ලිපිය
මෙතිලීන් බ්ලූට මයිටොකොන්ඩ්‍රියානු සංකීර්ණ III මඟහැර යා හැකිද? අධ්‍යයන එකිනෙකට වෙනස් නිගමන දක්වන්නේ ඇයි
අවහිර කළ මයිටොකොන්ඩ්‍රියානු සංකීර්ණ III මෙතිලීන් බ්ලූට මඟහැර යා හැකිදැයි රසායනාගාර දෙකක් විමසා බැලීය. එකක පිළිතුර වූයේ නොහැකි බවය. අනෙකේ පිළිතුර වූයේ හැකි බවය. දෙකම සතුව දත්ත තිබිණි.
මීයන්ගේ මොළයේ මයිටොකොන්ඩ්‍රියා යොදාගත් පළමු අධ්‍යයනයෙන්, එම වර්ණකයට එසේ කළ නොහැකි බව සොයාගන්නා ලදී. කෘන්තක විශේෂ තුනක මොළයේ මයිටොකොන්ඩ්‍රියා යොදාගත් දෙවන අධ්‍යයනයෙන්, එයට අර්ධ වශයෙන් එසේ කළ හැකි බව සොයාගන්නා ලදී. මීයන්ගේ අක්මාව පිළිබඳ තුන්වන අධ්‍යයනයක්ද මේවා සමඟ බොහෝ විට උපුටා දැක්වුවත්, එය පරීක්ෂා කළේ වෙනත් දෙයකි. එයට අදාළ සීමාව තුළ එය තැබූ විට ව්‍යාකූලත්වයෙන් අඩක්ම ඉවත් වේ.
සියලු තත්ත්වයන්ට පොදු යාන්ත්‍රණයක් මෙහි ප්‍රකාශ කළ නොහැක. ඇත්තේ වෙනස් අවහිරකාරක, මාත්‍රා සහ මිනුම් සහිත පරීක්ෂණ තුනකි. මුලින් තත්ත්වයන් කියවන්න. නිගමන පැමිණෙන්නේ ඉන් පසුවය.
මෙහි මඟහැර යාමෙන් අදහස් කරන්නේ කුමක්ද
ඉලෙක්ට්‍රෝන සංකීර්ණ I හරහා (NADH වෙතින්) හෝ සංකීර්ණ II හරහා (සක්සිනේට් වෙතින්) දාමයට ඇතුළු වී, සංකීර්ණ III හරහා සයිටොක්‍රෝම් c වෙතත්, ඉන්පසු සංකීර්ණ IV හරහා ඔක්සිජන් වෙතත් ගමන් කරයි. එම ගමනේදී ගොඩනැඟෙන අනුක්‍රමණය සෛලය ATP නිපදවීමට භාවිත කරයි.
මඟහැර යාමක් පිළිබඳ ප්‍රකාශයකින් අදහස් වන්නේ මෙතිලීන් බ්ලූ අවහිරය ඇති ස්ථානයට පෙර ඉලෙක්ට්‍රෝන ලබාගෙන, එම ස්ථානයට පසුව ඒවා භාර දෙන බවය. ඔක්සිකරණය වූ වර්ණකය NADH හෝ දාමයේ මුල් සංරචකවලින් ඉලෙක්ට්‍රෝන ලබාගෙන ලියුකොමෙතිලීන් බ්ලූ බවට පත්වෙයි. එම ඔක්සිහරණය වූ ආකාරය ඉලෙක්ට්‍රෝන සයිටොක්‍රෝම් c වෙත හෝ නැවත දාමයට භාර දෙයි. එම භාරදීම සිදුවන්නේ අවහිරයට පසුව නම්, ශ්වසනය සහ පටල විභවය අර්ධ වශයෙන් යථා තත්ත්වයට පත්වෙයි. එය සිදුවන්නේ අවහිරය ඇති ස්ථානයේ හෝ ඊට පෙර නම්, කිසිවක් යථා තත්ත්වයට පත් නොවේ.
සංකීර්ණ III හි එක් විශේෂ ලක්ෂණයක් මෙම මතභේදයෙන් බොහෝ කොටසක් තීරණය කරයි. එම සංකීර්ණය නිෂේධක බන්ධන ස්ථාන දෙකක් සහිත Q චක්‍රයක් ක්‍රියාත්මක කරයි. ඇන්ටිමයිසින් Qi ස්ථානයට බැඳෙයි. මයික්සොතයසෝල් Qo ස්ථානයට බැඳෙයි. මේවායින් එකක් පමණක් භාවිත කරන අධ්‍යයනයක් පරීක්ෂා කර ඇත්තේ සංකීර්ණයේ අඩක් පමණි.
