G6PD ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਟੈਸਟਾਂ ਵਿੱਚ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ: ਰੰਗ ਅਸਲ ਵਿੱਚ ਕੀ ਕਰ ਰਿਹਾ ਹੈ

ਇੱਕ ਵਿਦਿਆਰਥੀ ਇਨਕਿਊਬੇਸ਼ਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਦੋ ਟਿਊਬਾਂ ਨੂੰ ਵੇਖਦਾ ਹੈ। ਇੱਕ ਦਾ ਰੰਗ ਉਮੀਦ ਅਨੁਸਾਰ ਬਦਲ ਗਿਆ ਹੈ। ਦੂਜੀ ਦਾ ਨਹੀਂ। ਵਿਦਿਆਰਥੀ ਨਤੀਜਾ ਕੱਢਦਾ ਹੈ ਕਿ ਦੂਜੇ ਮਰੀਜ਼ ਵਿੱਚ ਗਲੂਕੋਜ਼-6-ਫਾਸਫੇਟ ਡੀਹਾਈਡ੍ਰੋਜਨੇਜ਼ ਦੀ ਘਾਟ ਹੈ। ਇਹ ਨਤੀਜਾ ਸਹੀ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਪਰ ਇਸ ਤਰਕ ਵਿੱਚ ਉਹ ਧਾਰਨਾ ਛੁੱਟ ਜਾਂਦੀ ਹੈ ਜਿਸ ਉੱਤੇ ਟੈਸਟ ਕੰਮ ਕਰਦਾ ਹੈ। ਟਿਊਬ ਵਿੱਚ ਕੋਈ ਵੀ ਚੀਜ਼ ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਨੂੰ ਸਿੱਧਾ ਨਹੀਂ ਮਾਪਦੀ। ਟਿਊਬ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਨੂੰ ਵਿਚੋਲੇ ਵਜੋਂ ਵਰਤ ਕੇ ਉਸ ਚੀਜ਼ ਨੂੰ ਮਾਪਦੀ ਹੈ ਜੋ ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਪੈਦਾ ਕਰਦਾ ਹੈ।

ਜਦੋਂ ਇਹ ਅਸਿੱਧਾ ਤਰੀਕਾ ਸਪਸ਼ਟ ਹੋ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ, ਕੰਟਰੋਲ ਅਤੇ ਗਲਤ ਨਤੀਜਿਆਂ ਦੀ ਲੰਮੀ ਸੂਚੀ ਮਨਮਾਨੀਆਂ ਨਹੀਂ ਲੱਗਦੀਆਂ।

ਸੰਖੇਪ ਜਵਾਬ

G6PD ਟੈਸਟ ਵਿੱਚ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਇੱਕ ਰੈਡੌਕਸ ਸੂਚਕ ਹੈ। G6PD ਐਂਜ਼ਾਈਮ NADPH ਬਣਾਉਂਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ NADPH-ਨਿਰਭਰ ਪ੍ਰਣਾਲੀਆਂ ਨੀਲੇ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਦਾ ਅਪਚਯ ਕਰਕੇ ਉਸ ਨੂੰ ਇਸ ਦੇ ਰੰਗਹੀਣ ਲਿਊਕੋ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਬਦਲਦੀਆਂ ਹਨ ਜਾਂ ਇਸ ਨੂੰ ਇਲੈਕਟ੍ਰਾਨਾਂ ਦੇ ਆਦਾਨ-ਪ੍ਰਦਾਨ ਲਈ ਵਰਤਦੀਆਂ ਹਨ। ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਦੀ ਸਧਾਰਣ ਸਰਗਰਮੀ ਨਾਲ ਅਪਚਯ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਨਾਲ ਹੁੰਦਾ ਹੈ। ਘੱਟ ਸਰਗਰਮੀ ਨਾਲ ਅਪਚਯ ਹੌਲੀ ਜਾਂ ਅਧੂਰਾ ਹੁੰਦਾ ਹੈ। ਪੂਰਾ ਸੰਕੇਤ ਇਹੀ ਹੈ।

ਦੋ ਇਤਿਹਾਸਕ ਵਿਧੀਆਂ ਵਿੱਚ ਇਹੋ ਰੰਗ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਪਰ ਉਨ੍ਹਾਂ ਦੇ ਅੰਤ-ਬਿੰਦੂ ਵੱਖਰੇ ਹਨ। ਇਨ੍ਹਾਂ ਨੂੰ ਵੱਖਰਾ ਸਮਝਣ ਨਾਲ ਬਹੁਤੀ ਉਲਝਣ ਦੂਰ ਹੋ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।

