ميٿيلين بلو جي حل پذيري ۽ محلول جي تياري: ليبارٽري رهنمائي

ٻه ٽيڪنيشن پائوڊر مان ميٿيلين بلو جو 1 سيڪڙو محلول تيار ڪن ٿا. هڪ 1.00 گرام توري ٿو ۽ فلاسڪ جو حجم 100 mL تائين پورو ڪري ٿو. ٻيو 1.00 گرام توري، ان کي 100 mL پاڻيءَ ۾ وجهي ٿو ۽ ڪم پورو سمجهي ٿو. ٽيون ٽيڪنيشن ٻئي لاٽ مان 1.00 گرام توري ٿو ۽ اهڙي ڪنسنٽريشن حاصل ڪري ٿو جنهن جو فرق ماپي سگهجي ٿو. ٽنهي بوتلن تي هڪجهڙا ليبل لڳل آهن. ڪنهن به بوتل ۾ بلڪل اهو ناهي جيڪو ليبل تي لکيل آهي، ۽ اهي فرق ٽن ڳالهين مان پيدا ٿين ٿا جن کي آسانيءَ سان پاڻ ۾ منجهائي سگهجي ٿو: محلّل ڪيترو مادو حل ڪري سگهي ٿو، توريل پائوڊر اصل ۾ ڇا آهي، ۽ سيڪڙو ڪهڙي شيءِ ڏانهن اشارو ڪري ٿو.

هي رهنمائي رڳو ليبارٽريءَ ۾ محلول تيار ڪرڻ بابت آهي: رنگڻ لاءِ محلول، اشاري مادا، تجزياتي اسٽاڪ محلول، ۽ استعمال لاءِ رقيق ڪيل محلول. اها وات ذريعي وٺڻ يا انجيڪشن لاءِ دوا تيار ڪرڻ جو نسخو ناهي، ۽ هتي ڏنل ڪنسنٽريشنن کي دوائن جي خوراک نه سمجهڻ گهرجي.

حل پذيري ڇا طئي ڪري ٿي، ۽ ڇا نه ٿي ڪري

رنگ جي لحاظ کان ميٿيلين بلو جي پاڻيءَ ۾ حل پذيري گهڻي آهي. ميٿيلين بلو بابت PubChem جو مرڪب رڪارڊ 25 C تي لڳ ڀڳ 43.6 گرام في ليٽر ٻڌائي ٿو، جيڪو 100 mL ۾ 4.36 گرام، يا 4.36 سيڪڙو w/v جي برابر آهي. ساڳئي گرمي پد تي ڪيل هڪ آزاد توازني مطالعي ۾ 43.21 g/L ماپيو ويو ۽ تجرباتي غلطيءَ جي حد اندر پراڻي قدر جي تصديق ٿي.

اهو انگ وڌ ۾ وڌ حد آهي، نه ڪو هدف. 1 سيڪڙو اسٽاڪ محلول 10 g/L هوندو آهي، جيڪو ان حد جي چوٿين حصي کان به گهٽ آهي. 0.1 سيڪڙو اسٽاڪ محلول 1 g/L هوندو آهي، يعني لڳ ڀڳ ان جو چاليهون حصو. جيڪڏهن ڪمري جي گرمي پد تي صحيح نموني ملائڻ کان پوءِ به 1 سيڪڙو تياريءَ ۾ ٺوس ذرڙا باقي رهن، ته مسئلو لڳ ڀڳ ڪڏهن به حل پذيريءَ جي حد نه هوندو آهي. عام طور سبب پائوڊر جو پوريءَ طرح نه ڀڄڻ، ٿڌو پاڻي، پائوڊر جون ڳوڙهيون جن کي وڌيڪ وقت گهرجي، يا حل ٿيندڙ مادي جي غلط سڃاڻپ هوندو آهي. گرم پاڻي ۽ هلائڻ سان انهن مان گهڻا مسئلا حل ٿي وڃن ٿا. جيڪڏهن گرم ڪيو ويو هجي، ته آخري حجم پورو ڪرڻ کان اڳ فلاسڪ کي ان گرمي پد تي موٽڻ ڏيو جنهن تي ان جي حجمي پيماني جي تصديق ٿيل آهي.

