ಲೇಖನ
ಪ್ರಯೋಗಾಲಯದಲ್ಲಿ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಗುರುತಿಸುವಿಕೆ: ಅವಕೆಂಪು ವರ್ಣಪಟಗಳು ಮತ್ತು ಪೂರಕ ವಿಧಾನಗಳು

ಮೂರು ಪ್ರಯೋಗಾಲಯಗಳು ಒಂದೇ ನೀಲಿ ಪುಡಿಯನ್ನು ಸ್ವೀಕರಿಸುತ್ತವೆ ಎಂದು ಊಹಿಸಿ. ಮೊದಲನೆಯದು ಅವಕೆಂಪು ವರ್ಣಪಟವನ್ನು ದಾಖಲಿಸಿ, ಅದು ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಎಂದು ಘೋಷಿಸುತ್ತದೆ. ಎರಡನೆಯದು ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ನಡೆಸಿ, 0.4% Azure B ಇದೆ ಎಂದು ವರದಿ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಮೂರನೆಯದು ಸ್ಫಟಿಕಗಳ ಮೇಲೆ ಎಕ್ಸ್-ಕಿರಣ ವಿವರ್ತನೆ ನಡೆಸಿ, ಹೈಡ್ರೇಟ್ ರೂಪವನ್ನು ಹೆಸರಿಸುತ್ತದೆ. ಮೂರೂ ಸರಿಯಾಗಿವೆ; ಆದರೆ ಅವುಗಳಲ್ಲಿ ಯಾವುದೂ ಉಳಿದ ಎರಡು ಪ್ರಶ್ನೆಗಳಿಗೆ ಉತ್ತರಿಸಿಲ್ಲ. ಒಂದು ಫಲಿತಾಂಶವನ್ನೇ ಮೂರೂ ಪ್ರಶ್ನೆಗಳಿಗೆ ಉತ್ತರವೆಂದು ಓದಿದಾಗ ಗೊಂದಲ ಆರಂಭವಾಗುತ್ತದೆ.
ಈ ಲೇಖನ ಆ ಪ್ರಶ್ನೆಗಳನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸುತ್ತದೆ. ಅವಕೆಂಪು ಗುರುತಿಸುವಿಕೆ ಉಲ್ಲೇಖ ಮಾನದಂಡಕ್ಕೆ ಹೋಲಿಸಿ ಅಣುವಿನ ಗುರುತನ್ನು ಸ್ಥಾಪಿಸುತ್ತದೆ. ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ಸಂಯೋಜನೆಯನ್ನು ಸ್ಥಾಪಿಸುತ್ತದೆ. ವಿವರ್ತನೆ ಘನಾವಸ್ಥೆಯ ರೂಪವನ್ನು ಸ್ಥಾಪಿಸುತ್ತದೆ. ಗುರುತಿಸುವಿಕೆ ಪರೀಕ್ಷೆಯಲ್ಲಿ ಅಂಗೀಕಾರಾರ್ಹ ಹೊಂದಾಣಿಕೆ ದೊರಕುವುದು ಶುದ್ಧತೆಯ ಪ್ರಮಾಣಪತ್ರವಲ್ಲ.
ಅವಕೆಂಪು ಗುರುತಿಸುವಿಕೆ ಒಂದು ಪ್ರಶ್ನೆಗೆ ಉತ್ತಮವಾಗಿ ಉತ್ತರಿಸುತ್ತದೆ
ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂಗಾಗಿ ಔಷಧಸಂಹಿತೆಯ ಗುರುತಿಸುವಿಕೆ ಪರೀಕ್ಷೆಯು ವರ್ಣಪಟವನ್ನು ಮಾನದಂಡದೊಂದಿಗೆ ಹೋಲಿಸುವ ಪರೀಕ್ಷೆಯಾಗಿದೆಯೇ ಹೊರತು ಶಿಖರಗಳ ಪರಿಶೀಲನಾಪಟ್ಟಿಯಲ್ಲ. USP ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಮೋನೋಗ್ರಾಫ್ ಪೂರ್ವವೀಕ್ಷಣೆ ಪ್ರಕಾರ, ಗುರುತಿಸುವಿಕೆ A ಪರೀಕ್ಷೆಯು ATR ಪ್ರಕಾಶೀಯ ವ್ಯವಸ್ಥೆ ಅಥವಾ ಪೊಟ್ಯಾಸಿಯಂ ಬ್ರೋಮೈಡ್ ಗುಳಿಗೆಯನ್ನು ಬಳಸುವ ಅವಕೆಂಪು ವರ್ಣಪಟಮಾಪನವನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಮಾದರಿ ಮತ್ತು ಮಾನದಂಡವನ್ನು ಸಮಾನ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ ಸಿದ್ಧಪಡಿಸಿ ದಾಖಲಿಸಿದಾಗ, ಮಾದರಿಯ ವರ್ಣಪಟವು USP ಉಲ್ಲೇಖ ಮಾನದಂಡದ ವರ್ಣಪಟಕ್ಕೆ ಹೊಂದಿಕೆಯಾಗಬೇಕು. ರೋಗನಿರ್ಣಾಯಕವಲ್ಲದ ಗುರುತು ಸೂಚಕ ತರಂಗಸಂಖ್ಯೆಗಳ ಯಾವುದೇ ಸ್ಥಿರ ಪಟ್ಟಿಯು ತೀರ್ಮಾನವನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸುವುದಿಲ್ಲ. ವರ್ಣಪಟಗಳನ್ನು ಒಂದರ ಮೇಲೊಂದು ಇಟ್ಟು ಹೋಲಿಸುವುದೇ ಅದನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸುತ್ತದೆ.