පළමු අධ්‍යයනය: මීයන්ගේ මොළයේ මයිටොකොන්ඩ්‍රියා තුළ මඟහැර යාමක් නැත
Gureev සහ සගයෝ C57BL/6 මීයන්ගේ මස්තිෂ්ක බාහිකයෙන් ලබාගත්, ඩිජිටොනින් භාවිතයෙන් වෙන් කළ මයිටොකොන්ඩ්‍රියා යොදාගෙන, ප්‍රෝටීන සාන්ද්‍රණය 0.1 mg per ml යටතේ පරීක්ෂා කළහ. උපස්තර තත්ත්ව තුනක් තිබිණි: පයිරුවේට් සහ මැලේට් එක් එක් ද්‍රව්‍යය 5 mM බැගින්, සක්සිනේට් 10 mM සමඟ ග්ලූටමේට් 2 mM, සහ L-ප්‍රෝලීන් 10 mM. අවහිරකාරක වූයේ රොටෙනෝන් 1 micromolar (සංකීර්ණ I) සහ ඇන්ටිමයිසින් 1 microgram per ml (සංකීර්ණ III) ය. වර්ණක මාත්‍රා 0.5, 1 සහ 2 micromolar වූ අතර ප්‍රධාන සාන්ද්‍රණය 1 micromolar විය. ක්‍රමවේද සහ මිනුම් වක්‍ර FEBS Letters පර්යේෂණ වාර්තාවේ ඇත.
සංකීර්ණ I මඟහැර යාම සාර්ථක විය. රොටෙනෝන් මඟින් ADP උත්තේජිත ශ්වසනය ආසන්න වශයෙන් 121 සිට 2 nmol per minute per mg දක්වා අඩු කළ අතර, 1 micromolar වර්ණකය එය ආසන්න වශයෙන් 21 දක්වා යථා තත්ත්වයට පත් කළේය. පයිරුවේට් සහ මැලේට් යටතේත්, L-ප්‍රෝලීන් යටතේත් පටල විභවය යථා තත්ත්වයට පත්විය.
සංකීර්ණ III මඟහැර යාම සාර්ථක නොවීය. ඇන්ටිමයිසින් ශ්වසනය ආසන්න වශයෙන් 16 දක්වා අඩු කළ අතර, වර්ණකය එය වැඩි කළේ ආසන්න වශයෙන් 20 දක්වා පමණි. 5 micromolar දක්වා වර්ණක මාත්‍රාවලදී කිසිදු උපස්තරයක් යටතේ පටල විභවය යථා තත්ත්වයට පත් නොවීය. පෙරොක්සයිඩ් දත්තද එම නිගමනයටම යොමු විය: වර්ණකය පමණක් යෙදූ විට, මාත්‍රා තුනේදී පෙරොක්සයිඩ් විමෝචනය ආසන්න වශයෙන් 76 pmol per minute per mg වූ මූලික අනුපාතයක සිට දළ වශයෙන් 1170, 1460 සහ 1945 දක්වා වැඩි විය. එහෙත් ඇන්ටිමයිසින්, වර්ණකය නිසා ඇති වූ එම සංඥාව පිළිවෙළින් ආසන්න වශයෙන් සියයට 25, 88 සහ 96 කින් අඩු කළේය. ඔක්සිහරණය වූ වර්ණකය සෘජුව ඔක්සිජන් සමඟ ප්‍රතික්‍රියා කළේ නම්, සංකීර්ණ III අවහිර කිරීමෙන් එම සංඥාව යටපත් නොවිය යුතුය. කතුවරුන්ගේ නිගමනය වූයේ ඔක්සිහරණය වූ වර්ණකය, ඇන්ටිමයිසින් අවහිරයට පෙර පිහිටි සංකීර්ණ III හි Qo ස්ථානයේදී ඔක්සිකරණය වන බවය. මෙම කෙටි චක්‍රය වචනවලින් දැක්වුවහොත්: දායකයන්ගෙන් වර්ණකයට, වර්ණකයෙන් Qo වෙත, ඉන්පසු සාමාන්‍ය මාර්ගයෙන් ඉදිරියට. රොටෙනෝන් අවහිරය මඟහැර යයි. ඇන්ටිමයිසින් අවහිරය මඟහැර නොයයි.
