕກຕ່າງນີ້ສຳຄັນເມື່ອຕີຄວາມໝາຍໃບຮັບຮອງການວິເຄາະ ຫຼືຂໍ້ອ້າງກ່ຽວກັບກິດຈະກຳທາງຊີວະພາບ. ການເອີ້ນ Azure B ວ່າເປັນເມຕາໂບໄລຕ໌ທີ່ມີກິດຈະກຳ ບໍ່ໄດ້ໝາຍຄວາມວ່າປະລິມານທີ່ບໍ່ຖືກຄວບຄຸມໃນຂວດເປັນສິ່ງທີ່ຄວນມີ. ການເອີ້ນມັນວ່າສິ່ງເຈືອປົນ ກໍບໍ່ໄດ້ໝາຍຄວາມວ່າມັນບໍ່ມີກິດຈະກຳທາງຊີວະພາບ.

ມີຫຍັງປ່ຽນແປງທາງເຄມີ?

Azure B ແມ່ນອະນຸພັນ monodemethylated ຂອງ methylene blue. ໝູ່ methyl ໜຶ່ງທີ່ຕິດກັບໄນໂຕຣເຈນຖືກແທນທີ່ດ້ວຍໄຮໂດຣເຈນ. ຄວາມສຳພັນນີ້ຖືກອະທິບາຍໃນ ການອະພິປາຍທາງເຄມີ ແລະ Figure 1 ຂອງບົດທົບທວນໂດຍ Schirmer ແລະຄະນະ. ນີ້ແມ່ນການປ່ຽນແປງໂຄງສ້າງທີ່ຈຳເພາະ ບໍ່ແມ່ນພຽງຊື່ອື່ນຂອງ methylene blue.

ມັນຍັງແຕກຕ່າງຈາກການຣີດິວຊ໌ເປັນ leucomethylene blue. ການຣີດິວຊ໌ປ່ຽນສະຖານະອອກຊິເດຊັນ; N-demethylation ປ່ຽນໝູ່ແທນທີ່ຢູ່ເທິງໄນໂຕຣເຈນ. ການຖືວ່າທັງສອງຂະບວນການເປັນພຽງ “methylene blue ກາຍເປັນບໍ່ມີສີ” ຈະທຳໃຫ້ສູນເສຍຄວາມແຕກຕ່າງທີ່ຈຳເປັນຕໍ່ການຕີຄວາມໝາຍການເຜົາຜານ. ຊື່ຂອງສີຍ້ອມທີ່ຄ້າຍກັນກໍຕ້ອງໃຊ້ຄວາມລະມັດລະວັງເຊັ່ນກັນ: Azure A, Azure B ແລະ methylene blue ບໍ່ແມ່ນຊື່ທີ່ໃຊ້ແທນກັນໄດ້. ຄູ່ມືກ່ຽວກັບສານປະກອບທີ່ມີຊື່ຄ້າຍກັນ ອະທິບາຍບັນຫາການຕັ້ງຊື່ນີ້.

ສາມແຫຼ່ງກຳເນີດ, ສາມຄຳຖາມທີ່ແຕກຕ່າງກັນ

ແຜນພາບໜ້າປົກແຍກສາມເສັ້ນທາງໃນການສືບສວນ. ຕາຕະລາງເຮັດໃຫ້ຫຼັກຖານທີ່ຕ້ອງການໃນແຕ່ລະເສັ້ນທາງຊັດເຈນ.

ແຖວກາງຖືກມອງຂ້າມໄດ້ງ່າຍ. ຖ້າ Azure B ມີຢູ່ແລ້ວໃນວັດຖຸທີ່ນຳໃຫ້, ຕົວຢ່າງທາງຊີວະພາບທີ່ເກັບພາຍຫຼັງອາດມີທັງສານທີ່ມີຢູ່ກ່ອນ ແລະສານທີ່ເກີດໃໝ່. ການຢືນຢັນການເກີດຂຶ້ນຕ້ອງການຫຼັກຖານຫຼາຍກວ່າການກວດພົບ peak ຫຼັງການສຳຜັດ.