ಈ ವಿಧಾನವನ್ನು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಿರುವುದು ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ FTIR ವರ್ಣಪಟಗಳ ವರ್ತನೆಯನ್ನು ಪ್ರತಿಬಿಂಬಿಸುತ್ತದೆ. ಅತ್ಯಂತ ಪ್ರಬಲ ಲಕ್ಷಣಗಳು ಬೆರಳಚ್ಚು ಪ್ರದೇಶದಲ್ಲಿವೆ. ಪ್ರಕಟಿತ ವೈಜ್ಞಾನಿಕ ಸಾಹಿತ್ಯವು ಮುಖ್ಯ ಸಂಯುಗ್ಮಿತ ವಲಯದ ಪಟ್ಟಿಯನ್ನು 1590 ರಿಂದ 1600 cm-1 ಸಮೀಪದಲ್ಲಿ ನಿರಂತರವಾಗಿ ಗುರುತಿಸುತ್ತದೆ; ಅಲ್ಲಿ ಅರೋಮ್ಯಾಟಿಕ್ ಕಾರ್ಬನ್-ಕಾರ್ಬನ್ ಮತ್ತು ಕಾರ್ಬನ್-ನೈಟ್ರೋಜನ್ ಹಿಗ್ಗುವ ಕಂಪನಗಳು ಪರಸ್ಪರ ಸಂಯೋಜಿತವಾಗಿರುತ್ತವೆ. 1490 ಮತ್ತು 1390 cm-1 ಸಮೀಪದ ಇತರ ಪಟ್ಟಿಗಳು ವಲಯ, ಕಾರ್ಬನ್-ನೈಟ್ರೋಜನ್ ಮತ್ತು ಕಾರ್ಬನ್-ಹೈಡ್ರೋಜನ್ ವಿರೂಪಣೆಯ ಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತವೆ. 1355 ಮತ್ತು 1330 cm-1 ಸಮೀಪದ ಪಟ್ಟಿಗಳು ಡೈಮೆಥಿಲ್ಅಮಿನೊ ಕಾರ್ಬನ್-ನೈಟ್ರೋಜನ್ ಬಂಧಗಳು ಮತ್ತು ಮೆಥಿಲ್ ವಿರೂಪಣೆಗಳಿಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿವೆ. 1225 ರಿಂದ 1250 cm-1 ಸಮೀಪದ ಲಕ್ಷಣಗಳು ಹೆಟೆರೊಸೈಕ್ಲಿಕ್ ಚೌಕಟ್ಟಿಗೆ ಸೇರಿವೆ; 1170 ರಿಂದ 1130 ಮತ್ತು 1066 cm-1 ಸಮೀಪದ ಪಟ್ಟಿಗಳು ಕಾರ್ಬನ್-ಸಲ್ಫರ್ ಲಕ್ಷಣವನ್ನು ಹೊಂದಿದ್ದು, ಅರೋಮ್ಯಾಟಿಕ್ C-H ಬಾಗುವ ಕಂಪನವು 880 cm-1 ಸಮೀಪದಲ್ಲಿರುತ್ತದೆ. ಹಿಗ್ಗುವ ಕಂಪನಗಳು ಹೆಚ್ಚಿನ ತರಂಗಸಂಖ್ಯೆಗಳಲ್ಲಿ ಕಾಣಿಸಿಕೊಳ್ಳುತ್ತವೆ: ಅರೋಮ್ಯಾಟಿಕ್ C-H ಸುಮಾರು 3040 cm-1 ಬಳಿ ಮತ್ತು N-ಮೆಥಿಲ್ C-H ಸರಿಸುಮಾರು 2900 ಮತ್ತು 3000 cm-1 ನಡುವೆ. ಫೀನೋಥಿಯಾಜಿನಿಯಮ್ ಮೂಲಚೌಕಟ್ಟು ಪರಸ್ಪರ ಸಂಯೋಜಿತ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯಾಗಿ ಕಂಪಿಸುವುದರಿಂದ, ಪ್ರಕಟಿತ ಕಂಪನ-ಪಟ್ಟಿ ಗುರುತಿಸುವಿಕೆಗಳ ವಿವರಗಳಲ್ಲಿ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳಿರುತ್ತವೆ. ಆದ್ದರಿಂದ ಯಾವುದೇ ಒಂದು ಗುರುತಿಸುವಿಕೆ ಪಟ್ಟಿಯನ್ನು ವರದಿಯಾದ ವಿವರಣೆಯೆಂದು ಪರಿಗಣಿಸಿ, ಏಕೈಕ ನಿರ್ಣಾಯಕ ವಿವರಣೆಯೆಂದಲ್ಲ.