දෙවන අධ්‍යයනය: විශේෂ තුනක, නිෂේධක ස්ථාන දෙකේදීම අර්ධ මඟහැර යාමක්
Svab සහ සගයෝ පරීක්ෂණ සැලසුම පුළුල් කළහ. මීයන්, රැට් මීයන් සහ ගිනි පිග් සතුන්ගේ මොළයෙන් ලබාගත්, පර්කෝල් භාවිතයෙන් වෙන් කළ මයිටොකොන්ඩ්‍රියා එම 0.1 mg per ml සාන්ද්‍රණයෙන්ම පරීක්ෂා කළහ. උපස්තර වූයේ පයිරුවේට් සහ මැලේට් හෝ ග්ලූටමේට් සහ මැලේට්, එක් එක් ද්‍රව්‍යය 5 mM බැගිනි. ඔවුහු සංකීර්ණ III අවහිරකාරක දෙකක් භාවිත කළහ: ඇන්ටිමයිසින් A 0.3 micromolar සහ මයික්සොතයසෝල් 1 micromolar. බොහෝ පරීක්ෂණවල වර්ණකය 2 micromolar වූ අතර, සයිටොක්‍රෝම් c පරීක්ෂණවල එය 0.5 විය. සමාන පරීක්ෂණ ක්‍රම යටතේ විශේෂ තුනම පිළිබඳ විස්තර විවෘත ප්‍රවේශ පර්යේෂණ පත්‍රිකාවේ ඇත.
විශේෂ තුනේම, අවහිර දෙකම අර්ධ වශයෙන් මඟහැර ගියේය. මීයන්ගේ මයිටොකොන්ඩ්‍රියා තුළ ඇන්ටිමයිසින් ශ්වසනය යටපත් කළ අතර, වර්ණකය එය ආසන්න වශයෙන් සියයට 60 කින්, දළ වශයෙන් 37 සිට 59 nmol per minute per mg දක්වා වැඩි කළේය. මයික්සොතයසෝල් එය සියයට 88 කින්, ආසන්න වශයෙන් 4.5 දක්වා යටපත් කළ අතර, වර්ණකය එය පස් ගුණයකින් ආසන්න වශයෙන් 23 දක්වා වැඩි කළේය. නිෂේධක දෙකෙන් කවරක් යටතේ වුවද පටල විභවය අර්ධ වශයෙන් නැවත ධ්‍රැවීකරණය විය. දෘශ්‍යමය මිනුම් දෝෂ බැහැර කිරීමට වර්ණක දෙකක් (සැෆ්‍රනින් O සහ අනුපාතමය TMRM) යොදා එය මනින ලදී.
පළමු අධ්‍යයනය කිසිවිටෙක නොකළ ආකාරයට, මෙම පත්‍රිකාව ඉලෙක්ට්‍රෝන භාරදීමද සෘජුව පරීක්ෂා කළේය. පිටතින් එක් කළ 25 micromolar ඇසිටිලීකරණය කළ සයිටොක්‍රෝම් c, නිෂේධක තිබුණත් නැතත්, ශක්තිමත් තත්ත්වයේ පවතින මයිටොකොන්ඩ්‍රියා මඟින් ඔක්සිහරණය නොවීය. එහෙත් වර්ණකය එක් කිරීමෙන් අවස්ථා දෙකේදීම ඔක්සිහරණය සිදුවිය. සෛල රහිත බෆර ද්‍රාවණයකදී, NADH සහ වර්ණකය එක්ව NADH ප්‍රමාණයට සමානුපාතික වේගයකින් සයිටොක්‍රෝම් c ඔක්සිහරණය කළේය. මෙම දිගු පැනීම වචනවලින් දැක්වුවහොත්: ඔක්සිහරණ සමතුල්‍යයන් වර්ණකයට, වර්ණකය සෘජුව සයිටොක්‍රෝම් c වෙත, සංකීර්ණ IV හරහා ඔක්සිජන් වෙත. එම මාර්ගය සංකීර්ණ III මුළුමනින්ම මඟහරින බැවින් අවහිරකාරක දෙකම මඟහැර යා හැක.
