ਮੈਥਲੀਨ ਬਲੂ ਅਤੇ ਸੋਜ-ਸੰਬੰਧੀ ਸੰਕੇਤ-ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ: ਇਨਫਲਾਮਾਸੋਮ, IL-6 ਅਤੇ STAT3

ਮੰਨ ਲਓ ਕਿ ਤਿੰਨ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾਵਾਂ ਦੱਸਦੀਆਂ ਹਨ ਕਿ ਇੱਕੋ ਨੀਲਾ ਯੋਗਿਕ ਸੋਜ ਘਟਾਉਣ ਵਾਲਾ ਹੈ। ਇੱਕ ਮੈਕ੍ਰੋਫੇਜਾਂ ਤੋਂ ਘੱਟ IL-1beta ਦਿਖਾਉਂਦੀ ਹੈ। ਦੂਜੀ ਉਸੇ ਕਿਸਮ ਦੀਆਂ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਵਿੱਚ ਘੱਟ iNOS ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਦਿਖਾਉਂਦੀ ਹੈ। ਤੀਜੀ ਖੂਨ ਵਿੱਚ ਘੱਟ IL-6 ਅਤੇ ਦਿਮਾਗ ਵਿੱਚ ਘੱਟ STAT3 ਸਰਗਰਮੀ ਦਿਖਾਉਂਦੀ ਹੈ। ਇਨ੍ਹਾਂ ਤਿੰਨਾਂ ਨੂੰ ਇੱਕੋ ਦਾਅਵੇ ਵਿੱਚ ਜੋੜ ਦੇਣ ਦਾ ਮਨ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ। ਪਰ ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ ਜੋੜਨ ਨਾਲ ਅਸਲ ਨਤੀਜਾ ਲੁਕ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।

ਹਰੇਕ ਨਤੀਜਾ ਸੰਕੇਤ-ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਦੀ ਇੱਕ ਵੱਖਰੀ ਧਾਰਨਾ ਨਾਲ ਸੰਬੰਧਿਤ ਹੈ, ਜਿਸ ਦਾ ਆਪਣਾ ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਕਾਰਕ, ਸੰਯੋਜਨ ਦਾ ਪੜਾਅ ਅਤੇ ਮਾਪਿਆ ਜਾਣ ਵਾਲਾ ਨਤੀਜਾ ਹੈ। ਮੈਥਲੀਨ ਬਲੂ ਹਰੇਕ ਧਾਰਨਾ ਨੂੰ ਵੱਖਰੇ ਬਿੰਦੂ ’ਤੇ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਕਰਦਾ ਹੈ। ਕੀ ਇਨ੍ਹਾਂ ਵਿੱਚੋਂ ਕੋਈ ਗੱਲ ਸਿਹਤ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਨੂੰ ਸੁਧਾਰਦੀ ਹੈ, ਇਹ ਇੱਕ ਵੱਖਰਾ ਸਵਾਲ ਹੈ, ਜਿਸ ਬਾਰੇ ਸਾਡੀ ਮੈਥਲੀਨ ਬਲੂ ਅਤੇ ਸੋਜ ਦੀ ਸੰਖੇਪ ਜਾਣਕਾਰੀ ਵਿੱਚ ਚਰਚਾ ਕੀਤੀ ਗਈ ਹੈ। ਇਹ ਪੰਨਾ ਸਿਰਫ਼ ਇਨ੍ਹਾਂ ਮਾਰਗਾਂ ’ਤੇ ਕੇਂਦ੍ਰਿਤ ਹੈ।

