ఊదా రంగు రక్త రంజనాన్ని ఎవరు అభివృద్ధి చేశారు? మిథిలీన్ బ్లూ, మలఖోవ్‌స్కీ, రొమనోవ్‌స్కీ, గీమ్సా

ఇయోసిన్ ఎరుపు. మిథిలీన్ బ్లూ నీలం. ఈ రెండింటినీ కలిపి, ఆ మిశ్రమాన్ని ఎండబెట్టిన పలుచని రక్తపు పొరపై పూస్తే, ఆ పొరలోని కొన్ని భాగాలు ఊదా రంగులో కనిపిస్తాయి.

అన్ని భాగాలూ కాదు. సరిగ్గా తయారుచేసిన నమూనాలో తెల్ల రక్త కణాల కేంద్రకాలు ఎరుపు-ఊదా రంగును సంతరించుకుంటాయి. మలేరియా పరాన్నజీవి లోపల క్రొమాటిన్ కూడా అదే రంగును సంతరించుకుంటుంది. చుట్టూ ఉన్న ఎర్ర రక్త కణాలు మాత్రం గులాబీ రంగులోనే, కణద్రవ్యం బూడిద-నీలం రంగులోనే ఉంటాయి. కణ రకాలను ఒకదాని నుంచి మరొకటి వేరుగా గుర్తించేలా చేసేది ఈ ఊదా రంగే.

ఏ సీసాలోనూ ఊదా రంగు ఉండదు. మిథిలీన్ బ్లూ విచ్ఛిన్నమయ్యేటప్పుడు ఏర్పడే ఒక నిర్దిష్ట పదార్థం స్లైడ్‌పై ఇయోసిన్‌తో కలిసినప్పుడు మాత్రమే ఆ రంగు కనిపిస్తుంది. 1880లలో, 1890లలో ఆ పదార్థం ఏమిటనేది అటుంచితే, అది ఉందని కూడా ఎవరికీ తెలియదు. ఆ రంగు కోసం అన్వేషించినవారు అశుద్ధ రంజకాలతో, ఒంటరిగా పనిచేశారు. ఒక సీసా రెండు నెలలపాటు అలమారలో ఉన్న తర్వాత దానిలో ఏముందో తెలుసుకోవడానికి వారికి నమ్మదగిన పద్ధతి లేదు.

అందుకే శీర్షికలోని ప్రశ్నకు సమర్థించగల సమాధానాలు ఒకటి కంటే ఎక్కువ ఉన్నాయి. 2011లో ఆ సమాధానం మారడానికి కూడా అదే కారణం.

మిశ్రమంతోపాటు మారిన దృశ్య సమాచారం

ఈ రంజనం ఒక్కసారిగా ఆవిష్కరించబడలేదు. దశలవారీగా రూపుదిద్దుకుంది. మిశ్రమంలో చేసిన ప్రతి మార్పూ సరిగ్గా ఒక కొత్త అంశాన్ని కనిపించేలా చేసింది. ఆ అంశాల క్రమమే ఈ చరిత్రను అర్థం చేసుకోవడానికి అత్యంత స్పష్టమైన మార్గం.

చివరి నిలువు వరుసలో కనిపించే క్రమమే ముఖ్యమైనది. ప్రతి పురోగతీ రంగుల పరిధిని విస్తరించింది. ప్రతి విస్తరణా మరో నిర్మాణాన్ని కనిపించేలా చేసింది. ఈ పద్ధతిలో ఊదా రంగు అలంకారం కాదు; పరాన్నజీవి ఉందని చూడటానికీ, అది ఏ నిర్మాణాలతో తయారైందో చూడటానికీ మధ్య ఉన్న తేడా అదే. ఈ రంజకం BASF రంగుల కర్మాగారం నుంచి వైద్యరంగంలోకి ఎలా వచ్చిందనేది దాని సొంత పత్రాధారాలతో కూడిన మరింత విస్తృతమైన చరిత్ర. పైనున్న పూర్తి క్రమం, ప్రతి అంశానికి సంబంధించిన ఆధారంతో సహా, మూలాధారాల లింకులతో కూడిన కృషిచేసినవారి కాలక్రమంగా అందుబాటులో ఉంది.

