Макала
Сүт үчүн метилен көгүнүн калыбына келүү тести: принциби жана чектөөлөрү
Студент кыз сүт куюлган эки пробирканы көтөрүп көрсөтөт. Бири бир саатта агарып калган. Экинчиси беш саат бою көк бойдон турган. Ал көк пробирканы көрсөтүп, андагы сүттү ичүү коопсуз экенин айтат.
Бул тыянак тестти туура эмес түшүнгөнүн көрсөтөт. Сүттү метилен көгү менен текшерүү коопсуздукту аныктабайт. Ал белгиленген шарттарда ошол пробиркадагы микроорганизмдердин жыйындысы кычкылдануу-калыбына келүү потенциалын канчалык тез төмөндөтөрүн көрсөтөт. Жай натыйжа үлгүдөгү жалпы зат алмашуу активдүүлүгү төмөн экенин билдирет. Ал кайсы организмдер бар экенин, алардын арасында патоген бар-жогун же сүт туура пастерленгенин көрсөтпөйт.
Бул айырма маанилүү, анткени тест ынанымдуу көрүнөт. Көк түс жоголот. Саат сандык натыйжа берет. Сандардан ашыкча тыянак чыгаруу оңой. Бул макала пайдалуу чечмелөөнү сактап, кооптуу чечмелөөгө жол бербейт.
Калыбына келүү чындыгында эмнени өлчөйт
Метилен көгү кычкылданган абалда көк болот, ал эми лейкометилен көгүнө чейин калыбына келгенде дээрлик түссүз болот. Жаңы сүттө эриген кычкылтек бар, ал боёкту көк бойдон кармайт. Дем алган жана ачытуу жүргүзгөн бактериялар ошол кычкылтекти керектеп, калыбына келтирүүчү кошулмаларды бөлүп чыгарат. Кычкылдануу-калыбына келүү потенциалы жетиштүү төмөндөгөндө, боёк электрондорду кабыл алып, түсүн жоготот. Гуэлф университетинин сүт микробиологиясы боюнча окуу материалында да ушул эле ырааттуулук сүрөттөлөт: адегенде кычкылтек жоголот, андан кийин бактериялардын зат алмашуусу учурунда калыбына келтирүүчү заттар пайда болот.
Journal of Dairy Science журналындагы классикалык изилдөө муну эки баскычтуу процесс катары түшүндүрөт: адегенде микрофлора кычкылтекти түгөтөт, андан соң сүттүн курамындагы заттар боёкту тез калыбына келтирет. Ошондуктан сүт үчүн метилен көгүнүн калыбына келүү тестин клеткаларды эсептөөчү ыкма эмес, биргелешкен зат алмашуу активдүүлүгүн баалоочу функционалдык анализ катары түшүнүү туура. Метилен көгүнүн кычкылдануу-калыбына келүү жүрүм-туруму бул өзгөрүүнүн химиялык негизин түшүндүрөт.
Кычкылтек акыркы натыйжаны кайра өзгөртөт. Калыбына келген лейкобоёк абага тийгенде кайра кычкылданып, көк түскө өтөт. Ошондуктан чайкоо, куюу, кең пробиркалар жана сүттүн үстүндөгү чоң аба мейкиндиги натыйжанын чыгышын кечеңдетет. Пробиркадагы сүттүн негизги бөлүгү түссүздөнгөндөн кийин да аба менен тийишкен бетинде ичке көк шакек көп учурда сакталып калат. Стандарттуу жол-жоболор анын жоголушун күтпөстөн, мындай шакектин болушуна жол берет.
Организмдин түрү дагы бир бурмалоону жаратат. Колиформдор жана көптөгөн сүт кычкыл бактериялары боёкту тез калыбына келтирет. Көптөгөн психротрофтук жана ысыкка чыдамдуу организмдер аны жай калыбына келтирет же дээрлик такыр калыбына келтирбейт. Табакчада эсептелген микроорганизмдеринин саны бирдей болгон эки сүт үлгүсүнүн көк түсү бир нече саат айырма менен жоголушу мүмкүн. Ушул факттын өзү эле убакытты колониялардын санына айландырууга болбой турганын көрсөтөт.
Көзөмөлдөнгөн лабораториялык жол-жобо
Талаа шартындагы жана окуу китептериндеги варианттардын деталдары айырмаланат, ошондуктан натыйжа аны берген ыкманын алкагында гана жарактуу. Тамак-аш лабораторияларында колдонулган кадимки вариант төмөнкүдөй жүргүзүлөт:
- Чийки сүттү аба менен мүмкүн болушунча аз аралаштырып чогултуп, дароо муздатыңыз. Үлгү алуудан мурун идишти акырын оодарып аралаштырыңыз.
- Стерилдүү пробиркага 10 mL сүт жана 1 mL боёктун жумушчу эритмесин куюңуз. Кеңири колдонулган жумушчу концентрациялардын бири — 0.005 пайыз боёк; сүт менен боёктун катышы 10 менен 1.
- Пробирканы тыгын менен жаап, акырын эки жолу оодарыңыз да, бир нече мүнөттүн ичинде суу мончосуна салыңыз. Колдонулган стандартка жараша инкубация адатта Цельсий боюнча 35тен 38 градуска чейинки температурада жүргүзүлөт. Кайсы стандартты колдонгонуңузду жазып коюңуз.
