Метилен хөх ба олон голомтот хатуурал: амьтны судалгаагаар юуг шалгасан бэ

Олон голомтот хатууралд (MS) метилен хөх хэрэглэх талаар хайхад нэг асуултад хариулж байгаа мэт харагдах өгүүллүүд олдоно. Гэвч тэд тийм биш. Нэг өгүүлэлд өвчилсөн хулганад метилен хөхийг эмчилгээ болгон өгсөн. Нөгөө нь ямар ч амьтныг үүгээр эмчлээгүй. Харин эмгэг судлаач миелинийг микроскопоор харах боломжтой болгохын тулд нугасны нимгэн зүсмэлүүдийг метилен хөхөөр будсан.

Нийт өгүүллийн гол санаа нь энэ юм. Уг будаг биологид хоёр үүрэгтэй бөгөөд нэг саванд байдаг гэдгээс өөр нийтлэг зүйлгүй. Эмийн боломжит бодисын хувьд амьд амьтанд тунгаар өгч, өвчин өөрчлөгдөж байгаа эсэхийг шалгана. Будагчийн хувьд туршилтын дараа амьд бус, бэхжүүлсэн эдэд түрхэж, эд ямар байсныг харна. Энэ ялгааг анзаарахгүй бол эмгэг судлалын арга зүйн хэсгийг эмчилгээний үр дүн мэт уншина.

EAE гэж юу вэ: энгийн тайлбар

Туршилтын аутоиммун энцефаломиелитийг ихэвчлэн EAE гэж товчилдог бөгөөд олон голомтот хатуурлын зарим талыг амьтанд загварчлахад түгээмэл ашигладаг. Судлаач өртөмтгий хулганыг миелиний уургийн хэсэг болон хүчтэй адъювантаар дархлаажуулна. Үүний дараа дархлааны тогтолцоо амьтны өөрийн төв мэдрэлийн тогтолцоог довтолдог. Хулганад дээш тархах булчингийн сулрал үүсэх бөгөөд үүнийг сүүл унжихаас эхлээд хойд мөч саажих хүртэлх 0-ээс 5 хүртэлх шатлалаар хялбар үнэлдэг.

Ингэж оноогоор үнэлэхэд хялбар байдаг нь EAE яагаад өргөн хэрэглэгддэгийг, мөн яагаад төөрөгдүүлж болохыг тайлбарлана. Хүний MS аяндаа үүсэж, илүү өргөн хүрээтэй, нарийн тодорхойлогдоогүй олон байг хамардаг бөгөөд сэдэрч намдах эсвэл даамжрах явцдаа хараа, мэдрэхүй, танин мэдэхүй, бага тархи, хөдөлгөөний шинж тэмдэг илэрдэг. EAE нь хяналттай нөхцөлд үрэвсэл, миелингүйжилт, аксоны гэмтэл зэрэг сонгосон механизмыг загварчилдаг. Энэ нь MS-ийг жижигрүүлсэн хувилбараар нь бүрэн давтдаггүй. Ерөнхий ойлголт авахыг хүссэн уншигч аливаа нэг өвчинтэй холбоотой мэдэгдлийг дүгнэхээсээ өмнө метилен хөх эсийн түвшинд хэрхэн үйлчилдэг гэж үздэгийг нягталж болно.

Доорх хоёр өгүүлэл мөн EAE үүсгэхдээ өөр өөр антиген ашигласан нь чухал. Эмчилгээний судалгаанд миелиний олигодендроцитын гликопротеины богино пептид болох MOG35-55-аар өвчнийг өдөөсөн. Эмгэг судлалын судалгаанд миелиний суурь уураг болон протеолипид уургийн хэсгүүдийг нэгтгэсэн MP4-өөр өвчнийг өдөөсөн. Удмын шугам, антигений сонголт нь гэмтлийн голомт хаана үүсэх, үрэвсэл хэрхэн өрнөхийг өөрчилдөг тул эдгээр нь нэг туршилтыг хоёр удаа хийсэн судалгаа биш юм.

