Ang methyl blue ay hindi methylene blue: mga CAS number, estruktura, at gamit

May dalawang bote sa mesa ng laboratoryo. Methyl blue ang nakasulat sa isa. Methylene blue naman sa kabila. Para sa pagod na mambabasa, parang iisang salita lang ang nabasa niya nang dalawang beses. Sa kimika, dalawang magkaibang molekula ang mga ito.

Isa itong problema sa pagpapangalan na may praktikal na mga kahihinatnan. Kapag maling pangkulay ang naorder, iba ang magiging resulta ng pagkukulay, hindi lilitaw ang inaasahang redox indicator, o magkakaroon ang pormulasyon ng isang tambalang walang sinumang nagpatunay na angkop. Simple ang solusyon: ituring na pahiwatig ang karaniwang pangalan at gawing batayan ng pasya ang identifier. Suriin muna ang CAS number, Colour Index number, at anyong hydrate bago ang anumang iba pa.

Ang maikling sagot

Ang methylene blue ay isang maliit na kationikong pangkulay na phenothiazine, C.I. 52015, na may siksik na chromophore na binubuo ng tatlong singsing at dalawang grupong dimethylamino. Ang methyl blue ay isang malaking anionikong pangkulay na triarylmethane, C.I. 42780, na binubuo ng mga yunit ng sulfonated triphenylmethane. Magkapareho ang kanilang pangkat ng kulay at bahagi ng pangalan. Halos wala na silang iba pang pagkakatulad.

Mas malapit ang toluidine blue O sa methylene blue. Pareho silang kationikong pangkulay na thiazine, ngunit may isang grupong amino at isang methyl substituent sa singsing ang toluidine blue O sa bahaging kinaroroonan ng ikalawang grupong dimethylamino ng methylene blue. Binabago ng maliit na pagkakaibang iyon ang rurok ng pagsipsip nito at ang pagpili nito sa mga bahaging kinukulayan, kaya hindi rin maaaring ipagpalit ang dalawa.

Talahanayan ng pagkakakilanlan: suriin ang mga impormasyong ito sa bawat order

Pabago-bago ang mga pangalan sa katalogo. Maluwag ang paggamit ng mga nagtitinda sa magkasingkahulugang pangalan. Hindi pabago-bago ang mga impormasyon sa ibaba, at nakatala ang mga ito sa isang maayos na sertipiko ng pagsusuri. Itinatala ng PubChem ang methylene blue bilang methylthioninium chloride, C.I. Basic Blue 9, na siyang batayan ng lahat ng kasunod.

Dalawang detalye sa talahanayang ito ang sanhi ng karamihan sa mga pagkakamali sa pagbili. Una, may ilang CAS number ang methylene blue para sa iba't ibang anyong hydrate, at ang 122965-43-9 ay tumutukoy sa isang hindi tinukoy na hydrate sa halip na sa partikular na trihydrate (7220-79-3), gaya ng nakatala sa pagtutugma ng mga identifier sa monograpo ng USP. Kapag maling bigat batay sa pormula ang ginamit sa pagtitimbang, hindi namamalayang nababago ang bawat konsentrasyong kinakalkula pagkatapos nito. Ikalawa, kasama sa listahan ng mga katumbas na pangalan ng toluidine blue O mula sa isang nagtitinda ang pariralang Methylene Blue T50, kaya maaaring ibang pangkulay ang lumabas sa paghahanap sa katalogo kung pangalan lamang ang gagamitin.

Ipinapaliwanag ng estruktura ang kilos

Isipin ang dalawang chromophore na magkatabi at mawawala ang kalituhan. Nakasentro ang methylene blue sa isang sistemang phenothiazinium: tatlong magkakadugtong na singsing na may sulfur at nitrogen sa gitnang singsing at isang grupong dimethylamino sa bawat dulo. Ang may kulay na anyong kemikal nito ay ang methylthioninium cation na may chloride bilang katapat na ion. Maliit, patag, may positibong karga, at madaling makaugnay sa mga bahagi ng selula na may negatibong karga.