Azure B ໃນວັດຖຸເລີ່ມຕົ້ນ

ການສຶກສາດ້ານການວິເຄາະໃນອະດີດໃຫ້ຕົວຢ່າງທີ່ເປັນປະໂຫຍດວ່າເປັນຫຍັງສ່ວນປະກອບທີ່ມີປະລິມານນ້ອຍຈຶ່ງອາດມີຄວາມສຳຄັນ. ນັກວິຈັຍທີ່ສຶກສາ ການ iodination ຂອງ methylene blue ດ້ວຍ HPLC–mass spectrometry ພົບວ່າຜະລິດຕະພັນ iodinated ຫຼັກເກີດຈາກສິ່ງເຈືອປົນ Azure B. ຕົວຢ່າງ methylene blue ທີ່ສຶກສາມີ Azure B ປະມານ 7–8%. ພາຍໃຕ້ເງື່ອນໄຂການເກີດປະຕິກິລິຍາຂອງພວກເຂົາ, iodinated Azure B ມີປະລິມານຫຼາຍກວ່າ iodinated methylene blue ຢ່າງຫຼາຍ.

ເປີເຊັນເຫຼົ່ານັ້ນອະທິບາຍວັດຖຸທີ່ໃຊ້ໃນການສຶກສາປີ 1999 ນັ້ນ. ມັນບໍ່ໄດ້ກຳນົດຂີດຈຳກັດສິ່ງເຈືອປົນທີ່ຍອມຮັບໄດ້ໃນປັດຈຸບັນ ຫຼືອົງປະກອບຂອງຜະລິດຕະພັນຈາກຜູ້ສະໜອງລາຍອື່ນ. ການທົດລອງສະແດງຈຸດທີ່ແຄບກວ່າ: ສານປະກອບເລີ່ມຕົ້ນທີ່ມີຫຼາຍທີ່ສຸດບໍ່ຈຳເປັນຕ້ອງໃຫ້ຜະລິດຕະພັນປະຕິກິລິຍາທີ່ມີຫຼາຍທີ່ສຸດ.

ສຳລັບໃບຮັບຮອງການວິເຄາະ, ໃຫ້ກວດເບິ່ງຜົນ Azure B ໂດຍສະເພາະ, ຫົວໜ່ວຍ, ວິທີທົດສອບ, ຂີດຈຳກັດການລາຍງານ ແລະຕົວຕົນຂອງ lot. ການ assay ສີຍ້ອມລວມ ແລະການທົດສອບສານທີ່ກ່ຽວຂ້ອງຕອບຄຳຖາມຄົນລະຢ່າງ. ຜົນ “ກວດບໍ່ພົບ” ກໍຕ້ອງມີຂີດຈຳກັດການກວດພົບ ຫຼືການລາຍງານຈຶ່ງຈະຕີຄວາມໝາຍໄດ້. ເບິ່ງ ວິທີອ່ານໃບຮັບຮອງການວິເຄາະຂອງ methylene blue ສຳລັບການກວດເອກະສານໃນພາບລວມ.

Azure B ທີ່ເກີດຂຶ້ນລະຫວ່າງການເຜົາຜານ

ການສຶກສາການເຜົາຜານຕ້ອງອາໄສການແຍກວິເຄາະສານຕັ້ງຕົ້ນ ແລະເມຕາໂບໄລຕ໌ຂອງມັນ. Kim ແລະຄະນະໄດ້ພັດທະນາ ວິທີ LC–MS/MS ສຳລັບວັດແທກສານທັງສອງໃນ plasma ຂອງໜູ. ຊ່ວງ calibration ຂອງພວກເຂົາແມ່ນ 1–1,000 ng/mL ສຳລັບແຕ່ລະສານປະກອບ, ໂດຍມີຂີດຈຳກັດການຫາປະລິມານຕ່ຳສຸດ 1 ng/mL ໂດຍໃຊ້ plasma ຂອງໜູ 20 microlitres. ຈາກນັ້ນພວກເຂົານຳວິທີນີ້ໄປໃຊ້ໃນການສຶກສາເຠສັດຈະລະນະສາດໃນໜູ.