ಮಾದರಿ ಸಿದ್ಧತೆಯ ಎರಡು ಪರಿಣಾಮಗಳಿಗೆ ಗಮನ ಕೊಡಬೇಕು, ಏಕೆಂದರೆ ಅವು ಬಣ್ಣದ್ರವ್ಯವನ್ನು ಬದಲಿಸದೆ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ IR ವರ್ಣಪಟಗಳನ್ನು ಬದಲಿಸುತ್ತವೆ. ಮೊದಲನೆಯದಾಗಿ, ಜಲಯುಕ್ತ ವಸ್ತುವಿನಲ್ಲಿ 3300 ರಿಂದ 3500 cm-1 ಸುತ್ತಲೂ ವಿಶಾಲ O-H ಪಟ್ಟಿಯೂ, 1630 ರಿಂದ 1640 cm-1 ಸಮೀಪದಲ್ಲಿ ನೀರಿನ ಬಾಗುವ ಕಂಪನವೂ ಕಾಣಿಸುತ್ತವೆ; ವಿಭಿನ್ನ ಹೈಡ್ರೇಟ್ ರೂಪಗಳು ಬೆರಳಚ್ಚು ಪಟ್ಟಿಗಳನ್ನು ಅಳೆಯಬಹುದಾದಷ್ಟು ಸ್ಥಳಾಂತರಿಸುತ್ತವೆ. ಎರಡನೆಯದಾಗಿ, KBr ಗುಳಿಗೆಯ ಮಾಧ್ಯಮವು ತೇವಾಂಶವನ್ನು ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ: ಹೀರಿಕೊಂಡ ತೇವಾಂಶವು ನಿಖರವಾಗಿ ಅದೇ ನೀರಿನ ಪ್ರದೇಶಗಳಲ್ಲಿ ಪಟ್ಟಿಗಳನ್ನು ಉಂಟುಮಾಡುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಮಾದರಿಯ ಹೈಡ್ರೇಟ್ ನೀರಿನಂತೆ ಕಾಣಿಸಿಕೊಳ್ಳಬಹುದು. ATR ಮಾದರಿ ಪರೀಕ್ಷೆಯು KBr ಮಾಧ್ಯಮವನ್ನು ತಪ್ಪಿಸುತ್ತದೆ; ಆದರೆ ATR ತೀವ್ರತೆಗಳು ತರಂಗಸಂಖ್ಯೆಗೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ ಬದಲಾಗುವ ಒಳನುಗ್ಗುವ ಆಳದೊಂದಿಗೆ ಬದಲಾಗುತ್ತವೆ. ಆದ್ದರಿಂದ ಒಂದೇ ಪುಡಿಯ ATR ವರ್ಣಪಟ ಮತ್ತು ಪ್ರಸರಣ ವರ್ಣಪಟವನ್ನು ನೇರವಾಗಿ ಒಂದರ ಮೇಲೊಂದು ಹೊಂದಿಸಿ ಹೋಲಿಸಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ. ಔಷಧಸಂಹಿತೆಯ ಅವಶ್ಯಕತೆಯಿಂದ ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ನಿಯಮ ಸ್ಪಷ್ಟವಾಗುತ್ತದೆ: ಒಂದೇ ತಂತ್ರದಿಂದ ದಾಖಲಿಸಿದ ಮಾದರಿ ಮತ್ತು ಉಲ್ಲೇಖವನ್ನು ಹೋಲಿಸಿ, ಯಾವ ತಂತ್ರವನ್ನು ಬಳಸಲಾಗಿದೆ ಎಂಬುದನ್ನು ದಾಖಲಿಸಿ. ಈ ವರ್ಣಪಟಗಳ ಹಿಂದಿರುವ ಧನಾಯನ, ಲವಣ ಮತ್ತು ಹೈಡ್ರೇಟ್ಗಳ ಮೂಲ ರಸಾಯನಶಾಸ್ತ್ರಕ್ಕಾಗಿ, ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ರಚನೆ ಮತ್ತು ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳ ಉಲ್ಲೇಖ ಲೇಖನ ನೋಡಿ.
ವಿಶ್ಲೇಷಣಾ ವಿಧಾನ ಆಯ್ಕೆ ಪಟ್ಟಿ
ಈ ಪಟ್ಟಿಯು ವಿಧಾನ ಆಯ್ಕೆಗೆ ನೆರವಾಗುತ್ತದೆ. ಒಂದು ಸಾಲನ್ನು ಅಡ್ಡಲಾಗಿ ಓದಿ, ಆ ವಿಧಾನ ಯಾವ ಪ್ರಶ್ನೆಗೆ ಉತ್ತರಿಸುತ್ತದೆ, ಅಂಗೀಕಾರಾರ್ಹ ಫಲಿತಾಂಶ ಏನನ್ನು ಸ್ಥಾಪಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಯಾವುದು ಇನ್ನೂ ಸಾಬೀತಾಗಿಲ್ಲ ಎಂಬುದನ್ನು ತಿಳಿಯಿರಿ.