Humigit-kumulang dalawa at kalahating beses ang masa ng methyl blue. Nagmumula ang kulay nito sa isang ubod na triphenylmethane na may nakakabit na mga sulfonated anilino phenyl group, at ibinibigay ito bilang disodium salt. Ginagawa itong anionikong pangkulay na asido ng mga grupong sulfonate, kaya kabaligtaran ang karga nito at lubos na naiiba ang mga tisyu na mas madali nitong kapitan. Habang pumapasok sa mga selula ang methylene blue at nakikilahok sa mga siklo ng redox, ginagamit ang methyl blue bilang pangkulay ng collagen at tisyung pang-ugnay, at bilang Cotton Blue sa mga preparasyon ng fungi gaya ng mga protokol ng lactophenol cotton blue. Hindi mas mahinang bersiyon ng parehong resulta ang makukuha kapag ipinalit ang isa sa isa. Ibang eksperimento ang kalalabasan nito.

Pinananatili ng toluidine blue O ang balangkas na phenothiazinium, kaya may pagkakahawig ang kilos nito sa methylene blue ngunit hindi sila magkapareho. Ang pinakamataas na pagsipsip nito ay malapit sa 626 nm, kumpara sa methylene blue na nasa humigit-kumulang 660 hanggang 665 nm. Ang metakromatikong pagkukulay nito sa mga bahaging asidiko ng tisyu (mga granula ng mast cell, mucin, kartilago, mga estrukturang sagana sa nucleic acid) ay sumusunod sa sarili nitong pagpili, gaya ng inilalarawan sa mga rebyu sa histolohiya. Dapat asahan ng laboratoryong nagpapalit ng methylene blue ng TBO ang paglipat ng spectra at ibang contrast, hindi isang murang katumbas.

Para saan talaga ang bawat pangkulay

Nagsimula ang methylene blue bilang pangkulay ng tela, bago ginamit sa bakteryolohiya, hematolohiya, at mikroskopiya—isang paglalakbay na binuod sa literatura tungkol sa kasaysayan nito. Ang ikalawa nitong larangan ay kimika: asul ang oksidadong anyo nito at halos walang kulay ang nabawasang anyong leucomethylene blue, kaya nagagamit ito bilang redox indicator. Ang ikatlo nitong larangan ay parmasyutika. Ang methylthioninium chloride ay ang de-resetang gamot na PROVAYBLUE, na may indikasyon para sa natamong methemoglobinemia, at dahil sa medikal na tungkuling iyon, higit na mataas ang mga kinakailangan sa kadalisayan nito kaysa sa mga antas ng kalidad para sa pagkukulay o tela. Ipinapaliwanag ng Paano kumikilos ang methylene blue bilang redox na pangkulay ang mekanismo sa likod ng mga gamit na ito.

Hindi dumaan sa gayong paglalakbay ang methyl blue. Nananatili itong pangkulay para sa papel, tela, katad, at mikroskopiya: isang sertipikadong pangkulay para sa collagen sa mga pamamaraang pang-tisyung pang-ugnay na uri ng Mallory, pamalit sa fast green sa mga bersiyon ng Gomori trichrome, at pangkulay ng fungi sa mikolohiya. May ilang produktong methyl blue na may saklaw bilang pH indicator na humigit-kumulang 9.4 hanggang 14. Wala sa mga iyon ang dahilan upang maging panlunas na redox ito, at walang sertipikasyon sa pagkukulay na makapagpapabago rito bilang gayon.

Pangunahing biyolohikal na pangkulay ang toluidine blue O na may mga katangiang metakromatiko, na ginagamit sa histolohiya at mikrobiyolohiya. Hiwalay dito, ginagamit din ito bilang klinikal na pangkulay ng buhay na tisyu upang makatulong na malinaw na matukoy ang mga kahina-hinalang lesyon sa bibig bago ang biopsy. Pantulong ito sa pagpili ng mga lugar para sa biopsy, hindi kapalit ng histopatolohiya. Sinumang naghahambing ng toluidine blue at methylene blue para sa pagsusuri o pormulasyon ay dapat maghambing ng spectra, mga target na tisyu, at dokumentasyon ng antas ng kalidad, hindi ng mga pangalan.