చిత్రం: అదే ఆరు మిశ్రమాలు, పాత్రలో ఏముందో, దాని నుంచి ఏ రంగులు వచ్చాయో చూపేలా గీసినవి. వృత్తాలు రంజకాలను సూచిస్తాయి; వాటి కింద ఉన్న చతురస్రాలు ఆ రంజకాలు రక్తపు పొరలో ఉత్పత్తి చేయగల రంగులను సూచిస్తాయి. 1890కు ముందు ఎక్కడా ఎరుపు-ఊదా చతురస్రం లేదు; ఆ తర్వాత ఎక్కడా అది లేకుండా లేదు.

బోరాక్స్‌ను ఉద్దేశపూర్వకంగా ఉపయోగించిన వ్యక్తి

ఎర్న్‌స్ట్ మలఖోవ్‌స్కీ బ్రెస్లావ్‌లో, అంటే ఇప్పటి వ్రోత్స్వావ్‌లో, వైద్యుడిగా పనిచేశారు. తన వృత్తి జీవితాన్ని ప్రైవేటు వైద్యసేవల్లోనూ, ఒక సహచరుడితో కలిసి నడిపిన చిన్న క్లినిక్‌లోనూ గడిపారు. తన తీరిక సమయంలో ప్రయోగశాల పరిశోధన చేసేవారు. ఆయన 12 మార్చి 1857న స్ట్షెల్నోలో జన్మించారు, బ్రెస్లావ్ విశ్వవిద్యాలయంలో వైద్యవిద్య అభ్యసించారు. 1882 నుంచి 1887 వరకు ఆల్ సెయింట్స్ ఆసుపత్రిలో అంతర్గత వైద్య విభాగంలో సహాయకుడిగా పనిచేశారు. అప్పట్లో అది జర్మనీలో రెండో అతిపెద్ద ఆసుపత్రి.

ఆయన 1888లో ఖెంచిన్‌స్కీ, ప్లేన్‌ల ద్వంద్వ రంజనంతో మొదలుపెట్టారు. 1889లో తయారుచేసిన ఒక నమూనాలో ప్లాస్మోడియం కేంద్రకంలోని క్రొమాటిన్, కణద్రవ్యానికి భిన్నంగా రంగును సంతరించుకోవడం చూశారు. కానీ ఆ ఫలితాన్ని మళ్లీ పొందలేకపోయారు. మిథిలీన్ బ్లూను ఆమ్లంగా మార్చి ప్రయత్నించగా, పరిస్థితి మరింత దిగజారింది. బోరాక్స్‌తో క్షారంగా మార్చి ప్రయత్నించగా, ప్రతిసారీ పనిచేసింది. ఆయన 15 జూన్ 1890న ఆ పద్ధతిని బహిరంగంగా ప్రదర్శించారు. బోరాక్స్‌ను ఉపయోగించే సూచనతో సహా మరింత పూర్తి వివరణను ఆగస్టు 1891లో ప్రచురించారు. రంజనానికి ఇరవై నాలుగు గంటలు పట్టిందనీ, ఫలితాలను సులభంగా పునరావృతం చేయగలిగారనీ పేర్కొన్నారు.

రోగనిర్ధారణ ప్రయోగశాలలో ఇరవై నాలుగు గంటలు సుదీర్ఘ సమయం. పైగా, ఆయన పత్రం పరాన్నజీవి కేంద్రకంలోని ఊదా-ఎరుపు రంగును విపులంగా చర్చించలేదు. కారణమేదైనా, 1898లో నోఖ్ట్ మళ్లీ చేసే వరకు ఎవరూ మిథిలీన్ బ్లూను ఉద్దేశపూర్వకంగా క్షారంగా మార్చే పద్ధతిని చేపట్టలేదు. మలఖోవ్‌స్కీ రక్త రంజనం గురించి మళ్లీ ఎప్పుడూ రాయలేదు.

