Метилени кабуд ва микробиоми рӯда: далелҳо аз мушҳо

Метилени кабуд метавонад таркиби бактериявии дар наҷосати мушҳо ченшударо тағйир диҳад. Ин бозёфт исбот намекунад, ки он саломатии рӯдаи инсонро беҳтар мекунад, бактерияҳои зарароварро ба таври интихобӣ нест мекунад ё дисбиозро табобат мекунад. Фарқи асосӣ байни тағйир додани ҷамоаи микробӣ ва беҳтар кардани саломатии организми мизбони он аст.

Таҷрибаи мушҳо, ки ба ин савол бевосита алоқамандтар аст, ДНК-и бактериявӣ ва иҷрои вазифаи лабиринтиро чен кард. Ин ченкуниҳо метавонанд қонуниятҳоеро ошкор кунанд, ки арзандаи таҳқиқанд. Онҳо худ аз худ исбот карда наметавонанд, ки тағйироти бактериявӣ сабаби тағйироти рафторӣ шудааст ё яке аз ин ду сабук шудани нишонаҳои ҳозимаро пешгӯӣ мекунад.

Муҳаққиқон воқеан чиро чен карданд

Дар таҷрибаи Гуреев ва ҳамкоронаш дар соли 2020, мушҳои семоҳаи C57Bl/6 дар давоми чор ҳафта метилени кабудро бо вояи 15 mg/kg/day (нӯҳ муш), 50 mg/kg/day (ҳашт муш) ё оби назоратӣ (13 муш) гирифтанд. Дар бахши тарҳи таҷриба роҳи ворид кардани дору ё ҷинси ҳайвонот ба таври возеҳ нишон дода нашудааст.

Намунаҳои наҷосат пеш аз оғоз ва ҳар ҳафта гирифта шуданд. Муҳаққиқон qPCR-и гурӯҳҳои бактериявӣ ва пайдарпайхонии иловагии ампликонҳои ДНК-и 16S-ро истифода бурданд. Дар панҷ рӯзи охир мушҳо ду рӯзи одаткуниро гузаронида, сипас се рӯз дар лабиринти T-шакл бо мукофот санҷида шуданд; ҳар рӯз даҳ интихоби онҳо баҳогузорӣ мешуд.

Инҳо таъсиррасониҳои таҷрибавӣ дар мушҳо мебошанд, на тавсияҳои воя барои инсон. Роҳи воридкунӣ барои тафсири он ки чӣ қадар дору ба рӯда мерасад, муҳим аст ва роҳи зикрнашуда бояд зикрнашуда боқӣ монад. Табдили воя аз рӯйи вазни бадан низомеро, ки барои инсон бехатар ё самаранок бошад, исбот намекунад.

Ҷадвали далелҳои таҳқиқоти микробиом

Ин ҷадвали аслӣ мушоҳидаҳои гузоришшуда-ро аз иддаоҳои иловагие, ки хонанда метавонад бо онҳо рӯ ба рӯ шавад, ҷудо мекунад. Номҳои гурӯҳҳои бактериявӣ ба истилоҳоти мақолаи илмӣ мувофиқат мекунанд.

Сатҳи далелҳо	Мушоҳида ё ченкунӣ	Ҳудуди тафсир
Таркиби бактериявӣ ҳангоми таъсиррасонии камтар	Дар 15 mg/kg/day гурӯҳҳои интихобшуда тағйир ёфтанд; Delta/Gammaproteobacteria дар аввали таҷриба афзуданд ва дар ҳафтаи чорум ошкор нашуданд.	Намунаи ниҳоӣ метавонад тағйироти қаблиро нишон надиҳад. Ошкор нашудан ба усули таҳлил вобаста аст.
Таркиби бактериявӣ ҳангоми таъсиррасонии бештар	Дар 50 mg/kg/day медианаи Proteobacteria дар ҳафтаи чорум 7.49% буд, дар муқоиса бо 1.61% дар гурӯҳи назоратӣ.	Афзоиши фоизӣ афзоиши мутлақи ҳуҷайраҳои зиндаро исбот намекунад.
Тафсилоти таксономӣ	Пайдарпайхонӣ тағйиротро дар дохили гурӯҳҳои васеи бактериявӣ муайян кард.	Миқдори умумии устувори як тип метавонад тағйиротро дар байни аъзои он пинҳон кунад.
Рафтори мизбон	Таъсиррасонии камтар холҳои якҷояи санҷиши лабиринти T-шаклро беҳтар кард; таъсиррасонии бештар чунин натиҷа надод.	Ин иҷрои як вазифаи мушаххас аст, на арзёбии ҳамаҷонибаи қобилиятҳои маърифатӣ.
Алоқамандӣ	Deferribacteres бо холҳои рӯзи дуюм ҳамбастагии манфӣ дошт.	Ҳамбастагӣ организм ё механизми сабабгорро муайян намекунад.
Фаъолияти рӯда	Ягон нишондиҳандаи мустақими садди рӯда ё метаболит чен нашуд.	Таҳқиқот барқарор шудани гузаронандагӣ ё беҳтар шудани фаъолияти микробҳоро исбот карда наметавонад.
Санҷиши сабабият	Таҷрибаи интиқол ё кам кардани микробиота гузаронида нашуд.	Оё микробҳо дар таъсири рафторӣ миёнарав буданд, ҳанӯз норӯшан аст.

