వ్యాసం
రూమెన్ ద్రవానికి మిథిలీన్ బ్లూ అవకరణ పరీక్ష
ఒక పశువైద్య పట్టభద్రురాలు చేతిలో నీలిరంగు పరీక్షనాళంతో ఒక వ్యవసాయ క్షేత్రం నుంచి ఫోన్ చేస్తుంది. పది నిమిషాల క్రితం ఆమె రూమెన్ ద్రవానికి మిథిలీన్ బ్లూ కలిపింది; నీలిరంగు ఇంకా అలాగే ఉంది. ఆవుకు మరింత రంగు పదార్థం ఇవ్వాలా అని ఆమె అడుగుతుంది.
ఆ ప్రశ్న ఒక తప్పు అవగాహనను బయటపెడుతుంది. రూమెన్ ద్రవానికి చేసే మిథిలీన్ బ్లూ అవకరణ పరీక్షలో రంగు పదార్థాన్ని పరీక్షనాళంలో వేస్తారు, జంతువుకు ఎప్పుడూ ఇవ్వరు. మొత్తం పరీక్ష ఆ నాళంలోనే జరుగుతుంది. నీలిరంగు ఎంత వేగంగా మాయమవుతుందో కొలవడం ఆ నమూనాలోని సూక్ష్మజీవుల గురించి కొంత సమాచారం ఇస్తుంది; జంతువుకు అవసరమైన చికిత్స గురించి కాదు.
మిథిలీన్ బ్లూ మూడు వేర్వేరు పశువైద్య సందర్భాల్లో కనిపిస్తుంది కాబట్టి ఈ గందరగోళాన్ని అర్థం చేసుకోవచ్చు. ఈ వ్యాసం వాటిని వేరుగా వివరిస్తూ, అవకరణ సమయాన్ని pH, ప్రోటోజోవా, నమూనా నాణ్యత, వైద్య లక్షణాలతో కలిపి ఎలా అర్థం చేసుకోవాలో చూపిస్తుంది.
ఈ పరీక్ష వాస్తవంగా ఏమి కొలుస్తుంది
మిథిలీన్ బ్లూ ఆక్సీకరణ చెందినప్పుడు నీలిరంగులో ఉంటుంది; అవకరణ చెందినప్పుడు దాదాపు రంగులేనిదిగా మారుతుంది. ఆరోగ్యంగా ఉన్న జంతువు నుంచి తాజాగా సేకరించిన రూమెన్ ద్రవానికి బలమైన అవకరణ సామర్థ్యం ఉంటుంది, ఎందుకంటే వాయురహిత బ్యాక్టీరియా మేతను చురుకుగా కిణ్వనం చేస్తుంటాయి. అలాంటి ద్రవంలో కొద్దిపాటి రంగు పదార్థాన్ని కలిపినప్పుడు, బ్యాక్టీరియా జీవక్రియ వల్ల కొన్ని నిమిషాల్లోనే రంగు మాయమవుతుంది.
అందువల్ల పరీక్ష పనిచేసే సూత్రం సరళమైనది: చురుకైన వాయురహిత సూక్ష్మజీవ సముదాయం నీలిరంగును వేగంగా తొలగిస్తుంది; క్రియాశీలత తగ్గిన లేదా దెబ్బతిన్న సూక్ష్మజీవ సముదాయం నెమ్మదిగా తొలగిస్తుంది. తక్కువ సమయం ఆ నమూనాలో ఎక్కువ అవకరణ సామర్థ్యాన్ని సూచిస్తుంది. నమూనాను సరిగ్గా సేకరించి, నిర్వహించి ఉంటే, ఎక్కువ సమయం సూక్ష్మజీవుల క్రియాశీలత తగ్గిందని సూచిస్తుంది.
