Метыленавы сіні ў зніжэнні колькасці патагенаў у плазме: як працуе працэс

Метыленавы сіні можа спрыяць зніжэнню колькасці патагенаў у донарскай плазме, калі ён выкарыстоўваецца як частка кантраляванай сістэмы апрацоўкі. Апрацоўка адбываецца па-за арганізмам, да таго як плазму дапускаюць да пералівання. Яна спалучае вызначанае абсталяванне, уздзеянне фарбавальніка, асвятленне, фільтрацыю і праверкі атрыманага кампанента крыві.

Гэтае адрозненне вызначае, што азначаюць доказы. Даследаванне, якое паказвае, што сістэма апрацоўкі зніжае колькасць інфекцыйнага віруса ў пакеце з плазмай, пацвярджае вынік для гэтага матэрыялу і працэсу. Яно не пацвярджае, што прыём метыленавага сіняга лечыць інфекцыю ў чалавека.

Клінічна значнае пытанне таксама мае два бакі: наколькі працэс зніжае колькасць патагенаў і якая доля карысных функцый плазмы захоўваецца?

Пачынайце з плазмы, а не з нявызначанага прадукту крыві

Плазма — гэта вадкі кампанент крыві, які змяшчае бялкі, у тым ліку фактары згусання. Не варта лічыць, што сістэма апрацоўкі плазмы падыходзіць для цэльнай крыві, канцэнтратаў эрытрацытаў або трамбацытарных кампанентаў. Гэтыя матэрыялы маюць іншы склад і іншыя функцыі, якія неабходна захаваць.

У якасці канкрэтнага прыкладу сістэма THERAFLEX MB-Plasma кампаніі Macopharma апрацоўвае дозы плазмы ад аднаго донара. Яе дакументаваная паслядоўнасць уключае зніжэнне колькасці клетак, даданне метыленавага сіняга, асвятленне, выдаленне фарбавальніка і захоўванне. Вытворца апісвае розныя канфігурацыі для плазмы, атрыманай з цэльнай крыві, і для большых аб'ёмаў, сабраных метадам аферэзу. Таму зыходны матэрыял і аднаразовы набор маюць значэнне яшчэ да пачатку асвятлення.

«Плазма з метыленавым сінім» — гэта апісанне апрацаванага кампанента, а не поўная спецыфікацыя. Для змястоўнага параўнання трэба пазначыць сістэму, канфігурацыю, крыніцу плазмы і версію інструкцыі па эксплуатацыі.

Прасочвайце матэрыял праз этапы апрацоўкі і ацэнкі

Ілюстрацыя вышэй падзяляе працэс на этапы. Гэтая суправаджальная табліца тлумачыць, што дае кожны этап і чаго ён сам па сабе не можа пацвердзіць.

Табліца дапамагае разумець валідзіраваны працэс, але не замяняе працоўную інструкцыю. У прыватнасці, фільтр для выдалення рэчываў і крыніца святла выконваюць розныя задачы. Macopharma апісвае Blueflex як сродак зніжэння колькасці метыленавага сіняга і яго вытворных, у тым ліку азуравых злучэнняў і тыяніну. Сцвярджэнне аб выдаленні хімічных рэчываў трэба разумець як вымеранае зніжэнне іх колькасці, а не як абяцанне, што не застанецца ніводнай малекулы.

Чаму крыніца святла з'яўляецца часткай уздзеяння

Метыленавы сіні фотаактыўны. Асвятленне можа выклікаць хімічнае пашкоджанне біялагічных мішэняў, таму гэтае спалучэнне даследавалі для інактывацыі вірусаў. У даследаванні Мора і яго калег, прысвечаным фенатыязінавым фарбавальнікам і святлу, змена крыніцы асвятлення змяняла як інактывацыю вірусаў, так і пашкоджанне бялкоў плазмы.

Гэта не дазваляе рабіць распаўсюджанае спрашчэнне: лічыць, што назва фарбавальніка апісвае ўсё ўздзеянне. Іншая лямпа, пакет, аптычны шлях або матэрыял могуць змяніць уздзеянне. Больш агульны матэрыял пра тое, як даследуюць фотадынамічную апрацоўку метыленавым сінім, тлумачыць, чаму склад сродку і асвятленне трэба апісваць разам.

Тэмпература — асабліва паказальны прыклад. У даследаванні 2018 года, прысвечаным апрацоўцы THERAFLEX пры розных тэмпературах, параўноўвалі плазму пры тэмпературах каля 5°C, 22°C і 30°C. Пры самай нізкай тэмпературы даследчыкі назіралі горшае растварэнне таблеткі і слабейшую інактывацыю трох даследаваных вірусаў. Больш высокія тэмпературы ўзмацнялі змены часу згусання і страты актыўнасці фактараў згусання.

Гэтыя вынікі не задаюць новы працоўны дыяпазон. Яны тлумачаць, чаму служба крыві павінна прытрымлівацца зададзеных умоў: паляпшэнне аднаго выніку праз змену параметра можа пагоршыць іншы.