Тойм: загвараас асуулт, хязгаар хүртэл

Энэ хүснэгтийг харах боломжтой байлгаарай. Энэ нь өгүүллийн үндсэн лавлах юм. Мөр бүр тухайн загвараар эмнэлзүйн ямар асуултад хариулж болох, бодитоор юуг хэмжсэн, үр дүнг хүнд хамааруулан дүгнэх боломж хаана дуусахыг харуулна.

Дараагийн гарчгийг нягтлах хүн бүр эмнэлзүйн өмнөх судалгааг хэрхэн унших тухай тайлбарын тусламжтайгаар эдгээр баганыг дахин ашиглаж болно: амьтны зүйл болон антиген, бодисын үүрэг, үр дүнгийн үзүүлэлтүүдийг асууж, үр дүн нь өвчний явцыг харуулж байна уу, эсвэл тухайн мөчийн эдийн дүр зураг уу гэдгийг шалгаарай.

Эмчилгээний үр дүн: тунгаар өгөхөд юу өөрчлөгдсөн бэ

Journal of Neuroimmunology сэтгүүлийн 2016 оны эмчилгээний судалгаанд ойролцоогоор 8-аас 10 долоо хоногтой, эм C57BL/6 хулгана ашиглаж, хулгана тус бүрийг 250 микрограмм MOG35-55-аар дархлаажуулсан. EAE үүсгэсний дараа амьтдыг метилен хөх авах бүлэг эсвэл эмчилгээ аваагүй EAE бүлэгт санамсаргүй хуваарилж, эмнэлзүйн оноог ойролцоогоор 30 дахь өдөр хүртэл хянасан.

15 дахь өдрөөс 30 дахь өдөр хүртэл эмчилгээ авсан хулгануудын эмнэлзүйн оноо EAE хяналтын бүлгийнхээс статистикийн ач холбогдолтойгоор бага байсан бөгөөд P нь 0.01-ээс бага байв. Нугасны шинжилгээ мөн ижил чиглэлтэй үр дүн үзүүлсэн: эмчилгээ авсан амьтдад үрэвслийн нэвчдэс, миелингүйжилт, аксоны алдагдал бага байсан.

Онцлог хэсэг нь дохиоллын үзүүлэлтүүдийн багц байв. Эмчилгээ нь AMPK-ийн идэвхжил болон SIRT1-ийн илэрхийллийг нэмэгдүүлж, үрэвслийн гол зохицуулагч NF-kB-ийн идэвхжлийг дарангуйлсан. Олдмол дархлааны хувьд Th17-ийн хариу урвалыг бууруулж, Treg-ийн хариу урвалыг бэхжүүлсэн. Иймээс санал болгосон дараалал нь метилен хөхөөс AMPK ба SIRT1-д, тэндээс NF-kB-ийн дохиолол буурахад, улмаар үрэвсэл өдөөгч Th17-оос зохицуулагч Treg рүү шилжихэд, цаашлаад эдийн гэмтэл хөнгөрч, оноо буурахад хүргэнэ гэсэн тайлбар юм.

Энэ дараалал нь тайлбар болохоос нотлогдсон шалтгаан-үр дагаврын хэлхээ биш. Судалгаа эмийн хэрэглээ, дохиоллын өөрчлөлт, өвчний сайжрал зэрэгцэн өөрчлөгдсөнийг харуулсан. AMPK болон SIRT1 бүх эерэг нөлөөг зуучилдаг гэдгийг нотлоогүй бөгөөд нийтэд нээлттэй индексжүүлсэн бичвэрт килограмм тутамд хэдэн миллиграммын тун өгсөн, ямар замаар хэрэглэсэн, хэд дэх өдөр эхэлсэн, хэр удаан үргэлжилсэн нь зөвхөн хураангуйгаас уг горимыг давтан хэрэгжүүлэхүйц тодорхой биш байна. Борлуулалтын хуудсанд энэ өгүүлэлтэй холбоотой дурдсан аливаа тунгийн тоо нь бүрэн эхийн арга зүйн хэсгийг эшлээгүй бол баталгаажаагүй гэж үзээрэй. Дархлааны энэ анхны дохио хожим эмнэлзүйн өгөгдөл болсон эсэхийг шалгахдаа метилен хөхийн хүний судалгааны өргөн хүрээний нотолгоог нягтлах хэрэгтэй.