Ҷадвал қасдан аз рӯйи он чизе, ки чен шудааст, ҷудо карда шудааст. Ҷавоби мусбат дар як сатр наметавонад ҷойи ҷавоби холиро дар сатри дигар пур кунад. Масалан, иҷрои беҳтари вазифаи лабиринтӣ далелҳои норасидаро дар бораи илтиҳоби рӯда таъмин намекунад.

Чаро фоизҳои бактериявӣ нишон намедиҳанд, ки чӣ нобуд шудааст

Истилоҳи фаровонии нисбӣ ҳиссаи як гурӯҳро дар ҷамоаи ченшуда ифода мекунад. Он аз шумораи ҳуҷайраҳои бактериявӣ дар як грамм наҷосат фарқ мекунад. Вандепутте ва ҳамкоронаш дар таҳқиқоти муайян кардани таркиби миқдории микробиом нишон доданд, ки чаро миқдори умумии микробҳо ҳангоми тафсири фарқиятҳои байни ҷамоаҳо муҳим аст.

Барои мисол, намунаеро тасаввур кунед, ки даҳ воҳиди организми A ва 90 воҳиди организмҳои дигар дорад. Ҳиссаи A баробари 10% аст. Агар A дар сатҳи даҳ боқӣ монад, вале миқдори организмҳои дигар то 40 кам шавад, ҳиссаи A акнун 20% мешавад. Ҳиссаи он бе ҳеҷ гуна афзоиши миқдори мутлақаш ду баробар шуд. Ин мисоли арифметикӣ натиҷаи таҷрибаи метилени кабуд нест.

Ҳамин фарқ иддаоҳоро дар бораи нобуд кардани бактерияҳо низ маҳдуд мекунад. Таносубе, ки бар асоси ДНК муайян шудааст, санҷиши мустақими зинда мондан нест. Барои исботи кам шудани бактерияҳои қобили ҳаёт, таҷриба бояд ченкуниҳое дошта бошад, ки қобили ҳаёт буданро арзёбӣ кунанд ва саршумори умумиро ба ҳисоб гиранд. Барои исботи тағйироти функсионалӣ, ченкунии дахлдори функсионалӣ лозим аст, масалан, метаболити ченшуда, на пешгӯие, ки танҳо ба номҳои бактерияҳо асос ёфтааст.

Номгузориҳои васеъ низ гуногунии биологиро пинҳон мекунанд. Фоидаовар ё зараровар донистани як типи пурра организмҳо ва фаъолиятҳоеро, ки барои натиҷаи мушаххас масъуланд, сарфи назар мекунад. Аз ин рӯ, тағйирёбии таносуб худ аз худ на ташхиси дисбиоз аст ва на далели он ки дисбиоз табобат шудааст.

Оё микробиом натиҷаи лабиринтро шарҳ дод?

Дар таҷриба таъсиррасонии дору, таркиби бактериявӣ ва рафтор дар доираи як таҳқиқот баррасӣ шуданд. Ин барои таҳияи фарзия муфид аст. Ба тафсири мо, ин тарҳ байни чанд шарҳи эҳтимолӣ фарқ гузошта наметавонад: таъсири мустақими дору ба рафтор, таъсири ғайримустақими микробҳо ё вокунишҳои ҷудогонаи рафтор ва бактерияҳо ба ҳамон таъсиррасонӣ.

Таҷрибаи қавитар барои санҷиши миёнаравӣ миёнарави микробии пешниҳодшударо новобаста аз дору тағйир медод. Муҳаққиқон метавонистанд бисанҷанд, ки оё интиқоли ҷамоаи муайян таъсирро низ интиқол медиҳад ё бартараф кардани роҳи микробии пешниҳодшуда онро пешгирӣ мекунад. Чунин таҷрибаҳо инчунин назоратеро талаб мекунанд, ки дигар чизҳои интиқолёфта ё тағйирёфтаро ба ҳисоб гирад.