ఇది రూమెన్ రెడాక్స్ పొటెన్షియల్‌ను నేరుగా కొలవదు. అవకరణ పరీక్షను నేరుగా చేసిన మిల్లీవోల్ట్ కొలతలతో పోల్చిన పశువుల పరీక్షా పద్ధతుల అధ్యయనంలో, అవకరణ సమయానికి, కొలిచిన రెడాక్స్ పొటెన్షియల్‌కు మధ్య రేఖీయ సహసంబంధం కనిపించలేదు. ఈ రెండింటిని ఒకే చరరాశికి పరస్పరం ప్రత్యామ్నాయంగా ఉపయోగించగల కొలతలుగా చూడకూడదని ఆ అధ్యయనం తేల్చింది. పూర్తి పోలిక సారాంశం PubMedలో ఉంది. అవకరణ పరీక్షను సూక్ష్మజీవ సముదాయం పనితీరును అంచనా వేసే పరీక్షగా భావించండి, చవకైన ఎలక్ట్రోడ్‌గా కాదు.
నెమరువేసే జంతువుల్లో సాధారణ అజీర్ణంపై Merck/MSD వివరణలో, ఎక్కువ అవకరణ సమయాన్ని అసాధారణ రూమెన్ pH, తగ్గిన ప్రోటోజోవా సంఖ్యలతో కూడిన అదే లక్షణాల సమూహంలో చేర్చారు. ఏ ఒక్క విలువతోనూ నిర్ధారణ చేయలేం. వాటి సమష్టి నమూనా ఆధారంగానే నిర్ధారణ జరుగుతుంది.
జంతువు వద్దే చేసే ఒక ప్రామాణిక పరీక్షా విధానం
విద్యాసంస్థల మధ్య విధానాలు కొద్దిగా మారుతుంటాయి. కాబట్టి మీరు ఉపయోగించే ఖచ్చితమైన పరిమాణాలు, ఉష్ణోగ్రతను నమోదు చేసి, అదే విధానంలో వచ్చిన ఫలితాలను మాత్రమే పోల్చండి. విస్తృతంగా బోధించే ఒక విధానం ఇలా ఉంటుంది:
- లాలాజలం కలవడం, గాలికి గురికావడం, చల్లబడడం వీలైనంత తక్కువగా ఉండేలా కనీసం 10 నుంచి 20 mL తాజా రూమెన్ ద్రవాన్ని సేకరించండి. వెంటనే పరీక్షించండి.
- 0.03 శాతం మిథిలీన్ బ్లూ ద్రావణాన్ని సిద్ధం చేయండి; ఇది ప్రతి mLకు 0.3 mg.
- ద్రవ పరిమాణంలో 5 శాతానికి సమానమైన రంగు ద్రావణాన్ని కలపండి. అంటే 20 mL ద్రవానికి 1.0 mL రంగు ద్రావణం, లేదా 10 mL ద్రవానికి 0.5 mL రంగు ద్రావణం. రెండింటిలోనూ ద్రవం, రంగు ద్రావణం నిష్పత్తి 20కి 1గానే ఉంటుంది.
- అదే నమూనా నుంచి రంగు పదార్థం కలపని ద్రవాన్ని రెండో నాళంలో ఉంచి, రంగును పోల్చడానికి నియంత్రణ నమూనాగా ఉపయోగించండి.
- మెల్లగా కలిపి, వెంటనే టైమర్‌ను ప్రారంభించండి. స్థానిక విధానాన్ని బట్టి నాళాన్ని శరీర ఉష్ణోగ్రతకు దగ్గరగా, సుమారు 37 నుంచి 39 degrees Celsius వద్ద ఉంచండి.
- పరీక్షనాళంలోని రంగు నియంత్రణ నమూనాతో సమానమయ్యే వరకు పట్టిన సమయాన్ని నమోదు చేయండి. గాలిని తాకే ఉపరితలంపై పలుచని నీలిరంగు వలయం మిగిలి ఉండవచ్చు, ఎందుకంటే అక్కడ ఆక్సిజన్ రంగు పదార్థాన్ని మళ్లీ ఆక్సీకరణ చేస్తుంది. ఆ వలయం మాయమయ్యే వరకు వేచి ఉండకండి.
