EMB ਅਗਰ ਉੱਤੇ E. coli ਅਤੇ ਹੋਰ ਕਾਲੋਨੀਆਂ ਦੀ ਦਿੱਖ ਨੂੰ ਪੜ੍ਹਨਾ

ਇੱਕ ਵਿਦਿਆਰਥੀ ਈਓਸਿਨ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਅਗਰ ਉੱਤੇ ਇੱਕ ਅਣਪਛਾਤੇ ਨਮੂਨੇ ਨੂੰ ਸਟ੍ਰੀਕ ਕਰਦਾ ਹੈ, ਉਸ ਨੂੰ ਰਾਤ ਭਰ ਇਨਕਿਊਬੇਟ ਕਰਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਵਾਪਸ ਆ ਕੇ ਪਲੇਟ ਉੱਤੇ ਹਰੀ ਝਲਕ ਵਾਲੀਆਂ ਗੂੜ੍ਹੀਆਂ ਕਾਲੋਨੀਆਂ ਵੇਖਦਾ ਹੈ। ਨੋਟਬੁੱਕ ਵਿੱਚ ਲਿਖਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, "E. coli, ਪੁਸ਼ਟੀ ਹੋ ਗਈ।" ਇਹ ਦਰਜ ਕੀਤਾ ਨਤੀਜਾ ਉਸ ਤੋਂ ਵੱਧ ਦਾਅਵਾ ਕਰਦਾ ਹੈ ਜਿੰਨਾ ਪਲੇਟ ਤੋਂ ਸਾਬਤ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ। ਪਲੇਟ ਖ਼ਾਸ ਹਾਲਾਤਾਂ ਵਿੱਚ ਵਾਧੇ ਅਤੇ ਖਮੀਰਣ ਦਾ ਫੀਨੋਟਾਈਪ ਦਿਖਾਉਂਦੀ ਹੈ। ਪ੍ਰਜਾਤੀ ਦੀ ਪਛਾਣ ਇੱਕ ਵੱਖਰਾ ਦਾਅਵਾ ਹੈ, ਜਿਸ ਲਈ ਵੱਖਰੇ ਸਬੂਤ ਦੀ ਲੋੜ ਹੈ।

ਇਹ ਗਾਈਡ EMB ਅਗਰ ਦੇ ਨਤੀਜਿਆਂ ਨੂੰ ਵਿਆਖਿਆ ਦੇ ਕੰਮ ਵਜੋਂ ਲੈਂਦੀ ਹੈ। ਇਹ ਪਿੱਛੇ ਕੰਮ ਕਰਦੇ ਸਿਧਾਂਤ ਨੂੰ ਸਮਝਾਉਂਦੀ ਹੈ, ਕੰਟਰੋਲਾਂ ਸਮੇਤ ਇੱਕ ਚਿੱਤਰਾਤਮਕ ਪਲੇਟ ਐਟਲਸ ਰਾਹੀਂ ਦਿੱਖਾਂ ਸਮਝਾਉਂਦੀ ਹੈ ਅਤੇ ਉਹ ਹਾਲਾਤ ਦੱਸਦੀ ਹੈ ਜਿੱਥੇ ਪਾਠ-ਪੁਸਤਕ ਵਾਲੀ ਤਸਵੀਰ ਗੁਮਰਾਹ ਕਰ ਸਕਦੀ ਹੈ।

ਪਲੇਟ ਦੇ ਪਿੱਛੇ ਦਾ ਸਿਧਾਂਤ

EMB ਅਗਰ ਚੋਣਾਤਮਕ ਵੀ ਹੈ ਅਤੇ ਭੇਦਕ ਵੀ। ਈਓਸਿਨ Y ਅਤੇ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਰੰਗਕ ਕਈ ਗ੍ਰਾਮ-ਪਾਜ਼ਿਟਿਵ ਜੀਵਾਂ ਦੇ ਵਾਧੇ ਨੂੰ ਦਬਾਉਂਦੇ ਹਨ, ਇਸ ਲਈ ਮਾਧਿਅਮ ਗ੍ਰਾਮ-ਨੈਗੇਟਿਵ ਜੀਵਾਂ ਦੇ ਵਾਧੇ ਨੂੰ ਤਰਜੀਹ ਦਿੰਦਾ ਹੈ। ਇਹੀ ਰੰਗਕ ਸੂਚਕਾਂ ਵਜੋਂ ਵੀ ਕੰਮ ਕਰਦੇ ਹਨ: ਜਦੋਂ ਕੋਈ ਜੀਵ ਉਪਲਬਧ ਸ਼ੱਕਰ ਦਾ ਖਮੀਰਣ ਕਰਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਕਾਫ਼ੀ ਸਥਾਨਕ ਅਮਲ ਪੈਦਾ ਕਰਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਕਾਲੋਨੀ ਵੱਡੀ ਮਾਤਰਾ ਵਿੱਚ ਰੰਗਕ ਸੋਖ ਲੈਂਦੀ ਹੈ ਅਤੇ ਗੂੜ੍ਹੇ ਜਾਮਨੀ ਤੋਂ ਨੀਲੇ-ਕਾਲੇ ਰੰਗ ਦੀ ਹੋ ਜਾਂਦੀ ਹੈ। ਅਮਲ ਦਾ ਤੀਬਰ ਉਤਪਾਦਨ ਹੋਣ ਨਾਲ ਕਾਲੋਨੀ ਦੀ ਸਤਹ ਉੱਤੇ ਧਾਤੂ ਹਰੀ ਰੰਗ-ਬਦਲਵੀਂ ਚਮਕ ਦਿਖਾਈ ਦੇ ਸਕਦੀ ਹੈ। ਈਓਸਿਨ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਅਗਰ ਪਲੇਟਾਂ ਲਈ ASM ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ ਚੋਣ ਅਤੇ ਭੇਦ ਕਰਨ ਦੇ ਇਸ ਸੁਮੇਲ ਦਾ ਵਰਣਨ ਕਰਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਅਧਿਆਪਨ ਲਈ ਹਵਾਲਾ ਫ਼ੋਟੋਆਂ ਦਿੰਦਾ ਹੈ।