ఇటీవలివరకు ఆయన గురించి చాలా తక్కువగా తెలియడానికి కారణం ఏదో మర్మం కాదు, దస్తావేజులు అందుబాటులో లేకపోవడమే. వైద్య సాహిత్యంలో ఆయన జీవితానికి సంబంధించిన ఆనవాళ్లు దాదాపుగా మిగలలేదు. మిగిలినవి కూడా ఒకే మార్గం ద్వారా వచ్చాయి. ఆయన కుమార్తె మారీ 1939లో జర్మనీని విడిచి లండన్‌కు వెళ్లారు, బ్రిటిష్ సైన్యంలో సేవలందించారు, తర్వాత కెనడాలో స్థిరపడ్డారు. ఆమె వద్ద ఉన్న కుటుంబ పత్రాల సేకరణ చివరకు న్యూయార్క్‌లోని లియో బేక్ ఇన్‌స్టిట్యూట్‌కు చేరింది. ఆమె సోదరుడు లియో మొదటి ప్రపంచ యుద్ధంలో మరణించారు. ఆమె సోదరి ఈవాను ఏప్రిల్ 1942లో బ్రెస్లావ్ నుంచి ఇజ్బిట్సా తాత్కాలిక నిర్బంధ శిబిరానికి బలవంతంగా తరలించారు; ఆమె తిరిగి రాలేదు. తనకూ అదే బలవంతపు తరలింపు జరిగే వరకు వేచి ఉండకుండా, ఆమె తల్లి హెడ్విగ్ 22 ఏప్రిల్ 1942న ఆత్మహత్య చేసుకున్నారు. ఇవన్నీ జరగడానికి ముందే, 1934లో మలఖోవ్‌స్కీ మరణించారు.

ఇలా ముగిసిన కుటుంబ చరిత్రను ప్రస్తావించేవారూ లేకుండా పోతారు. రంజనం అభివృద్ధి చరిత్రలో మలఖోవ్‌స్కీని తిరిగి నిలబెట్టిన రెండు పత్రాలూ 2011లో ప్రచురించబడ్డాయి. పోజ్నాన్, వ్రోత్స్వావ్‌లలోని దస్తావేజుల నుంచి, న్యూయార్క్‌లోని మారీ పత్రాల నుంచి వాటిని రూపొందించారు.

బూజుపట్టిన సీసా, అదృష్టం కలిసొచ్చిన రష్యన్

ద్మిత్రి రొమనోవ్‌స్కీ సెయింట్ పీటర్స్‌బర్గ్‌లోని మిలిటరీ మెడికల్ అకాడమీలో వైద్యవిద్య అభ్యసించారు. తన వృత్తి జీవితంలో ఎక్కువకాలం మలేరియాపై పనిచేశారు. 1890లో ఆయన ప్రచురించిన పద్ధతి, రాతపూర్వకంగా చూస్తే, ఖెంచిన్‌స్కీ పద్ధతితో దాదాపు సమానమే: మార్పు చేయని మిథిలీన్ బ్లూ, ఇయోసిన్; ఇయోసిన్ మాత్రం కొంచెం ఎక్కువ.

సెప్టెంబర్ 1891లో ఆయనకు పేరు తెచ్చిన పద్ధతిని ప్రచురించారు. అందులో ముఖ్యమైన వివరమంతా సూచనల మధ్య దాగి ఉంది. ఆయనకు ఉత్తమ ఫలితాలు నిల్వ ఉంచిన మిథిలీన్ ద్రావణం నుంచి వచ్చాయి. అది రెండు నెలలకు పైగా నిల్వ ఉండి, దానిపై బూజు పెరిగిన మిథిలీన్ బ్లూ మూల ద్రావణం. బూజు, నిల్వకాలం కలిసి రంజకంలోని మిథైల్ సమూహాలను కొంతవరకు తొలగించాయి. రొమనోవ్‌స్కీకి అది తెలియదు; దాన్ని నియంత్రించలేకపోయారు. ఆయన పద్ధతిని ప్రయత్నించిన ఇతర పరిశోధకులు ఊదా రంగును పొందలేకపోయారు. ఆయన పరిశోధన గ్రంథం జూన్ 1891లో సెయింట్ పీటర్స్‌బర్గ్‌లో సమర్పించబడింది. అందుకే సాధారణంగా చెప్పే చరిత్రలో 1891ను ఆవిష్కరణ సంవత్సరంగా పరిగణిస్తారు.