ఇక్కడ ఆక్సిజన్ ఎందుకు ముఖ్యమో మిథిలీన్ బ్లూ రెడాక్స్ రసాయనశాస్త్రం వివరిస్తుంది. బలంగా కుదపడం, విశాలమైన నోరు తెరిచి ఉన్న నాళం, లేదా ఎక్కువ ఆలస్యం వల్ల ఆక్సిజన్ లోపలికి చేరి, రూమెన్‌లో ఉండే పరిస్థితులతో పోలిస్తే రంగు పదార్థం ఎక్కువసేపు నీలంగా ఉండేలా చేస్తుంది. అదే కారణంతో, కలుషితం కాకుండా రూమెన్ ద్రవాన్ని సేకరించే పద్ధతి వివరాలు ముఖ్యమైనవి. లాలాజలం నమూనాను పలుచన చేసి pHను పెంచుతుంది. అందువల్ల స్టమక్ ట్యూబ్ ఉపయోగించినప్పుడు, తగినంత ద్రవం లభిస్తే చాలామంది పశువైద్యులు మొదట వచ్చిన భాగాన్ని పారవేస్తారు.
వేర్వేరు పరిశీలనలు ఏమి కొలుస్తాయి
అవకరణ సమయం ఒక్క ప్రశ్నకు మాత్రమే సమాధానం ఇస్తుంది. కింద ఉన్న రూమెన్ అంచనా పట్టికలో జంతువు వద్ద చేసే ప్రతి పరిశీలన ఏ సమాచారం ఇస్తుందో చూపించారు. ఒక్క గడిని కాకుండా పూర్తి వరుసను ఉపయోగించండి.
| పరిశీలన | అది కొలిచేది | జంతువు వద్ద సాధారణంగా కనిపించేది | ఫలితాన్ని ప్రభావితం చేసే సాధారణ అంశాలు |
|---|---|---|---|
| మిథిలీన్ బ్లూ అవకరణ సమయం | నమూనాలోని వాయురహిత బ్యాక్టీరియా కార్యాత్మక అవకరణ క్రియాశీలత | పశువుల్లో తరచుగా 2 నుంచి 6 నిమిషాలు; గొర్రెలు, మేకల్లో తరచుగా ఇంకా వేగంగా ఉంటుంది. తగిన క్రియాశీలతకు ఆచరణాత్మక గరిష్ఠ పరిమితిగా 6 నిమిషాలను ఉపయోగిస్తారు; 10 నిమిషాలు దాటిన సమయాలు స్పష్టంగా అసాధారణం | చల్లబడిన, ఆలస్యంగా పరీక్షించిన, గాలికి గురైన లేదా లాలాజలంతో పలుచబడిన నమూనా; ఎక్కువకాలం ఆహారం తీసుకోకపోవడం వల్ల తక్కువ సబ్‌స్ట్రేట్; నోటి ద్వారా ఇచ్చిన యాంటీమైక్రోబియల్స్; వేర్వేరు రంగు ద్రావణ నిష్పత్తులు లేదా ఉష్ణోగ్రతల మధ్య పోలిక |
| రూమెన్ pH | రసాయన వాతావరణం, ఆమ్ల లేదా క్షార భారం | పీచు మేత తినే పశువుల్లో తరచుగా 6.0 నుంచి 7.2కు దగ్గరగా ఉంటుంది; చిన్న నెమరువేసే జంతువుల పాఠ్యగ్రంథాలు తరచుగా సుమారు 6.5 నుంచి 7.5ను పేర్కొంటాయి; ఆహారం, మేత తిన్నప్పటి నుంచి గడిచిన సమయం విలువను మారుస్తాయి | స్టమక్ ట్యూబ్ నమూనాల్లో లాలాజల కలుషితం pHను పెంచుతుంది; సేకరణ తర్వాత కార్బన్ డయాక్సైడ్ నష్టం; ధాన్యపు మేత pHను తగ్గిస్తుంది |
| ప్రోటోజోవా సంఖ్య, చలనశీలత | సీలియేట్ సముదాయం సమగ్రత, ముఖ్యంగా మార్పులకు సున్నితమైన పెద్ద రకాల స్థితి | వెచ్చని తాజా చుక్కలో అనేక పరిమాణాలకు చెందిన జీవులు చురుకుగా ఒక దిశలో కదులుతూ కనిపించడం | చల్లబడితే కదలిక మందగిస్తుంది; తీవ్రమైన అసిడోసిస్ ప్రోటోజోవాను పూర్తిగా తొలగించవచ్చు; ఆలస్యం వల్ల సాధారణ నమూనా కూడా మందకొడిగా కనిపిస్తుంది |