| ವಿಧಾನ | ಅದು ಉತ್ತರಿಸುವ ಪ್ರಶ್ನೆ | ಅಂಗೀಕಾರಾರ್ಹ ಫಲಿತಾಂಶವು ಸ್ಥಾಪಿಸುವುದು | ಅದು ಸ್ಥಾಪಿಸಲಾರದ ಅಂಶಗಳು |
|---|---|---|---|
| ಉಲ್ಲೇಖ ಮಾನದಂಡದೊಂದಿಗೆ FTIR ಹೋಲಿಕೆ | ಈ ವಸ್ತು ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಆಗಿದೆಯೇ? | ಉಲ್ಲೇಖ ವರ್ಣಪಟಕ್ಕೆ ಹೊಂದಿಕೆಯಾಗುವ ಅಣುವಿನ ಗುರುತು | ಶುದ್ಧತೆ, ಅಶುದ್ಧತೆಗಳ ವಿವರ, ಹೈಡ್ರೇಟ್ ರೂಪವನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕವಾಗಿ ನಿರ್ಧರಿಸುವುದು ಅಥವಾ ಸಾಂದ್ರತೆ |
| HPLC-UV ಪ್ರಮಾಣ ನಿರ್ಧಾರ ಮತ್ತು ಸಾವಯವ ಅಶುದ್ಧತೆಗಳು (ಫೀನಿಲ್ ಕಾಲಮ್, 246 nm) | ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಎಷ್ಟು ಮತ್ತು Azure B ಎಷ್ಟು ಇದೆ? | ಧಾರಣ ಹೊಂದಾಣಿಕೆಯಿಂದ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿಕ್ ಗುರುತು; ಮುಖ್ಯ ಘಟಕದ ಪ್ರಮಾಣ ಮತ್ತು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಅಶುದ್ಧತೆಗಳ ಪ್ರಮಾಣಗಳು | ಘನಾವಸ್ಥೆಯ ರೂಪ; ಮಾನದಂಡಗಳಿಲ್ಲದೆ ಅನಿರೀಕ್ಷಿತ ಶಿಖರಗಳ ಗುರುತು |
| ಅರ್ಹತೆ ಪರಿಶೀಲಿಸಲಾದ ಮಾನದಂಡಗಳೊಂದಿಗೆ LC-MS/MS | ಯಾವ ಡೀಮೆಥಿಲೀಕರಣಗೊಂಡ ಬಣ್ಣದ್ರವ್ಯಗಳಿವೆ? | MB, ಅಜೂರ್ A, Azure B, ಅಜೂರ್ C, ಥಯೊನಿನ್ ಸರಣಿಯ ಪ್ರತ್ಯೇಕಣೆ ಮತ್ತು ಗುರುತಿಸುವಿಕೆ | ಔಷಧಸಂಹಿತೆಯ ಮಾನ್ಯತೆ; ಇದು ಸಂಶೋಧನಾ ಮಟ್ಟದ ವಿಸ್ತರಣೆಯೇ ಹೊರತು ನಿಯಮಿತ ಮೋನೋಗ್ರಾಫ್ ಪರೀಕ್ಷೆಯಲ್ಲ |
| ಪುಡಿ XRD | ಯಾವ ಸ್ಫಟಿಕೀಯ ಹೈಡ್ರೇಟ್ ಇದೆ? | ಘನಾವಸ್ಥೆಯ ಪ್ರಾವಸ್ಥೆ, ಪತ್ತೆ ಮಿತಿಗಿಂತ ಮೇಲಿರುವ ಪ್ರಾವಸ್ಥೆ ಮಿಶ್ರಣಗಳು ಮತ್ತು ಸ್ಫಟಿಕೀಯತೆ | ಅಸ್ಫಟಿಕೀಯ ಅಶುದ್ಧತೆಗಳ ಅಣು ಗುರುತು; ದ್ರಾವಣದ ಸಾಂದ್ರತೆ |
| UV-Vis ಹೀರಿಕೆ | ದ್ರಾವಣವು ನಿರೀಕ್ಷೆಯಂತೆ ಬೆಳಕನ್ನು ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆಯೇ? | ವಿಶಿಷ್ಟ ಹೀರಿಕೆ ಗರಿಷ್ಠಗಳು ಮತ್ತು ಸಾಂದ್ರತೆ-ಅವಲಂಬಿತ ವರ್ತನೆ | ಸ್ವತಂತ್ರವಾಗಿ ಗುರುತು ಅಥವಾ ಶುದ್ಧತೆ |
| ಕ್ಲೋರೈಡ್ ಗುರುತಿಸುವಿಕೆ ಮತ್ತು ಒಣಗಿಸುವಾಗ ತೂಕ ನಷ್ಟ (ಪೂರಕ) | ಪ್ರತಿಅಯಾನ್ ಇದೆಯೇ; ಎಷ್ಟು ದ್ರವ್ಯರಾಶಿ ಬಾಷ್ಪಶೀಲವಾಗಿದೆ? | ಲವಣದ ರೂಪ ಮತ್ತು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ ಒಣಗಿಸುವಾಗ ದ್ರವ್ಯರಾಶಿ ನಷ್ಟ | ಯಾವ ಅಣು ಬಣ್ಣಕ್ಕೆ ಕಾರಣವಾಗಿದೆ |
ಅವಕೆಂಪು ಹೊಂದಾಣಿಕೆ ಶುದ್ಧತೆಯ ಪ್ರಮಾಣಪತ್ರವಲ್ಲ ಏಕೆ
ಗುರುತು ಹೊಂದಾಣಿಕೆಯು ಅದು ತಪ್ಪು ಬಣ್ಣದ್ರವ್ಯವಲ್ಲ ಎಂಬುದನ್ನು ಖಚಿತಪಡಿಸುತ್ತದೆ. ಆದರೆ ಅದು ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿರುವ ಎಲ್ಲ ಘಟಕಗಳ ಪಟ್ಟಿಯನ್ನು ನೀಡುವುದಿಲ್ಲ. ಮೂರು ಮಿತಿಗಳು ಮುಖ್ಯವಾಗಿವೆ.