మలఖోవ్‌స్కీ ప్రదర్శన జూన్ 1890లోనే జరిగింది, అంటే ఒక సంవత్సరానికి పైగా ముందే. ఆయన పద్ధతి ఉద్దేశించినట్లుగానే పనిచేసింది.

రావలసిన వ్యక్తికి కాకుండా మరొకరి పేరు ఎందుకు స్థిరపడింది

మలఖోవ్‌స్కీకి ఘనత దక్కాలనే వాదనను క్రిస్టీన్ క్రాఫ్ట్స్, ఎర్న్‌స్ట్ హెంపెల్‌మన్, బార్బరా ఒలెక్సిన్ రూపొందించారు. అది నాలుగు అంశాలపై ఆధారపడింది. బహిరంగ ప్రదర్శన తేదీ: సెప్టెంబర్ 1891తో పోలిస్తే జూన్ 1890. ఉద్దేశపూర్వకం అనే మాటకు ఎదురుగా అనుకోకుండా కలిసొచ్చినది అనే మాట. బోరాక్స్‌తో సహా తన పూర్తి పద్ధతిని మలఖోవ్‌స్కీ ప్రచురించగా, రొమనోవ్‌స్కీ పద్ధతి నియంత్రించని ఒక అంశంపై ఆధారపడటం. ఇంకా, యాదృచ్ఛికంగా వచ్చిన ఫలితాన్ని ఎవరూ పునరావృతం చేయలేకపోవడంతో, ప్లాస్మోడియం కేంద్రకపు వివరణ, దాన్ని బయటపెట్టిన ఊదా రంగు రెండూ ఏడు సంవత్సరాలపాటు సాహిత్యం నుంచి దాదాపుగా కనుమరుగవడం.

తమ నిర్ధారణను వారు కుండబద్దలు కొట్టినట్లు చెబుతారు. జీవితచరిత్ర పత్రంలో ఈ ఘనత కేటాయింపును “ఒక అపహాస్యం” అని పిలుస్తారు. 1978లో రాల్ఫ్ లిల్లీ రాసిన “బహుశా ఈ రంజకాల కుటుంబాన్ని మలఖోవ్‌స్కీ రంజకాలు అని పిలవాలి” అనే మాటలను కూడా ఉటంకిస్తారు.

ముందుగా ఎవరు సాధించారనే వాదనలకు సాధారణంగా ఎదురయ్యే విధంగానే, ఈ వాదనకూ వ్యతిరేకత ఉంది. ఆ వివాదాన్ని తేల్చడం కంటే దాని స్వరూపాన్ని వివరించడం ఉపయోగకరం. ప్రాధాన్యంపై వాదించాలంటే, ఆవిష్కరణ ఏమిటో ముందుగా చెప్పాలి. ఆవిష్కరణ ఊదా రంగు అయితే, అంతకుముందే పత్రబద్ధమైన ప్రదర్శన మలఖోవ్‌స్కీది. ఆవిష్కరణ ప్రచురించిన పద్ధతి అయితే, ఇద్దరూ 1891లోనే ప్రచురించారు; పేరు మాత్రం రొమనోవ్‌స్కీది స్థిరపడింది. ఆవిష్కరణ వివరణ అయితే, ఇద్దరికీ ఆ ఘనత దక్కదు. ఎందుకంటే పరిపక్వత అంటే మిథైల్ సమూహాల తొలగింపు అని ఇద్దరికీ తెలియదు; అసలు ఆ రంగు ఎందుకు కనిపిస్తుందో ఇద్దరూ చెప్పలేకపోయారు. ప్రజాదరణ పొందిన కథనాలు వదిలేసేది ఈ చివరి అంశాన్నే. క్రియాశీల పదార్థం ఎవ్వరూ గుర్తించని ఒక మలినం. మొదటిసారి ఆ రంగును ఉద్దేశపూర్వకంగా ఉత్పత్తి చేసిన వ్యక్తి, అదే ఫలితాన్ని మళ్లీ ఇవ్వగల అనుభవాధారిత తయారీ విధానంతో సాధించారు; ఆ విధానం లోపల ఏం జరుగుతుందో అర్థం చేసుకుని కాదు.