| వాసన, రంగు, చిక్కదనం | కిణ్వన స్వభావం, కలుషితం | స్వల్ప పరిమళంతో, ఆకుపచ్చ కలిసిన గోధుమరంగులో, కొద్దిగా జిగటగా ఉండే ద్రవం | తీవ్రమైన సూక్ష్మజీవ సమతుల్యత భంగంలో కుళ్లిన లేదా పుల్లని వాసన; సరిగా సేకరించకపోవడం వల్ల నీరుగా లేదా ఎక్కువ లాలాజలం కలిసిన ద్రవం |
| రూమెన్ సంకోచాలు, ఆకలి | మొత్తం జంతువులో ముందరి జీర్ణాశయాల పనితీరు, ఆహార స్వీకరణ | చురుకుగా ఉన్న జంతువులో క్రమమైన సంకోచాలు, స్థిరంగా నెమరువేయడం | ఇటీవల మేత మిశ్రమం మారడం, నొప్పి, నిర్జలీకరణం, శరీరవ్యాప్త అనారోగ్యం |
ఈ పట్టికలోని సమష్టి సమాచారమే ముఖ్యమైనది. ఎక్కువ అవకరణ సమయంతో పాటు మందకొడి ప్రోటోజోవా, అసాధారణ pH, బలహీనమైన సంకోచాలు ఉంటే, నిజంగా సూక్ష్మజీవుల క్రియాశీలత తగ్గిందని సూచిస్తుంది. చురుకుగా నెమరువేస్తున్న జంతువులో ప్రోటోజోవా చురుకుగా ఉండి, అవకరణ సమయం మాత్రమే ఎక్కువగా ఉంటే, సమస్య రూమెన్‌లో కాకుండా నమూనాలో ఉండవచ్చని సూచిస్తుంది. చర్య తీసుకునే ముందు మళ్లీ నమూనాను సేకరించండి.
pH, చరిత్రతో కలిపి సమయాన్ని అర్థం చేసుకోవడం
ఆహారం ప్రాథమిక స్థాయిని నిర్ణయిస్తుంది. సాంద్రీకృత మేత అధికంగా ఉన్న ఆహారం వేగంగా కిణ్వనం చెంది, సుమారు ఒక నిమిషంలో రంగును తొలగించవచ్చు. ఎండుగడ్డి ఆహారం తీసుకునే ఆరోగ్యకరమైన జంతువుల్లో కూడా కొన్ని నిమిషాలు పట్టవచ్చు. కాబట్టి తక్కువ సమయం ఒక్కటే మెరుగైన ఆరోగ్యాన్ని నిరూపించదు. కిణ్వనానికి అనువైన సబ్‌స్ట్రేట్ ఎక్కువగా ఉండి, చురుకైన సూక్ష్మజీవులతో కలిసిందని అది చూపిస్తుంది.
తీవ్రంగా ధాన్యం అధికంగా తీసుకోవడం ఈ సరళమైన ధోరణిని మార్చేస్తుంది. మొదట్లో కార్బోహైడ్రేట్ కిణ్వనం తీవ్రంగా ఉండవచ్చు; తర్వాత ఆమ్లం వల్ల కలిగే నష్టం సాధారణ సూక్ష్మజీవ సముదాయాన్ని, ప్రోటోజోవాను అణచివేసి, అవకరణ సమయాన్ని పెంచుతుంది. అందుకే రూమెన్ pH సుమారు 5.5 కంటే తక్కువగా ఉన్నప్పుడు ఈ పరీక్ష చెల్లదని ఒక బోధనా నియమం చెబుతుంది. ఆ దశలో పరీక్షిస్తున్న సూక్ష్మజీవ సముదాయం మారిపోయి ఉంటుంది.
లక్షణాల సమష్టిని అర్థం చేసుకోవడానికి ఆచరణాత్మక మార్గదర్శి:
- సాధారణ pHతో పాటు సుమారు 6 నిమిషాల్లో అవకరణ జరిగితే, సూక్ష్మజీవ సముదాయం కార్యాత్మకంగా చురుకుగా ఉందని సూచిస్తుంది.