ਦੋ ਟੈਸਟ, ਇੱਕ ਰੰਗ, ਵੱਖਰੇ ਅੰਤ-ਬਿੰਦੂ

ਪਹਿਲਾ ਸਿੱਧਾ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਅਪਚਯ ਟੈਸਟ ਹੈ, ਜਿਸ ਦਾ ਵਰਣਨ ਸਾਸ ਅਤੇ ਸਹਿਕਰਮੀਆਂ ਨੇ ਕੀਤਾ ਅਤੇ ਬਾਅਦ ਵਿੱਚ ਗਿਬਜ਼ ਨੇ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕੀਤਾ। ਇੱਥੇ ਅੰਤ-ਬਿੰਦੂ ਖੁਦ ਰੰਗ ਹੈ: ਆਕਸੀਕ੍ਰਿਤ ਨੀਲੇ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਦਾ ਅਪਚਯ ਹੋਣ ਨਾਲ ਉਹ ਰੰਗਹੀਣ ਲਿਊਕੋਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਵੱਲ ਬਦਲਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਇਸ ਬਦਲਾਅ ਦੀ ਦਰ NADPH ਬਣਾਉਣ ਦੀ ਸਮਰੱਥਾ ਦਰਸਾਉਂਦੀ ਹੈ। ਮੂਲ ਸਕ੍ਰੀਨਿੰਗ ਖੋਜ-ਪੱਤਰ PubMed ਉੱਤੇ ਸਾਸ ਅਤੇ ਸਹਿਕਰਮੀਆਂ (1966) ਦੇ ਨਾਂ ਹੇਠ ਸੂਚੀਬੱਧ ਹੈ।

ਦੂਜਾ ਬਰੂਅਰ ਮੈਟਹੀਮੋਗਲੋਬਿਨ ਅਪਚਯ ਟੈਸਟ ਹੈ। ਸੋਡੀਅਮ ਨਾਈਟ੍ਰਾਈਟ ਪਹਿਲਾਂ ਹੀਮੋਗਲੋਬਿਨ ਦਾ ਆਕਸੀਕਰਨ ਕਰਕੇ ਉਸ ਨੂੰ ਭੂਰੇ ਮੈਟਹੀਮੋਗਲੋਬਿਨ ਵਿੱਚ ਬਦਲਦਾ ਹੈ। ਫਿਰ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਇਲੈਕਟ੍ਰਾਨ ਤਬਾਦਲੇ ਦੇ ਵਿਚੋਲੇ ਵਜੋਂ ਕੰਮ ਕਰਦਾ ਹੈ: ਅਪਚਯਿਤ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਮੈਟਹੀਮੋਗਲੋਬਿਨ ਨੂੰ ਅਪਚਯਕ ਸਮਤੁੱਲ ਸੌਂਪਦਾ ਹੈ, ਜਿਸ ਨਾਲ ਉਹ ਮੁੜ ਲਾਲ ਹੀਮੋਗਲੋਬਿਨ ਬਣ ਜਾਂਦਾ ਹੈ। ਇਸ ਲਈ ਦਿਸਣ ਵਾਲਾ ਅੰਤ-ਬਿੰਦੂ ਭੂਰਾ ਬਨਾਮ ਲਾਲ ਹੈ, ਨਾ ਕਿ ਨੀਲਾ ਬਨਾਮ ਰੰਗਹੀਣ। ਮੂਲ ਵਿਧੀ ਵਿਸ਼ਵ ਸਿਹਤ ਸੰਗਠਨ ਦੇ ਬੁਲੇਟਿਨ (ਬਰੂਅਰ ਅਤੇ ਸਹਿਕਰਮੀ, 1960) ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਕਾਸ਼ਿਤ ਹੋਈ ਸੀ।

ਬਰੂਅਰ ਐਸੇ ਨੂੰ ਰੰਗ ਦੇ ਰੰਗਹੀਣ ਹੋਣ ਦਾ ਟੈਸਟ ਕਹਿਣਾ ਰਸਾਇਣਕ ਤੌਰ ਉੱਤੇ ਸਟੀਕ ਨਹੀਂ ਹੈ। ਰੰਗ ਚੱਕਰ ਵਿੱਚ ਆਕਸੀਕ੍ਰਿਤ ਅਤੇ ਅਪਚਯਿਤ ਹੁੰਦਾ ਰਹਿੰਦਾ ਹੈ; ਰੰਗ ਹੀਮੋਗਲੋਬਿਨ ਦਾ ਬਦਲਦਾ ਹੈ। ਹੇਠਾਂ ਦਿੱਤਾ ਚਿੱਤਰ ਦੋਵੇਂ ਮਾਰਗ ਦਰਸਾਉਂਦਾ ਹੈ।

