Kolorasyon ak ble metilèn: metòd mikwoskopi ak yon atlas imaj reyèl

Kolorasyon ak ble metilèn fè karakteristik selilè ki ta prèske envizib vin pi fasil pou distenge nan mikwoskopi an chan klè. Li ka ede elèv yo jwenn nwayo yon selil ki soti anndan machwè oswa egzamine kontou ak aranjman mikwo-òganis yo. Men, yon objè ble se yon obsèvasyon. Bay òganis la yon non, mezire li, epi deside si li endike yon maladi se travay apa.

Imaj kouvèti a montre prensip kontras la. Atlas ki anba a gen foto reyèl ki soti nan echantiyon ki dokimante endepandamman, ansanm ak enfòmasyon sou sous orijinal yo.

Kisa ble metilèn fè parèt?

Ble metilèn se yon koloran bazik: iyon ki bay li koulè a pote yon chaj pozitif. Jan OpenStax eksplike nan seksyon li sou kolorasyon echantiyon, koloran bazik yo reyaji ak materyèl selilè ki gen chaj negatif epi yo ka fè selil yo parèt pi klè sou yon fon ki pi pal. Nan preparasyon ki apwopriye, ble metilèn mete aksan sou zòn ki rich an asid nikleyik ak lòt estrikti ki mare ak koloran an.

Nan yon kolorasyon senp, se yon sèl koloran ki bay kontras la. Kidonk, plizyè òganis ka parèt ble san yo pa menm òganis la. Kesyon ki itil yo se kesyon deskriptif an premye: èske objè yo won oswa long, izole oswa an gwoup, kolore menm jan tout kote oswa gen diferans anndan yo? Gade diferans ant kolorasyon senp ak kolorasyon Gram anvan ou entèprete koulè kòm yon rezilta klasifikasyon.

Kontras ak rezolisyon se de bagay diferan. Kontras ede distenge yon objè ak sa ki antoure li; rezolisyon pèmèt separe detay ki toupre youn ak lòt. Yon imaj ki pi fonse pa garanti plis estrikti ki byen distenge. Epi se pa tout ti grenn fonse ki merite etikèt òganit.

Preparasyon natif, preparasyon imid kolore, ak fwoti

Yon preparasyon imid san koloran, oswa natif, prezève yon vizyon san koloran ajoute, menm si retire echantiyon an nan anviwònman orijinal li toujou chanje li. Yon preparasyon imid kolore ajoute reyaktif pandan materyèl la rete nan likid anba yon lamèl. Yon fwoti fikse gaye materyèl sou yon lam epi sèvi ak yon metòd fiksasyon presi anvan tretman ki vin apre yo. Apèsi OpenStax sou preparasyon yo fè diferans ant preparasyon imid ak fiksasyon epi eksplike poukisa òganis ki fikse yo pa montre mouvman oswa metabolis nòmal yo ankò.

Preparasyon sa yo reponn kesyon diferan:

Pou yon konparezon nan klas, dokimante yon preparasyon san koloran anvan ou egzamine yon lòt preparasyon kolore ki fèt dapre pwotokòl ansèyman an. Kenbe ekleraj la ak paramèt kaptire imaj yo konparab. Si ou pran foto de selil diferan, dekri yo kòm egzanp, pa kòm yon dosye anvan-ak-apre pou yon sèl selil.

Atlas mikwoskopi: twa echantiyon reyèl ki kolore

Atlas sa a se yon seleksyon ak yon entèpretasyon orijinal twa mikwofotografi ki gen lisans ouvè. Otè sous yo idantifye echantiyon yo ak koloran yo. Nou pa verifye otantisite echantiyon yo endepandamman. Imaj yo repwodui san rekadraj kòm konvèsyon WebP san pèt, san karakteristik ajoute oswa chanjman koulè.

Planch 1: selil ki soti anndan machwè moun

Echantiyon: selil ki soti anndan machwè moun. Koloran: ble metilèn. Agrandisman: 400×, dapre fotograf la. Ba echèl: pa disponib; sous la pa bay yon gwosè piksèl kalibre. Foto Fritzmann2002, 2017, ki soti nan Selil ki soti anndan machwè moun (kolorasyon ak ble metilèn), anba lisans CC BY-SA 4.0. Repwodiksyon sa a konsève lisans sa a.

Kòmanse ak yon selil izole: nwayo li ki pi fonse pi fasil pou distenge ak sitoplas ble ki antoure li a. Apre sa, egzamine selil ki sipèpoze anba li yo. Sipèpozisyon fè limit yon selil pi difisil pou swiv epi li ka kreye yon zòn ki pi fonse nan yon kote. Sèvi ak planch sa a pou pratike trase kontou yo, pa pou konte chak tach fonse kòm yon nwayo. Gid obsèvasyon selil ki soti anndan machwè a devlope egzèsis ki espesifik pou echantiyon sa a.

Planch 2: selil zonyon

Echantiyon: selil zonyon, jan sous la idantifye yo. Koloran: ble metilèn. Agrandisman: “200x” parèt nan non fichye orijinal la; li pa valide endepandamman. Ba echèl: pa disponib; pa gen kalibrasyon ki bay. Foto Alvy16, 2019, ki soti nan Selil zonyon 200x, anba lisans CC BY 4.0.