ਕੋਈ ਵੀ ਨਤੀਜਾ ਪੜ੍ਹਨ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਇੱਕ ਗੱਲ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਹੈ: ਜਾਂਚੋ ਕਿ ਕਿਹੜਾ ਫਾਰਮੂਲੇਸ਼ਨ ਵਰਤਿਆ ਜਾ ਰਿਹਾ ਹੈ। ਪੁਰਾਣੇ Holt Harris Teague ਫਾਰਮੂਲੇਸ਼ਨ ਵਿੱਚ ਲੈਕਟੋਜ਼ ਦੇ ਨਾਲ ਸੁਕਰੋਜ਼ ਵੀ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਜਦਕਿ Levine EMB ਵਿੱਚ ਸਿਰਫ਼ ਲੈਕਟੋਜ਼ ਹੁੰਦਾ ਹੈ। ਜੋ ਜੀਵ ਸੁਕਰੋਜ਼ ਦਾ ਖਮੀਰਣ ਕਰਦਾ ਹੈ ਪਰ ਲੈਕਟੋਜ਼ ਦਾ ਨਹੀਂ, ਜਿਵੇਂ Serratia marcescens ਦੇ ਕਈ ਆਈਸੋਲੇਟ, ਉਹ ਦੋਵਾਂ ਰੂਪਾਂ ਉੱਤੇ ਵੱਖਰਾ ਦਿਖ ਸਕਦਾ ਹੈ। EMB ਮਾਧਿਅਮਾਂ ਬਾਰੇ ਨਿਰਮਾਤਾ ਦੇ ਦਸਤਾਵੇਜ਼ ਫਾਰਮੂਲੇਸ਼ਨ ਦਾ ਇਹ ਫ਼ਰਕ ਸਪਸ਼ਟ ਤੌਰ ਉੱਤੇ ਦੱਸਦੇ ਹਨ। ਨਤੀਜੇ ਦੇ ਨਾਲ ਨੋਟਬੁੱਕ ਵਿੱਚ ਨਿਰਮਾਤਾ ਅਤੇ ਫਾਰਮੂਲੇਸ਼ਨ ਵੀ ਦਰਜ ਕਰੋ।

ਤਿਆਰ ਕੀਤਾ EMB ਅਗਰ, ਜਿਸ ਉੱਤੇ ਜੀਵ ਨਹੀਂ ਲਗਾਏ ਗਏ, ਆਮ ਤੌਰ ਉੱਤੇ ਲਾਲ-ਭੂਰੇ ਤੋਂ ਲਾਲੀ ਵਾਲੇ ਜਾਮਨੀ ਰੰਗ ਦਾ ਹੁੰਦਾ ਹੈ; ਕਦੇ ਇਸ ਵਿੱਚ ਹਰੇ ਰੰਗ ਦੀ ਝਲਕ ਜਾਂ ਬਰੀਕ ਅਵਖੇਪ ਵੀ ਹੁੰਦਾ ਹੈ। ਪਿਛੋਕੜ ਦਾ ਇਹ ਰੰਗ ਵਾਧਾ ਨਹੀਂ ਹੈ। ਹਰ ਨਿਰੀਖਣ ਦੀ ਤੁਲਨਾ ਜੀਵ ਨਾ ਲਗਾਈ ਗਈ ਪਲੇਟ ਜਾਂ ਦਸਤਾਵੇਜ਼ਾਂ ਵਿੱਚ ਦਿੱਤੀ ਮੁੱਢਲੀ ਦਿੱਖ ਨਾਲ ਕਰੋ। ਜੇ ਅਧਿਆਪਨ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ ਕੁਝ ਹੋਰ ਨਾ ਦੱਸਦਾ ਹੋਵੇ, ਤਾਂ ਮੁੱਢਲੀ ਪਲੇਟ ਨੂੰ 35 ਤੋਂ 37 C ਉੱਤੇ ਲਗਭਗ 18 ਤੋਂ 24 ਘੰਟੇ ਹਵਾ ਦੀ ਮੌਜੂਦਗੀ ਵਿੱਚ ਇਨਕਿਊਬੇਟ ਕਰਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਪੜ੍ਹੋ। ਲੰਮਾ ਇਨਕਿਊਬੇਸ਼ਨ ਖਮੀਰਣ ਦੀ ਦਿੱਖ ਬਦਲ ਸਕਦਾ ਹੈ।