ਮੂਲ ਅਭਿਕਿਰਿਆ

G6PD ਪੈਂਟੋਜ਼ ਫਾਸਫੇਟ ਮਾਰਗ ਦੇ ਪਹਿਲੇ ਆਕਸੀਕਰਨ ਪੜਾਅ ਨੂੰ ਉਤਪ੍ਰੇਰਿਤ ਕਰਦਾ ਹੈ:

Glucose-6-phosphate + NADP+ becomes 6-phosphogluconolactone + NADPH + H+

ਪਰਿਪੱਕ ਲਾਲ ਖੂਨ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ NADPH ਲਈ ਇਸ ਮਾਰਗ ਉੱਤੇ ਬਹੁਤ ਨਿਰਭਰ ਕਰਦੀਆਂ ਹਨ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਬਲੱਡ ਵਿੱਚ ਲੁਜ਼ਾਟੋ ਅਤੇ ਸਹਿਕਰਮੀਆਂ (2020) ਦੀ ਸਮੀਖਿਆ ਵਿੱਚ ਦੱਸਿਆ ਗਿਆ ਹੈ। NADPH ਗਲੂਟਾਥਾਇਓਨ ਨੂੰ ਅਪਚਯਿਤ ਅਵਸਥਾ ਵਿੱਚ ਰੱਖਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਕੋਸ਼ਿਕਾ ਨੂੰ ਆਕਸੀਕਰਨ ਨਾਲ ਹੋਣ ਵਾਲੇ ਨੁਕਸਾਨ ਤੋਂ ਬਚਾਉਂਦਾ ਹੈ। ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਇਸ ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਵਿੱਚ ਇਲੈਕਟ੍ਰਾਨ ਸਵੀਕਾਰਕ ਵਜੋਂ ਸ਼ਾਮਲ ਹੁੰਦਾ ਹੈ। ਕਾਫ਼ੀ G6PD ਨਾਲ ਕਾਫ਼ੀ NADPH ਬਣਦਾ ਹੈ, ਜਿਸ ਨਾਲ ਅਪਚਯ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਨਾਲ ਹੁੰਦਾ ਹੈ। ਘੱਟ G6PD ਇਸ ਲੜੀ ਨੂੰ ਪਹਿਲੀ ਕੜੀ ਉੱਤੇ ਹੀ ਤੋੜ ਦਿੰਦਾ ਹੈ।

ਰੰਗ ਨੂੰ ਇੰਜਣ ਨਹੀਂ, ਸਗੋਂ ਬਾਲਣ ਦਾ ਮੀਟਰ ਸਮਝੋ। ਇਹ NADPH ਦੀ ਸਪਲਾਈ ਬਾਰੇ ਦੱਸਦਾ ਹੈ। ਕੋਈ ਹੋਰ ਚੀਜ਼ ਜੋ ਇਸ ਸਪਲਾਈ ਜਾਂ ਨਤੀਜੇ ਨੂੰ ਪੜ੍ਹਨ ਦੇ ਤਰੀਕੇ ਵਿੱਚ ਬਦਲਾਅ ਕਰਦੀ ਹੈ, ਜੀਨ ਵਿੱਚ ਕੋਈ ਤਬਦੀਲੀ ਹੋਏ ਬਿਨਾਂ ਵੀ ਮੀਟਰ ਦੀ ਸੂਈ ਨੂੰ ਹਿਲਾ ਸਕਦੀ ਹੈ।