మలఖోవ్‌స్కీకి ఘనత దక్కాలనే వాదనను అత్యంత సమగ్రంగా ప్రచురించినవి ఈ రెండు 2011 పత్రాలే. రెండింటినీ PubMedలో ఉచితంగా చదవవచ్చు: విస్తృత సమీక్ష PMID 21235291 వద్ద, జీవితచరిత్ర పత్రం PMID 21660627 వద్ద ఉన్నాయి. ఆ సమీక్షకు సంబంధించిన PubMed నమోదులో, అదే సంవత్సరం తర్వాత అదే పత్రికలో 86(5):366 వద్ద ప్రచురించిన వ్యాఖ్య కూడా ఉంది. ఆ వాదన వెలువడగానే ముద్రిత రూపంలో దానికి వ్యతిరేకత వచ్చిందని ఇది గుర్తుచేస్తుంది.

ఈ వివాదం రసాయనశాస్త్రంపై భిన్నాభిప్రాయం మాత్రం కాదు. ఊదా రంగు ఏమిటో, దాన్ని ఏ భాగాలు ఉత్పత్తి చేస్తాయో సంబంధిత వారందరూ అంగీకరిస్తారు. ముందుగా ఎవరు సాధించారన్నదే విభేదం. ఎవరూ పునరావృతం చేయలేని యాదృచ్ఛిక ఫలితాన్ని అసలు సాధించినట్లుగా లెక్కించాలా అన్నదీ విభేదమే.

తర్వాత వచ్చిన పేర్లు తెచ్చిన ప్రయోజనం

మలఖోవ్‌స్కీ మొదట ఊదా రంగును ఉత్పత్తి చేస్తే, ఆ రంజనం రొమనోవ్‌స్కీ, రైట్, గీమ్సా పేర్లతో ఎందుకు పిలవబడుతోంది?

ఎందుకంటే ఆవిష్కర్త చేతుల్లో ఒక్కసారి పనిచేసిన రంజకం, ఉపయోగించదగిన ప్రయోగశాల కారకం కాదు. తర్వాతి కృషి, నమ్మకంగా పనిచేయని మిశ్రమాన్ని మరో దేశంలోని సాంకేతిక నిపుణుడు ఒక సాధారణ మంగళవారంనాడు కూడా ఉపయోగించగల పదార్థంగా మార్చింది.

