Miks võib metüleensinise sisaldusmääramise tulemus ületada 100%

Metüleensinise sisaldusmääramise tulemus 101.0% on esitatud analüütiline tulemus. See ei tähenda, et 100 g materjali sisaldab füüsiliselt 101 g metüleensinist. Tulemuse tõlgendamiseks tehke kindlaks, mida mõõdeti, milline materjali mass oli nimetajas ja kuidas labor tulemuse arvutas.

USP metüleensinise määratlus näeb ette sisaldusvahemiku 97.0% kuni 103.0%, arvutatuna kuivatatud aine alusel. Need on konkreetse katse vastuvõetavuspiirid. Need ei väida, et tegelik puhtus ületab 100%, ega määra iga laborimõõtmise määramatuse vahemikku.

Alustage nimetajast

Vastuvõetud kujul esitatud tulemus käib materjali kohta sellises seisundis, nagu see vastu võeti, sealhulgas koos selles oleva veega. Kuivatatud aine alusel esitatud tulemuse nimetajast jäetakse välja ettenähtud kuivatamistingimustes kaotatud mass. See väljendab analüüdi sisaldust allesjäänud materjali suhtes.

Neid mõisteid tuleb kasutada hoolikalt. USP peatükk kuivatuskao kohta määratleb mõõtmise kindlaksmääratud tingimustes eemaldatud lenduvate ainete kaudu. Kuivatuskadu ei ole automaatselt üksnes vee mõõt. Sellele võivad kaasa aidata ka muud lenduvad ained. Lähtuge sertifikaadil märgitud tegelikust meetodist ja tulemuse esitamise alusest.

Lihtsa paranduse korral, kui sisaldusmääramise ja kuivatuskao tulemused puudutavad sama materjali ning analüüt säilib:

Sisaldus kuivatatud aine alusel (%) = sisaldus vastuvõetud kujul (%) × 100 / 100 − kuivatuskadu (%)

Pöördteisendus on järgmine:

Sisaldus vastuvõetud kujul (%) = sisaldus kuivatatud aine alusel (%) × 100 − kuivatuskadu (%) / 100

Ärge rakendage parandust uuesti tulemusele, mis on juba esitatud kuivatatud aine alusel.

Arvutusnäide: üks proov, kaks kehtivat protsendiväärtust

Oletame, et hüpoteetiline 100 g proov sisaldab 88 g metüleensinist, väljendatuna veevaba kloriidina, 10 g vett ja 2 g muid mittelenduvaid tahkeid aineid. Eeldame, et kuivatamisel eemaldatakse täpselt vesi, ilma et värvaine kaoks või muutuks. Need on õpetlikud näidiskogused, mitte tootepartii analüüsitulemused.

Kuiva aine osakaalud annavad kokku 100%. Suurem sisaldusmääramise tulemus ei eemaldanud muid tahkeid aineid ega suurendanud värvaine kogust. See muutis võrdluse alust: kogu vastuvõetud proovi asemel võrreldi selle kuiva osa.

Seevastu aruanne, milles sisaldus kuivatatud aine alusel on 99.0% ja kuivatuskadu 12.0%, annab meetodi eelduste kehtimisel sisalduseks vastuvõetud kujul 99.0 × 0.88 = 87.12%. Selle 87.12% otsene võrdlemine teise tarnija 99.0% tulemusega kuivatatud aine alusel tähendaks erinevate suuruste võrdlemist.

Vesi võib kuuluda ka kristalli hüdraatvormi koostisse. Metüleensinise trihüdraadi ja veevaba materjali erinevus selgitab, miks valemimass ja sisaldusmääramise alus peavad olema kooskõlas. Hüdraatvormi märgistus ei asenda partiipõhist veesisalduse või kuivatuskao tulemust.

Miks võib esitatud sisaldusmääramise tulemus ületada 100%

Täpseid mõõtmisi kasutav korrektne kuivmassi arvutus ei saa muuta tegelikku massiosa suuremaks kui 100%. Seda piiri ületav tulemus tuleneb analüütilise hinnangu saamise viisist, sealhulgas selle mõõtemääramatusest, võimalikust süstemaatilisest nihkest või aruandlus- või arvutusveast.