ਬਰੂਅਰ ਕਿਸਮ ਦੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਕਿਵੇਂ ਚੱਲਦੀ ਹੈ

ਦਹਾਕਿਆਂ ਦੌਰਾਨ ਅਭਿਕਰਮਕਾਂ ਦੇ ਨੁਸਖ਼ੇ ਬਦਲਦੇ ਰਹੇ ਹਨ, ਇਸ ਲਈ ਸਿੱਖਿਆ ਲਈ ਦਿੱਤੇ ਵਰਣਨ ਨੂੰ ਕਲੀਨੀਕਲ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ ਨਹੀਂ ਸਮਝਣਾ ਚਾਹੀਦਾ। ਹਰ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਆਪਣੀ ਪ੍ਰਮਾਣਿਤ ਮਿਆਰੀ ਕਾਰਜ-ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਦੀ ਪਾਲਣਾ ਕਰਦੀ ਹੈ। ਇਸ ਸਾਵਧਾਨੀ ਨਾਲ, ਰਵਾਇਤੀ ਟਿਊਬ ਵਿਵਸਥਾ ਹੇਠ ਲਿਖੇ ਤਰੀਕੇ ਨਾਲ ਕੰਮ ਕਰਦੀ ਹੈ; ਇਸ ਪ੍ਰਕਾਸ਼ਿਤ ਕਾਰਜਾਨਵਯਨ ਵਿੱਚ ਤਿੰਨ ਟਿਊਬਾਂ ਅਤੇ 3-hour ਇਨਕਿਊਬੇਸ਼ਨ ਵਾਲਾ ਰੂਪ ਦਰਜ ਹੈ:

1. ਮਰੀਜ਼ ਦੀ ਟਿਊਬ: ਪੂਰਾ ਖੂਨ, ਗਲੂਕੋਜ਼, ਸੋਡੀਅਮ ਨਾਈਟ੍ਰਾਈਟ ਅਤੇ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ। ਨਾਈਟ੍ਰਾਈਟ ਮੈਟਹੀਮੋਗਲੋਬਿਨ ਬਣਾਉਂਦਾ ਹੈ, ਗਲੂਕੋਜ਼ ਲਾਲ ਖੂਨ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਦੇ ਚਯਾਪਚਯ ਲਈ ਸਰੋਤ ਦਿੰਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਰੰਗ NADPH-ਨਿਰਭਰ ਇਲੈਕਟ੍ਰਾਨ ਤਬਾਦਲੇ ਦਾ ਮਾਧਿਅਮ ਬਣਦਾ ਹੈ।
2. ਆਕਸੀਕ੍ਰਿਤ ਕੰਟਰੋਲ: ਖੂਨ, ਨਾਈਟ੍ਰਾਈਟ ਅਤੇ ਗਲੂਕੋਜ਼, ਪਰ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਨਹੀਂ। ਇਹ ਭੂਰੇ ਮੈਟਹੀਮੋਗਲੋਬਿਨ ਵਾਲਾ ਅੰਤ-ਬਿੰਦੂ ਦਰਸਾਉਂਦਾ ਹੈ, ਜੋ ਘਾਟ ਵਾਲਾ ਪੈਟਰਨ ਹੈ।
3. ਹੀਮੋਗਲੋਬਿਨ ਕੰਟਰੋਲ: ਖੂਨ ਅਤੇ ਪਾਣੀ। ਇਹ ਲਾਲ ਹੀਮੋਗਲੋਬਿਨ ਵਾਲਾ ਅੰਤ-ਬਿੰਦੂ ਦਰਸਾਉਂਦਾ ਹੈ, ਜੋ ਸਧਾਰਣ ਪੈਟਰਨ ਹੈ।
4. ਸਾਰੀਆਂ ਟਿਊਬਾਂ ਨੂੰ ਲਗਭਗ 37 C ਉੱਤੇ, ਆਮ ਤੌਰ ਉੱਤੇ 3 hours ਲਈ, ਹੌਲੀ-ਹੌਲੀ ਮਿਲਾਉਂਦੇ ਹੋਏ ਇਨਕਿਊਬੇਟ ਕਰੋ।
5. ਹਰ ਟਿਊਬ ਵਿੱਚੋਂ ਥੋੜ੍ਹਾ ਜਿਹਾ ਹਿੱਸਾ ਡਿਸਟਿਲਡ ਪਾਣੀ ਵਿੱਚ ਪਤਲਾ ਕਰੋ, ਤਾਂ ਜੋ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਟੁੱਟ ਜਾਣ ਅਤੇ ਰੰਗਾਂ ਦੀ ਤੁਲਨਾ ਸਪਸ਼ਟ ਹੋ ਸਕੇ।
6. ਮਰੀਜ਼ ਦੀ ਟਿਊਬ ਦੀ ਦੋਵੇਂ ਕੰਟਰੋਲਾਂ ਨਾਲ ਤੁਲਨਾ ਕਰੋ। ਲਾਲ ਰੰਗ ਵੱਲ ਮੁੜਨਾ ਕਾਫ਼ੀ ਅਪਚਯ ਸਮਰੱਥਾ ਦਰਸਾਉਂਦਾ ਹੈ। ਭੂਰਾ ਰੰਗ ਬਣਿਆ ਰਹਿਣਾ ਸਪਸ਼ਟ ਘਾਟ ਦਾ ਸੰਕੇਤ ਦਿੰਦਾ ਹੈ।