Konpatiman long yo fòme yon kouch òganize. Konpare limit long yo pataje yo ak kontou iregilye nan Planch 1. Remake tou materyèl fonse ki fasil pou wè a ak klète chan an ki pa egal. Foto a pa etabli idantite chak depo fonse. Li montre poukisa yon dosye obsèvasyon ki itil gen ladan atifak ak ensètitid olye li bay yon etikèt pou tout sa ki pran koulè.

Planch 3: ledven sous la idantifye kòm Candida spp.

Echantiyon: Candida spp., dapre fotograf la. Koloran: kolorasyon pozitif senp ak ble metilèn. Agrandisman: pa disponib. Ba echèl: pa disponib; pa gen gwosè piksèl kalibre ki bay. Foto Marta, itilizatè Wikimedia Martunia.g, 2021, ki soti nan Kolorasyon pozitif ak ble metilèn 2, anba lisans CC BY 4.0.

Konpare gwoup ble ki dans yo ak bò kote ki gen mwens objè sere. Kontou endividyèl yo pi fasil pou swiv kote objè yo sipèpoze mwens. Non Candida a soti nan dosye sous la, pa nan yon idantifikasyon espès ki fèt sou foto sa a. Planch sa a pa bay okenn rezilta sou viabilite nonplis. Tès viabilite ak respirasyon ledven mande pwòp kondisyon, kontwòl, ak entèpretasyon pa yo.

Li echèl la kòrèkteman

Planch sa yo pèmèt konparezon vizyèl, pa mezi an mikwomèt oswa konparezon gwosè absoli selil yo ant planch yo. Agrandisman yo rapòte a pa pèmèt rekonstwi kalibrasyon kamera ki manke a. Chanje gwosè ekspozisyon yon imaj chanje agrandisman li sanble genyen an.

Pou pwòp imaj ou yo, etabli yon kalibrasyon mezi avèk yon etalon ou konnen ak konfigirasyon optik ki konsène a. Gid Nikon sou mikwometri eksplike kijan yon mikwomèt pou platinn konvèti divizyon abitrè nan yon imaj oswa yon retikil an longè fizik. Note objektif la, konfigirasyon kamera a, ak kalibrasyon an, epi ajoute yon ba echèl dapre done sa yo. Pa dedui yon ba echèl apati gwosè mwayèn selil ki nan yon liv.

Èske boutèy la koresponn ak metòd la?

Yon boutèy ki gen etikèt ble metilèn pa yon espesifikasyon laboratwa konplè. Verifye konsantrasyon li ak inite yo, sòlvan an, engredyan adisyonèl yo, itilizasyon li fèt pou li a, dokiman lo a, ak enstriksyon yo. Fich done sekirite yon reyaktif dekri danje yo; enstriksyon metòd la etabli kijan pou sèvi avè l pou preparasyon li fèt pou li a.

Yon egzanp konkrè se solisyon ble metilèn Löffler Merck la. Manifakti a idantifye li kòm yon reyaktif mikwoskopi epi li dekri wòl li kòm yon kontrekoloran nan kolorasyon asidorezistan. Enflamabilite li ki mansyone a montre tou poukisa “yon likid ble” pa ase enfòmasyon pou planifye manipilasyon oswa chofaj. Pwopriyete sa yo aplike pou fòmil sa a, pa otomatikman pou tout solisyon ble metilèn nan dlo.

Menm jan an tou, aga eozin ble metilèn se yon milye kilti ki gen yon fòmil espesifik. Se pa yon koloran pou lam ou fè lè ou ajoute ble metilèn senp nan yon echantiyon. Pou yon lòt objektif imajri, konpare altènativ pou ble metilèn nan mikwoskopi.

Pou yon twous mikwoskòp pou debutan, kòmanse ak metòd edikatif li ki dokimante a, lam ki deja prepare epi ou konnen yo, ak reyaktif ki presize a. Si yon boutèy pèdi etikèt li oswa ou pa ka etabli konpozisyon li, ranplase li ak reyaktif apwopriye ki dokimante a. Sèvi ak pwoteksyon pou je epi suiv enstriksyon manipilasyon yo bay pou fòmil reyèl la. Materyèl ki soti nan moun ak echantiyon anviwònman ou pa konnen mande pwosedi laboratwa ansèyman an pou manipile epi elimine echantiyon; kolorasyon pa ranplase pwosedi sa yo.

Ekri obsèvasyon an anvan konklizyon an

“Objè oval ble an gwoup” se yon deskripsyon yon imaj ou ka jistifye. “Yon enfeksyon espesifik” mande prèv imaj la pa bay. Kenbe orijin echantiyon an, preparasyon an, reyaksyon kolorasyon an, ak metòd idantifikasyon an separe nan kaye a. Distenksyon sa a fè yon imaj senp nan klas vin itil epi anpeche yon mikwofotografi atiran pote yon afimasyon li pa ka sipòte.