- సాధారణ pHతో పాటు అవకరణ సమయం గణనీయంగా ఎక్కువగా ఉంటే, ఆహారం తీసుకోకపోవడం, యాంటీమైక్రోబియల్ ప్రభావం లేదా నాణ్యత దెబ్బతిన్న నమూనా వల్ల క్రియాశీలత తగ్గి ఉండవచ్చని సూచిస్తుంది.
- అధిక pHతో పాటు ఎక్కువ అవకరణ సమయం తరచుగా దీర్ఘకాలం ఆహారం తీసుకోకపోవడం, తక్కువ సబ్‌స్ట్రేట్ ఉండటం తర్వాత కనిపిస్తుంది. అయితే ట్యూబ్ ద్వారా సేకరించిన నమూనాలో లాలాజలం కలిసిందేమో కూడా పరిగణించండి.
- తక్కువ pHతో పాటు ప్రోటోజోవా క్రియాశీలత తగ్గడం, కార్బోహైడ్రేట్లకు సంబంధించిన సూక్ష్మజీవ సమతుల్యత భంగంపై ఆందోళన కలిగిస్తుంది. రూమెన్ pHను అర్థం చేసుకునే మార్గదర్శకాలు ఇక్కడ ఉపయోగపడతాయి. 5.5 కంటే తక్కువ విలువలతో పాటు మొత్తం జంతువు చురుకుదనం తగ్గితే, సాధారణ అజీర్ణం కంటే ధాన్యం అధికంగా తీసుకోవడం, తీవ్రమైన అసిడోసిస్ వైపు సూచిస్తుంది.
ఇటీవల నోటి ద్వారా ఇచ్చిన టెట్రాసైక్లిన్లు, మేతలోని అయోనోఫోర్లు, ఎక్కువకాలం ఇచ్చిన శరీరవ్యాప్త యాంటీమైక్రోబియల్స్, అకస్మాత్తుగా మేత మిశ్రమంలో మార్పులు, ఆహారం తీసుకోకుండా ఉన్న కాలం, నీటి వినియోగం ఎప్పుడూ నమోదు చేయండి. నోటి ద్వారా ఇచ్చే టెట్రాసైక్లిన్లు రూమెన్ సూక్ష్మజీవ సముదాయం క్రియాశీలతను గణనీయంగా తగ్గించగలవని MSD మాన్యువల్ ప్రత్యేకంగా హెచ్చరిస్తుంది. అయోనోఫోర్లు ఉద్దేశపూర్వకంగా బ్యాక్టీరియా సముదాయాలను మారుస్తాయి. ఆ చరిత్ర లేకుండా ఎక్కువ అవకరణ సమయాన్ని అర్థం చేసుకోవడం సాధ్యం కాదు.
నమూనా నాణ్యతకు కూడా సమాన ప్రాధాన్యం ఇవ్వాలి. నియంత్రిత అధ్యయనంలో, అదే జంతువుల నుంచి కాన్యులా ద్వారా సేకరించిన నమూనాలతో పోలిస్తే స్టమక్ ట్యూబ్ నమూనాల్లో pH ఎక్కువగా, ఆవిరయ్యే కొవ్వు ఆమ్లాలు తక్కువగా ఉన్నాయని తేలింది; దీనికి ప్రధాన కారణం లాలాజలం. పరీక్షించిన ప్రతి పరిమాణంలోనూ, సేకరణ తర్వాత 60 నిమిషాలకు అవకరణ సమయం గణనీయంగా పెరిగింది; చిన్న నమూనాలపై ప్రభావం ఎక్కువగా ఉంది. కనీసం 10 mL సేకరించండి, 30 నిమిషాల్లో పరీక్షించండి, అవకరణ పరీక్షను ప్రారంభంలోనే చేయండి, నమూనాను వెచ్చగా ఉంచండి, గాలితో సంపర్కాన్ని తగ్గించండి.
కలిపి చూడకూడని మూడు ఉపయోగాలు
ఒకే రంగు పదార్థం, మూడు వేర్వేరు వ్యవస్థలు.
మొదటిది, ఇక్కడ వివరించిన రూమెన్ ద్రవ పరీక్ష. సేకరించిన రూమెన్ ద్రవమే నమూనా. ప్రయోగశాలలో నమూనాకు 0.03 శాతం రంగు ద్రావణం కలుపుతారు. రంగు మాయమయ్యే వరకు పట్టిన సమయమే పరీక్ష ముగింపు సూచిక. సూక్ష్మజీవుల అవకరణ క్రియాశీలతను అంచనా వేయడమే ఉద్దేశం.