ਇੱਕ ਇਤਿਹਾਸਕ ਮਿਸ਼ਰਣ ਵਿੱਚ ਲਗਭਗ 1 mL ਖੂਨ ਨਾਲ ਅਭਿਕਰਮਕਾਂ ਦੀਆਂ ਮਾਤਰਾਵਾਂ ਲਗਭਗ 180 mM ਸੋਡੀਅਮ ਨਾਈਟ੍ਰਾਈਟ, 280 mM ਡੈਕਸਟ੍ਰੋਜ਼ ਅਤੇ 0.4 mM ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਸਨ। ਇਨ੍ਹਾਂ ਅੰਕਾਂ ਨੂੰ ਪ੍ਰਕਾਸ਼ਿਤ ਸਾਹਿਤ ਦੀ ਇੱਕ ਮਿਸਾਲ ਸਮਝੋ, ਨਾ ਕਿ ਹਰ ਥਾਂ ਲਾਗੂ ਹੋਣ ਵਾਲਾ ਮਿਆਰ।

ਨਤੀਜਾ ਪੜ੍ਹਨਾ

ਗੁਣਾਤਮਕ ਸਕ੍ਰੀਨਿੰਗ ਸਧਾਰਣ ਸਰਗਰਮੀ ਦੇ ਲਗਭਗ 30 ਤੋਂ 40 ਪ੍ਰਤੀਸ਼ਤ ਦੇ ਪੱਧਰ ਉੱਤੇ ਸਭ ਤੋਂ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਫ਼ਰਕ ਕਰਦੀ ਹੈ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ G6PD ਦੀ ਪਛਾਣ ਵਿੱਚ ਰਹਿ ਜਾਂਦੀਆਂ ਕਮੀਆਂ ਬਾਰੇ ਮਲੇਰੀਆ ਜਰਨਲ ਦੀ ਇਸ ਸਮੀਖਿਆ ਵਿੱਚ ਚਰਚਾ ਕੀਤੀ ਗਈ ਹੈ। ਇਸ ਲਈ ਸਧਾਰਣ ਸਕ੍ਰੀਨਿੰਗ ਨਤੀਜੇ ਦਾ ਅਰਥ ਹੈ ਕਿ ਐਸੇ ਨੇ ਗੰਭੀਰ ਘਾਟ ਨਹੀਂ ਪਛਾਣੀ। ਇਹ ਸਰਗਰਮੀ ਦੇ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਸਧਾਰਣ ਹੋਣ ਦੀ ਪੁਸ਼ਟੀ ਨਹੀਂ ਕਰਦਾ।

ਸਕ੍ਰੀਨਿੰਗ ਗੁਮਰਾਹ ਕਿਉਂ ਕਰ ਸਕਦੀ ਹੈ

ਹੀਮੋਲਾਈਸਿਸ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਰੈਟੀਕੁਲੋਸਾਈਟੋਸਿਸ ਗਲਤੀ ਨਾਲ ਸਧਾਰਣ ਨਤੀਜਾ ਆਉਣ ਦਾ ਜਾਣਿਆ-ਪਛਾਣਿਆ ਕਾਰਨ ਹੈ। ਨਵੀਆਂ ਲਾਲ ਖੂਨ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਅਤੇ ਰੈਟੀਕੁਲੋਸਾਈਟਾਂ ਵਿੱਚ ਪੁਰਾਣੀਆਂ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਨਾਲੋਂ ਵੱਧ G6PD ਹੁੰਦਾ ਹੈ। ਤੀਬਰ ਹੀਮੋਲਾਈਟਿਕ ਘਟਨਾ ਦੌਰਾਨ ਸਭ ਤੋਂ ਪੁਰਾਣੀਆਂ ਅਤੇ ਸਭ ਤੋਂ ਵੱਧ ਘਾਟ ਵਾਲੀਆਂ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਪਹਿਲਾਂ ਹੀ ਨਸ਼ਟ ਹੋ ਸਕਦੀਆਂ ਹਨ, ਜਿਸ ਨਾਲ ਨਵੀਆਂ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਦਾ ਸਮੂਹ ਬਚਦਾ ਹੈ ਜਿਸ ਦੀ ਸਰਗਰਮੀ ਟੈਸਟ ਵਿੱਚ ਸਧਾਰਣ ਆਉਂਦੀ ਹੈ। ਇਹੀ ਜੀਵ-ਵਿਗਿਆਨਕ ਪ੍ਰਭਾਵ ਸਿਰਫ਼ ਰੰਗ ਵਾਲੀ ਸਕ੍ਰੀਨਿੰਗ ਨੂੰ ਹੀ ਨਹੀਂ, ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਐਸੇ ਨੂੰ ਵੀ ਗੁਮਰਾਹ ਕਰਦਾ ਹੈ।