ٻين محلّلن ۾ حل پذيري گهٽ آهي ۽ مختلف ماخذن ۾ ڏنل قدر وڌيڪ مختلف آهن؛ ان جو هڪ سبب اهو آهي ته آزمائشي مادي جي هائيڊريٽ حالت مختلف هوندي آهي. روزمره جي ليبارٽري اسٽاڪ محلولن لاءِ پاڻي ئي معياري حوالو آهي. ايٿانول رنگ کي حل ڪري ٿو، پر پاڻيءَ جي ڀيٽ ۾ گهڻو گهٽ مقدار حل ڪري سگهي ٿو؛ ڪلوروفارم به ان کي حل ڪري ٿو، پائريڊين رڳو ٿورو، ۽ ڊائي ايٿائل ايٿر عملي طور نه ٿو ڪري. ماپيل سلسلن ۾ ايسيٽون ۽ ايٿائل ايسيٽيٽ جي حل پذيري پاڻيءَ کان گهڻو هيٺ آهي. غير آبي ڪم لاءِ ڪنهن به دستي ڪتاب ۾ ڏنل انگ کي محلول سازيءَ جي قطعي حد بدران شروعاتي اندازو سمجهو ۽ اصل لاٽ سان ان جي تصديق ڪريو. عملي ڳالهه سادي آهي: جيڪڏهن مقصد 1 سيڪڙو يا ان کان گهٽ مقرر آبي ڪنسنٽريشن آهي، ته پاڻي حل پذيريءَ جي حد کان ڪافي گنجائش ڏئي ٿو.

پائوڊر هڪ ئي قسم جو نه هوندو آهي

ليبارٽري استعمال لاءِ وڪرو ٿيندڙ ميٿيلين بلو پائوڊر هڪ ڪلورائيڊ لوڻ آهي، جنهن جي بلوري ڍانچي ۾ پاڻي موجود هوندو آهي، ۽ ان پاڻيءَ جو مقدار بدلجندو رهي ٿو. بي آب آئن جو ماليڪيولي وزن 319.85 g/mol آهي. عام طور ڄاڻايل ٽرائي هائيڊريٽ جو وزن 373.90 g/mol ۽ پينٽا هائيڊريٽ جو 409.93 g/mol آهي؛ اهي قدر PubChem رڪارڊ سان گڏ خلاصو ڪيل USP مونوگراف جي ڊيٽا ۾ جدول جي صورت ۾ ڏنل آهن.

تجارتي بوتلن تي اڪثر ٽرائي هائيڊريٽ، CAS 7220-79-3، لکيل هوندو آهي، پر ٺوس حالت بابت مطالعي مان معلوم ٿيو آهي ته اصل مادو پينٽا هائيڊريٽ، لڳ ڀڳ 2.2 پاڻيءَ جي ماليڪيولن وارو جزوي هائيڊريٽ، ڊائي هائيڊريٽ يا مونو هائيڊريٽ ٿي سگهي ٿو؛ ڪجهه تجزين ۾ ٽرائي هائيڊريٽ جي ڪا الڳ بلوري حالت نه ملي آهي. هي رنگ نمي به جذب ڪري ٿو، تنهنڪري کليل بوتل ۾ پاڻيءَ جو مقدار آهستي آهستي بدلجي ٿو. ڪيفيتي رنگڻ لاءِ ان جو اثر تمام ٿورو آهي. مقداري تجزياتي ڪم لاءِ اهو تمام اهم آهي، ان ڪري تجزيي جي سرٽيفڪيٽ تي خالص مادي جي مقدار ۽ پاڻيءَ جي مقدار پڙهڻ بابت رهنمائي ۾ سامهون واري ليبل تي لکيل ٽرائي هائيڊريٽ جي لفظ کان وڌيڪ لاٽ جي دستاويز کي معتبر سمجهيو ويو آهي.

ان مان درستگيءَ جا ٻه طريقا نڪرن ٿا، ۽ هڪ وقت ۾ رڳو هڪ استعمال ڪرڻ گهرجي. جيڪڏهن سرٽيفڪيٽ ۾ خالص مادي جو مقدار ۽ پاڻيءَ جو مقدار يا سڪائڻ دوران وزن جي گهٽتائي ڏنل هجي، ته اهي انگ سڌو استعمال ڪريو. جيڪڏهن سرٽيفڪيٽ جي ڊيٽا موجود نه هجي ۽ ڪنسنٽريشن بي آب هم مقدار جي بنياد تي ظاهر ڪرڻي هجي، ته نظرياتي هائيڊريٽ عامل لاڳو ڪريو: نالي ماتر ٽرائي هائيڊريٽ لاءِ 373.90 کي 319.85 سان ورهايو، يعني 1.169، ۽ نالي ماتر پينٽا هائيڊريٽ لاءِ 409.93 کي 319.85 سان ورهايو، يعني 1.282. ٻئي درستگيون هڪ ئي وقت لاڳو نه ڪريو. ائين ڪرڻ سان پاڻي ٻه ڀيرا ڳڻجي ٿو.