నోఖ్ట్ తార్కికంగా ఆలోచించి ఆ దశకు చేరుకున్నారు. ఒక సాధారణ తటస్థ రంజకం నుంచి నమ్మదగిన ఫలితం పొందలేకపోయిన తర్వాత, ఊదా రంగు మిథిలీన్ బ్లూలోని, మిథిలీన్ బ్లూ కాని మరో పదార్థం నుంచి రావాలని నిర్ధారించారు. దాని కోసం అన్వేషించడం మొదలుపెట్టారు. పాతబడిన మిథిలీన్ బ్లూ ద్రావణాలు మాస్ట్ కణాల కణికలకు ఎరుపు రంగు ఇస్తాయని ఉన్నా అప్పటికే గమనించారు. రంజకం పరిపక్వమయ్యేటప్పుడు కొత్త పదార్థం ఏర్పడుతుందని ప్రతిపాదించారు. క్షార పరిస్థితులు మిథిలీన్ బ్లూ నుంచి మిథైల్ సమూహాలను తొలగిస్తాయనీ, అలా ఏర్పడే పదార్థాలే ఇప్పుడు మనం అజ్యూర్‌లు అని పిలిచేవనీ బెర్న్ట్‌సెన్ 1885లో చూపించారు. నోఖ్ట్ క్లోరోఫామ్‌తో క్రియాశీల భాగాన్ని వేరుచేశారు. దాన్ని మిథిలీన్ బ్లూ నుంచి ఎరుపు అని మాత్రమే పిలవగలిగారు; మైఖేలిస్ 1901లో దానికి అజ్యూర్ I అని పేరు పెట్టారు. జెన్నర్ తయారీ, నిర్వహణ సమస్యను పరిష్కరించారు. మిథిలీన్ బ్లూ, ఇయోసిన్ అవక్షేపాన్ని సంపూర్ణ మెథనాల్‌లో మళ్లీ కరిగించడం వల్ల ఒకే స్థిరమైన ద్రావణం లభించింది. అది రంజనం చేస్తూనే రక్తపు పొరను స్థిరీకరించింది; వేడితో స్థిరీకరించాల్సిన అవసరాన్ని తొలగించింది. లీష్‌మన్, రాయ్‌టర్ పాలీక్రోమ్ రంజకాన్ని ఆల్కహాల్ ద్రావకంతో కలిపి, స్థిరత్వాన్నీ ఊదా రంగునూ ఒకేసారి పొందారు. 65 °C వద్ద పన్నెండు గంటలపాటు ఉంచడం, ఆ తర్వాత పది రోజులు నిల్వ చేయడం స్థానంలో, రైట్ ఒక గంటపాటు ప్రవహించే ఆవిరిలో ఉంచే పద్ధతిని ప్రవేశపెట్టారు. గీమ్సా యాదృచ్ఛికంగా పరిపక్వమైన ద్రావణంపై ఆధారపడటాన్ని పూర్తిగా మానేశారు. తెలిసిన రంజకాలను కొలిచిన పరిమాణాల్లో ఉపయోగించి, మెథనాల్‌లో గ్లిసరాల్ కలిపారు. దాంతో ఉత్పత్తి ఉష్ణమండల వేడిని తట్టుకుంది. స్వచ్ఛమైన మిథిలీన్ అజ్యూర్‌ను ఎలా తయారుచేశారో ఆయన ఎప్పుడూ ప్రచురించలేదు. దాన్ని లైప్‌జిగ్‌లోని డాక్టర్ గ్ర్యూబ్లర్ ప్రయోగశాలకు అమ్మారు. ఆ ప్రయోగశాల దాన్ని అజ్యూర్ I పేరుతో విక్రయించింది; తమ రూపాంతరం మాత్రమే అసలైన గీమ్సా రంజకం అని చెప్పుకుంది.

ఆ అజ్యూర్ ఏమిటన్నదానిపై ఇప్పటికీ వాదనలు ఉన్నాయి. కొందరు అది కేవలం పాలీక్రోమ్ మిథిలీన్ బ్లూ అంటారు; మరికొందరు దానిలో Azure B ఎక్కువగా ఉందంటారు. సమాధానం ఒక యుద్ధం వల్ల బయటపడింది. జర్మన్ రంజకాలు అందుబాటులో లేకపోయినప్పుడు, యునైటెడ్ స్టేట్స్ పబ్లిక్ హెల్త్ సర్వీస్ బృందంలోని రాల్ఫ్ లిల్లీ, మారిస్ రో, ఐమీ విల్‌కాక్స్ మూడు వేరుచేసిన భాగాలతో ఉత్తమ రంజనం లభిస్తుందని కనుగొన్నారు: మార్పు చేయని మిథిలీన్ బ్లూ, దాని నుంచి మిథైల్ సమూహాలు తొలగిపోయి ఏర్పడిన విచ్ఛిన్న పదార్థం Azure B, ఇయోసిన్. అందుబాటులో లేని అజ్యూర్ I స్థానాన్ని Azure B తీసుకుంది. నేడు మలేరియాను నిర్ధారించడానికి ఉపయోగించే రంజకానికి ఇప్పటికీ ఆ మూడు భాగాలే ఆధారం.