ਹਾਲ ਹੀ ਵਿੱਚ ਹੋਇਆ ਖੂਨ ਚੜ੍ਹਾਉਣਾ ਘਾਟ ਨੂੰ ਲੁਕਾ ਦਿੰਦਾ ਹੈ, ਕਿਉਂਕਿ ਦਾਤਾ ਦੀਆਂ ਲਾਲ ਖੂਨ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਨਮੂਨੇ ਵਿੱਚ ਆਪਣਾ ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਜੋੜਦੀਆਂ ਹਨ। ਮੇਯੋ ਕਲੀਨਿਕ ਲੈਬੋਰਟਰੀਜ਼ ਖੂਨ ਚੜ੍ਹਾਉਣ ਨੂੰ ਰੈਟੀਕੁਲੋਸਾਈਟੋਸਿਸ ਅਤੇ ਲਿਊਕੋਸਾਈਟਾਂ ਦੀ ਦਖ਼ਲਅੰਦਾਜ਼ੀ ਦੇ ਨਾਲ ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਦੇ ਅਣਭਰੋਸੇਯੋਗ ਨਤੀਜਿਆਂ ਦੇ ਕਾਰਨਾਂ ਵਿੱਚ ਗਿਣਦੀ ਹੈ।

ਹੈਟਰੋਜ਼ਾਈਗਸ ਔਰਤਾਂ ਦੇ ਮਾਮਲੇ ਸਭ ਤੋਂ ਔਖੇ ਹੁੰਦੇ ਹਨ। X-ਕ੍ਰੋਮੋਸੋਮ ਦੇ ਬੇਤਰਤੀਬ ਨਿਸ਼ਕ੍ਰਿਯ ਹੋਣ ਨਾਲ ਸਧਾਰਣ ਅਤੇ ਘਾਟ ਵਾਲੀਆਂ ਲਾਲ ਖੂਨ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਦਾ ਮਿਸ਼ਰਣ ਬਣਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਕੁੱਲ ਸਰਗਰਮੀ ਗੰਭੀਰ ਘਾਟ ਤੋਂ ਲੈ ਕੇ ਦਿਖਣ ਵਿੱਚ ਸਧਾਰਣ ਤੱਕ ਕਿਸੇ ਵੀ ਪੱਧਰ ਉੱਤੇ ਹੋ ਸਕਦੀ ਹੈ। ਗੁਣਾਤਮਕ ਸਕ੍ਰੀਨਿੰਗ ਵਿੱਚ ਵਿਚਕਾਰਲੇ ਫੀਨੋਟਾਈਪ ਅਕਸਰ ਪਛਾਣੇ ਨਹੀਂ ਜਾਂਦੇ। G6PD ਟੈਸਟਿੰਗ ਬਾਰੇ WHO ਦੇ ਦਸਤਾਵੇਜ਼ ਵਿੱਚ ਇਸ ਸੀਮਾ ਦੀ ਵਿਸਥਾਰ ਨਾਲ ਚਰਚਾ ਕੀਤੀ ਗਈ ਹੈ।

ਨਮੂਨਾ ਕਿੰਨਾ ਪੁਰਾਣਾ ਹੈ, ਸਟੋਰੇਜ ਦਾ ਤਾਪਮਾਨ, ਅੰਤ-ਬਿੰਦੂ ਨੂੰ ਅੱਖ ਨਾਲ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰਨ ਵਿੱਚ ਵਿਅਕਤੀਗਤ ਫ਼ਰਕ, ਹੀਮੈਟੋਕ੍ਰਿਟ ਅਤੇ ਅਭਿਕਰਮਕਾਂ ਦੀ ਗੁਣਵੱਤਾ—ਇਹ ਸਭ ਇਨ੍ਹਾਂ ਜੀਵ-ਵਿਗਿਆਨਕ ਪ੍ਰਭਾਵਾਂ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਵਿੱਚ ਹੋਰ ਅਨਿਸ਼ਚਿਤਤਾ ਜੋੜਦੇ ਹਨ।