ಮೊದಲನೆಯದಾಗಿ, ಹತ್ತಿರದ ಸಂಬಂಧಿತ ಸಂಯುಕ್ತಗಳು ಅವಕೆಂಪಿನಲ್ಲಿ ಒಂದೇ ರೀತಿಯಾಗಿ ಕಾಣುತ್ತವೆ. Azure B ಮತ್ತು ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ನಡುವಿನ ವ್ಯತ್ಯಾಸ ಕೇವಲ ಒಂದು ಮೆಥಿಲ್ ಗುಂಪು; ಆದ್ದರಿಂದ ಅದರ ವರ್ಣಪಟವು ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ವರ್ಣಪಟವನ್ನು ಬಹಳವಾಗಿ ಹೋಲುತ್ತದೆ. ಕೆಲವು ಶೇಕಡಾ Azure B ಹೊಂದಿರುವ ಮಿಶ್ರಣವೂ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಉಲ್ಲೇಖ ವರ್ಣಪಟದೊಂದಿಗೆ ಉತ್ತಮವಾಗಿ ಹೊಂದಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ. ಆ ಅಶುದ್ಧತೆಯನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚುವುದು ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿಯ ಕೆಲಸ; ಇದನ್ನು ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಅಶುದ್ಧತೆಗಳು ಮತ್ತು ಪರೀಕ್ಷಾ ವಿಧಾನಗಳ ಮಾರ್ಗದರ್ಶಿ ವಿವರಿಸುತ್ತದೆ.
ಎರಡನೆಯದಾಗಿ, ಅವಕೆಂಪು ವರ್ಣಪಟಮಾಪನವು ಮಾದರಿಯನ್ನು ಒಟ್ಟಾರೆಯಾಗಿ ಪರಿಶೀಲಿಸುವ ತಂತ್ರವಾಗಿದ್ದು, ಅಲ್ಪ ಪ್ರಮಾಣದ ಘಟಕಗಳಿಗೆ ಅದರ ಸಂವೇದನಾಶೀಲತೆ ಸೀಮಿತವಾಗಿದೆ. ಸಂಬಂಧಿತ ಬಣ್ಣದ್ರವ್ಯಗಳು, ಉಳಿಕೆ ದ್ರಾವಕಗಳು ಅಥವಾ ಅಜೈವಿಕ ಉಳಿಕೆಗಳ ಸಣ್ಣ ಪ್ರಮಾಣಗಳು ಪ್ರಮುಖ ಪಟ್ಟಿಗಳ ಅಡಿಯಲ್ಲಿ ಮರೆಮಾಡಲ್ಪಡುತ್ತವೆ. ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಶಿಖರಗಳಿಲ್ಲದಿರುವುದು ಅಶುದ್ಧತೆಗಳಿಲ್ಲದಿರುವುದಕ್ಕೆ ದುರ್ಬಲ ಸಾಕ್ಷ್ಯವಾಗಿದೆ.
ಮೂರನೆಯದಾಗಿ, ಉಲ್ಲೇಖ ಮಾನದಂಡವು ಇಡೀ ಹೋಲಿಕೆಯನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸುತ್ತದೆ. ಕ್ಷಯಗೊಂಡ, ಜಲಯುಕ್ತತೆಯಿಂದ ವರ್ಣಪಟ ಸ್ಥಳಾಂತರಗೊಂಡ ಅಥವಾ ತಪ್ಪಾಗಿ ನಿರ್ವಹಿಸಲಾದ ಮಾನದಂಡವು ನಿರ್ಣಯದ ಆಧಾರವನ್ನೇ ಬದಲಿಸುತ್ತದೆ. ATR ಮಾದರಿ ವರ್ಣಪಟವನ್ನು KBr ಉಲ್ಲೇಖದೊಂದಿಗೆ ಹೋಲಿಸುವಂತಹ ಹೊಂದಿಕೆಯಾಗದ ತಂತ್ರಗಳ ಜೋಡಿಯೂ ಅದೇ ಪರಿಣಾಮ ಉಂಟುಮಾಡುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿಯೊಂದು ತೀರ್ಮಾನದ ಜೊತೆಗೆ ಮಾನದಂಡದ ಲಾಟ್, ತಂತ್ರ ಮತ್ತು ಸಿದ್ಧತೆಯನ್ನು ದಾಖಲಿಸಿ.