ਮਾਰਗ 1: ਇਨਫਲਾਮਾਸੋਮ ਦਾ ਸੰਯੋਜਨ ਅਤੇ caspase-1

ਇਨਫਲਾਮਾਸੋਮ ਇੱਕ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਢਾਂਚਾ ਹੈ ਜੋ ਲੋੜ ਪੈਣ ’ਤੇ ਮਾਇਲੋਇਡ ਕੋਸ਼ਿਕਾ ਦੇ ਅੰਦਰ ਬਣਦਾ ਹੈ। ਇਸ ਦੇ ਹਿੱਸੇ ਇੱਕ ਸੰਵੇਦਕ, ASC ਨਾਮ ਦਾ ਇੱਕ ਅਡੈਪਟਰ ਅਤੇ caspase-1 ਨਾਮ ਦਾ ਇੱਕ ਕਾਰਜਕਾਰੀ ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਹਨ। ਸੰਯੋਜਨ ਹੋ ਜਾਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, caspase-1, pro-IL-1beta ਅਤੇ pro-IL-18 ਨੂੰ ਕੱਟ ਕੇ ਉਨ੍ਹਾਂ ਦੇ ਸ੍ਰਾਵਿਤ ਹੋਣ ਵਾਲੇ ਰੂਪਾਂ ਵਿੱਚ ਬਦਲਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਪਾਇਰੋਪਟੋਸਿਸ ਸ਼ੁਰੂ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਜੋ ਕੋਸ਼ਿਕਾ ਦੀ ਮੌਤ ਦਾ ਇੱਕ ਸੋਜ-ਸੰਬੰਧੀ ਰੂਪ ਹੈ। ਸੰਵੇਦਕ ਇਸ ਦੀ ਕਿਸਮ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰਦਾ ਹੈ: NLRP3 ਕ੍ਰਿਸਟਲਾਂ ਅਤੇ ਛੇਦ ਬਣਾਉਣ ਵਾਲੇ ਜ਼ਹਿਰੀਲੇ ਪਦਾਰਥਾਂ, ਜਿਵੇਂ ਨਾਈਜਰਿਸਿਨ ਅਤੇ ATP, ਨੂੰ ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆ ਦਿੰਦਾ ਹੈ; NLRC4 ਬੈਕਟੀਰੀਆ ਦੇ ਫਲੈਜੇਲਿਨ ਨੂੰ ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆ ਦਿੰਦਾ ਹੈ; AIM2 ਸਾਇਟੋਸੋਲ ਵਿੱਚ ਮੌਜੂਦ ਦੋਹਰੀ ਲੜੀ ਵਾਲੇ DNA ਨੂੰ ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆ ਦਿੰਦਾ ਹੈ; ਅਤੇ ਗੈਰ-ਕੈਨੋਨਿਕਲ ਮਾਰਗ ਕੋਸ਼ਿਕਾ ਦੇ ਅੰਦਰਲੇ ਲਿਪੋਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡ ਨੂੰ ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆ ਦਿੰਦਾ ਹੈ।

ਸਰਗਰਮੀ ਲਈ ਦੋ ਸੰਕੇਤ ਲੋੜੀਂਦੇ ਹਨ। ਪਹਿਲਾ ਸੰਕੇਤ ਮੁੱਢਲੀ ਤਿਆਰੀ ਹੈ: ਟੋਲ-ਵਰਗੇ ਰਿਸੈਪਟਰ ਦਾ ਇੱਕ ਲਿਗੈਂਡ, NF-kB ’ਤੇ ਨਿਰਭਰ NLRP3 ਅਤੇ pro-IL-1beta ਦੇ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਨੂੰ ਚਲਾਉਂਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਜੋ ਹਿੱਸੇ ਉਪਲਬਧ ਹੋਣ। ਦੂਜਾ ਸੰਕੇਤ ਸੰਯੋਜਨ ਹੈ: ਇੱਕ ਹੋਰ ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਕਾਰਕ ASC ਨੂੰ ਇਕੱਠਾ ਹੋ ਕੇ ਓਲਿਗੋਮਰਿਕ ਬਿੰਦੂ ਬਣਾਉਣ, caspase-1 ਨੂੰ ਕੱਟ ਕੇ ਉਸ ਦਾ p20 ਖੰਡ ਬਣਾਉਣ ਅਤੇ ਪੱਕੇ IL-1beta p17 ਨੂੰ ਛੱਡਣ ਲਈ ਪ੍ਰੇਰਿਤ ਕਰਦਾ ਹੈ। ਮਾਈਟੋਕਾਂਡਰੀਆ ਦੀਆਂ ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆਸ਼ੀਲ ਆਕਸੀਜਨ ਪ੍ਰਜਾਤੀਆਂ ਅਤੇ ਕ੍ਰਿਸਟਲਾਂ ਨੂੰ ਅੰਦਰ ਲੈਣਾ, NLRP3 ਲਈ ਦੂਜੇ ਸੰਕੇਤ ਵਿੱਚ ਯੋਗਦਾਨ ਪਾਉਣ ਵਾਲੇ ਜਾਣੇ-ਪਛਾਣੇ ਕਾਰਕ ਹਨ।

