Glas methylen a microbiom y perfedd: tystiolaeth o lygod

Gall glas methylen newid y proffil bacteriol a fesurir yn ysgarthion llygod. Nid yw'r canfyddiad hwn yn cadarnhau ei fod yn gwella iechyd perfedd pobl, yn dileu bacteria niweidiol yn ddetholus, nac yn trin dysbiosis. Y gwahaniaeth hanfodol yw'r un rhwng newid cymuned ficrobaidd a gwella iechyd ei lletywr.

Mesurodd yr arbrawf ar lygod sydd fwyaf perthnasol yn uniongyrchol i'r cwestiwn hwn DNA bacteriol a pherfformiad mewn drysfa. Gall y mesuriadau hynny nodi patrymau sy'n werth ymchwilio iddynt. Ni allant, ar eu pen eu hunain, gadarnhau bod newid bacteriol wedi achosi newid ymddygiadol nac y byddai'r naill neu'r llall yn rhagweld lleddfu symptomau treulio.

Beth fesurodd yr ymchwilwyr mewn gwirionedd

Yn arbrawf Gureev a'i gydweithwyr yn 2020, cafodd llygod C57Bl/6 tri mis oed glas methylen am bedair wythnos ar 15 mg/kg/day (naw llygoden), 50 mg/kg/day (wyth), neu ddŵr rheoli (13). Nid yw'r adran ar ddyluniad yr arbrawf yn nodi'n glir lwybr rhoi'r cyffur na rhyw'r anifeiliaid.

Cymerwyd samplau o ysgarthion cyn y driniaeth ac yn wythnosol. Defnyddiodd yr ymchwilwyr qPCR ar gyfer grwpiau bacteriol a dilyniannu ampliconau DNA 16S ychwanegol. Yn ystod y pum diwrnod olaf, cwblhaodd y llygod ddau ddiwrnod o ymgynefino ac yna dri diwrnod o brofion mewn drysfa T gyda gwobrau, gyda deg dewis yn cael eu sgorio bob dydd.

Amlygiadau arbrofol mewn llygod yw'r rhain, nid argymhellion dos ar gyfer pobl. Mae'r llwybr yn bwysig wrth ddehongli faint o'r cyffur sy'n cyrraedd y perfedd, a dylai llwybr nad yw wedi'i nodi aros heb ei nodi. Ni fyddai trosiad yn seiliedig ar bwysau'r corff yn cadarnhau trefn ddiogel neu effeithiol ar gyfer pobl.

Tabl tystiolaeth yr astudiaeth o'r microbiom

Mae'r tabl gwreiddiol hwn yn gwahanu'r arsylwadau a adroddwyd oddi wrth yr honiadau pellach y gallai darllenydd ddod ar eu traws. Mae enwau'r grwpiau bacteriol yn dilyn terminoleg y papur.

Haen dystiolaeth	Arsylwad neu fesuriad	Terfyn y dehongliad
Proffil bacteriol ar amlygiad is	Ar 15 mg/kg/day, newidiodd grwpiau penodol; cynyddodd Delta/Gammaproteobacteria yn gynnar ac ni chawsant eu canfod yn wythnos pedwar.	Gall sampl ar y pwynt terfyn fethu newidiadau cynharach. Mae peidio â chanfod yn dibynnu ar y prawf.
Proffil bacteriol ar amlygiad uwch	Ar 50 mg/kg/day, roedd canolrif Proteobacteria yn wythnos pedwar yn 7.49%, o gymharu â 1.61% yn y grŵp rheoli.	Nid yw cynnydd canrannol yn cadarnhau cynnydd absoliwt mewn celloedd byw.
Manylion tacsonomig	Nododd dilyniannu newidiadau o fewn grwpiau bacteriol eang.	Gall cyfanswm sefydlog ar gyfer ffylwm guddio newidiadau ymhlith ei aelodau.
Ymddygiad y lletywr	Gwellodd amlygiad is sgoriau cyfun y ddrysfa T; ni wnaeth amlygiad uwch hynny.	Perfformiad ar dasg benodol yw hwn, nid asesiad cynhwysfawr o wybyddiaeth.
Cysylltiad	Roedd cydberthyniad negyddol rhwng Deferribacteres a sgoriau'r ail ddiwrnod.	Nid yw cydberthyniad yn nodi organeb na mecanwaith achosol.
Gweithrediad y perfedd	Dim pwynt terfyn uniongyrchol ar gyfer y rhwystr berfeddol na metabolion.	Ni all yr astudiaeth gadarnhau bod athreiddedd wedi'i adfer neu fod gweithrediad microbaidd wedi gwella.
Profi achosiaeth	Dim arbrawf trosglwyddo neu ddisbyddu microbiota.	Mae'n parhau'n ansicr a oedd microbau'n cyfryngu'r effaith ymddygiadol.