ਸਕ੍ਰੀਨਿੰਗ ਨਿਦਾਨ ਨਹੀਂ ਹੈ

ਘਾਟ ਵਾਲੇ, ਵਿਚਕਾਰਲੇ ਜਾਂ ਕਲੀਨੀਕਲ ਸਥਿਤੀ ਨਾਲ ਮੇਲ ਨਾ ਖਾਂਦੇ ਸਕ੍ਰੀਨਿੰਗ ਨਤੀਜੇ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਮਾਤਰਾਤਮਕ G6PD ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਐਸੇ ਦੀ ਲੋੜ ਹੁੰਦੀ ਹੈ। WHO ਤਾਪਮਾਨ-ਨਿਯੰਤਰਿਤ ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਸਪੈਕਟ੍ਰੋਫੋਟੋਮੀਟਰੀ ਨੂੰ ਸੰਦਰਭ ਵਿਧੀ ਮੰਨਦਾ ਹੈ। ਇਸ ਐਸੇ ਵਿੱਚ ਲਾਲ ਖੂਨ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਦੇ ਹੀਮੋਲਾਈਸੇਟ ਵਿੱਚ ਗਲੂਕੋਜ਼-6-ਫਾਸਫੇਟ ਅਤੇ NADP+ ਪਾਏ ਜਾਂਦੇ ਹਨ, ਅਤੇ ਬਣੇ NADPH ਨੂੰ 340 nm ਉੱਤੇ ਵਧਦੀ ਪ੍ਰਕਾਸ਼-ਅਵਸ਼ੋਸ਼ਤਾ ਰਾਹੀਂ ਮਾਪਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ। ਬਦਲਾਅ ਦੀ ਦਰ ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਦੀ ਸਰਗਰਮੀ ਦੇ ਅਨੁਪਾਤ ਵਿੱਚ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਅਤੇ ਆਮ ਤੌਰ ਉੱਤੇ ਇਸ ਨੂੰ ਹੀਮੋਗਲੋਬਿਨ ਦੇ ਪ੍ਰਤੀ ਗ੍ਰਾਮ ਇਕਾਈਆਂ ਵਜੋਂ ਮਿਆਰੀਕ੍ਰਿਤ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ। ਮੌਜੂਦਾ ਕਲੀਨੀਕਲ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਪ੍ਰਥਾ ਦਾ ਸਾਰ G6PD ਸਰਗਰਮੀ ਲਈ ਮੇਯੋ ਟੈਸਟ ਕੈਟਾਲਾਗ ਦੀ ਐਂਟਰੀ ਵਿੱਚ ਦਿੱਤਾ ਗਿਆ ਹੈ।

ਵਿਆਖਿਆ ਲਈ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਦੀ ਪ੍ਰਮਾਣਿਤ ਸੰਦਰਭ ਸੀਮਾ ਵਰਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ, ਜਿਸ ਨੂੰ ਅਕਸਰ ਆਬਾਦੀ ਦੀ ਸਧਾਰਣ ਸਰਗਰਮੀ ਦੇ ਮੁਕਾਬਲੇ ਦਰਸਾਇਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ। ਘਾਟ ਦੀ ਚਰਚਾ ਆਮ ਤੌਰ ਉੱਤੇ 30 ਪ੍ਰਤੀਸ਼ਤ ਦੀ ਹੱਦ ਦੇ ਨੇੜੇ ਅਤੇ ਵਿਚਕਾਰਲੀ ਸਰਗਰਮੀ ਦੀ ਚਰਚਾ ਇਸ ਤੋਂ ਉੱਪਰ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ। G6PD ਟੈਸਟਾਂ ਲਈ WHO ਦੇ ਟਾਰਗੇਟ ਉਤਪਾਦ ਪ੍ਰੋਫ਼ਾਈਲ (2022) ਇਹ ਨਿਦਾਨਕ ਢਾਂਚਾ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰਦੇ ਹਨ। ਜੇ ਹਾਲ ਹੀ ਵਿੱਚ ਹੋਏ ਹੀਮੋਲਾਈਸਿਸ ਜਾਂ ਖੂਨ ਚੜ੍ਹਾਉਣ ਕਾਰਨ ਫੀਨੋਟਾਈਪ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰਨਾ ਭਰੋਸੇਯੋਗ ਨਾ ਹੋਵੇ, ਤਾਂ ਲਾਲ ਖੂਨ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਦਾ ਸਮੂਹ ਮੁੜ ਸੰਤੁਲਿਤ ਹੋਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਟੈਸਟ ਦੁਹਰਾਓ। ਅਣੂ-ਪੱਧਰੀ ਟੈਸਟ ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਦੇ ਮਾਪ ਦੀ ਥਾਂ ਲਏ ਬਿਨਾਂ ਹੋਰ ਜਾਣਕਾਰੀ ਜੋੜ ਸਕਦੇ ਹਨ।

