Pewarnaan biru metilena: cara mikroskopi lan atlas gambar nyata

Pewarnaan biru metilena ndadekake ciri-ciri sel sing maune samar luwih gampang dibedakake ing mikroskopi medan padhang. Iki bisa mbantu siswa nemokake inti sel pipi utawa mriksa kontur lan tata letak mikroorganisme. Nanging, obyek biru iku asil pengamatan. Menehi jeneng organisme, ngukur ukurane, lan nemtokake apa iku nuduhake penyakit minangka pakaryan sing kapisah.

Gambar sampul nggambarake prinsip kontras. Atlas ing ngisor iki ngemot foto nyata saka spesimen sing didokumentasikake kanthi mandiri, bebarengan karo katrangan sumber asline.

Apa sing dituduhake biru metilena?

Biru metilena iku pewarna basa: ion sing menehi warna nduweni muatan positif. Kaya sing diterangake OpenStax ing bahasan babagan pewarnaan spesimen, pewarna basa sesambungan karo materi sel sing nduweni muatan negatif lan bisa ndadekake sel katon luwih cetha tinimbang latar mburi sing luwih padhang. Ing preparat sing cocog, biru metilena nyorot bagean sing sugih asam nukleat lan struktur liyane sing bisa ngiket pewarna.

Ing pewarnaan prasaja, siji pewarna menehi kontras. Mula, sawetara organisme bisa katon biru tanpa ateges organisme kasebut padha. Pitakon sing migunani ing wiwitan yaiku pitakon deskriptif: apa obyek kasebut bunder utawa dawa, dhewekan utawa nglumpuk, diwarnani rata utawa nduweni bagean njero sing beda? Delengen bedane pewarnaan prasaja lan pewarnaan Gram sadurunge nafsirake warna minangka asil klasifikasi.

Kontras lan resolusi iku beda. Kontras mbantu mbedakake obyek saka sakiwa-tengene; resolusi mbedakake rincian sing cedhak siji lan sijine. Gambar sing luwih peteng ora njamin luwih akeh struktur bisa dibedakake. Uga, ora saben granula peteng pantes diwenehi label organel.

Preparat asli, preparat teles sing diwarnani, lan olesan

Preparat teles tanpa pewarna, utawa preparat asli, menehi tampilan tanpa tambahan pewarna, sanajan pamindhahan saka lingkungan asline tetep ngowahi spesimen. Preparat teles sing diwarnani ditambahi reagen nalika materi isih ana ing cairan ing sangisore kaca panutup. Olesan sing difiksasi nyebarake materi ing kaca obyek lan nggunakake cara fiksasi sing ditemtokake sadurunge pangolahan sabanjure. Ringkesan nyiyapake preparat saka OpenStax mbedakake preparat teles saka fiksasi lan nerangake apa sebabe organisme sing wis difiksasi ora maneh nuduhake gerakan utawa metabolisme normal.

Preparat iki mangsuli pitakon sing beda-beda:

Kanggo pambandhing ing kelas, cathet preparat tanpa pewarna sadurunge mriksa preparat kapisah sing diwarnani manut protokol pamulangan. Jaga supaya setelan cahya lan pangambilan gambar bisa dibandhingake. Yen sing difoto rong sel sing beda, jlentrehake minangka tuladha, dudu cathetan sadurunge lan sawise saka siji sel.

Atlas mikroskopi: telung spesimen nyata sing diwarnani

Atlas iki minangka pilihan lan interpretasi asli saka telung mikrograf kanthi lisensi terbuka. Panulis sumber nyebutake identitas spesimen lan pewarnane. Kita durung verifikasi kanthi mandiri spesimen kasebut. Gambar diterbitake maneh tanpa dipotong minangka konversi WebP tanpa mundhut data, tanpa tambahan fitur utawa owah-owahan warna.

Lembar 1: sel pipi manungsa

Spesimen: sel pipi manungsa. Pewarna: biru metilena. Perbesaran: 400×, miturut katrangan fotografer. Garis skala: ora kasedhiya; sumber ora menehi ukuran piksel sing wis dikalibrasi. Foto dening Fritzmann2002, 2017, saka Sel Pipi Manungsa (Pewarnaan Biru Metilena), kanthi lisensi CC BY-SA 4.0. Reproduksi iki tetep nggunakake lisensi kasebut.

Wiwiti saka sel sing dhewekan: intine sing luwih peteng luwih gampang dibedakake saka sitoplasma biru ing sakiwa-tengene. Banjur priksa sel sing tumpang tindih ing sangisore. Tumpang tindih ndadekake wates sel luwih angel ditutake lan bisa nggawe bagean tartamtu katon luwih peteng. Gunakake lembar iki kanggo latihan ngetutake kontur, dudu ngetung saben bercak peteng minangka inti. Pandhuan pengamatan sel pipi njlentrehake latihan khusus kanggo sampel iki.

Lembar 2: sel bawang

Spesimen: sel bawang, miturut identifikasi saka sumber. Pewarna: biru metilena. Perbesaran: “200x” ana ing jeneng berkas asli; durung divalidasi kanthi mandiri. Garis skala: ora kasedhiya; ora ana kalibrasi sing diwenehake. Foto dening Alvy16, 2019, saka Sel bawang 200x, kanthi lisensi CC BY 4.0.