سيڪڙي جو مطلب ڇا آهي

سيڪڙو w/v جو مطلب آهي آخري محلول جي هر 100 mL ۾ ڄاڻايل حل ٿيندڙ مادي جا گرام، نه شروعاتي پاڻيءَ جي هر 100 mL ۾. تنهنڪري 1 سيڪڙو w/v آخري 100 mL ۾ 1.000 g آهي، جيڪو 10 mg/mL يا 10 g/L جي برابر آهي. 0.1 سيڪڙو محلول آخري 100 mL ۾ 0.100 g آهي، جيڪو 1 mg/mL جي برابر آهي. 1 سيڪڙي کي 1 mg/mL سمجهڻ واري عام غلطي ڏهه ڀيرا فرق پيدا ڪري ٿي، تنهنڪري هر ليبل تي ان جي جاچ ڪرڻ ضروري آهي.

تعريف جو ٻيو حصو حل ٿيندڙ مادي جي وضاحت آهي. جيئن توريل ٽرائي هائيڊريٽ پائوڊر جو 1 سيڪڙو محلول ۽ بي آب هم مقدار طور ظاهر ڪيل 1 سيڪڙو محلول مختلف محلول آهن. هيٺ ڏنل حل ڪيل مثالن ۾ هر ڀيري آخري حجم ۽ بنياد ٻئي ڄاڻايل آهن؛ اها ئي عادت مٿي بيان ڪيل ٽن ٽيڪنيشنن واري مسئلي کان بچائي ٿي.

تياريءَ جا حل ڪيل مثال، هائيڊريٽ بابت مفروضا واضح ڪندي

سڀني مثالن ۾ ڄاڻايل هائيڊريٽ جو خالص پائوڊر ۽ ڪمري جي گرمي پد تي پاڻي محلّل طور فرض ڪيا ويا آهن. ٻين حجمن لاءِ مقدار سڌي تناسب سان وڌايو يا گهٽايو.

مثال A: 1 سيڪڙو w/v جا 100.0 mL، جيئن توريل ٽرائي هائيڊريٽ جي بنياد تي. ميٿيلين بلو ٽرائي هائيڊريٽ جا 1.000 g توريو. لڳ ڀڳ 70 mL صاف ڪيل پاڻي شامل ڪريو، مڪمل حل ٿيڻ تائين هلائو يا گهمايو، پوءِ ڌوئڻ واري پاڻي سميت سڄو مادو بغير نقصان جي 100.0 mL حجمي فلاسڪ ۾ منتقل ڪريو ۽ نشان تائين پاڻي شامل ڪريو. حل ٿيندڙ مادو خود ٽرائي هائيڊريٽ آهي، تنهنڪري ماليڪيولي وزن جي ڪا درستگي لاڳو نه ٿيندي. نتيجو: آخري 100.0 mL ۾ 1.000 g، يا جيئن توريل پائوڊر جا 10 mg/mL.

مثال B: نالي ماتر ٽرائي هائيڊريٽ مان بي آب هم مقدار جي بنياد تي 1 mg/mL جا 100.0 mL. هدف آخري 100.0 mL ۾ بي آب ميٿيلين بلو جا 100.0 mg آهي. پاڻيءَ جي ٽن ماليڪيولن جي درستگي لاءِ 1.169 سان ضرب ڪريو: 100.0 mg کي 1.169 سان ضرب ڪرڻ سان 116.9 mg ٿين ٿا. نالي ماتر ٽرائي هائيڊريٽ جا 116.9 mg توريو، لڳ ڀڳ 70 mL پاڻيءَ ۾ حل ڪريو، ۽ حجمي فلاسڪ ۾ آخري حجم 100.0 mL تائين پورو ڪريو. نالي ماتر پينٽا هائيڊريٽ لاءِ عامل 1.282 آهي، تنهنڪري ساڳئي هدف لاءِ 128.2 mg گهرجن. ليبل تي لکو ته ڪهڙو عامل استعمال ڪيو ويو.

