મેથિલીન બ્લુ અભિરંજન: સૂક્ષ્મદર્શન પદ્ધતિઓ અને વાસ્તવિક છબીઓનો એટલસ

મેથિલીન બ્લુ અભિરંજનથી તેજક્ષેત્ર સૂક્ષ્મદર્શનમાં સામાન્ય રીતે ઝાંખાં દેખાતાં કોષીય લક્ષણોને અલગ ઓળખવાનું સરળ બને છે. તે વિદ્યાર્થીઓને ગાલના કોષનું કોષકેન્દ્ર શોધવામાં અથવા સૂક્ષ્મજીવોની રૂપરેખા અને ગોઠવણી તપાસવામાં મદદ કરી શકે છે. જોકે, વાદળી પદાર્થ દેખાવો એ એક અવલોકન છે. જીવનું નામ નક્કી કરવું, તેને માપવું અને તે રોગ સૂચવે છે કે નહીં તે નક્કી કરવું અલગ કાર્યો છે.

મુખપૃષ્ઠની છબી દૃશ્યવિરોધનો સિદ્ધાંત સમજાવે છે. નીચેના એટલસમાં સ્વતંત્ર રીતે દસ્તાવેજીકૃત નમૂનાઓના વાસ્તવિક ફોટોગ્રાફ્સ તેમની મૂળ સ્રોતની માહિતી સાથે આપેલા છે.

મેથિલીન બ્લુ શું દેખાડે છે?

મેથિલીન બ્લુ એક બેઝિક રંજક છે: તેનો રંગીન આયન ધન વિદ્યુતભાર ધરાવે છે. નમૂનાઓના અભિરંજન વિશે OpenStax સમજાવે છે તેમ, બેઝિક રંજકો ઋણ વિદ્યુતભાર ધરાવતા કોષીય પદાર્થ સાથે ક્રિયા કરે છે અને આછા પૃષ્ઠભૂમિ સામે કોષોને સ્પષ્ટ દેખાડી શકે છે. યોગ્ય રીતે તૈયાર કરેલા નમૂનાઓમાં મેથિલીન બ્લુ ન્યુક્લિક એસિડથી સમૃદ્ધ વિસ્તારો અને અભિરંજક સાથે બંધાતી અન્ય રચનાઓને વધુ સ્પષ્ટ કરે છે.

સરળ અભિરંજનમાં એક રંજક દૃશ્યવિરોધ પૂરો પાડે છે. તેથી અલગ-અલગ જીવો એક જ પ્રકારના ન હોવા છતાં વાદળી દેખાઈ શકે છે. શરૂઆતમાં ઉપયોગી પ્રશ્નો વર્ણનાત્મક હોય છે: પદાર્થો ગોળ છે કે લંબાયેલા, છૂટાછવાયા છે કે સમૂહમાં, એકસરખા રંગાયેલા છે કે અંદર જુદા ભાગો દેખાય છે? રંગને વર્ગીકરણના પરિણામ તરીકે સમજતાં પહેલાં સરળ અભિરંજન અને ગ્રામ અભિરંજન વચ્ચેનો તફાવત જુઓ.

દૃશ્યવિરોધ અને વિભેદનક્ષમતા અલગ છે. દૃશ્યવિરોધ પદાર્થને તેની આસપાસથી અલગ ઓળખવામાં મદદ કરે છે; વિભેદનક્ષમતા નજીકની વિગતોને અલગ દર્શાવે છે. વધુ ઘેરી છબીમાં વધુ રચનાઓ અલગ દેખાશે જ એવું નથી. તેમજ દરેક ઘેરા કણને કોષાંગ તરીકે ઓળખાવવું યોગ્ય નથી.

મૂળ અવસ્થાના નમૂનાઓ, અભિરંજિત ભીના માઉન્ટ અને સ્મિયર

અભિરંજન વિનાની, એટલે કે મૂળ અવસ્થાની, ભીની તૈયારી ઉમેરેલા રંજક વિના દૃશ્ય જાળવે છે, જોકે મૂળ પર્યાવરણમાંથી બહાર કાઢવાથી પણ નમૂનો બદલાય છે. અભિરંજિત ભીના માઉન્ટમાં પદાર્થ આવરણ કાચ હેઠળ પ્રવાહીમાં હોય ત્યારે અભિકર્મક ઉમેરવામાં આવે છે. સ્થિરીકૃત સ્મિયરમાં પદાર્થને સ્લાઇડ પર ફેલાવીને આગળની પ્રક્રિયા પહેલાં નિર્ધારિત સ્થિરીકરણ પદ્ધતિ વપરાય છે. નમૂના તૈયાર કરવા અંગેનો OpenStaxનો સારાંશ ભીના માઉન્ટ અને સ્થિરીકરણ વચ્ચેનો તફાવત સમજાવે છે તથા સ્થિરીકૃત જીવોમાં સામાન્ય ગતિ કે ચયાપચય કેમ જોઈ શકાતાં નથી તે સમજાવે છે.