ਇਨਫਲਾਮਾਸੋਮ ਦੀਆਂ ਕਈ ਕਿਸਮਾਂ ਨੂੰ ਰੋਕਣ ਬਾਰੇ 2017 ਦੇ ਮੈਕ੍ਰੋਫੇਜ ਅਧਿਐਨ ਨੇ ਦੋਵਾਂ ਸੰਕੇਤਾਂ ’ਤੇ ਮੈਥਲੀਨ ਬਲੂ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕੀਤੀ। ਲਿਪੋਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡ ਨਾਲ ਮੁੱਢਲੀ ਤਿਆਰੀ ਕੀਤੇ ਚੂਹਿਆਂ ਦੇ ਅਸਥਿ-ਮੱਜਾ ਮੈਕ੍ਰੋਫੇਜਾਂ ਵਿੱਚ ਨਾਈਜਰਿਸਿਨ, ATP ਅਤੇ ਮੋਨੋਸੋਡੀਅਮ ਯੂਰੇਟ ਕ੍ਰਿਸਟਲਾਂ ਨੇ, ਹਰੇਕ ਨੇ, IL-1beta ਅਤੇ caspase-1 ਦਾ ਸ੍ਰਾਵ ਅਤੇ ASC ਬਿੰਦੂਆਂ ਦਾ ਬਣਨਾ ਸ਼ੁਰੂ ਕੀਤਾ। 20 ਤੋਂ 200 micromolar ਮੈਥਲੀਨ ਬਲੂ ਨੇ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਨੂੰ ਮਾਰੇ ਬਿਨਾਂ ਇਹ ਤਿੰਨੇ ਨਤੀਜੇ ਮਾਤਰਾ-ਨਿਰਭਰ ਢੰਗ ਨਾਲ ਘਟਾਏ। NLRC4 ਲਈ ਫਲੈਜੇਲਿਨ ਅਤੇ ਸੈਲਮੋਨੇਲਾ, AIM2 ਲਈ ਦੋਹਰੀ ਲੜੀ ਵਾਲਾ DNA ਅਤੇ ਲਿਸਟੀਰੀਆ, ਅਤੇ ਗੈਰ-ਕੈਨੋਨਿਕਲ ਮਾਰਗ ਲਈ ਟ੍ਰਾਂਸਫੈਕਸ਼ਨ ਰਾਹੀਂ ਅੰਦਰ ਪਹੁੰਚਾਇਆ ਲਿਪੋਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡ ਜਾਂ ਜੀਵਤ E. coli ਨੇ ਵੀ ਇਹੋ ਜਿਹਾ ਰੁਝਾਨ ਦਿਖਾਇਆ। ਇਕੱਲੇ ਯੋਗਿਕ ਨੇ ਸ੍ਰਾਵ ਸ਼ੁਰੂ ਨਹੀਂ ਕੀਤਾ, ਅਤੇ ਕੰਟਰੋਲ ਪਲੇਟਾਂ ਵਿੱਚ ਕੋਈ ਬੈਕਟੀਰੀਆ-ਰੋਧੀ ਅਸਰ ਨਹੀਂ ਦਿਖਿਆ, ਇਸ ਲਈ ਇਹ ਨਤੀਜਾ ਮੇਜ਼ਬਾਨ ਦੀ ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆ ਨਾਲ ਸੰਬੰਧਿਤ ਹੈ।

ਇਸ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਵਾਲੇ ਪੜਾਵਾਂ ’ਤੇ ਤਿੰਨ ਦਖ਼ਲਾਂ ਨੂੰ ਮਾਪਿਆ ਗਿਆ। ਮੈਥਲੀਨ ਬਲੂ ਨਾਲ ਰੋਟੇਨੋਨ ਦੁਆਰਾ ਪੈਦਾ ਕੀਤਾ ਮਾਈਟੋਕਾਂਡਰੀਆ ਦਾ ਸੁਪਰਆਕਸਾਈਡ ਘਟਿਆ, ਅਤੇ ਇਸ ਦੇ ਨਾਲ ਰੋਟੇਨੋਨ ਦੁਆਰਾ ਚਲਾਇਆ IL-1beta ਸ੍ਰਾਵ ਵੀ ਘਟਿਆ। ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਮਣਕਿਆਂ ਨੂੰ ਅੰਦਰ ਲੈਣਾ ਘਟਿਆ, ਜੋ ਕ੍ਰਿਸਟਲਾਂ ਦੀ ਪਛਾਣ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਘੱਟ ਫੈਗੋਸਾਇਟੋਸਿਸ ਨਾਲ ਮੇਲ ਖਾਂਦਾ ਹੈ। ਦੋ NF-kB ਸਥਾਨਾਂ ਵਾਲੇ NLRP3 ਪ੍ਰੋਮੋਟਰ ਦੁਆਰਾ ਚਲਾਏ ਰਿਪੋਰਟਰ ਨੇ ਮੈਥਲੀਨ ਬਲੂ ਨਾਲ ਘੱਟ ਸਰਗਰਮੀ ਦਿਖਾਈ, ਜਦਕਿ ਉਨ੍ਹਾਂ ਸਥਾਨਾਂ ਤੋਂ ਬਿਨਾਂ ਛੋਟੇ ਕੀਤੇ ਪ੍ਰੋਮੋਟਰ ਨੇ ਕੋਈ ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆ ਨਹੀਂ ਦਿੱਤੀ। ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਤੋਂ ਰਹਿਤ ਟਿਊਬ ਵਿੱਚ ਮੈਥਲੀਨ ਬਲੂ ਨੇ ਰੀਕੰਬਿਨੈਂਟ ਮਨੁੱਖੀ caspase-1 ਦੀ ਸਰਗਰਮੀ ਵੀ ਸਿੱਧੇ ਤੌਰ ’ਤੇ ਘਟਾਈ। ਯੋਗਿਕ ਨੂੰ ਸਿਰਫ਼ ਮੁੱਢਲੀ ਤਿਆਰੀ ਵੇਲੇ ਜਾਂ ਸਿਰਫ਼ ਸਰਗਰਮੀ ਵੇਲੇ ਜੋੜਨ ਨਾਲ ਵੀ IL-1beta, IL-18 ਅਤੇ caspase-1 ਦਾ ਸ੍ਰਾਵ ਘਟਿਆ, ਇਸ ਲਈ ਦੋਵੇਂ ਪੜਾਅ ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ।