Kompartemen sing dawa mbentuk lembaran sing tumata. Bandhingake wates dawa sing dienggo bareng karo kontur sing ora ajeg ing Lembar 1. Gatekna uga materi peteng sing katon mencolok lan padhange medan pandeleng sing ora rata. Foto iki ora nemtokake identitas saben endhapan peteng. Iki nuduhake apa sebabe cathetan pengamatan sing migunani nyakup artefak lan kahanan sing durung mesthi, tinimbang menehi label marang kabeh sing nyerep warna.

Lembar 3: khamir sing diidentifikasi sumber minangka Candida spp.

Spesimen: Candida spp., miturut fotografer. Pewarna: pewarnaan positif prasaja nganggo biru metilena. Perbesaran: ora kasedhiya. Garis skala: ora kasedhiya; ora ana ukuran piksel sing wis dikalibrasi. Foto dening Marta, pangguna Wikimedia Martunia.g, 2021, saka Pewarnaan positif nganggo biru metilena 2, kanthi lisensi CC BY 4.0.

Bandhingake klompok biru sing rapet karo pinggiran sing luwih renggang. Kontur saben obyek luwih gampang ditutake ing papan sing kurang tumpang tindih. Jeneng Candida asale saka cathetan sumber, dudu saka identifikasi spesies sing ditindakake adhedhasar foto iki. Lembar iki uga ora menehi asil viabilitas. Uji viabilitas lan respirasi khamir mbutuhake kahanan, kontrol, lan interpretasi dhewe.

Maca skala kanthi bener

Lembar-lembar iki bisa digunakake kanggo pambandhing visual, dudu kanggo pangukuran ing mikrometer utawa pambandhing ukuran sel absolut antarlembar. Perbesaran sing dilaporake ora bisa ngganti kalibrasi kamera sing ora ana. Ngowahi ukuran tampilan gambar ngowahi sepira gedhene gambar kasebut katon.

Kanggo gambarmu dhewe, gawe kalibrasi pangukuran nganggo standar sing wis dingerteni lan susunan optik sing cocog. Pandhuan mikrometri saka Nikon nerangake carane mikrometer meja ngowahi bagean gambar utawa retikel sing durung nduweni ukuran fisik dadi ukuran dawa fisik. Cathet lensa obyektif, konfigurasi kamera, lan kalibrasi, banjur tambahake garis skala saka data kasebut. Aja ngira-ngira garis skala saka ukuran sel rata-rata ing buku teks.

Apa isi botol cocog karo cara sing digunakake?

Botol kanthi label biru metilena dudu spesifikasi laboratorium sing lengkap. Priksa konsentrasi lan satuane, pelarut, bahan tambahan, panggunaan sing dituju, dokumentasi bets, lan pandhuane. Lembar data keamanan reagen nerangake bebaya; pandhuan cara nemtokake carane nggunakake reagen kanggo preparat sing dituju.

Tuladha nyata yaiku larutan biru metilena Löffler saka Merck. Pabrikan ngenali iki minangka reagen mikroskopi lan nerangake perane minangka pewarna tandhing ing pewarnaan tahan asam. Katrangan gampang kobong sing dicantumake uga nuduhake apa sebabe “cairan biru” ora cukup minangka informasi kanggo ngrancang penanganan utawa pemanasan. Sipat kasebut ditrapake kanggo formulasi iku, ora kanthi otomatis kanggo saben larutan biru metilena kanthi pelarut banyu.

Semono uga, agar eosin biru metilena iku medium kultur kanthi formulasi tartamtu. Iki dudu pewarna preparat ing kaca obyek sing digawe kanthi nambahake biru metilena biasa menyang spesimen. Kanggo tujuan panggambaran sing beda, bandhingake alternatif biru metilena kanggo mikroskopi.

Kanggo kit mikroskop pamula, wiwiti saka cara pamulangan sing didokumentasikake, preparat siap pakai sing wis dingerteni, lan reagen sing ditemtokake. Yen label botol ilang utawa komposisine ora bisa dipesthekake, ganti nganggo reagen sing cocog lan didokumentasikake. Gunakake pelindung mripat lan pandhuan penanganan sing diwenehake kanggo formulasi sing pancen digunakake. Materi saka manungsa lan sampel lingkungan sing ora dingerteni mbutuhake prosedur penanganan lan pembuangan sampel saka laboratorium pamulangan; pewarnaan ora ngganti prosedur kasebut.

Tulisen pengamatan sadurunge dudutan

“Obyek biru lonjong sing nglumpuk” minangka katrangan gambar sing bisa dipertanggungjawabake. “Infeksi tartamtu” mbutuhake bukti sing ora diwenehake gambar kasebut. Ing buku cathetan, pisahake asal-usul spesimen, panyiyapan preparat, reaksi pewarnaan, lan cara identifikasi. Pambedaan iki ndadekake gambar kelas sing prasaja migunani lan nyegah mikrograf sing narik kawigaten nggawa pratelan sing ora bisa didhukung.