આ તૈયારીઓ અલગ પ્રશ્નોના જવાબ આપે છે:

વર્ગખંડમાં સરખામણી માટે, શિક્ષણ પ્રોટોકોલ અનુસાર અલગથી તૈયાર કરેલા અભિરંજિત નમૂનાને તપાસતાં પહેલાં અભિરંજન વિનાના નમૂનાની નોંધ લો. પ્રકાશ અને છબી લેવાની સેટિંગ્સ સરખાવી શકાય તેવી રાખો. જો બે જુદા કોષોના ફોટોગ્રાફ્સ લેવામાં આવે, તો તેમને ઉદાહરણો તરીકે વર્ણવો, એક જ કોષના પહેલાં અને પછીના રેકોર્ડ તરીકે નહીં.

સૂક્ષ્મદર્શન એટલસ: ત્રણ વાસ્તવિક અભિરંજિત નમૂનાઓ

આ એટલસ ખુલ્લા લાઇસન્સ હેઠળ ઉપલબ્ધ ત્રણ સૂક્ષ્મછબીઓની મૌલિક પસંદગી અને અર્થઘટન છે. સ્રોતના લેખકો નમૂનાઓ અને અભિરંજકોની ઓળખ આપે છે. અમે તેમના નમૂનાઓની સ્વતંત્ર રીતે ખરાઈ કરી નથી. છબીઓ કાપ્યા વિના, કોઈ લક્ષણ ઉમેર્યા વિના કે રંગ બદલ્યા વિના, ગુણવત્તાની હાનિ ન થાય તેવા WebP રૂપાંતર તરીકે પુનઃપ્રસ્તુત કરવામાં આવી છે.

પ્લેટ 1: માનવ ગાલના કોષો

નમૂનો: માનવ ગાલના કોષો. અભિરંજક: મેથિલીન બ્લુ. આવર્ધન: 400×, ફોટોગ્રાફરે જણાવ્યા મુજબ. માપમાન પટ્ટી: ઉપલબ્ધ નથી; સ્રોત માપાંકિત પિક્સેલ કદ આપતો નથી. Fritzmann2002 દ્વારા લેવાયેલો ફોટોગ્રાફ, 2017, માનવ ગાલના કોષો (મેથિલીન બ્લુ અભિરંજન) પરથી, CC BY-SA 4.0 લાઇસન્સ હેઠળ. આ પુનઃપ્રસ્તુતિમાં એ જ લાઇસન્સ જાળવવામાં આવ્યું છે.

એક છૂટા કોષથી શરૂઆત કરો: તેનું ઘેરું કોષકેન્દ્ર આસપાસના વાદળી કોષરસથી અલગ ઓળખવું વધુ સરળ છે. પછી તેની નીચે એકબીજા પર આવેલા કોષોને તપાસો. એકબીજા પર આવવાથી સીમાને અનુસરવી મુશ્કેલ બને છે અને કોઈ સ્થાનિક વિસ્તાર વધુ ઘેરો દેખાઈ શકે છે. આ પ્લેટનો ઉપયોગ રૂપરેખાઓ અનુસરવાની પ્રેક્ટિસ માટે કરો, દરેક ઘેરા ડાઘને કોષકેન્દ્ર ગણવા માટે નહીં. ગાલના કોષોના અવલોકનની માર્ગદર્શિકા આ નમૂના-વિશિષ્ટ અભ્યાસને વધુ વિગતે સમજાવે છે.