ਚੂਹਿਆਂ ਵਿੱਚ ਕੀਤੀਆਂ ਜਾਂਚਾਂ ਨੇ ਵੀ ਇਸ ਚੋਣਵੀਂ ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆ ਨਾਲ ਮੇਲ ਖਾਧਾ। ਲਿਪੋਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡ ਦੀ ਇੱਕ ਘਾਤਕ ਮਾਤਰਾ ਨੇ ਕੰਟਰੋਲ ਚੂਹਿਆਂ ਨੂੰ ਕੁਝ ਘੰਟਿਆਂ ਵਿੱਚ ਮਾਰ ਦਿੱਤਾ, ਜਦਕਿ ਮੈਥਲੀਨ ਬਲੂ ਨੇ ਬਚਾਅ ਦੀ ਦਰ ਸੁਧਾਰੀ; ਪੈਰੀਟੋਨੀਅਲ ਤਰਲ ਵਿੱਚ IL-1beta ਘਟਿਆ, ਪਰ ਉਸੇ ਤਰਲ ਵਿੱਚ IL-6 ਨਹੀਂ ਘਟਿਆ। ਲਿਸਟੀਰੀਆ ਪੈਰੀਟੋਨਾਈਟਿਸ ਮਾਡਲ ਵਿੱਚ ਪੈਰੀਟੋਨੀਅਲ IL-1beta ਘਟਿਆ, ਜਦਕਿ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਦੀ ਕੁੱਲ ਗਿਣਤੀ ਨਹੀਂ ਬਦਲੀ। ਮਨੁੱਖੀ THP-1 ਮੋਨੋਸਾਈਟਾਂ ਨੇ ਇਨਫਲਾਮਾਸੋਮ ਦੀਆਂ ਚਾਰੋਂ ਕਿਸਮਾਂ ਵਿੱਚ ਚੂਹਿਆਂ ਦੇ ਮੈਕ੍ਰੋਫੇਜਾਂ ਵਰਗਾ ਵਿਹਾਰ ਕੀਤਾ। ਇਨਫਲਾਮਾਸੋਮ ਦਾ ਨਤੀਜਾ IL-1beta ਅਤੇ IL-18 ਦੇ ਪੱਕੇ ਹੋਣ ਨੂੰ ਸਮਝਾਉਂਦਾ ਹੈ, ਹਰੇਕ ਸਾਇਟੋਕਾਈਨ ਨੂੰ ਨਹੀਂ। ਇਸੇ ਲਈ ਮਾਈਕ੍ਰੋਗਲੀਆ ਅਤੇ ਐਸਟ੍ਰੋਸਾਈਟ ਪ੍ਰਯੋਗਾਂ ਵਿੱਚ ਦਿਮਾਗ ਦੀਆਂ ਰੋਗ-ਰੋਧਕ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਦੀ ਸ਼ਕਲ, ਢਾਂਚੇ ਦੇ ਸੰਯੋਜਨ ਨਾਲੋਂ ਵੱਖਰੇ ਸਵਾਲ ਦਾ ਜਵਾਬ ਦਿੰਦੀ ਹੈ।

ਮਾਰਗ 2: NF-kB ਅਤੇ STAT1 ਦੇ ਬੰਧਨ ਰਾਹੀਂ iNOS ਦਾ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ

ਇੰਡਿਊਸਿਬਲ ਨਾਈਟ੍ਰਿਕ ਆਕਸਾਈਡ ਸਿੰਥੇਜ਼, ਜਾਂ iNOS, ਆਰਾਮ ਦੀ ਅਵਸਥਾ ਵਿੱਚ ਬਹੁਤ ਘੱਟ ਮੌਜੂਦ ਹੁੰਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਲੋੜ ਪੈਣ ’ਤੇ ਇਸ ਦਾ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਹੁੰਦਾ ਹੈ। ਲਿਪੋਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡ ਇਸ ਨੂੰ ਮੁੱਖ ਤੌਰ ’ਤੇ IkB-alpha ਦੇ ਵਿਘਟਨ ਅਤੇ ਉਸ ਤੋਂ ਬਾਅਦ NF-kB ਦੇ ਫਾਸਫੋਰੀਲੇਸ਼ਨ ਅਤੇ ਨਿਊਕਲੀਅਸ ਵਿੱਚ ਦਾਖ਼ਲੇ ਰਾਹੀਂ ਚਲਾਉਂਦਾ ਹੈ। ਇੰਟਰਫੇਰੋਨ-ਗਾਮਾ ਇਸ ਨੂੰ ਮੁੱਖ ਤੌਰ ’ਤੇ ਜੈਨਸ ਕਾਇਨੇਜ਼ ਦੁਆਰਾ STAT1 ਦੇ ਫਾਸਫੋਰੀਲੇਸ਼ਨ ਅਤੇ ਉਸ ਤੋਂ ਬਾਅਦ STAT1 ਦੇ ਨਿਊਕਲੀਅਸ ਵਿੱਚ ਦਾਖ਼ਲੇ ਰਾਹੀਂ ਚਲਾਉਂਦਾ ਹੈ। ਫਿਰ ਹਰੇਕ ਕਾਰਕ iNOS ਪ੍ਰੋਮੋਟਰ ਉੱਤੇ ਆਪਣੇ ਸਥਾਨ ਨਾਲ ਜੁੜਦਾ ਹੈ। ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਦੀ ਸਰਗਰਮੀ ਅਤੇ ਜੀਨ ਦੀ ਅਭਿਵਿਅਕਤੀ ਨੂੰ ਪ੍ਰੇਰਿਤ ਕਰਨਾ ਵੱਖਰੇ ਨਿਯੰਤਰਣ ਬਿੰਦੂ ਹਨ, ਅਤੇ ਕੋਈ ਦਵਾਈ ਇਨ੍ਹਾਂ ਵਿੱਚੋਂ ਕਿਸੇ ਇੱਕ ਜਾਂ ਦੋਵਾਂ ’ਤੇ ਕੰਮ ਕਰ ਸਕਦੀ ਹੈ।