ಮಿಶ್ರಣಗಳಿಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದಂತೆ ಕೊನೆಯ ಎಚ್ಚರಿಕೆಯೂ ಇದೆ. ಹೆಚ್ಚಿನ ಭಾಗದಲ್ಲಿ ಹೊಂದಿಕೆಯಾಗಿದ್ದರೂ ಶಿಖರಗಳ ಪಾರ್ಶ್ವ ಉಬ್ಬುಗಳು ಅಥವಾ ತೀವ್ರತೆಯ ವೈಪರೀತ್ಯಗಳಿರುವ ವರ್ಣಪಟವು ಅಡಿಟಿಪ್ಪಣಿಗಳೊಂದಿಗೆ ಅಂಗೀಕರಿಸಬಹುದಾದ ಫಲಿತಾಂಶವಲ್ಲ. ಅದು ಮಾದರಿಯನ್ನು ಗುರುತಿಸುವ ಮೊದಲು ಅದರ ಘಟಕಗಳನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಬೇಕೆಂಬ ಸೂಚನೆಯಾಗಿದೆ.
ಪ್ರಾಯೋಗಿಕವಾಗಿ ಪೂರಕ ವಿಧಾನಗಳು
ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ HPLC, ಅವಕೆಂಪು ನೀಡಲಾರದ ಸಂಯೋಜನೆಯ ಉತ್ತರವನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ. ಪ್ರಸ್ತುತ ಔಷಧಸಂಹಿತೆಯ ವಿಧಾನವು ಟ್ರೈಫ್ಲೋರೊಅಸೆಟಿಕ್ ಆಮ್ಲವನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ನೀರು-ಅಸೆಟೊನೈಟ್ರೈಲ್ ಗ್ರೇಡಿಯಂಟ್ನೊಂದಿಗೆ ಫೀನಿಲ್-ಮಾದರಿಯ ಕಾಲಮ್ ಬಳಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಗೋಚರ ಪಟ್ಟಿಯಲ್ಲಿ ಅಲ್ಲದೆ 246 nm ನಲ್ಲಿ ಪತ್ತೆಹಚ್ಚುತ್ತದೆ. ಉಲ್ಲೇಖ ಮಾನದಂಡದೊಂದಿಗೆ ಧಾರಣ ಸಮಯದ ಹೊಂದಾಣಿಕೆಯಿಂದ ಗುರುತು ದೊರೆಯುತ್ತದೆ; ಅದೇ ಹೋಲಿಕೆ ಪ್ರಮಾಣ ನಿರ್ಧಾರಕ್ಕೂ ಆಧಾರವಾಗುತ್ತದೆ. ಸಾವಯವ ಅಶುದ್ಧತೆ ಪರೀಕ್ಷೆಯು Azure B ಯನ್ನು ಅದರದೇ ಉಲ್ಲೇಖ ವಸ್ತುವಿನ ಮೂಲಕ ಗುರುತಿಸುತ್ತದೆ; ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂಗೆ 1.0 ಆಗಿರುವ ಸಾಪೇಕ್ಷ ಧಾರಣಕ್ಕೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ Azure B ಯದು ಸುಮಾರು 0.8 ಆಗಿರುತ್ತದೆ. ಈ ಎರಡು ಶಿಖರಗಳ ನಡುವೆ ಹೆಚ್ಚಿನ ವಿಭೇದನ ಸಾಮರ್ಥ್ಯ ಅಗತ್ಯವಾಗಿದೆ. ತರಂಗಾಂತರದ ಆಯ್ಕೆಯನ್ನು ಗಮನಿಸಿ: ಡೀಮೆಥಿಲೀಕರಣ ಸರಣಿಯು ಕ್ರಮೇಣ ಕೆಂಪಿನ ಕಡೆಗೆ ಇನ್ನಷ್ಟು ದೂರದಲ್ಲಿ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ; ಸುಮಾರು 600 nm ಬಳಿಯ ಥಯೊನಿನ್ನಿಂದ ಅಜೂರ್ C, ಅಜೂರ್ A ಮತ್ತು Azure B ಮೂಲಕ ಸುಮಾರು 670 nm ಬಳಿಯ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂವರೆಗೆ ಸಾಗುತ್ತದೆ. ಆದ್ದರಿಂದ ಸುಮಾರು 660 nm ಗೆ ಸ್ಥಿರಗೊಳಿಸಲಾದ ಡಿಟೆಕ್ಟರ್ ಈ ಸರಣಿಯ ವಿವಿಧ ಘಟಕಗಳಿಗೆ ಅಸಮಾನವಾಗಿ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯಿಸಿ, ಕೆಲವು ಸಮವರ್ಗೀಯ ಸಂಯುಕ್ತಗಳ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಕಡಿಮೆಯಾಗಿ ತೋರಿಸುತ್ತದೆ. ಅಗತ್ಯವಿದ್ದಾಗ ಇಡೀ ಸರಣಿಯ ಸಂಪೂರ್ಣ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗೆ, ಪ್ರತಿ ವಿಶ್ಲೇಷ್ಯಕ್ಕೂ ಅರ್ಹತೆ ಪರಿಶೀಲಿಸಲಾದ ಮಾನದಂಡಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ C18 LC-MS/MS ವಿಧಾನವನ್ನು ಬಳಸಬೇಕು.