مثال C: ميٿيلين بلو کي 1 سيڪڙو اسٽاڪ محلول مان 0.1 سيڪڙو تائين رقيق ڪرڻ. C1V1 برابر C2V2 استعمال ڪريو. 1.0 سيڪڙو اسٽاڪ محلول مان 0.1 سيڪڙي جا 100.0 mL ٺاهڻ لاءِ گهربل اسٽاڪ حجم 0.1 کي 100.0 سان ضرب ڪري 1.0 سان ورهائڻ سان ملي ٿو، جيڪو 10.0 mL آهي. پائيپيٽ سان 1 سيڪڙو اسٽاڪ محلول جا 10.0 mL هڪ 100.0 mL فلاسڪ ۾ وجهو ۽ نشان تائين پاڻي شامل ڪريو. جيڪي تجزيه نگار وزن جا يونٽ پسند ڪن ٿا، انهن لاءِ: 1 سيڪڙو برابر 10 mg/mL آهي، تنهنڪري 10.0 mL ۾ 100 mg ٿين ٿا، ۽ آخري 100.0 mL ۾ 100 mg برابر 1 mg/mL آهن، جيڪو 0.1 سيڪڙو آهي.

مثال D: 1 mg/mL اسٽاڪ محلول مان 10 mg/L استعمال واري محلول جا 1.000 L. 1 mg/mL اسٽاڪ محلول برابر 1000 mg/L آهي. گهربل حجم 10 کي 1.000 سان ضرب ڪري 1000 سان ورهائڻ سان ملي ٿو، جيڪو 0.0100 L، يا 10.0 mL آهي. پائيپيٽ سان اسٽاڪ محلول جا 10.0 mL وٺو ۽ پاڻيءَ سان رقيق ڪري آخري حجم 1.000 L ڪريو. 10,000 mg/L واري 1 سيڪڙو اسٽاڪ محلول مان ساڳئي هدف لاءِ رڳو 1.00 mL وٺي آخري حجم 1.000 L ڪرڻو پوندو. جڏهن تناسب لڳ ڀڳ هڪ سؤ کان وڌي وڃي، ته ٻن مرحلن ۾ سلسليوار رقيق ڪرڻ هڪ ئي ڀيري مائڪروليٽر مقدار منتقل ڪرڻ کان وڌيڪ درستگي ڏئي ٿو.

انهن مان هر هڪ مڪمل وضاحت رڳو ان ڪري آهي جو ان ۾ ٽي حقيقتون موجود آهن: هائيڊريٽ بابت مفروضي سان گڏ توريل وزن، محلول جو آخري حجم، ۽ ڄاڻايل ڪنسنٽريشن جو بنياد. نوٽ بڪ جي داخلا ۾ انهن ٽن مان ڪا به هڪ ڳالهه نه هجي، ته ان کي بلڪل ساڳيءَ طرح ٻيهر تيار نٿو ڪري سگهجي.

عام غلطين کان بچائيندڙ طريقو

پهريان پائوڊر کي آخري حجم کان گهٽ پاڻيءَ ۾ حل ڪريو، پوءِ حجم پورو ڪريو. پاڻيءَ جي پوري آخري حجم ۾ سڌو پائوڊر شامل ڪرڻ سان محلول جو ڪُل حجم گهربل نشان کان وڌي وڃي ٿو، ۽ ڪنسنٽريشن گهٽ نڪري ٿي. بيڪر کي ڌوئي اهو پاڻي فلاسڪ ۾ وجهو ته جيئن ڪو رنگ پوئتي نه رهجي؛ گهاٽو رنگ ننڍڙا نقصان به نظر اچڻ جهڙا بڻائي ٿو، جيڪو هڪ فائدو آهي جيڪڏهن ان سان سڄو مادو بغير نقصان جي منتقل ڪرڻ جو خيال اچي.

حجم پورو ڪرڻ کان اڳ تيستائين ملايو جيستائين ڪو به ذرڙو باقي نه رهي، ۽ روشنيءَ جي سامهون رکي جاچيو. فلٽر رڳو تڏهن ڪريو جڏهن طريقي ۾ ان جي ضرورت هجي. ميٿيلين بلو ڪجهه جھلي وارن مواد جي سطح تي جذب ٿي وڃي ٿو، تنهنڪري فلٽر ڪرڻ سان تازو معياري ڪيل اسٽاڪ محلول جي ڪنسنٽريشن گهٽجي سگهي ٿي. اها ڳالهه جھلين تي سطحي جذب بابت مطالعي ۾ درج ٿيل آهي ۽ جڏهن به فلٽر ڪرڻ يا ڪنسنٽريشن جي تصديق طريقي جو حصو هجي، ته ياد رکڻ گهرجي. جيڪڏهن فلٽر ٿيل اسٽاڪ محلول جي ڪنسنٽريشن تصديق ٿيل هجڻ ضروري هجي، ته فلٽر ڪرڻ کان پوءِ ان جي تصديق ڪريو، نه اڳ.