ਮੈਕ੍ਰੋਫੇਜਾਂ ਅਤੇ ਐਂਡੋਟਾਕਸੀਮੀਆ ਵਾਲੇ ਚੂਹਿਆਂ ਵਿੱਚ iNOS ਦੀ ਅਭਿਵਿਅਕਤੀ ਨੂੰ ਪ੍ਰੇਰਿਤ ਕਰਨ ਬਾਰੇ 2015 ਦੇ ਅਧਿਐਨ ਨੇ ਇਹ ਅਸਰ ਸੁਨੇਹੇ ਦੇ ਪੱਧਰ ’ਤੇ ਪਾਇਆ। RAW 264.7 ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਅਤੇ ਚੂਹਿਆਂ ਦੇ ਪ੍ਰਾਇਮਰੀ ਮੈਕ੍ਰੋਫੇਜਾਂ ਵਿੱਚ, ਲਿਪੋਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡ, ਇੰਟਰਫੇਰੋਨ-ਗਾਮਾ ਜਾਂ ਦੋਵਾਂ ਤੋਂ 30 ਮਿੰਟ ਪਹਿਲਾਂ ਦਿੱਤੇ 1 micromolar ਮੈਥਲੀਨ ਬਲੂ ਨੇ 8 ਤੋਂ 24 ਘੰਟਿਆਂ ਦੌਰਾਨ iNOS ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਅਤੇ mRNA ਘਟਾਏ। ਮਾਧਿਅਮ ਵਿੱਚ ਨਾਈਟ੍ਰਾਈਟ ਵੀ ਘੱਟ ਸੀ ਅਤੇ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਦੀ ਜੀਵਿਤਤਾ ਵਿੱਚ ਕੋਈ ਘਾਟ ਨਹੀਂ ਆਈ। 25 mg per kg ਲਿਪੋਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡ ਦਿੱਤੇ ਚੂਹਿਆਂ ਵਿੱਚ, ਇੱਕ ਘੰਟਾ ਪਹਿਲਾਂ ਦਿੱਤੀ 5 mg per kg ਦੀ ਇੱਕੋ ਖੁਰਾਕ ਨੇ ਫੇਫੜਿਆਂ, ਜਿਗਰ ਅਤੇ ਦਿਲ ਵਿੱਚ iNOS ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਅਤੇ mRNA ਘਟਾਏ।

ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਗੱਲ ਇਹ ਹੈ ਕਿ ਕੀ ਨਹੀਂ ਬਦਲਿਆ। IkB-alpha ਦਾ ਵਿਘਟਨ, NF-kB ਦਾ ਫਾਸਫੋਰੀਲੇਸ਼ਨ, STAT1 ਦਾ ਫਾਸਫੋਰੀਲੇਸ਼ਨ ਅਤੇ ਦੋਵਾਂ ਕਾਰਕਾਂ ਦਾ ਨਿਊਕਲੀਅਸ ਵਿੱਚ ਇਕੱਠਾ ਹੋਣਾ ਬਰਕਰਾਰ ਰਹੇ। ਰੁਕਾਵਟ ਇੱਕ ਪੜਾਅ ਬਾਅਦ ਆਈ: ਨਿਊਕਲੀਅਸ ਦੇ ਅਰਕਾਂ ਵਿੱਚ ਲਿਪੋਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡ ਤੋਂ ਬਾਅਦ NF-kB ਦਾ ਆਪਣੇ DNA ਤੱਤ ਨਾਲ ਘੱਟ ਬੰਧਨ ਅਤੇ ਇੰਟਰਫੇਰੋਨ-ਗਾਮਾ ਤੋਂ ਬਾਅਦ STAT1 ਦਾ ਘੱਟ ਬੰਧਨ ਦਿਖਿਆ। ਕ੍ਰੋਮੈਟਿਨ ਇਮਿਊਨੋਪ੍ਰਿਸਿਪਿਟੇਸ਼ਨ ਨੇ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਦੇ ਅੰਦਰ iNOS ਪ੍ਰੋਮੋਟਰ ਉੱਤੇ ਦੋਵਾਂ ਕਾਰਕਾਂ ਦੀ ਘੱਟ ਮੌਜੂਦਗੀ ਦੀ ਪੁਸ਼ਟੀ ਕੀਤੀ। ਟਿਊਮਰ ਨੈਕਰੋਸਿਸ ਫੈਕਟਰ ਅਲਫਾ ਵੀ ਘਟਿਆ, ਜਿਸ ਦਾ ਪ੍ਰੋਮੋਟਰ ਵੀ NF-kB ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦਾ ਹੈ। ਕਾਰਕ ਸਰਗਰਮ ਹੋਏ ਅਤੇ ਪਹੁੰਚੇ ਵੀ, ਪਰ ਆਪਣੇ ਨਿਸ਼ਾਨੇ ਵਾਲੇ DNA ਨਾਲ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਨਹੀਂ ਜੁੜੇ।