අමතර මිනුම් දෙකක් එම අර්ථකථනයට සහාය දක්වයි. මයික්සොතයසෝල් යෙදූ මයිටොකොන්ඩ්‍රියාවලට වර්ණකය එක් කළ විට NAD(P)H ප්‍රතිදීප්තිය අඩු විය. එයින් අදහස් වන්නේ ඔක්සිහරණ සමතුල්‍යයන් නව මාර්ගය හරහා ඉවත් වූ බවය. තවද, 660 nm දී වර්ණකයේ අවශෝෂණය එක් එක් එකතු කිරීම සමඟ වෙනස් වූ අතර, කේන්ද්‍රාපසාරණයෙන් ලබාගත් උඩු ද්‍රාවණ පෙන්වූයේ ශක්තිමත් තත්ත්වයේ පවතින මයිටොකොන්ඩ්‍රියා තුළ ඔක්සිකරණය වූ වර්ණකය සිය ගුණයකට වැඩියෙන් සංකේන්ද්‍රණය වී, විභවය බිඳවැටුණු විට පිටව යන බවය. ප්‍රෝටෝන ගණනයද මෙයට ගැළපේ: පොම්ප කිරීමේ පියවර මඟහැරීමෙන් ඉලෙක්ට්‍රෝන යුගලයකට ප්‍රෝටෝන 10 වෙනුවට දළ වශයෙන් 2 ක් පමණක් ලැබේ. එබැවින් අර්ධ නැවත ධ්‍රැවීකරණයක් පමණක් තිබියදී ඔක්සිජන් භාවිතය වේගවත් වීම සැබෑ මඟහැර යාමක ලක්ෂණයකි; එවැන්නක් නොමැති බවට සාක්ෂියක් නොවේ.
එම මයිටොකොන්ඩ්‍රියා සැකසුමම, නොසැලකිලිමත් කියවීමකින් වැරදි නිගමනවලට යොමු කළ හැකි ප්‍රතිචාර ලබා දුන්නේය. නිෂේධකය සහ වර්ණකය එකට තිබියදී, ADP ශ්වසනය වැඩි කරනවා වෙනුවට අඩු කළේය. ප්‍රවාහනය අවහිර කිරීම එය මන්දගාමී කරනවා වෙනුවට උත්තේජනය කළේය. ඒ අතර පටල විභවය සාමාන්‍ය දිශාවලටම වෙනස් විය. මෙම පද්ධතියේ ඔක්සිජන් පරිභෝජනය පමණක් සලකා බැලීම නොමඟ යවයි.
තුන්වන අධ්‍යයනය: සංකීර්ණ III නොව I සහ II පරීක්ෂා කළ අක්මා අධ්‍යයනය
Lee සහ Boelsterli මීයන්ගේ අක්මා මයිටොකොන්ඩ්‍රියා සහ වගා කළ අක්මා සෛල භාවිත කළහ. ඒවාට හානි සිදු කර තිබුණේ එෆාවිරෙන්ස් (සංකීර්ණ I, IC50 ආසන්න වශයෙන් 30 micromolar) සහ අයිසොනියාසිඩ් පරිවෘත්තීය ඵලයක් වන හයිඩ්‍රසීන් (සංකීර්ණ II, IC50 ආසන්න වශයෙන් 30 micromolar) මඟිනි. ආසන්න වශයෙන් 30 micromolar වර්ණකය, ඔක්සිකාරක සහ පටක නෙරෝසිස් ආකාරයේ සෛල මරණය අඩු කරන අතරම NADH ඔක්සිකරණය, පටල විභවය සහ ATP යථා තත්ත්වයට පත් කළේය. Redox Biology පර්යේෂණ පත්‍රිකාව එය ආකෘතිගත කරන්නේ වර්ණකය හානි වූ සංකීර්ණ I සහ II මඟහැර ඉලෙක්ට්‍රෝන ගෙන යන ආකාරයක් ලෙසය.
එම ප්‍රතිඵලය දාමයේ පෙර කොටස පිළිබඳ තහවුරු වූ පසුබිමකි. එහි සංකීර්ණ III අවහිර කර නොතිබූ බැවින්, එය සංකීර්ණ III ගැන කිසිවක් නොකියයි. එයට මොළය පිළිබඳ අධ්‍යයන දෙකෙන් එකක්වත් තහවුරු කිරීමට හෝ ප්‍රතික්ෂේප කිරීමට නොහැක.