Эмгэг судлалын үр дүн: зургаан сарын эдийн шинжилгээ юу харуулсан бэ

PLoS ONE сэтгүүлийн 2015 оны MP4 судалгаанд эм C57BL/6 хулганыг Фрейндийн бүрэн адъювант дахь 200 микрограмм MP4-өөр дархлаажуулж, дархлаажуулсан өдөр болон дахин 48 цагийн дараа хөхүүл ханиадны хор өгсөн. Ямар ч амьтан метилен хөхийг эм болгон аваагүй. Эдийг бэхжүүлж, цутгасны дараа нугасны нэг микрометр зузаантай хөндлөн зүсмэлүүдийг гэрлийн микроскопоор харахын тулд метилен хөхөөр будсан бөгөөд илүү нарийн бүтцийг харахын тулд урд-хажуугийн замыг электрон микроскопоор шинжилсэн.

Эдийн дээжийг гурван үе шатанд авсан: цочмог оргил үед 7 хулганаас, өвчин эхэлснээс гурван сарын дараа 5 хулганаас, зургаан сарын дараа 10 хулганаас. Эдгээр үе шатны эмнэлзүйн дундаж оноо бараг ижил, 0-ээс 5 хүртэлх шатлалд ойролцоогоор 1.7-оос 1.8 байсан. Харин эдийн шинжилгээ өөр дүр зураг харуулсан. Зөвхөн миелин нь гэмтсэн ширхэгийн тоо цочмог оргил үед нэг квадрат миллиметрт ойролцоогоор 569,000 байснаас зургаан сарын дараа ойролцоогоор 1,496,000 болж өссөн бөгөөд цочмог үеийг урт хугацааны үетэй харьцуулахад P нь 0.027-той тэнцүү, статистикийн ач холбогдолтой байв. Миелин ба аксон хавсран гэмтсэн тохиолдол зургаан сарын дараа ойролцоогоор хоёр дахин нэмэгдсэн. Дахин миелинжиж буй ширхэг бүх үе шатанд нэг хувиас бага хэвээр байсан нь нөхөн сэргэлтийн найдлагыг бодитоор үнэлэхэд анхаарах үзүүлэлт юм.

Аксоны гэмтэл U хэлбэрийн явцтай байсан: цочмог оргил үед өндөр, гурван сарын дараа бага, зургаан сарын дараа хамгийн өндөр байв. Мөн митохондрийн хөөлт болон нейрофиламентуудын хоорондох зай багассантай хамааралтай байсан. Үнэлгээг оноо болон үе шатыг мэдэхгүйгээр хийсэн нь эмнэлзүйн оноо үргэлжилж буй бүтцийн гэмтлийг дутуу илэрхийлсэн гэсэн дүгнэлтийг улам бататгана.

Энэ зөрүү нь MS-ийн талаар уншиж буй хүнд уг судалгаанаас өгөх жинхэнэ хувь нэмэр юм. Үйл ажиллагааны алдагдлын оноо тогтвортой байх нь эдийн байдал тогтвортой гэсэн үг биш байв. Мөн энэ өгүүлэл яагаад метилен хөх ба MS-ийн эмчилгээний тухай аливаа мэдэгдлийг дэмжиж чадахгүйг харуулна. Судалгаа эмчилгээ бус, хугацааны нөлөөг шалгасан.

Яагаад аль ч судалгаа өвчтөнд ашиг тустайг тогтоохгүй вэ

Өгүүлэл бүрийг нарийн хүрээний асуултад сайн хариулсан ч өвчтөнтэй холбоотой асуултад огт хариулаагүй гэж ойлгоорой.

Нэгдүгээрт, шалтгаан нь өөр. EAE-г тодорхой антиген болон адъювантаар зориудаар өдөөдөг. Хүний MS нь T эс, B эс, төрөлхийн дархлаа болон эдэд байрлах гли эсийг хамарсан илүү өргөн дархлааны бүрэлдэхүүнтэйгээр аяндаа үүсдэг. Хулганад MOG руу чиглэсэн хариу урвалыг өөрчилсөн бодис хүний тэрхүү өргөн хүрээний хариу урвалыг заавал өөрчлөх албагүй.