ਮਾਰਗ 1 ਨਾਲ ਇਸ ਦਾ ਫ਼ਰਕ ਧਿਆਨ ਵਿੱਚ ਰੱਖੋ। ਇਹ ਕਾਰਕ ਦੇ DNA ਨਾਲ ਜੁੜਨ ਬਾਰੇ ਹੈ, STAT3 ਦੀ ਬਜਾਏ STAT1 ਵਰਤਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ASC ਬਿੰਦੂਆਂ ਤੇ caspase-1 ਖੰਡਾਂ ਦੀ ਬਜਾਏ mRNA, ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਅਤੇ ਨਾਈਟ੍ਰਾਈਟ ਨੂੰ ਮਾਪਦਾ ਹੈ। ਸਾਡਾ ਕੋਸ਼ਿਕਾ ਮਾਡਲਾਂ ਵਿੱਚ ਮੈਥਲੀਨ ਬਲੂ ਦੇ ਨਿਸ਼ਾਨਿਆਂ ਦਾ ਨਕਸ਼ਾ ਇਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਪੱਧਰ ਨੂੰ ਸਿੱਧੇ ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਅਤੇ ਮਾਈਟੋਕਾਂਡਰੀਆ ਦੇ ਮਾਪਾਂ ਤੋਂ ਵੱਖਰਾ ਰੱਖਦਾ ਹੈ।

ਮਾਰਗ 3: ਸੀਰਮ IL-6 ਅਤੇ ਟਿਸ਼ੂ ਵਿੱਚ STAT3 ਦੀ ਸਰਗਰਮੀ

IL-6, gp130 ਰਿਸੈਪਟਰ ਪਰਿਵਾਰ ਰਾਹੀਂ ਜੈਨਸ ਕਾਇਨੇਜ਼ ਤੋਂ STAT3 ਤੱਕ ਦੀ ਸੰਕੇਤ-ਲੜੀ ਵਿੱਚ ਸੰਕੇਤ ਭੇਜਦਾ ਹੈ। ਫਾਸਫੋਰੀਲੇਟਿਡ STAT3 ਜੋੜੇ ਬਣਾਉਂਦਾ ਹੈ, ਨਿਊਕਲੀਅਸ ਵਿੱਚ ਦਾਖ਼ਲ ਹੁੰਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਸੋਜ-ਸੰਬੰਧੀ ਪ੍ਰੋਗਰਾਮ ਚਲਾਉਂਦਾ ਹੈ। ਇਸ ਦੇ ਨਾਲ ਹੀ IL-6 ਖ਼ੁਦ NF-kB ਦਾ ਨਿਸ਼ਾਨਾ ਹੈ, ਇਸ ਲਈ ਦੋਵੇਂ ਇੱਕ ਫੀਡਬੈਕ ਚੱਕਰ ਬਣਾਉਂਦੇ ਹਨ ਜਿਸ ਨੂੰ ਅਕਸਰ IL-6 ਤੋਂ STAT3 ਧੁਰੀ ਕਿਹਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ। ਆਮ ਤੌਰ ’ਤੇ ਮਾਪੇ ਜਾਣ ਵਾਲੇ ਨਤੀਜੇ ਹਨ: ਉੱਪਰਲੇ ਪੜਾਅ ਵਿੱਚ ਸੀਰਮ IL-6, ਫਾਸਫੋਰੀਲੇਟਿਡ STAT3 ਦਾ ਕੁੱਲ STAT3 ਨਾਲ ਅਨੁਪਾਤ, ਅਤੇ ਅਗਲੇ ਪੜਾਅ ਵਿੱਚ iNOS ਤੇ COX2 ਵਰਗੇ ਕਾਰਜਕਾਰੀ ਐਂਜ਼ਾਈਮ।

ਲਿਪੋਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡ ਤੋਂ ਬਾਅਦ IL-6 ਅਤੇ STAT3 ਬਾਰੇ 2023 ਦੇ ਚੂਹਾ ਅਧਿਐਨ ਨੇ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਹਿੱਸਿਆਂ ਵਿੱਚ ਇਸ ਧੁਰੀ ਨੂੰ ਮਾਪਿਆ। ਨਰ C57BL/6 ਚੂਹਿਆਂ ਨੂੰ ਤਿੰਨ ਦਿਨਾਂ ਤੱਕ ਹਰ ਰੋਜ਼ 1 mg per kg ਲਿਪੋਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡ ਦਿੱਤਾ ਗਿਆ, ਅਤੇ ਹਰੇਕ ਖੁਰਾਕ ਤੋਂ 30 ਮਿੰਟ ਬਾਅਦ 5 ਜਾਂ 10 mg per kg ਮੈਥਲੀਨ ਬਲੂ ਦਿੱਤਾ ਗਿਆ। ਤੀਜੇ ਦਿਨ, ਮੈਥਲੀਨ ਬਲੂ ਵਾਲੇ ਦੋਵਾਂ ਸਮੂਹਾਂ ਵਿੱਚ ਸੀਰਮ IL-6, ਸਿਰਫ਼ ਲਿਪੋਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡ ਵਾਲੇ ਸਮੂਹ ਨਾਲੋਂ ਘੱਟ ਸੀ, ਜਦਕਿ ਜਾਂਚੇ ਗਏ ਜ਼ਿਆਦਾਤਰ ਹੋਰ ਸਾਇਟੋਕਾਈਨ ਇਲਾਜ ਨਾਲ ਨਹੀਂ ਬਦਲੇ। ਕਾਰਟੈਕਸ, ਹਿਪੋਕੈਂਪਸ ਅਤੇ ਕੰਨ ਦੀ ਚਮੜੀ ਵਿੱਚ ਫਾਸਫੋਰੀਲੇਟਿਡ STAT3 ਦਾ ਕੁੱਲ STAT3 ਨਾਲ ਅਨੁਪਾਤ ਘੱਟ ਸੀ। ਇਸ ਦੇ ਨਾਲ Iba-1 ਮਾਈਕ੍ਰੋਗਲੀਅਲ ਰੰਗਾਈ, iNOS ਅਤੇ COX2 ਘੱਟ ਸਨ, ਅਤੇ ਭਾਰ ਘਟਣ ਵਿੱਚ ਕੁਝ ਹੱਦ ਤੱਕ ਕਮੀ ਆਈ।

ਇੱਥੇ ਦੋ ਸਾਵਧਾਨੀਆਂ ਲਾਜ਼ਮੀ ਹਨ। ਘੱਟ ਸੀਰਮ IL-6 ਦੇ ਨਾਲ ਟਿਸ਼ੂ ਵਿੱਚ ਘੱਟ STAT3 ਫਾਸਫੋਰੀਲੇਸ਼ਨ, ਧੁਰੀ ਵਿੱਚ ਤਬਦੀਲੀ ਨਾਲ ਮੇਲ ਖਾਂਦਾ ਹੈ, ਪਰ ਇਸ ਨਾਲ ਮੁੱਖ ਨਿਯੰਤਰਣ ਬਿੰਦੂ ਦੀ ਵੱਖਰੇ ਤੌਰ ’ਤੇ ਪਛਾਣ ਨਹੀਂ ਹੁੰਦੀ। ਉੱਪਰਲੇ ਪੜਾਅ ਵਿੱਚ ਘੱਟ ਸਾਇਟੋਕਾਈਨ, ਘੱਟ ਰਿਸੈਪਟਰ ਸੰਕੇਤ-ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਜਾਂ ਫਾਸਫੇਟੇਜ਼ ਦੀ ਬਦਲੀ ਹੋਈ ਸਰਗਰਮੀ ਵਿੱਚੋਂ ਹਰੇਕ ਉਹੀ ਅਨੁਪਾਤ ਪੈਦਾ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ। ਅਤੇ ਤਿੰਨ ਦਿਨਾਂ ਦੇ ਤੀਬਰ ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਉੱਤੇਜਨ ਦੌਰਾਨ ਭਾਰ, ਪੂਰੇ ਜਾਨਵਰ ਦਾ ਮਾਪਿਆ ਨਤੀਜਾ ਹੈ, ਨਾ ਕਿ ਲੱਛਣਾਂ ਜਾਂ ਰੋਗ ਦੇ ਸ਼ਾਂਤ ਪੈਣ ਦਾ ਸਕੋਰ। ਇਹ ਬਲਾਟ ਤੋਂ ਅੱਗੇ ਦਾ ਸੰਦਰਭ ਜੋੜਦਾ ਹੈ, ਪਰ ਸੰਕੇਤ-ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਨੂੰ ਇਲਾਜ ਦੇ ਦਾਅਵੇ ਵਿੱਚ ਨਹੀਂ ਬਦਲਦਾ। ਮਾਈਟੋਕਾਂਡਰੀਆ ਵਿੱਚ ਰੀਡਾਕਸ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆਵਾਂ ਦੇ ਸੰਭਾਲ ਦੀ ਵੱਖਰੀ ਰਸਾਇਣਕ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਇਸ ਸਾਇਟੋਕਾਈਨ ਵਰਣਨ ਦੇ ਨਾਲ-ਨਾਲ ਚੱਲਦੀ ਹੈ ਅਤੇ ਇਸ ਨਾਲ ਰਲਾਈ ਨਹੀਂ ਜਾਣੀ ਚਾਹੀਦੀ।