තත්ත්වයන් සසඳන වගුව
| තත්ත්වය | Gureev 2019 | Svab 2021 | Lee 2014 |
|---|---|---|---|
| විශේෂය සහ පටකය | මීයාගේ මස්තිෂ්ක බාහිකය | මීයාගේ, රැට් මීයාගේ, ගිනි පිග් සතාගේ මොළය | මීයාගේ අක්මාව, මයිටොකොන්ඩ්‍රියා සහ සෛල |
| වර්ණක මාත්‍රාව | 0.5 සිට 2 micromolar, ප්‍රධාන අගය 1 | 2 micromolar, cyt c පරීක්ෂණවල 0.5 | ආසන්න වශයෙන් 30 micromolar |
| සංකීර්ණ III අවහිරකාරකය | ඇන්ටිමයිසින් 1 ug per ml, Qi පමණි | ඇන්ටිමයිසින් 0.3 uM සමඟ මයික්සොතයසෝල් 1 uM, Qi සහ Qo | නැත |
| උපස්තර | PM, සක්සිනේට් ග්ලූටමේට්, ප්‍රෝලීන් | PM හෝ GM | NADH හා සම්බන්ධ, I සහ II හානි |
| ප්‍රධාන මිනුම් අන්ත ලක්ෂ්‍ය | ශ්වසනය, විභවය, පෙරොක්සයිඩ් | ශ්වසනය, වර්ණක දෙකකින් මනින විභවය, NAD(P)H, වර්ණකයේ ඔක්සිකරණ-ඔක්සිහරණ තත්ත්වය, cyt c ඔක්සිහරණය | ශක්ති ක්‍රියාකාරිත්වය, විභවය, ATP, ඔක්සිකාරක, මරණය |
| ප්‍රතිඵලය | සංකීර්ණ I මඟහැර යාම ඇත, III නැත | III අවහිරකාරක දෙකෙන් කවරක් යටතේ වුවද අර්ධ මඟහැර යාමක් | I සහ II හානි වූ ස්ථාන මඟහැර යාම |
සංකීර්ණ III අධ්‍යයන දෙකම තමන්ගේ පරීක්ෂණ සැකසුම සම්බන්ධයෙන් නිවැරදි විය හැකි හේතු හතරක්
1. අවහිරකාරකය එකම මැදිහත්වීමක් නොවීය. එක් පැත්තක ඇන්ටිමයිසින් පමණක් 1 microgram per ml ය; අනෙක් පැත්තක ඇන්ටිමයිසින් 0.3 micromolar සමඟ වෙනම Qo ස්ථාන අවහිරකාරකයක් ඇත. Qo ස්ථානයට ඉලෙක්ට්‍රෝන සපයන වර්ණක මාර්ගයක් අසාර්ථක වන තැනම, සෘජුව සයිටොක්‍රෝම් c වෙත යන මාර්ගයක් සාර්ථක වෙයි. එක් ස්ථානයක් පරීක්ෂා කිරීමෙන් ස්ථාන දෙකම නියෝජනය කළ නොහැක.
2. වර්ණක මාත්‍රාව සහ කාලය වෙනස් විය. ප්‍රධාන සාන්ද්‍රණ 1 සහ 2 micromolar විය. මෙය ඔක්සිකරණ-ඔක්සිහරණ චක්‍රයක ක්‍රියා කරන ද්‍රව්‍යයක් වන අතර, එහි අවශෝෂණය සහ සෘජු සයිටොක්‍රෝම් c ඔක්සිහරණය සාන්ද්‍රණය හා කාලය මත රඳා පවතී. කුඩා මාත්‍රා වෙනස්කම් සමඟ මිනුම් ලබාගත් කාලයේ වෙනස්කම්ද එක් වූ විට, එකම ජාලයේ වෙනස් මාර්ග කොටස් අනාවරණය විය හැක.
3. මයිටොකොන්ඩ්‍රියා සැකසුම් වෙනස් විය. ඩිජිටොනින් මඟින් වෙන් කිරීම සහ පර්කෝල් අනුක්‍රමණයක් මඟින් වෙන් කිරීම, එකිනෙකට අතිච්ඡාදනය වන නමුත් එක සමාන නොවන මයිටොකොන්ඩ්‍රියා සමූහ තෝරාගනී. ප්‍රෝටීන සාන්ද්‍රණය 0.1 mg per ml ලෙස සමාන වූ නිසා එම විචල්‍යය හේතුවක් ලෙස බැහැර කළ හැක. එහෙත් උපසමූහය සහ ව්‍යුහාත්මක අඛණ්ඩතාව බැහැර කළ නොහැක. විශේෂය පිළිබඳ සැකයද ඉවත් විය: දෙවන කණ්ඩායම මීයන් තුළද එම ප්‍රතිචාර රටාව නැවත ලබාගත්තේය.