రెండవది, సజీవ నెమరువేసే జంతువుకు మిథిలీన్ బ్లూ ఇవ్వడం. మెథెమోగ్లోబినీమియాతో కూడిన నైట్రేట్ లేదా నైట్రైట్ విషప్రభావానికి శిరలో ఇచ్చే చికిత్స దీనికి స్థిరపడిన ఉదాహరణ; ఇందులో ఔషధం హీమోగ్లోబిన్ పనితీరును పునరుద్ధరిస్తుంది. మోతాదు, ఔషధ రూపం, అవశేషాలు, ఉపసంహరణ కాలానికి సంబంధించిన నియమాలు వర్తిస్తాయి. ఆ నిర్ణయానికి పరీక్షనాళంలో సమయాన్ని కొలవడంతో ఎలాంటి సంబంధమూ లేదు. ఒక నిర్దిష్ట ప్రక్రియలో రంగు పదార్థాన్ని సజీవ జంతువులో ట్రేసర్‌గా ఉపయోగిస్తే, అది ఎక్కడికి వెళ్తుందనేదే సూత్రం; రూమెన్ సూక్ష్మజీవులు దాన్ని ఎంత వేగంగా అవకరణ చేస్తాయనేది కాదు.
మూడవది, పాల అవకరణ పరీక్ష. ఇందులో నమూనా పాలు. పాల నమూనాకు రంగు పదార్థాన్ని కలుపుతారు. నీలిరంగు వేగంగా మాయమవడం సాధారణంగా ఎక్కువ సూక్ష్మజీవ క్రియాశీలతను, తక్కువ నిల్వ నాణ్యతను సూచిస్తుంది; నెమ్మదిగా అవకరణ జరగడం మెరుగైన నాణ్యతను సూచిస్తుంది. ఇది ఆహార సూక్ష్మజీవశాస్త్రానికి, పాల నాణ్యత పరీక్షలకు సంబంధించినది; రూమెన్ వైద్యానికి కాదు. ఇది బ్యాక్టీరియా సంఖ్యను లెక్కించే పరీక్ష కూడా కాదు.
పేర్లను స్పష్టంగా పేర్కొనడం పొరపాట్లను నివారిస్తుంది: రూమెన్ ద్రవ అవకరణ సమయం, శరీరవ్యాప్త మిథిలీన్ బ్లూ చికిత్స లేదా ట్రేసర్ వినియోగం, పాల అవకరణ పరీక్ష. భద్రతా నియమాన్ని ఒక్క వాక్యంలో చెప్పవచ్చు. రూమెన్ పరీక్షకు ఉపయోగించే రంగు పదార్థం ప్రయోగశాల పరీక్షనాళంలోనే ఉంటుంది; ఆ నాళాన్ని పారవేస్తారు. పరీక్ష చేయడానికి దాన్ని జంతువుకు ఎప్పుడూ ఇవ్వరు.
క్షేత్రం నుంచి వచ్చే ఫోన్ కాల్‌కు ఒక సంక్షిప్త నియమం
రంగు ద్రావణాన్ని 0.03 శాతంగా, 20 భాగాల ద్రవానికి 1 భాగం రంగు ద్రావణంగా ప్రామాణీకరించండి. తాజా ద్రవాన్ని శరీర ఉష్ణోగ్రతకు దగ్గరగా ఉంచి, రంగు పదార్థం కలపని నియంత్రణ నమూనాతో పోల్చి పరీక్షించండి. పట్టిన నిమిషాలను pH, ప్రోటోజోవా చలనశీలత, సేకరణ నాణ్యత, ఆహారం, మందులు, సంకోచాలు, ఆకలి, మలం, శరీర ద్రవస్థితితో కలిపి అర్థం చేసుకోండి. విడిగా ఉన్న ఒక సంఖ్యతో అజీర్ణాన్ని ఎప్పుడూ నిర్ధారించలేం. పరస్పరం సరిపోలే లక్షణాల సమష్టి ఆధారంగా నిర్ధారించవచ్చు.