ਮਾਰਗਾਂ ਦੀ ਤੁਲਨਾ: ਦਖ਼ਲ ਦੇ ਬਿੰਦੂ ਅਤੇ ਮਾਪੇ ਨਤੀਜੇ

ਇਹ ਸਾਰਣੀ ਇੱਕ ਨਤੀਜੇ ਨੂੰ ਦੂਜੇ ’ਤੇ ਲਾਗੂ ਕਰਨ ਵਾਲੀਆਂ ਤਿੰਨ ਅਣਉਚਿਤ ਵਿਆਖਿਆਵਾਂ ਨੂੰ ਰੋਕਦੀ ਹੈ। ASC ਬਿੰਦੂ ਦਾ ਨਤੀਜਾ STAT3 ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਨੂੰ ਸਾਬਤ ਨਹੀਂ ਕਰਦਾ। STAT1 ਦੇ iNOS ਪ੍ਰੋਮੋਟਰ ਨਾਲ ਜੁੜਨ ਦਾ ਨਤੀਜਾ STAT3 ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਨੂੰ ਸਾਬਤ ਨਹੀਂ ਕਰਦਾ, ਭਾਵੇਂ ਦੋਵੇਂ ਪ੍ਰੋਟੀਨ STAT ਪਰਿਵਾਰ ਦੇ ਮੈਂਬਰ ਹਨ। ਸੀਰਮ IL-6 ਦਾ ਨਤੀਜਾ ਇਨਫਲਾਮਾਸੋਮ ਦੇ ਘੱਟ ਸੰਯੋਜਨ ਨੂੰ ਸਾਬਤ ਨਹੀਂ ਕਰਦਾ: ਪੈਰੀਟੋਨੀਅਲ ਪ੍ਰਯੋਗ ਵਿੱਚ IL-1beta ਘਟਿਆ ਸੀ, ਪਰ IL-6 ਨਹੀਂ। ਹਰੇਕ ਕਤਾਰ ਨੂੰ ਆਪਣਾ ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਕਾਰਕ ਅਤੇ ਮਾਪਿਆ ਨਤੀਜਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ। ਇਸੇ ਲਈ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ, ਜਾਨਵਰਾਂ ਅਤੇ ਕਲੀਨੀਕਲ ਮੈਥਲੀਨ ਬਲੂ ਅਧਿਐਨਾਂ ਨੂੰ ਪੜ੍ਹਦੇ ਸਮੇਂ ਹਰੇਕ ਦਾਅਵੇ ਨੂੰ ਉਸ ਪੱਧਰ ਨਾਲ ਮਿਲਾਉਣਾ ਲਾਜ਼ਮੀ ਹੈ ਜਿਸ ’ਤੇ ਮਾਪ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।

ਇਨ੍ਹਾਂ ਵਿੱਚੋਂ ਕੋਈ ਵੀ ਗੱਲ ਮਨੁੱਖਾਂ ਵਿੱਚ ਖੁਰਾਕ, ਸੁਰੱਖਿਆ ਜਾਂ ਲਾਭ ਸਥਾਪਿਤ ਨਹੀਂ ਕਰਦੀ। ਲਿਪੋਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡ ਮਾਡਲ ਕਿਸੇ ਤੰਤਰ ਦੀ ਜਾਂਚ ਲਈ ਨਿਯੰਤਰਿਤ ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਕਾਰਕ ਹਨ, ਲੰਮੇ ਸਮੇਂ ਦੀ ਬਿਮਾਰੀ ਦੀਆਂ ਨਕਲਾਂ ਨਹੀਂ। ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਕਾਰਕ ਦੇ ਨਾਲ ਖੁਰਾਕ ਦੇਣਾ, ਪ੍ਰੇਰਿਤ ਤਬਦੀਲੀ ਨੂੰ ਰੋਕਣ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕਰਦਾ ਹੈ, ਨਾ ਕਿ ਪਹਿਲਾਂ ਤੋਂ ਸਥਾਪਿਤ ਰੋਗ ਨੂੰ ਉਲਟਾਉਣ ਦੀ। ਤੰਤਰ ਦੇ ਇਸ ਵਰਣਨ ਨੂੰ ਮਰੀਜ਼ਾਂ ਦੇ ਨਤੀਜਿਆਂ ਤੋਂ ਵੱਖਰਾ ਰੱਖੋ, ਅਤੇ ਸਿਹਤ ਸੰਬੰਧੀ ਕਿਸੇ ਵੀ ਦਾਅਵੇ ਨੂੰ ਉਸ ਦੇ ਪਿੱਛੇ ਮੌਜੂਦ ਮਰੀਜ਼ਾਂ ਦੇ ਅਧਿਐਨ ਦੇ ਆਧਾਰ ’ਤੇ ਪਰਖੋ।