تيار ڪيل محلولن کي تيز روشنيءَ کان بچائي، عنبري يا غير شفاف بوتلن ۾ ڪمري جي گرمي پد تي رکو، ۽ ليبل تي حل ٿيندڙ مادو، هائيڊريٽ جو بنياد، ڪنسنٽريشن، محلّل، تاريخ ۽ تيار ڪندڙ جو نالو لکو. مسلسل روشنيءَ هيٺ رنگ ڦڪو ٿيڻ بگاڙ جو هڪ ڄاتل طريقو آهي، تنهنڪري دريءَ جون دَريون ۽ روشن فرج ذخيرو ڪرڻ لاءِ مناسب نه آهن، جيتوڻيڪ رنگ مستحڪم نظر اچي. استحڪام بابت اميدون ۽ ٻيهر جاچ جا وقفا تيار ڪيل محلولن جي ذخيرو ڪرڻ ۽ استحڪام بابت رهنمائي سان لاڳاپيل آهن، پر عملي اصول طور تجزياتي اسٽاڪ محلولن تي اڻڄاتل مدي تائين ڀروسو ڪرڻ بدران انهن کي نئون تيار ڪرڻ يا ٻيهر تصديق ڪرڻ گهرجي.

پائوڊر ۽ گهاٽن اسٽاڪ محلولن سان ڪم ڪندي دستانا، اکين جي حفاظت، ليبارٽري ڪوٽ ۽ ڪم واري ميز جي ڍڪ استعمال ڪريو، ۽ بوتلن لاءِ ثانوي حفاظتي ڪنٽينر رکو. هي رنگ چمڙي، ڪپڙن، ڪم وارين ميزن ۽ پلاسٽڪ تي تيزيءَ سان داغ وجهي ٿو، ۽ فراهم ڪندڙن جي حفاظتي ڊيٽا شيٽن ۾ پائوڊر کي ڳهڻ جي صورت ۾ نقصانڪار ۽ درجي جي لحاظ کان اکين ۽ چمڙي لاءِ جلن پيدا ڪندڙ ڄاڻايو ويو آهي. مڪمل احتياط محفوظ سنڀال ۽ ذخيرو ڪرڻ جي طريقن ۾ ڏنل آهن، پر داغن تي ضابطو پاڻ به معيار جي حفاظت جو هڪ قدم آهي: شيشي جي سامان ۽ پائيپيٽن تي رهجي ويل رنگ تمام ٿوري مقدار واري تجزيي ۾ هڪ نموني کان ٻئي تائين آلودگيءَ جو ذريعو بڻجي ٿو.

درجي بابت هڪ نوٽ

رنگڻ وارن حوضن ۽ مظاهرن لاءِ، صحيح ڪنسنٽريشن تي تيار ڪيل ڪو به صاف ليبارٽري درجي جو مادو ڪم ڏئي ٿو. مقداري يا تقابلي ڪم لاءِ درجو اهم آهي، ڇو ته اڻ خالص جزا مختلف ٿين ٿا: باقي رهيل Azure B ۽ لاڳاپيل ٿائيازِين، ڳريون ڌاتون، باقي رهيل محلّل، ۽ خرد حياتياتي بار. ان ڪري مڪمل تجزيي جي سرٽيفڪيٽ سان تصديق ٿيل درجو چونڊڻ محلول جي تياريءَ جو حصو آهي، نه پوءِ سوچڻ واري ڳالهه. مڪمل لاٽ دستاويز ۾ سڃاڻپ، خالص مادي جي مقدار ۽ ان جو بنياد، پاڻيءَ جو مقدار، ۽ حقيقت ۾ جاچيل اڻ خالص جزن جي فهرست ڏنل هوندي آهي؛ ان سان مٿي ڏنل مثالن ۾ هائيڊريٽ جي درستگي نالي ماتر ٽرائي هائيڊريٽ جي مفروضي بدران ماپيل قدرن تي ٻڌل هوندي آهي. جڏهن ٻن لاٽن مان ساڳيو وزن تورڻ باوجود مختلف ڪنسنٽريشن ملي ٿي، ته سرٽيفڪيٽ عام طور ان جو سبب واضح ڪري ٿو.