Mae'r tabl wedi'i rannu'n fwriadol yn ôl yr hyn a fesurwyd. Ni all ateb ffafriol mewn un rhes lenwi bwlch mewn rhes arall. Er enghraifft, nid yw perfformiad gwell mewn drysfa yn darparu'r dystiolaeth sydd ar goll ynghylch llid berfeddol.

Pam nad yw canrannau bacteriol yn dangos beth a laddwyd

Mae'r term digonedd cymharol yn disgrifio cyfran grŵp o'r gymuned a fesurwyd. Mae'n wahanol i nifer y celloedd bacteriol fesul gram o ysgarthion. Yn eu hastudiaeth o broffilio meintiol y microbiom, dangosodd Vandeputte a'i gydweithwyr pam mae llwyth microbaidd yn bwysig wrth ddehongli gwahaniaethau rhwng cymunedau.

Ystyriwch sampl enghreifftiol sy'n cynnwys deg uned o organeb A a 90 o organebau eraill. Mae A yn cyfrif am 10%. Os yw A yn aros ar ddeg tra bod y lleill yn gostwng i 40, mae A bellach yn cyfrif am 20%. Dyblodd ei gyfran heb unrhyw gynnydd yn ei faint absoliwt. Nid yw'r enghraifft rifyddol hon yn ganlyniad o'r arbrawf glas methylen.

Mae'r un gwahaniaeth yn cyfyngu ar honiadau ynghylch lladd bacteria. Nid yw cyfran sy'n seiliedig ar DNA yn brawf uniongyrchol o oroesiad. I gadarnhau bod bacteria hyfyw wedi'u colli, mae angen mesuriadau ar arbrawf sy'n ymdrin â hyfywedd ac yn rhoi cyfrif am gyfanswm y boblogaeth. I gadarnhau newid swyddogaethol, mae angen mesuriad swyddogaethol perthnasol, megis metabolyn wedi'i fesur yn hytrach na rhagfynegiad sy'n seiliedig ar enwau bacteria yn unig.

Mae labeli eang hefyd yn cuddio amrywiad biolegol. Mae trin ffylwm cyfan fel un buddiol neu niweidiol yn anwybyddu'r organebau a'r gweithgareddau sy'n gyfrifol am ganlyniad penodol. Felly nid yw newid mewn cymhareb, ar ei ben ei hun, yn ddiagnosis o ddysbiosis nac yn dystiolaeth bod dysbiosis wedi'i wella.

A oedd y microbiom yn esbonio canlyniad y ddrysfa?

Roedd yr arbrawf yn cynnwys yr amlygiad i'r cyffur, y proffil bacteriol a'r ymddygiad yn yr un astudiaeth. Mae hynny'n ddefnyddiol ar gyfer llunio rhagdybiaeth. Ein dehongliad ni yw nad yw'r dyluniad yn gwahaniaethu rhwng sawl esboniad posibl: effaith uniongyrchol y cyffur ar ymddygiad, effaith ficrobaidd anuniongyrchol, neu ymatebion ar wahân gan yr ymddygiad a'r bacteria i'r un amlygiad.

Byddai arbrawf cyfryngu cryfach yn newid y cyfryngwr microbaidd arfaethedig yn annibynnol ar y cyffur. Gallai ymchwilwyr brofi a yw trosglwyddo cymuned ddiffiniedig yn trosglwyddo effaith, neu a yw dileu llwybr microbaidd arfaethedig yn ei hatal. Mae arbrofion o'r fath hefyd yn gofyn am reolaethau ar gyfer beth arall sy'n cael ei drosglwyddo neu ei newid.

