Мақола
Рангомезӣ бо кабуди метиленӣ: усулҳои микроскопӣ ва атласи тасвирҳои воқеӣ
Рангомезӣ бо кабуди метиленӣ ҷузъиёти камнамоёни ҳуҷайраҳоро дар микроскопияи майдони равшан осонтар фарқшаванда мекунад. Он метавонад ба донишҷӯён дар ёфтани ядрои ҳуҷайраи луобпардаи рухсора ё баррасии ҳудуд ва тарзи ҷойгиршавии микроорганизмҳо кумак кунад. Аммо объекти кабуд танҳо як мушоҳида аст. Номгузории организм, чен кардани он ва муайян кардани он ки оё он аз беморӣ дарак медиҳад, вазифаҳои ҷудогонаанд.
Тасвири муқова принсипи тазодро нишон медиҳад. Атласи зер аксҳои воқеии намунаҳои мустақилона ҳуҷҷатгузоришударо бо маълумоти манбаи аслии онҳо дар бар мегирад.
Кабуди метиленӣ чиро намоён мекунад?
Кабуди метиленӣ рангкунандаи асосӣ аст: иони рангаи он заряди мусбат дорад. Тавре ки OpenStax дар шарҳи рангомезии намунаҳо мефаҳмонад, рангкунандаҳои асосӣ бо маводи ҳуҷайравии дорои заряди манфӣ таъсири мутақобил мекунанд ва метавонанд ҳуҷайраҳоро дар заминаи равшантар намоён созанд. Дар препаратҳои мувофиқ кабуди метиленӣ минтақаҳои бой аз кислотаҳои нуклеинӣ ва дигар сохторҳои пайвастшаванда ба рангкунандаро барҷаста мекунад.
Дар рангомезии одӣ як рангкунанда тазодро таъмин мекунад. Аз ин рӯ, чанд организми гуногун метавонанд кабуд намоянд, бе он ки як организм бошанд. Саволҳои муфид дар оғоз тавсифӣ мебошанд: объектҳо гирданд ё дарозрӯя, ҷудоанд ё гурӯҳбандӣ шудаанд, яксон ранг гирифтаанд ё ҷузъиёти дохилиашон фарқ мекунад? Пеш аз он ки рангро ҳамчун натиҷаи тасниф тафсир кунед, фарқи байни рангомезии одӣ ва рангомезии Грамро бубинед.
Тазод ва қобилияти тафриқа гуногунанд. Тазод ба фарқ кардани объект аз муҳити атрофаш кумак мекунад; қобилияти тафриқа ҷузъиёти ба ҳам наздикро аз ҳам ҷудо нишон медиҳад. Тасвири тиратар кафолат намедиҳад, ки сохторҳои бештар аз ҳам фарқ карда мешаванд. Ҳамчунин, на ҳар доначаи тираро бояд органелла номид.
Препаратҳои табиӣ, препаратҳои тари рангомезишуда ва молишпрепаратҳо
Препарати тари рангомезинашуда, ё табиӣ, намуди намунаро бе иловаи рангкунанда нигоҳ медорад, ҳарчанд аз муҳити аслӣ берун овардан ҳам намунаро тағйир медиҳад. Дар препарати тари рангомезишуда реагент илова мешавад, дар ҳоле ки мавод зери шишаи пӯшиш дар моеъ мемонад. Барои молишпрепарати собитшуда маводро рӯйи шишаи предметӣ паҳн мекунанд ва пеш аз коркарди минбаъда бо усули муайян собит месозанд. Шарҳи OpenStax оид ба тайёркунии препаратҳо препаратҳои тарро аз собитсозӣ фарқ мекунад ва мефаҳмонад, ки чаро организмҳои собитшуда дигар ҳаракат ё мубодилаи моддаҳои муқаррариро нишон намедиҳанд.
Ин препаратҳо ба саволҳои гуногун ҷавоб медиҳанд:
| Препарат | Мушоҳидаи муфид | Он чизе, ки танҳо аз тасвир муайян кардан мумкин нест |
|---|---|---|
| Препарати тари табиӣ | Ҳаракат, ҳудудҳо, маводи табиатан намоён | Муайян кардани ҳувият танҳо аз рӯйи ҳаракат ё шакл |
| Препарати тари рангомезишуда | Тазод байни сохторҳои пайвастшаванда ба рангкунанда ва муҳити атроф | Оё реагент физиологияи муқаррариро бетағйир гузоштааст |
| Молишпрепарати собитшуда ва рангомезишуда | Морфологияе, ки пас аз тайёркунӣ бо тартиби муайян нигоҳ дошта шудааст | Намунаи аслии зинда чӣ гуна рафтор мекард |
| Усули мушаххаси дифференсиалӣ | Реаксияи муайяни рангомезӣ бо санҷишҳои назоратии мувофиқ | Ҳувияти намуд ё ташхис бе далелҳои фарогиртари ин усул |
Барои муқоиса дар дарс, пеш аз баррасии препарати алоҳидаи рангомезишуда, ки мувофиқи протоколи таълимӣ тайёр шудааст, препарати рангомезинашударо сабт кунед. Танзимоти равшанӣ ва сабти тасвирро муқоисашаванда нигоҳ доред. Агар ду ҳуҷайраи гуногун аксбардорӣ шаванд, онҳоро ҳамчун мисол тавсиф кунед, на ҳамчун сабти як ҳуҷайра пеш ва баъд аз рангомезӣ.