ਪਲੇਟ ਨੂੰ ਕਿਵੇਂ ਵੇਖਣਾ ਹੈ

ਦੋ ਕਿਸਮਾਂ ਦੀ ਰੌਸ਼ਨੀ ਵਰਤੋ। ਪਹਿਲਾਂ ਪਲੇਟ ਨੂੰ ਪਰਾਵਰਤਿਤ ਜਾਂ ਤਿਰਛੀ ਰੌਸ਼ਨੀ ਵਿੱਚ ਵੇਖੋ ਅਤੇ ਝੁਕਾਓ: ਧਾਤੂ ਚਮਕ ਰੰਗ-ਬਦਲਵੀਂ ਹੁੰਦੀ ਹੈ ਅਤੇ ਵੇਖਣ ਦਾ ਕੋਣ ਬਦਲਣ ਨਾਲ ਦਿਖਾਈ ਦੇ ਸਕਦੀ ਹੈ ਜਾਂ ਗਾਇਬ ਹੋ ਸਕਦੀ ਹੈ। ਫਿਰ ਕਾਲੋਨੀ ਦਾ ਰੰਗ ਅਤੇ ਗੂੜ੍ਹੇ ਕੇਂਦਰ ਪਰਖਣ ਲਈ ਉਸ ਵਿੱਚੋਂ ਲੰਘਦੀ ਰੌਸ਼ਨੀ ਵਿੱਚ ਵੇਖੋ। ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਵੱਖਰੀਆਂ ਕਾਲੋਨੀਆਂ ਤੋਂ ਨਿਰੀਖਣ ਕਰੋ, ਕਿਉਂਕਿ ਭੀੜ ਅਤੇ ਗੁਆਂਢੀ ਕਾਲੋਨੀਆਂ ਸਥਾਨਕ ਅਮਲ ਦੇ ਇਕੱਠ ਨੂੰ ਬਦਲਦੀਆਂ ਹਨ ਅਤੇ ਰੰਗ ਨੂੰ ਘਟਾ ਜਾਂ ਵਧਾ ਸਕਦੀਆਂ ਹਨ। ASM ਦਾ ਚਿੱਤਰ ਸੰਗ੍ਰਹਿ ਇਹ ਗੱਲ ਸਿੱਧੇ ਤੌਰ ਉੱਤੇ ਦਿਖਾਉਂਦਾ ਹੈ: ਮਿਸ਼ਰਤ ਕਲਚਰ ਵਿੱਚ E. coli ਦੀ ਉਮੀਦ ਕੀਤੀ ਚਮਕ ਗਾਇਬ ਹੋ ਸਕਦੀ ਹੈ, ਕਿਉਂਕਿ ਆਲੇ-ਦੁਆਲੇ ਦੇ ਜੀਵ ਅਮਲੀ ਵਾਤਾਵਰਣ ਨੂੰ ਬਦਲ ਦਿੰਦੇ ਹਨ।

ਜਦੋਂ ਵੀ ਅਭਿਆਸ ਵਿੱਚ ਸੰਭਵ ਹੋਵੇ, ਕੰਟਰੋਲ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ। ਅਧਿਆਪਨ ਵਿੱਚ ਵਰਤਿਆ ਜਾਣ ਵਾਲਾ ਇੱਕ ਆਮ ਸੈੱਟ ਨੀਲੇ-ਕਾਲੇ ਰੰਗ ਅਤੇ ਧਾਤੂ ਚਮਕ ਵਾਲੇ ਫੀਨੋਟਾਈਪ ਲਈ E. coli ATCC 25922, ਰੰਗਹੀਣ ਫੀਨੋਟਾਈਪ ਲਈ ਖਮੀਰਣ ਨਾ ਕਰਨ ਵਾਲਾ ਜੀਵ ਜਿਵੇਂ Salmonella Typhimurium ATCC 14028 ਜਾਂ Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, ਅਤੇ ਵਾਧਾ ਰੋਕੇ ਜਾਣ ਦੇ ਕੰਟਰੋਲ ਲਈ ਗ੍ਰਾਮ-ਪਾਜ਼ਿਟਿਵ ਜੀਵ ਜਿਵੇਂ Enterococcus faecalis ਜਾਂ Staphylococcus aureus ਹੈ। ਇਹ EMB ਮਾਧਿਅਮਾਂ ਲਈ ਮਿਆਰੀ QC ਸਾਰਣੀਆਂ ਵਿੱਚ ਦਿੱਤੇ ਗਏ ਹਨ। ਜੇ ਪਾਜ਼ਿਟਿਵ ਕੰਟਰੋਲ ਵਿੱਚ ਚਮਕ ਨਹੀਂ ਹੈ, ਤਾਂ ਅਣਪਛਾਤੇ ਨਮੂਨੇ ਉੱਤੇ ਸ਼ੱਕ ਕਰਨ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਇਨਕਿਊਬੇਸ਼ਨ, ਭੀੜ ਜਾਂ ਫਾਰਮੂਲੇਸ਼ਨ ਉੱਤੇ ਸ਼ੱਕ ਕਰੋ।