Mga kahawig na pangalang nakalilito sa mga mamimili

May tatlo pang pangalang dapat isama sa listahan ng mga susuriin. Ang New Methylene Blue N ay hindi methylene blue. Ito ay C.I. 52030 (CAS 1934-16-3), isang phenothiazine na may nakakabit na mga grupong ethyl at methyl sa singsing, na ginagamit sa histolohiya at hematolohiya. Ang mga pamamaraan ng pagkukulay gamit ang new methylene blue ay kabilang sa hiwalay na literaturang iyon. Mas malapit ang Azure B: isa itong analogo ng methylene blue na inalisan ng isang N-methyl group (CAS 531-55-5, C.I. 52010). Isa rin itong pangunahing metabolite ng methylene blue at dokumentadong impurity sa materyal na methylene blue, kaya ipinapares ng programa ng USP ang reperensiyang materyal ng methylene blue sa isang pamantayang Azure B. Tinatalakay ang ugnayan ng dalawa, at kung bakit mahalaga ang pagtukoy sa mga impurity, sa Azure B bilang impurity at metabolite. Ang crystal violet, na minsan ay ibinebenta sa lumang pangalang gentian violet, ay isang pangkulay na triarylmethane (CAS 548-62-9, C.I. 42555) na walang anumang singsing na thiazine.

Tiyakin ang pagkakakilanlan bago magbayad

Tinutukoy ng isang matibay na espesipikasyon sa pagbili ang eksaktong kemikal, CAS number, C.I. number, anyong hydrate, at antas ng kalidad, at pagkatapos ay tinitiyak ang mga ito batay sa sertipiko ng pagsusuri sa halip na sa etiketa sa harap. Mabilis at hiwalay na pagsusuri ang haba ng alon ng pinakamataas na pagsipsip: malapit sa 665 nm para sa methylene blue, malapit sa 626 nm para sa toluidine blue O, at malapit sa 595 hanggang 605 nm para sa methyl blue sa itinakdang asidikong mga kondisyon nito. Ang rurok sa maling posisyon ay nangangahulugang maling pangkulay, anuman ang sinasabi ng bote.

Ibang tanong ang sinasagot ng dokumentasyon ng antas ng kalidad kaysa sa pagkakakilanlang kemikal. Sinusuri ng sertipikasyon ng Biological Stain Commission ang isang partikular na batch para sa nilalaman nitong pangkulay at pagganap sa pagkukulay, na mahalaga kapag ang layunin ay paulit-ulit na makuha ang parehong resulta ng pagkukulay. Saklaw ng pagsunod sa USP ang pagkakakilanlang parmasyutiko, kadalisayan, mga organikong impurity, mga natitirang solvent, mga impurity na elemento, at pagkontrol sa mikrobyo, na mahalaga kapag iinumin o kakainin ang materyal. Magkaugnay ang layunin ng dalawang programa ngunit magkaiba ang nilalaman, kaya hindi maaaring ipalit ang isang sertipiko sa isa pa.

Dito nagiging kongkreto ang pagpili ng kalidad sa pagbili. Mahalaga ang mataas na kadalisayan dahil ang methylene blue na hindi sumusunod sa USP ay karaniwang may antas ng kalidad para sa tela, na may mga impurity tulad ng Azure B, mabibigat na metal, o natitirang solvent na hindi sinusuri ng anumang protokol sa pagkukulay. Karamihan sa mga nagtitindang nagsasabing sumusunod sila sa USP ay mabibigat na metal lamang ang sinusuri at itinuturing na sapat na iyon. Saklaw ng ganap na pagsunod ang pagkakakilanlan, pagsusuri ng nilalaman, mga organikong impurity, natitirang solvent, mga impurity na elemento, nalalabi matapos ang pagsunog, mga limitasyong mikrobiyal, at mga endotoxin mula sa bakterya. Ginagabayan ka ng paano pumili ng methylene blue na may antas ng kalidad na parmasyutiko sa pagbasa ng dokumentasyong iyon. Nakikipagtulungan ang Blupreme sa isang parmasyutikong tagagawa ng methylene blue, nagsasagawa ng pagsusuri ayon sa buong espesipikasyon ng USP, at inilalathala ang kumpletong COA—ang praktikal na kahulugan ng masusing pagtitiyak ng pagkakakilanlan na inirerekomenda ng artikulong ito.