ఈ మూడు భాగాలు స్లైడ్‌పై ఎలా పరస్పరం చర్య జరుపుతాయన్న రసాయనశాస్త్రం వేరే ప్రశ్న; దానికి వేరే పేజీ ఉంది. రొమనోవ్‌స్కీ రకం రంజకాలలో రంజకాల పాత్రలు, రసాయనశాస్త్రం పేజీ Azure B, ఇయోసిన్ విడివిడిగా ఏం చేస్తాయో, ఒక్కొక్కటి స్వయంగా ఇవ్వలేని రంగును ఆ జంట ఎందుకు ఉత్పత్తి చేస్తుందో వివరిస్తుంది. సూక్ష్మదర్శిని, ప్రయోగశాల అనువర్తనాలు పేజీ ఆచరణాత్మక అంశాలను వివరిస్తుంది: ఒక నిర్దిష్ట నమూనా ఏం చూపిస్తుంది, మీరు ఉపయోగించదలచిన పద్ధతికి ఒక ఉత్పత్తి తగినదో కాదో ఎలా అంచనా వేయాలి.

ఈ చరిత్రలో ఇప్పటికీ వర్తించే భాగం

ఈ కథలోని ఒక విషయం 1902తో ముగిసిపోలేదు. దాదాపు యాభై సంవత్సరాలపాటు ప్రపంచ ప్రామాణిక మలేరియా రంజకంలోని అత్యంత ముఖ్యమైన భాగం పేరు తెలియని ఒక మలినం. అది యాదృచ్ఛికంగా ఉండేది; దాని పరిమాణం సీసా నుంచి సీసాకు మారేది. ఆ కాలంలో కొంతకాలంపాటు దాని గుర్తింపు వ్యాపార రహస్యంగా ఉండేది. దాని నిష్పత్తిపై 1940ల వరకు వాదనలు సాగాయి. ఆ రంజకాన్ని ఉపయోగించేవారు అజాగ్రత్తగా లేరు. సీసాలో ఏముందో తెలుసుకునే మార్గం వారికి లేదు.

అదే సమస్యకు ఆధునిక రూపం, పదార్థంలోని కొంత భాగాన్ని మాత్రమే వివరించే నిర్దేశం. మార్కెట్‌లో లభించే అత్యధిక స్వచ్ఛతను పొందడానికి మార్గం USP ప్రమాణాలకు అనుగుణంగా ఉండటమే, ఎందుకంటే అది ఒక్క కొలత కాకుండా పూర్తిగా ప్రచురించిన ప్రమాణం: పదార్థ గుర్తింపు, స్వచ్ఛత, అజ్యూర్ రంజకాలతో సహా సేంద్రీయ మలినాలు, మిగిలిన ద్రావకాలు, మూలక మలినాలు, దహనం తర్వాత మిగిలే అవశేషం, సూక్ష్మజీవ పరిమితులు, బ్యాక్టీరియా ఎండోటాక్సిన్లు. Blupreme తన మిథిలీన్ బ్లూను ఔషధ తయారీదారు నుంచి పొందుతుంది; పూర్తి విశ్లేషణ ధ్రువపత్రాన్ని ప్రచురిస్తుంది. దాంతో ఆ జాబితాలోని ప్రతి అంశాన్నీ కేవలం చెప్పుకోవడం కాకుండా తనిఖీ చేయవచ్చు. ఒక భారలోహ పరీక్ష ఫలితాన్ని తెలిపి, దాన్నే USP అనుగుణత అని పేర్కొనే ధ్రువపత్రం, “పరిపక్వమైన మిథిలీన్ బ్లూ” అని లేబుల్ వేసిన సీసాకు నేటి సమానం: అది మంచి ప్రయోగశాల కారకం కావచ్చు, కానీ అందులో ఏముందో ఆ లేబుల్ చెప్పదు.