ਚਿੱਤਰਾਤਮਕ ਪਲੇਟ ਐਟਲਸ

ਹੇਠਾਂ ਦਿੱਤੀਆਂ ਪਲੇਟਾਂ ਬਣਾਏ ਗਏ ਚਿੱਤਰ ਹਨ, ਅਸਲੀ ਕਲਚਰਾਂ ਦੀਆਂ ਫ਼ੋਟੋਆਂ ਨਹੀਂ। ਇਹ ਵੇਖਣ ਵਾਲਾ ਪੈਟਰਨ ਦਿਖਾਉਂਦੀਆਂ ਹਨ, ਕਿਸੇ ਇੱਕ ਸਟ੍ਰੇਨ ਦਾ ਬਿਲਕੁਲ ਸਹੀ ਰੰਗ ਨਹੀਂ। ਇਨ੍ਹਾਂ ਦੀ ਤੁਲਨਾ ASM ਦੀਆਂ ਹਵਾਲਾ ਫ਼ੋਟੋਆਂ ਅਤੇ ਅਧਿਆਪਨ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਦੀਆਂ ਅਸਲੀ ਪਲੇਟਾਂ ਨਾਲ ਕਰੋ।

ਪਲੇਟ 1: EMB ਅਗਰ ਉੱਤੇ Escherichia coli, ਤੀਬਰ ਲੈਕਟੋਜ਼ ਖਮੀਰਣ ਕਰਨ ਵਾਲਾ ਜੀਵ

EMB ਅਗਰ ਉੱਤੇ E. coli ਆਮ ਤੌਰ ਉੱਤੇ ਗੂੜ੍ਹੇ ਜਾਮਨੀ ਤੋਂ ਨੀਲੇ-ਕਾਲੇ ਰੰਗ ਦਾ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਅਕਸਰ ਗੂੜ੍ਹੇ ਕੇਂਦਰ ਅਤੇ ਤੀਬਰ ਅਮਲ ਉਤਪਾਦਨ ਤੋਂ ਬਣੀ ਧਾਤੂ ਹਰੀ ਚਮਕ ਨਾਲ। ਇਹ ਚਮਕ ਉਹ ਮਸ਼ਹੂਰ ਲੱਛਣ ਹੈ ਜਿਸ ਨੂੰ ਵਿਦਿਆਰਥੀ ਲੱਭਦੇ ਹਨ, ਪਰ ਇਸ ਨੂੰ ਪਰਿਭਾਸ਼ਾ ਦੀ ਥਾਂ ਸਹਾਇਕ ਸਬੂਤ ਸਮਝੋ। ਚਮਕ ਦੀ ਤੀਬਰਤਾ ਸਟ੍ਰੇਨ, ਇਨਕਿਊਬੇਸ਼ਨ ਦੇ ਸਮੇਂ, ਕਾਲੋਨੀਆਂ ਦੀ ਘਣਤਾ ਅਤੇ ਵੇਖਣ ਦੇ ਕੋਣ ਨਾਲ ਬਦਲਦੀ ਹੈ। ਚਮਕ ਨਾ ਹੋਣ ਨਾਲ E. coli ਦੀ ਸੰਭਾਵਨਾ ਰੱਦ ਨਹੀਂ ਹੁੰਦੀ, ਅਤੇ ਚਮਕ ਤੋਂ ਬਿਨਾਂ ਗੂੜ੍ਹੀ ਕਾਲੋਨੀ ਕਈ ਹੋਰ ਖਮੀਰਣ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਜੀਵਾਂ ਵੱਲ ਸੰਕੇਤ ਕਰਦੀ ਹੈ। ਕਿਸੇ ਵੀ ਅਗਲੇ ਕੰਮ ਲਈ ਭੀੜ ਵਾਲੇ ਹਿੱਸੇ ਤੋਂ ਨਤੀਜਾ ਪੜ੍ਹਨ ਦੀ ਥਾਂ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਵੱਖਰੀ ਕਾਲੋਨੀ ਚੁਣੋ।

ਪਲੇਟ 2: EMB ਅਗਰ ਉੱਤੇ Klebsiella pneumoniae, ਲੇਸਦਾਰ ਕਾਲੋਨੀਆਂ ਵਾਲਾ ਖਮੀਰਣ ਕਰਨ ਵਾਲਾ ਜੀਵ