Хоёрдугаарт, илрэх шинж нь өөр. Хулганад сүүлээс хойд мөч рүү дээш тархах сулрал нь хэмжихэд хялбар үзүүлэлт юм. Энэ нь хүний MS-ийн олон янз байдлыг хөдөлгөөний нэг тоон үзүүлэлтэд багтааж орхидог. Эмүүд EAE-ийн богино хугацааны оноог өөрчилсөн ч хүний өвчний явцыг өөрчлөхгүй байх нь түгээмэл. Тиймээс EAE нь эмнэлзүйн жижигрүүлсэн хувилбар бус, урьдчилан шалгах болон механизмыг судлах хэрэгсэл юм.

Гуравдугаарт, эмийн өртөлт болон хугацааны асуудал шийдэгдээгүй. Хулганад хийсэн 30 өдрийн туршилтын эхэн үеэс тасралтгүй тунгаар өгөх нь өвчин нь нэгэнт тогтсон хүний удаан хугацааны уух хэрэглээтэй адил биш бөгөөд аль ч судалгаа мэдрэлийн тогтолцоон дахь эмийн түвшнийг хэмжээгүй. Энэ холбоосгүйгээр туршилтын тавган дээрх концентраци эсвэл хулганад өгсөн тунгаас хүний хэрэглэх горимд шилжих үндэс байхгүй.

Дөрөвдүгээрт, хоёр өгүүлэл бие биеийнхээ үр дүнг давтан баталгаажуулаагүй. Антиген, асуулт, үр дүнгийн үзүүлэлтүүд нь өөр бөгөөд нэг нь огт эмчилгээ хийгээгүй. Тэдгээрийг MS-ийн эмчилгээний эерэг үр дүнтэй хоёр судалгаа гэж хамтад нь эшлэх нь ангиллын алдаа юм.

Нотолгоог үнэлж буй уншигчдад энэ нь юу гэсэн үг вэ

Эдгээр өгүүлэлд MS-д зориулсан метилен хөхийн тогтоогдсон протокол байхгүй. Эмчилгээний судалгаа нь MOG EAE дахь AMPK, SIRT1, NF-kB болон Th17, Treg-ийн тэнцвэрийг цааш судлах үндэслэл өгдөг. Эмгэг судлалын судалгаа нь оноо өөрчлөгдөхгүй мэт харагдсан ч эдийн гэмтэл даамжирч болдгийг, мөн арга зүйн хэсэгт дурдсан метилен хөх заримдаа эмийн шүүгээ бус, будагчийн савыг хэлдэг гэдгийг сануулдаг. Олон голомтот хатуурлын үргэлжилж буй судалгааг дагаж буй уншигчид будагч ба эмийн энэ ялгааг санаж байх хэрэгтэй. Лабораторийн судалгааны гарчигт тулгуурлан ямар нэг арга хэмжээ авахаас өмнө цусанд үзүүлэх эрсдэл, харилцан үйлчлэлийн эрсдэл зэрэг аюулгүй байдлын асуудлыг метилен хөхийн аюулгүй байдлын ерөнхий өгөгдлийн хамт эмчтэй ярилцах нь зүйтэй.

Гол дүгнэлтийг нэг өгүүлбэрт багтааж болно. Эш татсан нэг судалгаа MOG EAE-тэй хулганад метилен хөхийг тунгаар өгч, үрэвслийн эсрэг чиглэлд дархлааны хариу өөрчлөгдөхийн хамт өвчин хөнгөрснийг мэдээлсэн бол нөгөө судалгаа ямар ч эмчилгээний бодис тунгаар өгөөгүй бөгөөд зургаан сарын турш хуримтлагдах миелин, аксоны гэмтлийг баримтжуулахдаа метилен хөхийг зөвхөн нугасыг будахад ашигласан тул эдгээр хоёр судалгаа метилен хөх хүний MS-д тустайг тогтоохгүй.