Атласи микроскопӣ: се намунаи воқеии рангомезишуда
Ин атлас интихоб ва тафсири мустақили се микрофотографияи дорои иҷозатномаҳои кушода мебошад. Муаллифони манбаъҳо намунаҳо ва рангкунандаҳоро муайян кардаанд. Мо дурустии муайянкунии намунаҳои онҳоро мустақилона тасдиқ накардаем. Тасвирҳо бе буриш, ҳамчун табдилҳои WebP бе талафи сифат, бе иловаи ҷузъиёт ё тағйири рангҳо бознашр шудаанд.
Тасвири 1: ҳуҷайраҳои луобпардаи рухсораи инсон
Намуна: ҳуҷайраҳои луобпардаи рухсораи инсон. Рангкунанда: кабуди метиленӣ. Калонкунӣ: 400×, мувофиқи маълумоти аксбардор. Хатти миқёс: мавҷуд нест; манбаъ андозаи калибршудаи пикселро пешниҳод намекунад. Акс аз Fritzmann2002, 2017, аз Ҳуҷайраҳои луобпардаи рухсораи инсон (рангомезӣ бо кабуди метиленӣ), бо иҷозатномаи CC BY-SA 4.0. Ин бознашр ҳамон иҷозатномаро нигоҳ медорад.
.jpg){kind=link}
Аз ҳуҷайраи ҷудогона оғоз кунед: ядрои тиратари онро аз ситоплазмаи кабуди атроф осонтар фарқ кардан мумкин аст. Сипас ҳуҷайраҳои ба ҳам пӯшидаро дар поёни он баррасӣ кунед. Пӯшиши байниҳамдигарӣ пайгирии ҳудудро душвортар мекунад ва метавонад дар як қисм минтақаи тиратар ба вуҷуд оварад. Аз ин тасвир барои машқи пайгирии ҳудудҳо истифода баред, на барои ядро ҳисоб кардани ҳар доғи тира. Дастури мушоҳидаи ҳуҷайраҳои луобпардаи рухсора ин машқи махсуси намунаро муфассалтар шарҳ медиҳад.
Тасвири 2: ҳуҷайраҳои пиёз
Намуна: ҳуҷайраҳои пиёз, мувофиқи муайянкунии манбаъ. Рангкунанда: кабуди метиленӣ. Калонкунӣ: “200x” дар номи файли аслӣ омадааст; он мустақилона тасдиқ нашудааст. Хатти миқёс: мавҷуд нест; маълумоти калибркунӣ пешниҳод нашудааст. Акс аз Alvy16, 2019, аз Ҳуҷайраи пиёз 200x, бо иҷозатномаи CC BY 4.0.
Қисмҳои дарозрӯя як қабати мураттабро ташкил медиҳанд. Ҳудудҳои дарози муштараки онҳоро бо ҳудудҳои номуназзами Тасвири 1 муқоиса кунед. Ҳамчунин ба маводи баръалои тира ва равшании нобаробари майдони дид диққат диҳед. Акс ҳувияти ҳар таҳшини тираро муайян намекунад. Он нишон медиҳад, ки чаро сабти муфиди мушоҳида бояд артефактҳо ва номуайяниро дар бар гирад, на ин ки ба ҳар чизи ранггирифта ном гузошта шавад.
Тасвири 3: хамиртуруше, ки манбаъ онро Candida spp. муайян кардааст
Намуна: Candida spp., мувофиқи маълумоти аксбардор. Рангкунанда: рангомезии одии мусбат бо кабуди метиленӣ. Калонкунӣ: маълум нест. Хатти миқёс: мавҷуд нест; андозаи калибршудаи пиксел пешниҳод нашудааст. Акс аз Marta, корбари Wikimedia бо номи Martunia.g, 2021, аз Рангомезии мусбат бо кабуди метиленӣ 2, бо иҷозатномаи CC BY 4.0.