EMB ਅਗਰ ਉੱਤੇ Klebsiella pneumoniae ਆਮ ਤੌਰ ਉੱਤੇ ਵੱਡੀਆਂ, ਚਮਕਦਾਰ, ਲੇਸਦਾਰ ਕਾਲੋਨੀਆਂ ਬਣਾਉਂਦਾ ਹੈ, ਜਿਨ੍ਹਾਂ ਦੇ ਰੰਗ ਗੁਲਾਬੀ-ਜਾਮਨੀ ਤੋਂ ਭੂਰੇ-ਜਾਮਨੀ ਤੱਕ ਹੁੰਦੇ ਹਨ। ਅਕਸਰ ਇਨ੍ਹਾਂ ਦੇ ਕੇਂਦਰ ਗੂੜ੍ਹੇ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਪਰ ਆਮ ਤੌਰ ਉੱਤੇ ਤੀਬਰ ਧਾਤੂ ਚਮਕ ਨਹੀਂ ਹੁੰਦੀ। Enterobacter ਵਰਗੇ ਸੰਬੰਧਿਤ ਖਮੀਰਣ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਜੀਵਾਂ ਵਿੱਚ ਵੀ ਮਿਲਦੀ-ਜੁਲਦੀ ਬਣਤਰ ਦਿਖਾਈ ਦਿੰਦੀ ਹੈ। ਲੇਸਦਾਰ ਬਣਾਵਟ ਅਤੇ ਕਾਲੋਨੀ ਦਾ ਆਕਾਰ ਨਤੀਜਾ ਪੜ੍ਹਨ ਦਾ ਹਿੱਸਾ ਹਨ: ਛੋਟੀ ਅਤੇ ਚਪਟੀ ਗੁਲਾਬੀ ਕਾਲੋਨੀ ਦਾ ਮਹੱਤਵ ਇੱਕ ਵੱਡੀ, ਗੁੰਬਦ ਵਰਗੀ ਲੇਸਦਾਰ ਕਾਲੋਨੀ ਤੋਂ ਵੱਖਰਾ ਹੁੰਦਾ ਹੈ। E. coli ਵਾਂਗ, ਪਲੇਟ ਖਮੀਰਣ ਦੇ ਫੀਨੋਟਾਈਪ ਦਾ ਸੰਕੇਤ ਦਿੰਦੀ ਹੈ, ਅਤੇ ਪ੍ਰਜਾਤੀ ਦੇ ਪੱਧਰ ਉੱਤੇ ਨਾਮ ਦੇਣ ਲਈ ਹੇਠਾਂ ਦੱਸੀ ਜੈਵ-ਰਸਾਇਣਕ ਪੁਸ਼ਟੀ ਦੀ ਲੋੜ ਹੁੰਦੀ ਹੈ।

ਪਲੇਟ 3: EMB ਅਗਰ ਉੱਤੇ Salmonella ਅਤੇ ਹੋਰ ਖਮੀਰਣ ਨਾ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਜੀਵ, ਰੰਗਹੀਣ ਕਾਲੋਨੀਆਂ

EMB ਅਗਰ ਉੱਤੇ Salmonella ਅਤੇ ਇਸ ਨਾਲ ਸੰਬੰਧਿਤ ਲੈਕਟੋਜ਼ ਦਾ ਖਮੀਰਣ ਨਾ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਜੀਵ, ਜਿਨ੍ਹਾਂ ਵਿੱਚ Shigella ਅਤੇ Pseudomonas ਦੇ ਕਈ ਆਈਸੋਲੇਟ ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ, ਆਮ ਤੌਰ ਉੱਤੇ ਰੰਗਹੀਣ ਤੋਂ ਅਰਧ-ਪਾਰਦਰਸ਼ੀ ਜਾਂ ਫਿੱਕੇ ਅੰਬਰ ਰੰਗ ਦੀਆਂ ਕਾਲੋਨੀਆਂ ਵਜੋਂ ਵਧਦੇ ਹਨ। ਕੁਝ ਫਾਰਮੂਲੇਸ਼ਨ ਅਤੇ ਹਾਲਾਤ ਹਲਕੀ ਗੁਲਾਬੀ ਝਲਕ ਦਿੰਦੇ ਹਨ, ਇਸ ਲਈ ਫਿੱਕੀ ਗੁਲਾਬੀ ਕਾਲੋਨੀ ਆਪਣੇ ਆਪ ਖਮੀਰਣ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਜੀਵ ਦੀ ਨਹੀਂ ਮੰਨੀ ਜਾ ਸਕਦੀ। EMB, Salmonella ਨੂੰ Shigella ਜਾਂ ਹੋਰ ਖਮੀਰਣ ਨਾ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਜੀਵਾਂ ਤੋਂ ਵੱਖਰਾ ਨਹੀਂ ਕਰਦਾ; ਇਹ ਫ਼ਰਕ ਬਾਅਦਲੇ ਟੈਸਟਾਂ ਨਾਲ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ। ਇਹ ਵੀ ਧਿਆਨ ਵਿੱਚ ਰੱਖੋ ਕਿ ਲੈਕਟੋਜ਼-ਪਾਜ਼ਿਟਿਵ Salmonella ਸਟ੍ਰੇਨਾਂ ਵਿੱਚ E. coli ਵਰਗੀਆਂ ਧਾਤੂ ਚਮਕ ਵਾਲੀਆਂ ਕਾਲੋਨੀਆਂ ਦਰਜ ਕੀਤੀਆਂ ਗਈਆਂ ਹਨ। ਇਹ ਇੱਕ ਹੋਰ ਕਾਰਨ ਹੈ ਕਿ ਇੱਕੋ ਪਲੇਟ ਦੇ ਆਧਾਰ ਉੱਤੇ ਅੰਤਿਮ ਨਤੀਜਾ ਨਹੀਂ ਕੱਢਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ।