ಪುಡಿ ವಿವರ್ತನೆಯು ಮೇಲಿನ ಎರಡೂ ವಿಧಾನಗಳು ನಾಶಪಡಿಸುವ ಅಥವಾ ಕಡೆಗಣಿಸುವ ಘನಾವಸ್ಥೆಯ ಪ್ರಶ್ನೆಗೆ ಉತ್ತರಿಸುತ್ತದೆ: ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿಗಾಗಿ ಪುಡಿಯನ್ನು ಕರಗಿಸುವುದು ಸ್ಫಟಿಕದ ಮಾಹಿತಿಯನ್ನು ಅಳಿಸುತ್ತದೆ; ಅಣು ಕಂಪನಗಳು ದೂರವ್ಯಾಪಿ ಜೋಡಣೆಗಿಂತ ಬಂಧಗಳ ಬಗ್ಗೆ ಮಾಹಿತಿ ನೀಡುತ್ತವೆ. ವಿವರ್ತನಾ ಮಾದರಿಗಳು ಹೈಡ್ರೇಟ್ ಪ್ರಾವಸ್ಥೆಗಳು ಮತ್ತು ಸ್ಫಟಿಕೀಯತೆಯನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕವಾಗಿ ಗುರುತಿಸುತ್ತವೆ; ಹೆಚ್ಚಿನ ವಸ್ತುಗಳಿಗಿಂತ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂಗೆ ಈ ಪರಿಶೀಲನೆ ಹೆಚ್ಚು ಅಗತ್ಯವಾಗಿದೆ. ರೇಗರ್ ಮತ್ತು ಸಹೋದ್ಯೋಗಿಗಳ ಘನಾವಸ್ಥೆ ಸಂಶೋಧನೆಯು ಒಂದು ಪೆಂಟಾಹೈಡ್ರೇಟ್, ಎರಡು ಡೈಹೈಡ್ರೇಟ್ಗಳು, ಒಂದು ಮೊನೊಹೈಡ್ರೇಟ್ ಮತ್ತು ಒಂದು ಮಧ್ಯಂತರ ಹೈಡ್ರೇಟ್ ಸೇರಿದಂತೆ ಐದು ವಿಭಿನ್ನ ಹೈಡ್ರೇಟ್ ರಚನೆಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಿತು. ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಿದ ರೂಪಗಳಲ್ಲಿ ನಿಜವಾದ ಟ್ರೈಹೈಡ್ರೇಟ್ ಕಂಡುಬರಲಿಲ್ಲ. ಇಲ್ಲಿ ಪ್ರಯೋಗಾಲಯದ ನಿರ್ವಹಣೆ ಮುಖ್ಯವಾಗುತ್ತದೆ: ಆರ್ದ್ರತೆ ಮತ್ತು ತಾಪಮಾನವು ಹೈಡ್ರೇಟ್ ಸ್ಥಿರತೆಯನ್ನು ಬದಲಿಸುತ್ತವೆ; ತೀವ್ರವಾಗಿ ಪುಡಿಮಾಡುವುದು ಪ್ರಾವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಬದಲಿಸಬಹುದು ಅಥವಾ ಸ್ಫಟಿಕೀಯತೆಯನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಬಹುದು. ಆದ್ದರಿಂದ ಸಾಪೇಕ್ಷ ಆರ್ದ್ರತೆ ಮತ್ತು ತಾಪಮಾನವನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸಿ ದಾಖಲಿಸಿ, ಪುಡಿಮಾಡುವಿಕೆಯನ್ನು ಕನಿಷ್ಠ ಮಟ್ಟದಲ್ಲಿಡಿ. ಹೈಡ್ರೇಟ್ ಲೇಬಲಿಂಗ್ ಮತ್ತು ತೂಗಿದ ದ್ರವ್ಯರಾಶಿಯ ಮೇಲೆ ಅದರ ಪರಿಣಾಮವನ್ನು ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಹೈಡ್ರೇಟ್ ರೂಪಗಳು ಮತ್ತು ಲೇಬಲಿಂಗ್ ಲೇಖನದಲ್ಲಿ ಇನ್ನಷ್ಟು ಚರ್ಚಿಸಲಾಗಿದೆ.
UV-Vis ಹೀರಿಕೆ ಪೂರಕ ಪಾತ್ರ ವಹಿಸುತ್ತದೆ. ಪರಿಚಿತ ಗರಿಷ್ಠಗಳು ನಿರೀಕ್ಷಿತ ದ್ರಾವಣದ ವರ್ತನೆಯನ್ನು ದೃಢಪಡಿಸಿ, ಸಾಂದ್ರತೆ ನಿರ್ಧಾರಕ್ಕೆ ನೆರವಾಗುತ್ತವೆ. ಆದರೆ ನಿರೀಕ್ಷಿತ ತರಂಗಾಂತರದಲ್ಲಿ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವ ನೀಲಿ ದ್ರಾವಣವು ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂಗೆ ಹೊಂದಿಕೆಯಾಗುತ್ತದೆ ಎಂಬುದಷ್ಟೇ ಹೇಳಬಹುದು; ಅದು ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಎಂದು ಸಾಬೀತುಪಡಿಸುವುದಿಲ್ಲ, ಏಕೆಂದರೆ ಸಂಬಂಧಿತ ಬಣ್ಣದ್ರವ್ಯಗಳೂ ಸಮೀಪದ ತರಂಗಾಂತರಗಳಲ್ಲಿ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುತ್ತವೆ.