Нишондиҳандаи рафторӣ низ бояд бо ҳамин эҳтиёт тафсир шавад. Лабиринти дорои мукофот аз ҳайвон талаб мекунад, ки дар шароити мушаххас интихоб кунад. Тибқи принсипи арзёбӣ, иҷрои вазифа метавонад ба майли таҳқиқ кардани муҳит, ҳаракат, ангезаи гирифтани мукофот ва омӯзиш вобаста бошад. «Қобилияти маърифатии беҳтар» номидани натиҷа ин фарқиятҳоро аз назар дур мекунад. Тавсифи вазифаи бевосита ченшуда ҳамоно иттилоотноктар аст.

Оё метилени кабуд бактерияҳои рӯдаро мекушад?

Метилени кабуд метавонад дар шароити муайяни озмоишгоҳӣ дар фаъолияти зиддимикробӣ иштирок кунад. Ин муайян намекунад, ки пас аз воридшавӣ аз даҳон бо тамоми ҷамоаи рӯда чӣ рӯй медиҳад.

Масалан, як таҳқиқоти озмоишгоҳии ғайрифаъолсозии фотодинамикии бактерияҳо E. coli ва S. aureus-ро бо моддаҳои ҳассоскунанда ба рӯшноӣ ва равшанкунии назоратшаванда санҷид. Он ташаккули колонияҳо ва осеби мембранаро арзёбӣ кард ва гурӯҳҳои назоратии мувофиқро дар торикӣ низ дар бар гирифт. Дар шароити санҷидашуда рӯшноӣ ё моддаи ҳассоскунанда ба рӯшноӣ, ҳар яке алоҳида, таъсире надошт.

Ин гурӯҳҳои назоратӣ ба саволи муҳими сабабӣ дар доираи он таҷриба ҷавоб медиҳанд: омезиши онҳо чӣ саҳм гузошт? Фурӯ бурдани модда равшан кардани суспензияи бактериявиро такрор намекунад. Баръакс, натиҷаи манфии гурӯҳи назоратӣ дар торикӣ дар як консентратсия ва давомнокии муайян исбот намекунад, ки ҳар гуна таъсиррасонӣ бе рӯшноӣ аз ҷиҳати биологӣ ғайрифаъол аст. Шарҳи таҳқиқоти зиддимикробӣ ин фарқиятҳои вобаста ба шароитро мефаҳмонад.

Таҳқиқоти ҷамоаи рӯда инчунин табобати сирояти мушаххасро исбот карда наметавонад. Муайян кардани организм ва нишон додани натиҷаи мувофиқи клиникӣ вазифаҳои ҷудогонаанд, аз ҷумла ҳангоми арзёбии иддаоҳо дар бораи табобати паразитҳо.

Ин барои иддаоҳо оид ба саломатии рӯдаи инсон чӣ маъно дорад

Ҷустуҷӯи мақсадноки адабиёт барои ин мақола озмоиши назоратшавандаи микробиоми рӯдаи инсонро, ки фоидаи метилени кабудро барои саломатии рӯда исбот кунад, муайян накард. Ин баёнот дар бораи далелҳои ёфтшуда аст, на исботи он ки ҳеҷ таҳқиқоти дахлдоре вуҷуд надорад. Таҳқиқоти инсонӣ оид ба табобати маҳаллии фотодинамикӣ дар ковокии даҳон масъалаи дигар аст: масалан, дар озмоиши бӯи бади даҳон бо иштироки 45 нафар аз қабати рӯйи забон намуна гирифта, газҳои нафасро чен карданд, на саломатии рӯдаро.

Барои дастгирии иддао дар бораи саломатии рӯдаи инсон, таҳқиқот бояд гурӯҳи аҳолии муайян, таркиби дору ва роҳи воридкунии такроршаванда, муқоисакунандаи мувофиқ ва натиҷаеро дошта бошад, ки барои он гурӯҳ аҳамият дорад. Таркиби микробӣ метавонад ба шарҳи натиҷа кумак кунад, вале беҳтар шудани нишонаҳо, назорати беморӣ ва таъсирҳои номатлуб ҳамоно бояд арзёбӣ шаванд.

Чор ҳафта дар як модели мушҳо низ оқибатҳои истифодаи чандмоҳа ё чандсоларо исбот карда наметавонад. Шарҳи таъсиррасонии ҳаррӯза ва дарозмуддати метилени кабуд давомнокии табобатро аз мушоҳида ва нишондиҳандаҳои бехатарӣ ҷудо мекунад. Барои заминаи васеътари клиникӣ ба он чӣ таҳқиқоти инсонӣ дастгирӣ мекунад муроҷиат кунед.