ਪਲੇਟ 4: Serratia marcescens ਅਤੇ ਫਾਰਮੂਲੇਸ਼ਨ ਦਾ ਭੁਲੇਖਾ

Serratia marcescens ਲਈ ਵੱਖਰਾ ਭਾਗ ਰੱਖਿਆ ਗਿਆ ਹੈ, ਕਿਉਂਕਿ ਵਿਦਿਆਰਥੀ ਅਕਸਰ ਲਾਲ ਕਾਲੋਨੀਆਂ ਦੀ ਉਮੀਦ ਕਰਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਫਿਰ ਪਲੇਟ ਨੂੰ ਗ਼ਲਤ ਪੜ੍ਹ ਲੈਂਦੇ ਹਨ। ਜ਼ਿਆਦਾਤਰ ਕਲੀਨੀਕਲ ਆਈਸੋਲੇਟ ਲੈਕਟੋਜ਼ ਦਾ ਖਮੀਰਣ ਨਹੀਂ ਕਰਦੇ, ਇਸ ਲਈ Levine EMB ਉੱਤੇ ਉਹ ਆਮ ਤੌਰ ਉੱਤੇ ਫਿੱਕੇ ਜਾਂ ਹਲਕੇ ਰੰਗ ਵਾਲੇ ਦਿਖਾਈ ਦਿੰਦੇ ਹਨ। ਕਿਉਂਕਿ ਕਈ ਆਈਸੋਲੇਟ ਸੁਕਰੋਜ਼ ਦਾ ਖਮੀਰਣ ਕਰਦੇ ਹਨ, ਸੁਕਰੋਜ਼ ਵਾਲਾ ਫਾਰਮੂਲੇਸ਼ਨ ਗੂੜ੍ਹੀ ਜਾਂ ਅਮਲ ਨਾਲ ਵੱਧ ਜੁੜੀ ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆ ਦੇ ਸਕਦਾ ਹੈ। 35 ਤੋਂ 37 C ਉੱਤੇ ਜਾਣੇ-ਪਛਾਣੇ ਲਾਲ ਪ੍ਰੋਡਿਜੀਓਸਿਨ ਰੰਗਦ੍ਰਵ ਦੀ ਵੀ ਉਮੀਦ ਨਾ ਕਰੋ; ਇਨਕਿਊਬੇਟਰ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ ਉੱਤੇ ਰੰਗਦ੍ਰਵ ਦਾ ਉਤਪਾਦਨ ਭਰੋਸੇਯੋਗ ਨਹੀਂ ਹੁੰਦਾ। ਜਦੋਂ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ EMB ਅਗਰ ਉੱਤੇ Serratia marcescens ਦਾ ਜ਼ਿਕਰ ਕਰਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਜਾਂਚੋ ਕਿ ਬਿਆਨ ਕਿਸ ਫਾਰਮੂਲੇਸ਼ਨ ਨੂੰ ਮੰਨ ਕੇ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ। Serratia ਦੇ ਚਯਾਪਚਯ ਦੀ ਸਮੀਖਿਆ ਇਸ ਭੁਲੇਖੇ ਦੇ ਪਿੱਛੇ ਲੈਕਟੋਜ਼-ਨੈਗੇਟਿਵ ਅਤੇ ਸੁਕਰੋਜ਼ ਲਈ ਬਦਲਵੇਂ ਪੈਟਰਨ ਦਾ ਸਾਰ ਦਿੰਦੀ ਹੈ।