Ametlik USP muudatuste bülletään septembrist 2023 kirjeldab sisaldusmääramist, milles võrreldakse proovi vedelikkromatograafilist signaali võrdlusstandardi omaga. See on kalibreeritud määramine, mitte pulbri iga koostisaine füüsiline eraldamine ja kaalumine. Võrdlusstandardile omistatud väärtus, kaalumine, lahjendamine, seadme signaal ja kuivatusparandus võivad esitatud hinnangut mõjutada.

Vaatleme teist hüpoteetilist proovi: 90 g metüleensinist ja 10 g vett. Selle tegelik sisaldus kuivaine alusel on 100%. Kui sisaldusmääramise signaal on 1% võrra liiga kõrge ja kuivatusparandus on muus osas täpne, hindab meetod algses 100 g proovis oleva koguse ekvivalendiks 90.9 g. Selle hinnangu parandamine annab 90.9 / 90 × 100 = 101.0%. Täiendav 0.9 g on ülehinnang, mitte lisamaterjal.

NIST-i mõõtemääramatuse selgitus eristab mõõdetud hinnangut mõõdetava suuruse täpsest teadmisest. Labor peab hindama oma mõõtemääramatust ise. Spetsifikatsioonis esitatud vahemik 97.0% kuni 103.0% ei tõenda, et meetodi määramatus on „±3%”. Samuti ei tõenda kõrge tulemus, et selle põhjustas juhuslik varieeruvus. Püsivalt kõrgete tulemuste korral tuleb kontrollida kalibreerimist, proovi ettevalmistust, parandustegureid ja arvutuse alust.

USP 2026. aasta muudatusettepaneku tutvustus märgib sõnaselgelt, et tegemist on septembri 2023 ametlikul versioonil põhineva ettepanekuga. Kavandatud muudatust ei tohiks käsitleda kehtiva katsenõudena üksnes seetõttu, et selle kuupäev on uuem.

Värvaine sisaldus ja kromatograafiline puhtus vastavad teistele küsimustele

„Värvaine sisaldus” vajab kindlaksmääratud meetodit ja arvutusalust. Näiteks Sigma-Aldrichi M9140 spetsifikatsioon näeb hüdraatvormis bioloogilise värvaine jaoks ette vähemalt 82% värvaine sisaldust. See miinimum ei ole iga partii mõõdetud väärtus. See ei määratle ülejäänud osa ohtliku saastena ega tõenda samaväärsust farmatseutilise spetsifikatsiooniga.

Samuti saadakse kromatograafiline pindalaprotsent ühe tuvastatud piigi pindala jagamisel piigipindalade kindlaksmääratud summaga. See ei tähenda automaatselt metüleensinise massi jagamist kogu proovi massiga. USP kromatograafiliste andmete esitamise juhend eristab pindalade normaliseerimist välisstandardiga arvutustest ja kirjeldab suhtelisi detektori vastustegureid, sest võrdsed massid võivad anda erinevaid detektorisignaale.

Valitud tingimustes ei pruugi detektor mõõta vett, anorgaanilisi sooli ega kõiki orgaanilisi saasteaineid. Seetõttu võivad eraldi määramistulemused kehtida üheaegselt, ilma et nende summa oleks täpselt 100%. Orgaaniliste lisandite määramise tulemus, elementanalüüs ja kuivatuskadu on üksteist täiendavad mõõtmised.

Vaadake tulemust aruande osana

Kasutage analüüsisertifikaadi lugemise juhendit, et leida partii tunnus, meetod, tulemuse esitamise alus, mõõdetud tulemus ja vastuvõetavuspiir. Hoidke iga tulemus koos selle ühikute ja nimetajaga. Laborilahuste arvutamiseks teeb metüleensinise molaarse kontsentratsiooni kalkulaator materjali vormi ja sisaldusmääramise eeldused selgesõnaliseks.

Sisaldusmääramise tulemus 101% võib vastata sisalduse spetsifikatsioonile, samal ajal kui mõni muu nõutav katse ebaõnnestub. Tulemus 99% ei tõenda steriilsust, vastuvõetavat elementlisandite sisaldust ega toote müügiluba. USP-kvaliteediga metüleensinise tähendus sõltub kõigist kohaldatavatest nõuetest tervikuna. Sisukas kvaliteedivõrdlus küsib, kas dokumenteeritud materjal vastab neile nõuetele, mitte ei järjesta tarnijaid suurima protsendinäidu järgi.