ਇੱਕ ਹੱਦ ਜਿਸ ਨੂੰ ਕਾਇਮ ਰੱਖਣਾ ਜ਼ਰੂਰੀ ਹੈ

ਇਨ੍ਹਾਂ ਐਸੇ ਵਿੱਚ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਇੱਕ ਸਰੀਰ ਤੋਂ ਬਾਹਰ ਵਰਤਿਆ ਜਾਣ ਵਾਲਾ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਅਭਿਕਰਮਕ ਹੈ। ਇਹ ਗੱਲ ਮਰੀਜ਼ ਨੂੰ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਦੇਣ ਦੀ ਸੁਰੱਖਿਆ ਵਾਲੀ ਚਰਚਾ ਤੋਂ ਵੱਖਰੀ ਹੈ, ਜਿਸ ਬਾਰੇ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਨਾ ਵਰਤਣ ਵਾਲੀਆਂ ਸਥਿਤੀਆਂ ਸੰਬੰਧੀ ਮਾਰਗਦਰਸ਼ਨ ਵਿੱਚ ਦੱਸਿਆ ਗਿਆ ਹੈ। ਜੀਵ-ਰਸਾਇਣਕ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਇਨ੍ਹਾਂ ਨੂੰ ਜੋੜਦੀ ਹੈ, ਕਿਉਂਕਿ ਦਵਾਈ ਵੀ NADPH-ਨਿਰਭਰ ਅਪਚਯ ਉੱਤੇ ਨਿਰਭਰ ਕਰਦੀ ਹੈ, ਪਰ ਟੈਸਟ ਟਿਊਬ ਵਿੱਚ ਰੰਗ ਹੋਣਾ ਖੂਨ ਦੇ ਵਹਾਅ ਵਿੱਚ ਖੁਰਾਕ ਦੇਣ ਦੇ ਬਰਾਬਰ ਨਹੀਂ ਹੈ। ਕਿਸੇ ਹੋਰ ਸੰਦਰਭ ਵਿੱਚ ਇਹ ਰੰਗ ਸਟੇਨ ਵਜੋਂ ਕਿਵੇਂ ਕੰਮ ਕਰਦਾ ਹੈ, ਇਸ ਬਾਰੇ ਜਾਣਨ ਲਈ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਸਟੇਨਿੰਗ ਦੇ ਸਿਧਾਂਤ ਵੇਖੋ; ਅਤੇ ਜਿਸ ਰਸਾਇਣਕ ਪਰਿਵਾਰ ਨਾਲ ਇਹ ਸੰਬੰਧਿਤ ਹੈ, ਉਸ ਲਈ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਵਿੱਚ ਰੈਡੌਕਸ ਰੰਗਾਂ ਦਾ ਵਿਸ਼ਾ ਵੇਖੋ।

ਸਕ੍ਰੀਨਿੰਗ ਇਹ ਪੁੱਛਦੀ ਹੈ ਕਿ ਕੀ ਅਪਚਯ ਸਮਰੱਥਾ ਬਰਕਰਾਰ ਦਿਸਦੀ ਹੈ। ਪੁਸ਼ਟੀਕਰਨ ਇਹ ਪੁੱਛਦਾ ਹੈ ਕਿ ਅਸਲ ਵਿੱਚ ਕਿੰਨਾ ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਮੌਜੂਦ ਹੈ। ਰੰਗ ਪਹਿਲੇ ਸਵਾਲ ਦਾ ਜਵਾਬ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਦਿੰਦਾ ਹੈ, ਬਸ਼ਰਤੇ ਕੋਈ ਇਸ ਤੋਂ ਦੂਜੇ ਸਵਾਲ ਦਾ ਜਵਾਬ ਨਾ ਮੰਗੇ।