ਪਲੇਟ 5: ਕੰਟਰੋਲ ਅਤੇ ਰੋਕੇ ਗਏ ਜੀਵ

Staphylococcus, Enterococcus, Streptococcus ਅਤੇ Bacillus ਵਰਗੇ ਗ੍ਰਾਮ-ਪਾਜ਼ਿਟਿਵ ਜੀਵਾਂ ਦਾ ਵਾਧਾ EMB ਅਗਰ ਉੱਤੇ ਆਮ ਤੌਰ ਉੱਤੇ ਰੁਕ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਜਾਂ ਕਾਫ਼ੀ ਦਬ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਹਾਲਾਂਕਿ ਹਰ ਸਟ੍ਰੇਨ ਲਈ ਰੋਕ ਪੂਰੀ ਨਹੀਂ ਹੁੰਦੀ। ਕੰਟਰੋਲਾਂ ਦਾ ਸੈੱਟ ਨਤੀਜੇ ਨੂੰ ਤੱਥਾਂ ਉੱਤੇ ਟਿਕਿਆ ਰੱਖਦਾ ਹੈ: E. coli ਕੰਟਰੋਲ ਵਿੱਚ ਨੀਲੇ-ਕਾਲੇ ਰੰਗ ਅਤੇ ਚਮਕ ਦੇ ਨਾਲ ਚੰਗਾ ਵਾਧਾ ਦਿਖਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ, ਖਮੀਰਣ ਨਾ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਜੀਵ ਦੇ ਕੰਟਰੋਲ ਵਿੱਚ ਰੰਗਹੀਣ ਵਾਧਾ ਦਿਖਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਵਾਧਾ ਰੋਕੇ ਜਾਣ ਦੇ ਕੰਟਰੋਲ ਵਿੱਚ ਬਹੁਤ ਘੱਟ ਜਾਂ ਬਿਲਕੁਲ ਕੋਈ ਵਾਧਾ ਨਹੀਂ ਦਿਖਣਾ ਚਾਹੀਦਾ। ਜੇ ਵਾਧਾ ਰੋਕੇ ਜਾਣ ਵਾਲਾ ਕੰਟਰੋਲ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਵਧਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਚੋਣਾਤਮਕ ਕਦਮ ਅਸਫਲ ਹੋਇਆ ਹੈ ਅਤੇ ਉਸ ਬੈਚ ਦੇ ਹੋਰ ਸਾਰੇ ਨਤੀਜੇ ਸ਼ੱਕ ਦੇ ਘੇਰੇ ਵਿੱਚ ਹਨ। ਰੰਗਣ ਦੀਆਂ ਵਿਧੀਆਂ ਕਲਚਰ ਮਾਧਿਅਮਾਂ ਤੋਂ ਵੱਖਰੇ ਸਵਾਲ ਦਾ ਜਵਾਬ ਦਿੰਦੀਆਂ ਹਨ; ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਵਿੱਚ ਸਲਾਈਡ ਰੰਗਣ ਵਾਲੇ ਪੱਖ ਲਈ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਰੰਗਣ ਐਟਲਸ ਵੇਖੋ।

ਸੀਮਾਵਾਂ ਸਮੇਤ ਤੁਲਨਾ

ਤਿੰਨ ਵਾਕ ਗੁਮਰਾਹ ਕਰਨ ਵਾਲੀਆਂ ਦਿੱਖਾਂ ਦਾ ਸਾਰ ਦਿੰਦੇ ਹਨ। ਗੂੜ੍ਹਾ ਰੰਗ ਹੋਣ ਦਾ ਅਰਥ E. coli ਨਹੀਂ, ਕਿਉਂਕਿ Klebsiella, Enterobacter ਅਤੇ ਹੋਰ ਖਮੀਰਣ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਜੀਵ ਚਮਕ ਤੋਂ ਬਿਨਾਂ ਗੂੜ੍ਹੇ ਕੇਂਦਰ ਬਣਾਉਂਦੇ ਹਨ। ਗੁਲਾਬੀ ਰੰਗ ਹੋਣ ਦਾ ਅਰਥ Klebsiella ਨਹੀਂ, ਕਿਉਂਕਿ ਦਰਮਿਆਨਾ ਜਾਂ ਹੌਲੀ ਖਮੀਰਣ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਜੀਵ ਅਤੇ ਕੁਝ ਆਮ ਤੌਰ ਉੱਤੇ ਖਮੀਰਣ ਨਾ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਮੰਨੇ ਜਾਂਦੇ ਜੀਵ ਗੁਲਾਬੀ ਜਾਂ ਹਲਕੇ ਜਾਮਨੀ ਦਿਖਾਈ ਦਿੰਦੇ ਹਨ। ਚਮਕ ਹੋਣ ਦਾ ਅਰਥ ਨਿਸ਼ਚਿਤ E. coli ਨਹੀਂ, ਕਿਉਂਕਿ ਹੋਰ ਤੀਬਰ ਖਮੀਰਣ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਜੀਵ ਵੀ ਇਹ ਪੈਦਾ ਕਰ ਸਕਦੇ ਹਨ। ਅਧਿਆਪਨ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ ਅਤੇ ਇਸ ਦੇ ਮਿਸ਼ਰਤ ਕਲਚਰ ਦੇ ਚਿੱਤਰ ਇਨ੍ਹਾਂ ਵਿੱਚੋਂ ਹਰ ਨਾਕਾਮੀ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ।

ਪੁਸ਼ਟੀ ਦੀਆਂ ਸੀਮਾਵਾਂ

EMB ਅਗਰ ਫੀਨੋਟਾਈਪ ਦੱਸਦਾ ਹੈ, ਪ੍ਰਜਾਤੀ ਨਹੀਂ। ਵੱਖਰੇ ਜੀਵਾਂ ਦੀਆਂ ਕਾਲੋਨੀਆਂ ਇੱਕੋ ਜਿਹੀਆਂ ਦਿਖ ਸਕਦੀਆਂ ਹਨ, ਅਤੇ ਇੱਕ ਜੀਵ ਸਟ੍ਰੇਨ, ਉਮਰ, ਭੀੜ, ਫਾਰਮੂਲੇਸ਼ਨ ਅਤੇ ਇਨਕਿਊਬੇਸ਼ਨ ਕਾਰਨ ਆਪਣੀ ਪਾਠ-ਪੁਸਤਕ ਵਾਲੀ ਦਿੱਖ ਤੋਂ ਵੱਖਰਾ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ। ਇਸੇ ਲਈ ਅਧਿਆਪਨ ਅਤੇ ਕਲੀਨੀਕਲ ਕੰਮ-ਪ੍ਰਕਿਰਿਆਵਾਂ ਵਿੱਚ EMB ਉੱਤੇ ਕਾਲੋਨੀ ਦੀ ਬਣਤਰ ਨੂੰ ਮੁੱਢਲੀ ਸੰਭਾਵਨਾ ਦਾ ਆਧਾਰ ਮੰਨਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।