Якая частка сістэмы знізіла колькасць мікраарганізмаў?

Зніжэнне колькасці патагенаў, вымеранае пасля ўсяго працэсу, нельга аўтаматычна прыпісваць толькі фарбавальніку, актываванаму святлом.

У даследаванні 2015 года з наўмысна забруджанай плазмай даследчыкі бралі ўзоры матэрыялу пасля асобных этапаў апрацоўкі. Значная частка зніжэння колькасці бактэрый прыпадала на фільтрацыю клетак. Для дробнай бактэрыі Brevundimonas diminuta гэты першы этап забяспечыў зніжэнне на 1.7 log; наступная апрацоўка святлом і фільтрацыя фарбавальніка давялі агульнае зніжэнне прынамсі да 3.7 log, ніжэй за мяжу выяўлення аналізу.

Гэта вынік для камбінаванай сістэмы. Ён не паказвае, што звычайны раствор метыленавага сіняга забяспечвае такое ж зніжэнне колькасці бактэрый. Гэтае адрозненне таксама важнае пры чытанні больш шырокіх даследаванняў антымікробнага дзеяння метыленавага сіняга.

Лагарыфмічнае зніжэнне апісвае суадносіны паміж вымеранай зыходнай колькасцю інфекцыйнага матэрыялу і колькасцю, якая засталася. Зніжэнне на тры лагарыфмічныя адзінкі азначае зніжэнне ў тысячу разоў. «Ніжэй за мяжу выяўлення» азначае, што аналіз не змог колькасна вызначыць рэшту ва ўмовах выпрабавання. Гэта не доказ абсалютнай стэрыльнасці або ўніверсальнай актыўнасці супраць мікраарганізмаў, якія не даследаваліся. Від віруса, зыходная колькасць патагенаў, матрыца ўзору і адчувальнасць аналізу застаюцца неабходнымі складнікамі такога сцвярджэння.

Захоўвайце функцыю, дзеля якой будзе выкарыстоўвацца плазма

Працэс можа зніжаць інфекцыйнасць і адначасова змяняць клінічна важныя бялкі. Таму вымярэнне толькі зніжэння колькасці патагенаў пакідае ацэнку няпоўнай.

У параўнанні крыніц плазмы і тэрмінаў апрацоўкі, праведзеным у 2014 годзе, захаванасць фактару VIII пасля апрацоўкі метыленавым сінім у розных серыях даследавання складала ад 78% да 89%. Захаванасць залежала ад крыніцы плазмы; даследчыкі таксама ацэньвалі фібрынаген. Гэта лабараторныя вымярэнні апрацаванага кампанента. Яны не з'яўляюцца працэнтамі клінічнай эфектыўнасці ў пацыентаў.

Разгледзьце дзве дозы плазмы з рознымі зыходнымі ўзроўнямі фактараў. Нават калі падчас апрацоўкі яны захоўваюць аднолькавую долю актыўнасці, іх канчатковыя ўзроўні будуць адрознівацца. І наадварот, вышэйшы працэнт захаванасці не абавязкова азначае вышэйшую канчатковую канцэнтрацыю. Улічвайце і вымярэнні да і пасля апрацоўкі, і спецыфікацыю допуску да выкарыстання, якая прымяняецца да кампанента.

Вынікі для пацыентаў патрабуюць іншага тыпу доказаў. Даследаванне якасці кампанента само па сабе не можа пацвердзіць эквівалентны кантроль крывацёку, патрэбу ў пераліваннях або частату непажаданых з'яў у пэўнай папуляцыі пацыентаў.

Аддзяляйце доказы, якія тычацца апрацоўкі, ад сцвярджэнняў пра лячэнне

Пакет з плазмай робіць кантраляванае ўздзеянне магчымым: ён мае вызначаны аб'ём, геаметрыю, паслядоўнасць апрацоўкі і вымерны вынік. У чалавека ёсць тканкі, кровазварот, метабалізм і ачагі інфекцыі, якія гэты эксперымент не ўзнаўляе.

Таму сцвярджэнні пра лячэнне ВІЧ у параўнанні з доказамі інактывацыі ў плазме і доказы адносна метыленавага сіняга пры COVID-19 і працяглым COVID патрабуюць асобнай клінічнай ацэнкі. Дэманстрацыя зніжэння інфекцыйнасці ў донарскім матэрыяле не адказвае ні на адно з гэтых пытанняў.

Для выкарыстання ў службе крыві ацэньвайце канкрэтны кампанент і сістэму, дазволеную ў адпаведнай краіне, яе валідацыю для асобных мікраарганізмаў, захаваную функцыю бялкоў, рэшткавыя хімічныя рэчывы і кантроль допуску да выкарыстання. Як адзначае вытворца, даступнасць прадукту адрозніваецца паміж краінамі. Выкарыстанне ў мінулым або паспяховы эксперымент не пацвярджаюць наяўнасці дзейнага дазволу паўсюль. Значнай адзінкай доказаў з'яўляецца поўны валідзіраваны працэс, ужыты да вызначанага для яго кампанента плазмы.