ລາຍລະອຽດນີ້ສຳຄັນ ເພາະວິທີການວັດແທກມີບໍລິບົດຂອງຕົວຢ່າງ. ການກວດສອບຄວາມໃຊ້ໄດ້ໃນ plasma ຂອງໜູ ບໍ່ໄດ້ຢືນຢັນໂດຍອັດຕະໂນມັດວ່າວິທີນັ້ນແມ່ນຖືກຕ້ອງໃນ plasma ຂອງຄົນ, ປັດສະວະ ຫຼືສານລະລາຍການຄ້າທີ່ເຂັ້ມຂຸ້ນ. ວິທີນີ້ສະແດງວ່ານັກວິຈັຍສາມາດຕິດຕາມສານສອງຊະນິດແຍກກັນໄດ້ແນວໃດ; ມັນບໍ່ໄດ້ໃຫ້ກົດການກຳນົດຂະໜາດສຳລັບມະນຸດ.

ຂໍ້ມູນການສຳຜັດໃນມະນຸດກໍສະແດງວ່າເປັນຫຍັງການໃຊ້ເປີເຊັນເມຕາໂບໄລຕ໌ຄົງທີ່ພຽງຄ່າດຽວຈຶ່ງບໍ່ພຽງພໍ. ພາກເຠສັດວິທະຍາຄລີນິກຂອງສະຫຼາກຢາສັກ methylene blue ລາຍງານການສຳຜັດ Azure B ທີ່ເພີ່ມຂຶ້ນໃນຜູ້ເຂົ້າຮ່ວມທີ່ມີການເຮັດວຽກຂອງໄຕບົກພ່ອງ. ການສຳຜັດຕາມເວລາສະທ້ອນການເກີດ, ການກະຈາຍ ແລະການກຳຈັດ ບໍ່ແມ່ນພຽງອົງປະກອບໃນຂວດ. ເສັ້ນທາງການໃຫ້, ເວລາເກັບຕົວຢ່າງ ແລະສ່ວນຂອງຮ່າງກາຍທີ່ວັດແທກ ລ້ວນມີຄວາມສຳຄັນເມື່ອປຽບທຽບຜົນເຫຼົ່ານີ້.

ການທົດລອງໂດຍກົງສະແດງຫຍັງ

Azure B ມີກິດຈະກຳທາງເຠສັດວິທະຍາທີ່ວັດແທກໄດ້. ຄຳຖາມທີ່ມີປະໂຫຍດກວ່າແມ່ນມັນອອກ຤ິດຕໍ່ເປົ້າໝາຍໃດ ແລະພາຍໃຕ້ເງື່ອນໄຂໃດ.

ໃນ ການສຶກສາປີ 2012 ທີ່ໃຊ້ recombinant human monoamine oxidase, Azure B ຍັບຍັ້ງ MAO-A ດ້ວຍ IC50 ເທົ່າກັບ 11 nM, ທຽບກັບ 70 nM ສຳລັບ methylene blue ພາຍໃຕ້ເງື່ອນໄຂດຽວກັນ. IC50 ແມ່ນຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນທີ່ສຳພັນກັບການຍັບຍັ້ງ 50% ໃນ assay ນັ້ນ. Azure B ຍັງຍັບຍັ້ງ MAO-B, ແຕ່ຕ້ອງໃຊ້ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນທີ່ສູງກວ່າຢ່າງຫຼາຍ: 968 nM. ນັກວິຈັຍລາຍງານວ່າການຍັບຍັ້ງນີ້ສາມາດຍ້ອນກັບໄດ້.

ຜົນເຫຼົ່ານີ້ຮອງຮັບຄວາມເປັນໄປໄດ້ວ່າ Azure B ອາດມີສ່ວນຕໍ່ຜົນທາງຊີວະພາບ ແລະປະຕິສຳພັນຕ່າງໆ, ລວມທັງຄຳຖາມກ່ຽວກັບ methylene blue ແລະສານສື່ປະສາດ. ມັນບໍ່ໄດ້ໝາຍຄວາມວ່າ Azure B ດີກວ່າໃນຖານະຢາເຖິງຫົກເທົ່າ. ອັດຕາສ່ວນນັ້ນອະທິບາຍການຍັບຍັ້ງ enzyme ໜຶ່ງຊະນິດໃນການປຽບທຽບການທົດລອງໜຶ່ງຄັ້ງ.