ਵਿਦਿਆਰਥੀ ਲਈ ਸਬੂਤਾਂ ਦੇ ਆਧਾਰ ਉੱਤੇ ਜਾਇਜ਼ ਕੰਮ-ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਇਹ ਹੈ: ਵੱਖਰੀ ਕਾਲੋਨੀ ਦਾ ਵਰਣਨ ਕਰੋ (ਆਕਾਰ, ਰੰਗ, ਕੇਂਦਰ, ਤਿਰਛੀ ਰੌਸ਼ਨੀ ਵਿੱਚ ਚਮਕ, ਲੇਸਦਾਰ ਸੁਭਾਅ), ਫਾਰਮੂਲੇਸ਼ਨ, ਇਨਕਿਊਬੇਸ਼ਨ ਦਾ ਸਮਾਂ ਅਤੇ ਤਾਪਮਾਨ, ਅਤੇ ਕੰਟਰੋਲ ਦਰਜ ਕਰੋ; ਫਿਰ ਕਿਸੇ ਵੀ ਪੁਸ਼ਟੀਕਰਨ ਟੈਸਟ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਵੱਖਰੀ ਕਾਲੋਨੀ ਦਾ ਸਬਕਲਚਰ ਕਰਕੇ ਸ਼ੁੱਧ ਕਲਚਰ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰੋ। ਆਮ ਅਗਲੇ ਕਦਮਾਂ ਵਿੱਚ ਸੰਭਾਵੀ E. coli ਅਤੇ ਕੋਲੀਫਾਰਮ ਦੀ ਪਛਾਣ ਲਈ ਗ੍ਰਾਮ ਰੰਗਣ ਦੇ ਨਾਲ IMViC ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆਵਾਂ, ਆਂਤੜੀ-ਸੰਬੰਧੀ ਜੀਵਾਂ ਲਈ TSI ਜਾਂ KIA ਅਤੇ ਜੀਵ-ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਜੈਵ-ਰਸਾਇਣਕ ਪੈਨਲ, ਅਤੇ ਜਿੱਥੇ ਕੰਮ ਦੀ ਲੋੜ ਹੋਵੇ ਉੱਥੇ ਸੀਰੋਲੋਜੀਕਲ, MALDI TOF ਜਾਂ ਹੋਰ ਪ੍ਰਮਾਣਿਤ ਪਛਾਣ ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ। ਚੋਣਾਤਮਕ ਅਤੇ ਭੇਦਕ ਆਂਤੜੀ-ਸੰਬੰਧੀ ਮਾਧਿਅਮਾਂ ਵਿੱਚ EMB ਦੀ ਭੂਮਿਕਾ ਬਾਰੇ ਪਿਛੋਕੜ ਲਈ ਆਂਤੜੀ-ਸੰਬੰਧੀ ਕਲਚਰ ਮਾਧਿਅਮਾਂ ਦੇ ਪਰਿਚਯ ਅਤੇ ਗ੍ਰਾਮ ਰੰਗਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਦੇ ਕਦਮ ਵੇਖੋ। ਇਸ ਨਾਲ ਜੁੜੇ ਸਵਾਲ ਲਈ ਕਿ ਨੀਲਾ ਸਲਾਈਡ ਰੰਗਣ ਕੀ ਸਾਬਤ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਕੀ ਨਹੀਂ, ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਰੰਗਣ ਐਟਲਸ ਇਸੇ ਸੋਚ ਨਾਲ ਨਿਰੀਖਣ ਅਤੇ ਨਤੀਜੇ ਨੂੰ ਵੱਖਰਾ ਰੱਖਦਾ ਹੈ।

ਨਤੀਜੇ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਨਿਰੀਖਣ ਲਿਖੋ। "Levine EMB ਉੱਤੇ 24 ਘੰਟਿਆਂ ਵਿੱਚ ਗੂੜ੍ਹੀਆਂ ਨੀਲੀਆਂ-ਕਾਲੀਆਂ ਕਾਲੋਨੀਆਂ, ਜਿਨ੍ਹਾਂ ਵਿੱਚ ਕੋਣ ਨਾਲ ਬਦਲਦੀ ਹਰੀ ਚਮਕ ਹੈ, ਤੀਬਰ ਲੈਕਟੋਜ਼ ਖਮੀਰਣ ਨਾਲ ਮੇਲ ਖਾਂਦੀਆਂ ਹਨ" ਇੱਕ ਜਾਇਜ਼ ਬਿਆਨ ਹੈ। "E. coli, ਪੁਸ਼ਟੀ ਹੋ ਗਈ" ਲਈ ਉਸ ਪੁਸ਼ਟੀਕਰਨ ਕਦਮ ਦੀ ਲੋੜ ਹੈ ਜੋ ਇਕੱਲੀ ਪਲੇਟ ਪੂਰਾ ਨਹੀਂ ਕਰ ਸਕਦੀ।