Mae angen darllen y pwynt terfyn ymddygiadol yr un mor ofalus. Mae drysfa gyda gwobrau yn gofyn i anifail wneud dewisiadau o dan amodau penodol. Fel egwyddor asesu, gall perfformiad ddibynnu ar barodrwydd i archwilio, symudiad, cymhelliant i gael gwobr, a dysgu. Mae galw canlyniad yn “wybyddiaeth well” yn cywasgu'r gwahaniaethau hyn. Y dasg a fesurwyd yn uniongyrchol yw'r disgrifiad mwy addysgiadol o hyd.

A yw glas methylen yn lladd bacteria'r perfedd?

Gall glas methylen gyfrannu at weithgarwch gwrthficrobaidd o dan amodau labordy diffiniedig. Nid yw hynny'n nodi beth sy'n digwydd i'r gymuned berfeddol gyfan ar ôl amlygiad drwy'r geg.

Er enghraifft, profodd astudiaeth labordy o anactifadu bacteria yn ffotodynamig E. coli ac S. aureus gyda ffotosensiteiddwyr a goleuo rheoledig. Asesodd ffurfio cytrefi a difrod i bilenni, ac roedd yn cynnwys rheolaethau cyfatebol yn y tywyllwch. Nid oedd golau na ffotosensiteiddiwr ar eu pen eu hunain yn cael unrhyw effaith o dan yr amodau hynny a brofwyd.

Mae'r rheolaethau hynny'n ateb cwestiwn achosol pwysig o fewn yr arbrawf hwnnw: pa gyfraniad a wnaeth y cyfuniad? Nid yw llyncu sylwedd yn atgynhyrchu goleuo ataliant bacteriol. Ar y llaw arall, nid yw canlyniad negyddol mewn rheolaeth yn y tywyllwch ar un crynodiad ac am un hyd yn profi bod pob amlygiad heb oleuo yn anweithredol yn fiolegol. Mae'r trosolwg o ymchwil gwrthficrobaidd yn esbonio'r gwahaniaethau hyn sy'n dibynnu ar yr amodau.

Ni all astudiaeth o gymuned berfeddol chwaith gadarnhau triniaeth ar gyfer haint penodol. Mae adnabod yr organeb a dangos canlyniad clinigol priodol yn dasgau ar wahân, gan gynnwys wrth asesu honiadau ynghylch trin parasitiaid.

Beth mae hyn yn ei olygu i honiadau am iechyd perfedd pobl

Ni nododd y chwiliad llenyddiaeth penodol ar gyfer yr erthygl hon dreial rheoledig o ficrobiom berfeddol pobl a oedd yn cadarnhau budd i iechyd y perfedd o las methylen. Datganiad am y dystiolaeth a ganfuwyd yw hynny, nid prawf nad oes astudiaeth berthnasol yn bodoli. Mae ymchwil mewn pobl ar driniaeth ffotodynamig leol yn y geg yn gwestiwn gwahanol: er enghraifft, cymerodd treial halitosis gyda 45 o bobl samplau o orchudd y tafod a mesurodd nwyon yn yr anadl, nid iechyd berfeddol.

I gefnogi honiad am iechyd perfedd pobl, byddai angen poblogaeth ddiffiniedig, fformiwleiddiad a llwybr y gellir eu hatgynhyrchu, cymharydd addas, a chanlyniad sy'n bwysig i'r boblogaeth honno. Gallai proffil microbaidd helpu i esbonio'r canlyniad, ond byddai angen asesu gwelliant mewn symptomau, rheoli clefydau ac effeithiau andwyol o hyd.

Ni all pedair wythnos mewn un model llygoden chwaith gadarnhau canlyniadau misoedd neu flynyddoedd o ddefnydd. Mae'r adolygiad o amlygiad dyddiol a hirdymor i las methylen yn gwahanu hyd y driniaeth oddi wrth arsylwi a phwyntiau terfyn diogelwch. I gael y cyd-destun clinigol ehangach, edrychwch ar yr hyn y mae ymchwil mewn pobl yn ei gefnogi.