પ્લેટ 2: ડુંગળીના કોષો

નમૂનો: સ્રોત દ્વારા ઓળખાવ્યા મુજબ ડુંગળીના કોષો. અભિરંજક: મેથિલીન બ્લુ. આવર્ધન: મૂળ ફાઇલનામમાં “200x” દેખાય છે; તેની સ્વતંત્ર રીતે ખરાઈ કરવામાં આવી નથી. માપમાન પટ્ટી: ઉપલબ્ધ નથી; કોઈ માપાંકન આપવામાં આવ્યું નથી. Alvy16 દ્વારા લેવાયેલો ફોટોગ્રાફ, 2019, ડુંગળીનો કોષ 200x પરથી, CC BY 4.0 લાઇસન્સ હેઠળ.

લંબાયેલા ખંડો એક વ્યવસ્થિત સ્તર બનાવે છે. તેમની લાંબી સહિયારી સીમાઓને પ્લેટ 1ની અનિયમિત રૂપરેખાઓ સાથે સરખાવો. સ્પષ્ટ દેખાતા ઘેરા પદાર્થ અને દૃશ્યક્ષેત્રની અસમાન તેજસ્વિતાને પણ ધ્યાનમાં લો. ફોટોગ્રાફ દરેક ઘેરા જમા થયેલા પદાર્થની ઓળખ સ્થાપિત કરતો નથી. તે બતાવે છે કે ઉપયોગી અવલોકન રેકોર્ડમાં રંગ પકડતી દરેક વસ્તુને નામ આપવાને બદલે તૈયારી કે છબીકરણથી ઊભી થયેલી વિકૃતિઓ અને અનિશ્ચિતતાનો સમાવેશ કેમ કરવો જોઈએ.

પ્લેટ 3: સ્રોત દ્વારા Candida spp. તરીકે ઓળખાવેલું યીસ્ટ

નમૂનો: ફોટોગ્રાફરના જણાવ્યા મુજબ Candida spp. અભિરંજક: મેથિલીન બ્લુ વડે સરળ પોઝિટિવ અભિરંજન. આવર્ધન: ઉપલબ્ધ નથી. માપમાન પટ્ટી: ઉપલબ્ધ નથી; કોઈ માપાંકિત પિક્સેલ કદ આપવામાં આવ્યું નથી. Marta, Wikimedia વપરાશકર્તા Martunia.g, દ્વારા લેવાયેલો ફોટોગ્રાફ, 2021, મેથિલીન બ્લુ વડે પોઝિટિવ અભિરંજન 2 પરથી, CC BY 4.0 લાઇસન્સ હેઠળ.

ગીચ વાદળી સમૂહોને ઓછી ભીડવાળી કિનારીઓ સાથે સરખાવો. જ્યાં પદાર્થો એકબીજા પર ઓછા આવે છે ત્યાં તેમની વ્યક્તિગત રૂપરેખાઓ અનુસરવી વધુ સરળ છે. Candida નામ સ્રોતના રેકોર્ડમાંથી આવે છે, આ ફોટોગ્રાફ પરથી કરવામાં આવેલી પ્રજાતિની ઓળખમાંથી નહીં. આ પ્લેટ જીવંતતા અંગેનું કોઈ પરિણામ પણ આપતી નથી. યીસ્ટની જીવંતતા અને શ્વસનના પરીક્ષણો માટે તેમની પોતાની શરતો, નિયંત્રણો અને અર્થઘટન જરૂરી છે.

માપમાનને યોગ્ય રીતે સમજવું

આ પ્લેટ્સ દૃશ્ય સરખામણી માટે ઉપયોગી છે, માઇક્રોમીટરમાં માપન કરવા અથવા પ્લેટ્સ વચ્ચે કોષોના નિરપેક્ષ કદની સરખામણી કરવા માટે નહીં. જણાવેલું આવર્ધન ખૂટતું કેમેરા માપાંકન પૂરું પાડતું નથી. છબીનું પ્રદર્શન કદ બદલવાથી તેનું દેખીતું આવર્ધન બદલાય છે.

તમારી પોતાની છબીઓ માટે, જાણીતા માનક અને સંબંધિત પ્રકાશીય ગોઠવણીનો ઉપયોગ કરીને માપનનું માપાંકન સ્થાપિત કરો. માઇક્રોમેટ્રી અંગેની Nikonની માર્ગદર્શિકા સમજાવે છે કે સ્ટેજ માઇક્રોમીટર છબી કે રેટિકલના મનસ્વી વિભાગોને ભૌતિક લંબાઈમાં કેવી રીતે ફેરવે છે. ઑબ્જેક્ટિવ લેન્સ, કેમેરાની ગોઠવણી અને માપાંકનની નોંધ લો તથા આ માહિતી પરથી માપમાન પટ્ટી ઉમેરો. પાઠ્યપુસ્તકમાં આપેલા કોષના સરેરાશ કદ પરથી પટ્ટીનો અંદાજ ન લગાવો.