ການທົດລອງ cholinesterase ໃນມະນຸດອີກການສຶກສາໜຶ່ງ ສະແດງຂໍ້ຈຳກັດຂອງການສະຫຼຸບແບບກວ້າງນັ້ນ. ຄ່າ IC50 ຂອງ Azure B ແມ່ນ 0.486 micromolar ສຳລັບ acetylcholinesterase ແລະ 1.99 micromolar ສຳລັບ butyrylcholinesterase. Methylene blue ມີ potency ສູງກວ່າໃນ assays ດຽວກັນນັ້ນ ໂດຍມີຄ່າຕາມລຳດັບເທົ່າກັບ 0.214 ແລະ 0.389 micromolar. ລຳດັບປ່ຽນກັບເມື່ອເປົ້າໝາຍທາງຊີວະພາບປ່ຽນໄປ. ບໍ່ມີຜົນໃດຜົນໜຶ່ງສາມາດຢືນຢັນໄດ້ໂດຍລຳພັງວ່າຊ່ວຍປັບປຸງການຮູ້ຄິດ ຫຼືປິ່ນປົວພະຍາດ Alzheimer's.

ຈາກກິດຈະກຳໃນການທົດລອງສູ່ການຕີຄວາມໝາຍທາງຄລີນິກ

ການທົດລອງໃນສັດທັງຕົວເພີ່ມຫຼັກຖານອີກລະດັບໜຶ່ງ ແຕ່ຍັງບໍ່ສາມາດຢືນຢັນປະສິດທິຜົນທາງຄລີນິກ. ໃນ ການສຶກສາໜູຂອງ Delport ແລະຄະນະ, Azure B ຫຼຸດ immobility ໃນການທົດສອບ forced-swim ແບບສ້ວຍແຫຼມ, ໂດຍມີ methylene blue ແລະ imipramine ເປັນບາງສ່ວນຂອງຕົວປຽບທຽບ. ບົດຄວາມເອີ້ນສິ່ງນີ້ວ່າຜົນຄ້າຍຢາຕ້ານຊຶມເສົ້າ. ນີ້ແມ່ນການທົດລອງດ້ານພຶດຕິກຳໃນໜູ ບໍ່ແມ່ນການທົດລອງທີ່ວັດແທກການຟື້ນຕົວຈາກພາວະຊຶມເສົ້າໃນຜູ້ປ່ວຍ.

ສຳລັບຂໍ້ອ້າງໃດໆກ່ຽວກັບ Azure B, ກ່ອນອື່ນໃຫ້ລະບຸວ່າວັດຖຸໃດຖືກນຳມາທົດສອບ. ຈາກນັ້ນໃຫ້ລະບຸສິ່ງມີຊີວິດ ຫຼື assay, ການສຳຜັດ ແລະຈຸດສິ້ນສຸດ. ສຸດທ້າຍ ໃຫ້ກວດວ່າຂໍ້ສະຫຼຸບນັ້ນກ່ຽວກັບອົງປະກອບ, ການເຜົາຜານ, ກິດຈະກຳຂອງ enzyme, ພຶດຕິກຳຂອງສັດ ຫຼືປະໂຫຍດທາງຄລີນິກ. ຂັ້ນຕອນເຫຼົ່ານີ້ຊ່ວຍປ້ອງກັນບໍ່ໃຫ້ຜົນດ້ານຄຸນນະພາບຂອງ batch ຖືກເຂົ້າໃຈຜິດເປັນຂໍ້ອ້າງການປິ່ນປົວ ແລະບໍ່ໃຫ້ກົນໄກຈາກການທົດລອງຖືກເຂົ້າໃຈຜິດເປັນຜົນລັບໃນຜູ້ປ່ວຍທີ່ຖືກຢືນຢັນແລ້ວ.