4. උපස්තර තත්ත්වය වර්ණකයට කළ හැකි දේ තීරණය කරයි. එක් පැත්තක උපස්තර තත්ත්ව තුනක්ද, අනෙක් පැත්තක NADH හා සම්බන්ධ උපස්තර යුගලද තිබිණි. NADH සැපයුම සහ පටල විභවය එක්ව වර්ණකය කෙතරම් වේගයෙන් ඔක්සිහරණය වේද සහ එය කොතැන බෙදී පවතීද යන්න තීරණය කරයි. ඔක්සිකරණය වූ සයිටොක්‍රෝම් c අසල ඔක්සිහරණය වූ වර්ණකය අවශ්‍ය වන මාර්ගයක් එම තේරීම මත රඳා පවතී.
මඟහැර යාම පිළිබඳ ඊළඟ ප්‍රකාශය කියවන්නේ කෙසේද
අවහිර කළේ කුමන සංකීර්ණයද, කුමන නිෂේධකයෙන්ද, කුමන ස්ථානයේද, කුමන මාත්‍රාවෙන්ද යන්න විමසන්න. වර්ණක සාන්ද්‍රණය සහ මිනුම ලබාගත් වේලාව විමසන්න. පටකය, විශේෂය, වෙන් කිරීමේ ක්‍රමය, ප්‍රෝටීන සාන්ද්‍රණය සහ උපස්තරය විමසන්න. තවද විභවය, ශ්වසනය, ඔක්සිකරණ-ඔක්සිහරණ තත්ත්වය සහ සෘජු ඉලෙක්ට්‍රෝන භාරදීමේ පරීක්ෂණය එකම නිගමනයට යොමු වේදැයි විමසන්න. මෙහි එක් වරකට වඩා ඔක්සිජන් පරිභෝජනය පමණක් වැරදි නිගමනයකට යොමු කළ බැවිනි.
සීමිත සාරාංශය තවමත් වලංගුය. වර්ණකය මඟින් සංකීර්ණ I මඟහැර යාම පිළිබඳ එකඟතාවක් ඇත. සංකීර්ණ III සම්බන්ධයෙන්, ඇන්ටිමයිසින් 1 microgram per ml සහ වර්ණකය 1 micromolar යටතේ මීයන්ගේ මයිටොකොන්ඩ්‍රියා ක්‍රියාකාරී මඟහැර යාමක් නොපෙන්වයි. එහෙත් ඇන්ටිමයිසින් 0.3 micromolar හෝ මයික්සොතයසෝල් 1 micromolar සමඟ වර්ණකය 2 micromolar යටතේ විශේෂ තුනක්, වර්ණකයෙන් සෘජුව සයිටොක්‍රෝම් c වෙත ඉලෙක්ට්‍රෝන හුවමාරුව සමඟ අර්ධ මඟහැර යාමක් පෙන්වයි. එම ප්‍රකාශ දෙකම එකවර සත්‍ය විය හැක. ඊට වඩා පුළුල් ඕනෑම නිගමනයක් දත්තවල සීමාව ඉක්මවා යන අනුමානයකි.
ආශ්‍රිත කියවීම් මෙම මතභේදාත්මක ප්‍රකාශය මතභේද රහිත රසායන විද්‍යාවේ සීමාව තුළ තබයි: ඉලෙක්ට්‍රෝන භාරදීමේ ක්‍රියාවලිය සඳහා මෙතිලීන් බ්ලූ ඉලෙක්ට්‍රෝන ගෙන යන්නේ කෙසේද, දාමයේ පෙර කොටස පිළිබඳ තහවුරු වූ අවස්ථාව සඳහා සංකීර්ණ I මඟහැර යාමේ පරීක්ෂණ, වර්ණක දෙකක් අවශ්‍ය වූයේ ඇයිද යන්න සඳහා පටල විභව මිනුම් සහ ඒවායේ කෘත්‍රිම දෝෂ, සහ මාත්‍රාව හා කාලය සම්බන්ධ උගුල් සඳහා ඔක්සිකරණ-ඔක්සිහරණ චක්‍රවල ක්‍රියා කරන ද්‍රව්‍ය රසායනාගාරයේ හැසිරවීම පිළිබඳ කියවීම්.