શું બોટલ પદ્ધતિને અનુરૂપ છે?

મેથિલીન બ્લુનું લેબલ ધરાવતી બોટલ પ્રયોગશાળા માટેનું સંપૂર્ણ વિશિષ્ટીકરણ નથી. તેની સાંદ્રતા અને એકમો, દ્રાવક, વધારાના ઘટકો, નિર્ધારિત ઉપયોગ, બેચના દસ્તાવેજો અને સૂચનાઓ તપાસો. અભિકર્મકનું સલામતી માહિતી પત્રક જોખમોનું વર્ણન કરે છે; પદ્ધતિની સૂચનાઓ નિર્ધારિત તૈયારી માટે તેનો ઉપયોગ કેવી રીતે કરવો તે સ્થાપિત કરે છે.

એક સ્પષ્ટ ઉદાહરણ Merckનું Löffler મેથિલીન બ્લુ દ્રાવણ છે. ઉત્પાદક તેને સૂક્ષ્મદર્શન માટેના અભિકર્મક તરીકે ઓળખાવે છે અને એસિડ-ફાસ્ટ અભિરંજનમાં પ્રતિઅભિરંજક તરીકે તેની ભૂમિકા વર્ણવે છે. તેની સૂચિબદ્ધ જ્વલનશીલતા પણ બતાવે છે કે હેન્ડલિંગ કે ગરમ કરવાની યોજના માટે માત્ર “વાદળી પ્રવાહી” એટલી માહિતી પૂરતી કેમ નથી. આ ગુણધર્મો તે ચોક્કસ સંયોજનને લાગુ પડે છે, દરેક જલીય મેથિલીન બ્લુ દ્રાવણને આપમેળે નહીં.

એ જ રીતે, ઇઓસિન મેથિલીન બ્લુ અગર એક વિશિષ્ટ સંયોજન ધરાવતું સંવર્ધન માધ્યમ છે. તે નમૂનામાં સાદું મેથિલીન બ્લુ ઉમેરીને બનાવાતું સ્લાઇડ અભિરંજક નથી. છબીકરણના જુદા હેતુ માટે સૂક્ષ્મદર્શન માટે મેથિલીન બ્લુના વિકલ્પો સરખાવો.

શરૂઆત કરનાર માટેની માઇક્રોસ્કોપ કિટમાં તેની દસ્તાવેજીકૃત શૈક્ષણિક પદ્ધતિ, જાણીતી તૈયાર સ્લાઇડ્સ અને નિર્દિષ્ટ અભિકર્મકથી શરૂઆત કરો. જો બોટલનું લેબલ ખોવાઈ ગયું હોય અથવા તેના સંયોજનની ખાતરી ન થઈ શકે, તો તેને યોગ્ય દસ્તાવેજીકૃત અભિકર્મકથી બદલો. આંખોનું રક્ષણ કરો અને વાસ્તવિક સંયોજન માટે આપેલી હેન્ડલિંગ સૂચનાઓ અનુસરો. માનવ સામગ્રી અને અજાણ્યા પર્યાવરણીય નમૂનાઓ માટે શિક્ષણ પ્રયોગશાળાની નમૂના સંભાળ અને નિકાલની પ્રક્રિયાઓ જરૂરી છે; અભિરંજન એ પ્રક્રિયાઓનો વિકલ્પ નથી.

નિષ્કર્ષ પહેલાં અવલોકન લખો

“સમૂહોમાં વાદળી અંડાકાર પદાર્થો” એ છબીનું પુરાવા આધારિત વર્ણન છે. “ચોક્કસ ચેપ” કહેવા માટે એવા પુરાવા જરૂરી છે જે છબીએ પૂરા પાડ્યા નથી. નોંધપોથીમાં નમૂનાનો સ્રોત, તૈયારી, અભિરંજન પ્રતિક્રિયા અને ઓળખની પદ્ધતિ અલગ રાખો. આ તફાવત વર્ગખંડની સરળ છબીને ઉપયોગી બનાવે છે અને આકર્ષક સૂક્ષ્મછબી પરથી એવો દાવો થતો અટકાવે છે જેને તે સમર્થન આપી શકતી નથી.