ಖರೀದಿಸುವ ಮೊದಲು ಏನು ಕೇಳಬೇಕು
ಈ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳನ್ನು ಖರೀದಿ ಪ್ರಶ್ನೆಗಳಾಗಿ ರೂಪಿಸಿ. ಯಾವ ಲಾಟ್ ಅನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಲಾಗಿದೆ, ಯಾವ ತಂತ್ರವು ಗುರುತನ್ನು ಸ್ಥಾಪಿಸಿದೆ, HPLC ಅಶುದ್ಧತೆ ಪರೀಕ್ಷೆಯು Azure B ಉಲ್ಲೇಖ ವಸ್ತುವನ್ನು ಬಳಸಿದೆಯೇ ಮತ್ತು ಹೈಡ್ರೇಟ್ ರೂಪವನ್ನು ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಿ ನಿರ್ಧರಿಸಲಾಗಿದೆಯೇ ಅಥವಾ ಊಹಿಸಲಾಗಿದೆಯೇ ಎಂದು ಕೇಳಿ. ಎಲ್ಲಕ್ಕಿಂತ ಮುಖ್ಯವಾಗಿ, ಪ್ರಮಾಣಪತ್ರವು ಪೂರ್ಣ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆಯನ್ನು ಒಳಗೊಳ್ಳುತ್ತದೆಯೇ ಅಥವಾ ಆಯ್ದ ಪರೀಕ್ಷೆಗಳನ್ನು ಮಾತ್ರ ಒಳಗೊಳ್ಳುತ್ತದೆಯೇ ಎಂದು ಕೇಳಿ. ಔಷಧಸಂಹಿತೆಯ ಅನುಸರಣೆಯನ್ನು ಹೇಳಿಕೊಳ್ಳುವ ಅನೇಕ ಮಾರಾಟಗಾರರು ಭಾರ ಲೋಹಗಳನ್ನು ಮಾತ್ರ ಪರೀಕ್ಷಿಸುತ್ತಾರೆ; ಇದರಿಂದ ಗುರುತು, ಪ್ರಮಾಣ ನಿರ್ಧಾರ, ಸಾವಯವ ಅಶುದ್ಧತೆ, ದ್ರಾವಕ ಮತ್ತು ಸೂಕ್ಷ್ಮಜೀವಿಗಳ ಪ್ರಶ್ನೆಗಳು ಉತ್ತರವಿಲ್ಲದೆ ಉಳಿಯುತ್ತವೆ.
ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ತಯಾರಿಸುವ ಔಷಧೀಯ ಉತ್ಪಾದಕರ ಸಹಭಾಗಿತ್ವದಲ್ಲಿ Blupreme ಪೂರ್ಣ USP ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆಯನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸುತ್ತದೆ. ಇದು ಗುರುತು, ಶುದ್ಧತೆ, ಸಾವಯವ ಅಶುದ್ಧತೆಗಳು, ಉಳಿಕೆ ದ್ರಾವಕಗಳು, ಧಾತು ಅಶುದ್ಧತೆಗಳು, ದಹನದ ನಂತರದ ಉಳಿಕೆ, ಸೂಕ್ಷ್ಮಜೀವಿ ಮಿತಿಗಳು ಮತ್ತು ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾ ಎಂಡೋಟಾಕ್ಸಿನ್ಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಳ್ಳುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿ ಬ್ಯಾಚ್ನ ಸಾರ್ವಜನಿಕ ವಿಶ್ಲೇಷಣಾ ಪ್ರಮಾಣಪತ್ರವನ್ನು Blupreme ಗುಣಮಟ್ಟ ಪರೀಕ್ಷೆ ಪುಟದಲ್ಲಿ ಪ್ರಕಟಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಆದ್ದರಿಂದ ಪ್ರಮಾಣ ನಿರ್ಧಾರದ ಆಧಾರ ಮತ್ತು ಅಶುದ್ಧತೆ ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ಊಹಿಸುವ ಬದಲು ನೇರವಾಗಿ ಓದಬಹುದು. 100 ಶೇಕಡಾಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚಿನ ಪ್ರಮಾಣ ನಿರ್ಧಾರ ಫಲಿತಾಂಶಗಳ ಮಾರ್ಗದರ್ಶಿ ವಿವರಿಸುವಂತೆ, 100% ಸಮೀಪದ ಫಲಿತಾಂಶಗಳಿಗೂ ಅವುಗಳ ಲೆಕ್ಕಾಚಾರದ ಆಧಾರವನ್ನು ತಿಳಿಸಬೇಕು. ಗುರುತು ಹೊಂದಾಣಿಕೆಯು ಪರಿಶೀಲನೆಯನ್ನು ಆರಂಭಿಸುತ್ತದೆ. ಸಂಪೂರ್ಣ ದಾಖಲೆಯು ಅದನ್ನು ಪೂರ್ಣಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ.