የሜቲሊን ሰማያዊ ሟሟትና ሶሉሽን ዝግጅት፦ የላቦራቶሪ መመሪያ

ሁለት ቴክኒሺያኖች እያንዳንዳቸው ከዱቄት 1 በመቶ የሜቲሊን ሰማያዊ ሶሉሽን ያዘጋጃሉ። አንዱ 1.00 ግራም መዝኖ በፍላስኩ ውስጥ ያለውን ይዘት ወደ 100 mL ያደርሳል። ሌላው 1.00 ግራም መዝኖ በ100 mL ውሃ ላይ ይጨምረዋል፣ ዝግጅቱንም እንደተጠናቀቀ ይቆጥረዋል። ሦስተኛ ቴክኒሺያን ደግሞ ከሌላ የምርት ስብስብ 1.00 ግራም መዝኖ በመለኪያ ሊታወቅ የሚችል የተለየ ክምችት ያገኛል። ሦስቱም ጠርሙሶች ተመሳሳይ መለያ አላቸው። አንዳቸውም መለያው የሚገልጸውን በትክክል አልያዙም፤ ልዩነቶቹም በቀላሉ ከሚደባለቁ ሦስት ጽንሰ ሐሳቦች ይመጣሉ፦ አሟሚው ምን ያህል ሊይዝ እንደሚችል፣ የተመዘነው ዱቄት በእውነቱ ምን እንደሆነ እና የበመቶ መጠኑ ምን እንደሚያመለክት።

ይህ መመሪያ የሚመለከተው የላቦራቶሪ ዝግጅትን ብቻ ነው፦ ማቅለሚያዎች፣ አመልካቾች፣ የትንተና መነሻ ሶሉሽኖች እና ለሥራ የሚውሉ የተቀጠኑ ሶሉሽኖች። በአፍ የሚወሰድ ወይም በመርፌ የሚሰጥ መድኃኒት ማዘጋጃ አይደለም፤ እዚህ የተጠቀሱትን ክምችቶችም እንደ መድኃኒት መጠን መተርጎም የለበትም።

የመሟሟት አቅም ምን ይወስናል፣ ምንስ አይወስንም?

ከቀለም ንጥረ ነገሮች አንጻር ሲታይ፣ ሜቲሊን ሰማያዊ በውሃ ውስጥ ከፍተኛ የመሟሟት አቅም አለው። የPubChem የሜቲሊን ሰማያዊ ውህድ መዝገብ በ25 C ወደ 43.6 ግራም በሊትር እንደሚሟሟ ይገልጻል፤ ይህም 4.36 ግራም በ100 mL፣ ወይም 4.36 በመቶ w/v ማለት ነው። በተመሳሳይ የሙቀት መጠን የተካሄደ ገለልተኛ የሚዛናዊ ሁኔታ ጥናት 43.21 g/L ለክቷል፣ በሙከራው የስህተት ወሰን ውስጥም የቀድሞውን እሴት አረጋግጧል።

ይህ ቁጥር ከፍተኛው ገደብ እንጂ የሚፈለግ መጠን አይደለም። 1 በመቶ መነሻ ሶሉሽን 10 g/L ነው፣ ይህም ከገደቡ አንድ አራተኛ ያነሰ ነው። 0.1 በመቶ መነሻ ሶሉሽን 1 g/L ነው፣ በግምትም የገደቡ አንድ አርባኛ ነው። 1 በመቶ ዝግጅት በክፍል ሙቀት በትክክል ከተቀላቀለ በኋላ የማይሟሙ ጠጣር ቅንጣቶች ከቀሩበት፣ ችግሩ የመሟሟት ገደብ መሆኑ እጅግ ያልተለመደ ነው። ብዙውን ጊዜ መንስኤው በቂ አለመርጠብ፣ ቀዝቃዛ ውሃ፣ ተጨማሪ ጊዜ የሚያስፈልጋቸው የዱቄት ጉብታዎች ወይም በስህተት የተለየ ሟሚ ንጥረ ነገር ነው። ሞቅ ያለ ውሃ እና መቀስቀስ ከእነዚህ አብዛኞቹን ይፈታሉ። ማሞቅ ከተጠቀሙ፣ የመጨረሻ ይዘቱን ከማስተካከልዎ በፊት ፍላስኩ ወደ ተመጣጠነበት የሙቀት መጠን እንዲመለስ ያድርጉ።

በሌሎች አሟሚዎች ውስጥ ያለው የመሟሟት አቅም ዝቅተኛ ነው፣ በተለያዩ ምንጮች የሚቀርቡት እሴቶችም ብዙ ይለያያሉ። የዚህ አንዱ ምክንያት የተፈተነው ንጥረ ነገር የሃይድሬት ሁኔታ መለያየቱ ነው። ለመደበኛ የላቦራቶሪ መነሻ ሶሉሽኖች ውሃ ዋናው ማጣቀሻ አሟሚ ሆኖ ይቀጥላል። ኤታኖል ቀለሙን ያሟሟል፣ ነገር ግን ከውሃ በጣም ያነሰ መጠን ይይዛል። ክሎሮፎርምም ያሟሟዋል፣ ፒሪዲን በጥቂቱ ብቻ ያሟሟዋል፣ ዳይኤቲል ኤተር ደግሞ በመሠረቱ አያሟሟውም። በተከታታይ ልኬቶች ውስጥ አሴቶን እና ኤቲል አሴቴት ከውሃ እጅግ ያነሰ የመሟሟት አቅም ያሳያሉ። ውሃ ባልሆነ አሟሚ ለሚሠራ ሥራ፣ በማጣቀሻ መጽሐፍ ያለን ማንኛውንም ቁጥር እንደ መነሻ ግምት ይውሰዱትና በተጨባጭ በሚጠቀሙበት የምርት ስብስብ ያረጋግጡት፤ እንደ ዝግጅት ገደብ አይውሰዱት። ተግባራዊው ነጥብ ቀላል ነው፦ ዓላማው 1 በመቶ ወይም ከዚያ በታች የሆነ በግልጽ የተወሰነ የውሃ ሶሉሽን ክምችት ከሆነ፣ ውሃ ከመሟሟት ገደቡ በቂ ርቀት ይሰጣል።

ዱቄቱ አንድ ወጥ ነገር አይደለም

ለላቦራቶሪ አገልግሎት የሚሸጠው የሜቲሊን ሰማያዊ ዱቄት በክሪስታል መዋቅሩ ውስጥ ውሃ የያዘ የክሎራይድ ጨው ነው፣ የዚያም ውሃ መጠን ይለያያል። ውሃ የሌለው አዮን ሞለኪውላዊ ክብደት 319.85 g/mol ነው። በተለምዶ የሚጠቀሰው ትራይሃይድሬት 373.90 g/mol፣ ፔንታሃይድሬት ደግሞ 409.93 g/mol ነው። እነዚህ እሴቶች ከPubChem መዝገብ ጋር በተጠቃለለው የUSP ሞኖግራፍ መረጃ በሰንጠረዥ ተቀምጠዋል።

በገበያ ያሉ ጠርሙሶች ብዙውን ጊዜ ትራይሃይድሬት፣ CAS 7220-79-3 የሚል መለያ ይይዛሉ። ነገር ግን በጠጣር ሁኔታ ላይ የተሠሩ ጥናቶች ተጨባጩ ንጥረ ነገር ፔንታሃይድሬት፣ ወደ 2.2 የውሃ ሞለኪውሎች የያዘ ከፊል ሃይድሬት፣ ዳይሃይድሬት ወይም ሞኖሃይድሬት ሊሆን እንደሚችል አሳይተዋል፤ በአንዳንድ ትንተናዎችም የተለየ ክሪስታላዊ የትራይሃይድሬት ፌዝ አልተገኘም። ቀለሙ እርጥበትንም ይስባል፣ ስለዚህ የተከፈተ ጠርሙስ የውሃ ይዘት በጊዜ ሂደት ይለዋወጣል። ለጥራታዊ ማቅለም ይህ እምብዛም ግምት ውስጥ አይገባም። ለመጠናዊ የትንተና ሥራ ግን በጣም ወሳኝ ነው። ለዚህም ነው በትንተና የምስክር ወረቀት ላይ ያለውን የንጥረ ነገሩ መጠንና የውሃ ይዘት የማንበብ መመሪያ በፊት መለያው ላይ ካለው ትራይሃይድሬት የሚል ቃል ይልቅ የምርት ስብስቡን ሰነድ እንደ ዋና ማስረጃ የሚወስደው።

ከዚህ ሁለት የማስተካከያ መንገዶች ይከተላሉ፣ በአንድ ጊዜም አንዱን ብቻ መጠቀም ይገባል። የምስክር ወረቀቱ የንጥረ ነገሩን መጠን እና የውሃ ይዘት ወይም በማድረቅ የሚቀንሰውን ክብደት ከገለጸ፣ እነዚያን ቁጥሮች በቀጥታ ይጠቀሙ። የምስክር ወረቀት መረጃ ከሌለ እና ክምችቱ ውሃ በሌለው ንጥረ ነገር አቻ መሠረት መገለጽ ካለበት፣ የሃይድሬቱን ንድፈ ሐሳባዊ ማባዣ ይጠቀሙ፦ ትራይሃይድሬት ተብሎ ለተገለጸ ዱቄት 373.90 ሲካፈል በ319.85፣ ወይም 1.169፤ ፔንታሃይድሬት ተብሎ ለተገለጸ ዱቄት ደግሞ 409.93 ሲካፈል በ319.85፣ ወይም 1.282። ሁለቱንም ማስተካከያዎች በአንድ ጊዜ አይተግብሩ። ይህ ውሃውን ሁለት ጊዜ መቁጠር ይሆናል።

በመቶ ማለት ምን ማለት ነው?

በመቶ w/v ማለት በመጨረሻው ሶሉሽን እያንዳንዱ 100 mL ውስጥ ያለው የተገለጸው ሟሚ ንጥረ ነገር በግራም የሚለካ መጠን ማለት ነው፤ በመነሻው ውሃ እያንዳንዱ 100 mL ማለት አይደለም። ስለዚህ 1 በመቶ w/v ማለት በመጨረሻው 100 mL ውስጥ 1.000 g ነው፣ ይህም ከ10 mg/mL ወይም 10 g/L ጋር እኩል ነው። 0.1 በመቶ ሶሉሽን ማለት በመጨረሻው 100 mL ውስጥ 0.100 g ነው፣ ይህም ከ1 mg/mL ጋር እኩል ነው። 1 በመቶን ከ1 mg/mL ጋር ማደባለቅ የተለመደ የአሥር እጥፍ ስህተት ነው፤ ለዚህ ስህተት እያንዳንዱን መለያ መፈተሽ ይጠቅማል።

የትርጉሙ ሁለተኛ ክፍል የሟሚው ንጥረ ነገር መግለጫ ነው። እንደተመዘነው የትራይሃይድሬት ዱቄት 1 በመቶ ሶሉሽን እና ውሃ በሌለው ንጥረ ነገር አቻ መሠረት የተገለጸ 1 በመቶ ሶሉሽን የተለያዩ ሶሉሽኖች ናቸው። ከታች ያሉት የስሌት ምሳሌዎች በእያንዳንዱ ጊዜ የመጨረሻ ይዘቱንም መሠረቱንም ይገልጻሉ። ይህ ልማድ ከላይ የተጠቀሰውን የሦስቱን ቴክኒሺያኖች ችግር ይከላከላል።

የሃይድሬት ግምቶቻቸው የተገለጹ የዝግጅት ስሌት ምሳሌዎች

ሁሉም ምሳሌዎች የተገለጸውን ሃይድሬት ንጹሕ ዱቄት እና በክፍል ሙቀት ያለ ውሃ እንደ አሟሚ ይወስዳሉ። ለሌሎች ይዘቶች መጠኖቹን በቀጥታ ተመጣጣኝ መልኩ ያስተካክሉ።

ምሳሌ A፦ እንደተመዘነው ትራይሃይድሬት መሠረት 100.0 mL የ1 በመቶ w/v ሶሉሽን። 1.000 g የሜቲሊን ሰማያዊ ትራይሃይድሬት ይመዝኑ። ወደ 70 mL የተጣራ ውሃ ይጨምሩ፣ ሙሉ በሙሉ እስኪሟሟ ድረስ ይቀስቅሱ ወይም በክብ እንቅስቃሴ ያወዛውዙ፣ በማለቅለቅ ምንም ሳይቀር ወደ 100.0 mL የይዘት መለኪያ ፍላስክ ያስተላልፉ፣ ከዚያም ውሃ እስከ ምልክቱ ይጨምሩ። ሟሚው ንጥረ ነገር ትራይሃይድሬቱ ራሱ ስለሆነ፣ የሞለኪውላዊ ክብደት ማስተካከያ አያስፈልግም። ውጤት፦ በመጨረሻው 100.0 mL ውስጥ 1.000 g፣ ወይም እንደተመዘነው ዱቄት 10 mg/mL።

ምሳሌ B፦ ትራይሃይድሬት ተብሎ ከተገለጸ ዱቄት፣ ውሃ በሌለው ንጥረ ነገር አቻ መሠረት 100.0 mL የ1 mg/mL ሶሉሽን። የሚፈለገው በመጨረሻው 100.0 mL ውስጥ 100.0 mg ውሃ የሌለው ሜቲሊን ሰማያዊ ነው። የሦስቱን የውሃ ሞለኪውሎች ማስተካከያ ለማድረግ በ1.169 ያባዙ፦ 100.0 mg ሲባዛ በ1.169 ከ116.9 mg ጋር እኩል ነው። ትራይሃይድሬት ተብሎ ከተገለጸው ዱቄት 116.9 mg ይመዝኑ፣ በ70 mL ገደማ ውሃ ውስጥ ያሟሙ እና በይዘት መለኪያ ፍላስክ ውስጥ የመጨረሻ ይዘቱን ወደ 100.0 mL ያድርሱ። ፔንታሃይድሬት ተብሎ ከተገለጸ ዱቄት ከሆነ ማባዣው 1.282 ነው፣ ስለዚህ ለተመሳሳይ የታለመ መጠን 128.2 mg ያስፈልጋል። የትኛው ማባዣ እንደተጠቀሙ በመለያው ላይ ይመዝግቡ።

ምሳሌ C፦ ሜቲሊን ሰማያዊን ከ1 በመቶ መነሻ ሶሉሽን ወደ 0.1 በመቶ ማቅጠን። C1V1 ከC2V2 ጋር እኩል ነው የሚለውን ይጠቀሙ። ከ1.0 በመቶ መነሻ ሶሉሽን 100.0 mL የ0.1 በመቶ ሶሉሽን ለማዘጋጀት፣ የሚያስፈልገው የመነሻ ሶሉሽን ይዘት 0.1 ሲባዛ በ100.0 እና ሲካፈል በ1.0 ነው፣ ይህም 10.0 mL ነው። ከ1 በመቶ መነሻ ሶሉሽኑ 10.0 mL በፒፔት ወስደው ወደ 100.0 mL ፍላስክ ያስገቡና ውሃ እስከ ምልክቱ ይጨምሩ። የጅምላ አሃዶችን ለሚመርጡ ተንታኞች፦ 1 በመቶ 10 mg/mL ነው፣ ስለዚህ 10.0 mL ውስጥ 100 mg አለ፣ በመጨረሻው 100.0 mL ውስጥ 100 mg ደግሞ 1 mg/mL ነው፣ ይህም 0.1 በመቶ ነው።

ምሳሌ D፦ ከ1 mg/mL መነሻ ሶሉሽን 1.000 L የ10 mg/L የሥራ ሶሉሽን። 1 mg/mL መነሻ ሶሉሽን 1000 mg/L ነው። የሚያስፈልገው ይዘት 10 ሲባዛ በ1.000 እና ሲካፈል በ1000 ነው፣ ይህም 0.0100 L፣ ወይም 10.0 mL ነው። 10.0 mL መነሻ ሶሉሽን በፒፔት ይውሰዱና ውሃ በመጨመር እስከ 1.000 L የመጨረሻ ይዘት ያቅጥኑ። 10,000 mg/L ካለው 1 በመቶ መነሻ ሶሉሽን ከሆነ፣ ለተመሳሳይ የታለመ መጠን 1.00 mL ብቻ ወስዶ ወደ 1.000 L ማድረስ ያስፈልጋል። ጥምርታው ከአንድ መቶ ገደማ ሲበልጥ፣ በሁለት ደረጃዎች ተከታታይ ማቅጠን በአንድ ጊዜ በማይክሮሊትር መጠን ከማስተላለፍ የበለጠ ትክክለኛነት ይሰጣል።

እያንዳንዱ ምሳሌ ሙሉ መግለጫ የሚሆነው ሦስት ነገሮችን ስለያዘ ብቻ ነው፦ የተመዘነውን ጅምላ ከሃይድሬት ግምቱ ጋር፣ የሶሉሽኑን የመጨረሻ ይዘት እና የተገለጸውን ክምችት መሠረት። ከሦስቱ አንዱ እንኳን የጎደለበትን የማስታወሻ ደብተር መዝገብ በትክክል ደግሞ መሥራት አይቻልም።

የተለመዱ ስህተቶችን የሚያስወግድ አሠራር

መጀመሪያ ዱቄቱን ከመጨረሻው ይዘት ባነሰ ውሃ ውስጥ ያሟሙ፣ ከዚያም ወደ መጨረሻው ይዘት ያድርሱ። ዱቄትን በቀጥታ በሙሉ የመጨረሻ ይዘት ውሃ ላይ መጨመር ጠቅላላ ይዘቱ ከታለመው ምልክት የሚበልጥ ሶሉሽን ይፈጥራል፣ ክምችቱም ዝቅተኛ ይሆናል። ምንም ቀለም እንዳይቀር ቢከሩን አለቅልቀው ፈሳሹን ወደ ፍላስኩ ያስገቡ፤ ጥልቅ ቀለሙ አነስተኛ ኪሳራዎችን እንኳን በዓይን እንዲታዩ ያደርጋል። ይህም ምንም ሳይቀር ለማስተላለፍ ካበረታታዎት ጥቅም ነው።

ወደ መጨረሻው ይዘት ከማድረስዎ በፊት ምንም ቅንጣት እስኪቀር ድረስ ያዋህዱ፣ ወደ ብርሃን በማዞርም ይመርምሩ። ያጣሩት ዘዴው ሲጠይቅ ብቻ ነው። ሜቲሊን ሰማያዊ በአንዳንድ የማጣሪያ ሽፋን ቁሶች ገጽ ላይ ይጣበቃል፣ ስለዚህ ማጣራት ክምችቱ ገና በመለካት የተረጋገጠ መነሻ ሶሉሽን ክምችትን ሊቀንስ ይችላል። ይህ ነጥብ በሽፋን ገጽ ላይ የመጣበቅ ጥናቶች ተመዝግቧል፣ ማጣራት ወይም ክምችትን ማረጋገጥ የዘዴው አካል በሆነ ጊዜ ሁሉም ማስታወስ ይገባል። የተጣራ መነሻ ሶሉሽን ክምችት በምስክር ወረቀት መረጋገጥ ካለበት፣ ክምችቱን ከማጣራት በፊት ሳይሆን ከማጣራት በኋላ ያረጋግጡ።

የተዘጋጁ ሶሉሽኖችን ከጠንካራ ብርሃን ጠብቀው፣ በአምበር ቀለም ያላቸው ወይም ብርሃን በማያሳልፉ ጠርሙሶች ውስጥ በክፍል ሙቀት ያከማቹ። በመለያው ላይም ሟሚውን ንጥረ ነገር፣ የሃይድሬት መሠረቱን፣ ክምችቱን፣ አሟሚውን፣ ቀኑን እና አዘጋጁን ይጻፉ። ለተከታታይ ብርሃን በመጋለጥ ቀለሙ መደብዘዝ የታወቀ የመበላሸት መንገድ ነው። ስለዚህ ቀለሙ የተረጋጋ ቢመስልም፣ የመስኮት ጠርዞችና ብርሃን ያላቸው ማቀዝቀዣዎች ጥሩ ማከማቻዎች አይደሉም። የመረጋጋት ግምቶችና የድጋሚ ምርመራ ክፍተቶች በተዘጋጁ ሶሉሽኖች ማከማቻና መረጋጋት መመሪያ ውስጥ ይዳሰሳሉ። እንደ ተግባራዊ ደንብ ግን፣ የትንተና መነሻ ሶሉሽኖችን ያለ ጊዜ ገደብ ከመተማመን ይልቅ አዲስ ማዘጋጀት ወይም ዳግም ማረጋገጥ ይገባል።

ዱቄቱንና ከፍተኛ ክምችት ያላቸውን መነሻ ሶሉሽኖች በጓንት፣ በዓይን መከላከያ፣ በላቦራቶሪ ካፖርት እና በሥራ ጠረጴዛ መሸፈኛ ይያዙ፤ ለጠርሙሶቹም ፍሳሽ የሚይዝ ተጨማሪ እቃ ይጠቀሙ። ቀለሙ ቆዳን፣ ልብስን፣ የሥራ ጠረጴዛዎችን እና ፕላስቲኮችን በፍጥነት ያቆሽሻል። የአቅራቢዎች የደህንነት መረጃ ወረቀቶችም እንደ ጥራት ደረጃው ዱቄቱን ሲዋጥ ጎጂ እና ለዓይንና ለቆዳ አስቆጪ ብለው ይመድባሉ። ሙሉ ጥንቃቄዎች በደህንነት የመያዝና የማከማቸት አሠራሮች ውስጥ ይዳሰሳሉ። ሆኖም የቀለም እድፍን መቆጣጠር በራሱ የጥራት እርምጃ ነው፦ በመስታወት እቃዎችና በፒፔቶች ላይ የቀረ ቀለም በእጅግ አነስተኛ መጠን ለሚገኙ ንጥረ ነገሮች ትንተና የተሻጋሪ ብክለት ምንጭ ነው።

ስለ ጥራት ደረጃ ማስታወሻ

ለማቅለሚያ መታጠቢያዎችና ለማሳያዎች፣ በትክክለኛው ክምችት የተዘጋጀ ማንኛውም ንጹሕ የላቦራቶሪ ደረጃ ምርት ይሠራል። ለመጠናዊ ወይም ለንጽጽር ሥራ ግን የጥራት ደረጃው ወሳኝ ነው፣ ምክንያቱም የቆሻሻ ንጥረ ነገሮቹ ይለያያሉ፦ የቀሩ Azure B እና ተዛማጅ ታያዚኖች፣ ከባድ ብረቶች፣ የቀሩ አሟሚዎች እና የጥቃቅን ሕይወታውያን ጫና። ለዚህም ነው በሙሉ የትንተና የምስክር ወረቀት የተደገፈ የጥራት ደረጃ መምረጥ ከዝግጅቱ በኋላ የሚታሰብ ተጨማሪ ጉዳይ ሳይሆን የዝግጅቱ አካል የሆነው። የተሟላ የምርት ስብስብ ሰነድ የንጥረ ነገሩን ማንነት፣ የተለካውን መጠን ከመሠረቱ ጋር፣ የውሃ ይዘትን እና በተጨባጭ የተፈተኑትን የቆሻሻ ንጥረ ነገሮች ስብስብ ይገልጻል። በዚህም ከላይ ባሉት ምሳሌዎች የሃይድሬት ማስተካከያ፣ ትራይሃይድሬት ነው የሚል የመለያ ግምት ሳይሆን የተለኩ እሴቶችን ይጠቀማል። ሁለት የምርት ስብስቦች ከተመሳሳይ የተመዘነ ጅምላ የተለያዩ ክምችቶችን ሲሰጡ፣ የምስክር ወረቀቱ ብዙውን ጊዜ ምክንያቱን ያብራራል።