Гурӯҳҳои зичи кабудро бо канорҳои камтар серобъект муқоиса кунед. Дар ҷойҳое, ки объектҳо камтар ба ҳам мепӯшанд, ҳудудҳои алоҳидаро осонтар пайгирӣ кардан мумкин аст. Номи Candida аз сабти манбаъ гирифта шудааст, на аз муайянкунии намуд дар асоси ин акс. Ин тасвир ҳамчунин натиҷаи қобилияти зиндамониро пешниҳод намекунад. Санҷишҳои қобилияти зиндамонӣ ва нафаскашии хамиртуруш шароит, санҷишҳои назоратӣ ва тафсири хоси худро талаб мекунанд.
Дуруст хондани миқёс
Ин тасвирҳо барои муқоисаи визуалӣ мувофиқанд, на барои ченкунӣ бо микрометр ё муқоисаи андозаи мутлақи ҳуҷайраҳо байни тасвирҳо. Калонкунии гузоришшуда калибркунии мавҷуднабудаи камераро барқарор намекунад. Тағйир додани андозаи намоиши тасвир калоншавии зоҳирии онро тағйир медиҳад.
Барои тасвирҳои худ бо истифода аз меъёри маълум ва танзимоти дахлдори оптикӣ калибркунии ченкуниро анҷом диҳед. Дастури Nikon оид ба микрометрия мефаҳмонад, ки чӣ гуна микрометри шишаи предметӣ тақсимоти шартии тасвир ё шабакаи ченкуниро ба дарозиҳои физикӣ табдил медиҳад. Объектив, конфигуратсияи камера ва калибркуниро сабт кунед ва аз рӯйи ин маълумот хатти миқёс илова намоед. Хатти миқёсро аз андозаи миёнаи ҳуҷайра дар китоби дарсӣ тахмин накунед.
Оё маҳлули дохили шиша ба усул мувофиқ аст?
Шишае бо тамғаи «кабуди метиленӣ» тавсифи пурраи озмоишгоҳӣ нест. Консентратсия ва воҳидҳои он, ҳалкунанда, ҷузъҳои иловагӣ, истифодаи пешбинишуда, ҳуҷҷатҳои силсилаи истеҳсолӣ ва дастурҳоро санҷед. Варақаи маълумоти бехатарии реагент хатарҳоро тавсиф мекунад; дастурҳои усул муайян мекунанд, ки онро барои препарати пешбинишуда чӣ гуна истифода бурдан лозим аст.
Мисоли мушаххас маҳлули кабуди метиленӣ аз рӯйи Лёффлери Merck мебошад. Истеҳсолкунанда онро ҳамчун реагент барои микроскопия муайян мекунад ва нақши онро ҳамчун рангкунандаи муқобил дар рангомезии кислотатобовар тавсиф менамояд. Оташгирандагии зикршудаи он низ нишон медиҳад, ки «моеъи кабуд» барои банақшагирии кор бо он ё гармкунии он маълумоти кофӣ нест. Ин хосиятҳо ба ҳамин таркиб дахл доранд, на ба таври худкор ба ҳар маҳлули обии кабуди метиленӣ.
Ба ҳамин монанд, агари эозин-метиленӣ муҳити ғизоии дорои таркиби муайян аст. Он рангкунандаи препарати рӯйи шиша нест, ки бо илова кардани танҳо кабуди метиленӣ ба намуна омода шавад. Барои ҳадафи дигари тасвирбардорӣ, ҷойгузинҳои кабуди метиленӣ барои микроскопияро муқоиса кунед.
Барои маҷмӯаи микроскопии навомӯзон аз усули таълимии ҳуҷҷатгузоришудаи он, препаратҳои омодаи маълум ва реагенти пешбинишуда оғоз кунед. Агар тамғаи шиша гум шуда бошад ё таркиби онро муайян кардан имкон надошта бошад, онро бо реагенти мувофиқи дорои ҳуҷҷат иваз кунед. Аз воситаҳои муҳофизати чашм истифода баред ва дастурҳои кор бо таркиби воқеиро риоя намоед. Маводи инсонӣ ва намунаҳои номаълуми муҳити атроф риояи тартиботи озмоишгоҳи таълимиро барои кор бо намунаҳо ва безараргардонии онҳо талаб мекунанд; рангомезӣ ҷойгузини ин тартибот нест.
Пеш аз хулоса мушоҳидаро нависед
«Объектҳои байзашакли кабуд дар гурӯҳҳо» тавсифи асосноки тасвир аст. «Сирояти муайян» далелҳоеро талаб мекунад, ки тасвир пешниҳод накардааст. Дар дафтар пайдоиши намуна, тайёркунӣ, реаксияи рангомезӣ ва усули муайянкуниро ҷудо сабт кунед. Ин фарқгузорӣ тасвири одии дарсиро муфид мегардонад ва намегузорад, ки микрофотографияи ҷолиб барои иддаое истифода шавад, ки онро асоснок карда наметавонад.