- Инкубация учурунда пробиркаларды жарыктан коргоңуз, анткени жарык калыбына келүүнү тездетет.
- 30 мүнөттөн кийин, андан соң белгиленген аралыктарда текшериңиз. Акыркы чек — пробиркадагы сүттүн түсү кайнатылган сүттүн эталонуна дал келген же жол-жободо аныкталган түс жоголуу деңгээлине жеткен убакыт.
- Ыкма талап кылган учурда, ошол эле сүттөн эч нерсе кошулбаган пробирканы көз менен салыштыруу үчүн контролдук үлгү катары сактаңыз.
FAOнун сүттү текшерүү боюнча колдонмосунда бул ырааттуулуктун талаа шарттарына арналган так варианты берилген: 10 mL сүткө 1 mL боёк кошуу, тыгын менен жабуу, акырын оодаруу, болжол менен 37ден 38 градуска чейинки температурада инкубациялоо жана ар бир 30 мүнөт сайын текшерүү. Анын контролдук пробиркаларында табигый калыбына келтирүүчү системаны жок кылуу жана түстү салыштырууга таяныч түзүү үчүн кайнатылган сүт колдонулат.
Жогорудагы схема көзөмөлдүн чектерин көрсөтөт. Көлөмдөр, боёк, температура, аралаштыруу, жарыктан коргоо жана акыркы чекти аныктоо эрежеси бирдей болушу керек. Булардын бирин өзгөртсөңүз, убакыт да өзгөрөт. Ошондуктан боёктун концентрациясы өз алдынча тандалган үй шартындагы варианттарды лабораториялык баалар менен салыштырууга болбойт.
Калыбына келүү убактысы эмнени көрсөтөт
Убакыттын узагыраак болушу көрсөтүлгөн шарттарда жалпы активдүүлүк төмөн экенин билдирет. Кыскараак убакыт жалпы активдүүлүк жогору экенин билдирет. Сүт боюнча окуу таблицаларында бул убакыттарга болжолдуу баалар берилет. Мисалы, BISке негизделген бир схемада 5 же андан көп саат «абдан жакшы», ал эми 30 мүнөттөн аз убакыт «начар» деп бааланат.
Баалардын айырмаланышы — негизги сабак. 5 сааттык натыйжанын жалпыга бирдей баасы жок. Ал өзүн аныктаган жол-жобого тиешелүү. Ошондуктан негиздүү отчеттун форматы төмөнкүдөй:
Аталган ыкма боюнча MBRT X саатка барабар жана ошол ыкманын тиешелүү баасына туура келет.
MBRT эч качан mL үчүн X колония түзүүчү бирдикке барабар эмес. Standard Methodsке негизделген көрсөтмөлөрдө боёктун калыбына келүү натыйжаларын бактериялардын саны катары билдирүүгө болбой турганы айтылат. Метилен көгү менен жөнөкөй боёо жол-жобосу да башка суроого жооп берет, анткени ал пробиркадагы жалпы активдүүлүктү эмес, микроскоптогу клеткалардын формасын көрсөтөт.
Чечмелөө жана чектөөлөр таблицасы
Бул таблица макала үчүн түзүлгөн баштапкы маалымдама болуп саналат. Ар бир сапты толугу менен окуңуз. Бир да уячаны өзүнчө кароого болбойт.
| Байкоо же ырастоо | Эмнени көрсөтөт | Эмнени далилдей албайт | Натыйжаны бурмалоочу негизги факторлор |
|---|---|---|---|
| Көк түстүн тез жоголушу, чийки сүт үчүн бир схемада 2 сааттан аз | Калыбына келтирүүчү активдүүлүк жогору; микробдук жүктүн көптүгүнө же сакталууга начар туруктуулукка шайкеш келет | Түрдү, так санды, токсиндерди же пастерлөөнүн бузулушун | Жылуу жерде сактоо, колиформдор көп микрофлора, жарык, боёктун аз өлчөмү |
| Орточо убакыт, 2ден 4 саатка чейин | Орточо активдүүлүк; баа аталган схеманын ичинде гана жарактуу | Коопсуздукту же жай калыбына келтирүүчү организмдердин жоктугун | Инкубациянын жогорку температурасы, аба менен аралашуудагы айырмалар, майдын бөлүнүшү |
| Жай калыбына келүү, 5 же андан көп саат | Ошол схемадагы жалпы активдүүлүктүн төмөндүгүн | Патогендердин жоктугун, пастерленгенин же химиялык коопсуздукту | Антибиотик калдыктары, консерванттар, кошумча эриген кычкылтек, боёктун көп өлчөмү |
| Негизги бөлүк түссүздөнүп, бетинде көк шакек калат | Аба менен чектешкен жерде кайра кычкылдануу, кадимки четки эффект | Тесттин ишке ашпай калганын же реакциянын толук бүтпөгөнүн | Кең пробирка, бош тыгын, текшерүү үчүн кайра-кайра ачуу |
| Жылытылган сүт инкубациялангандан кийин пробирка агарат | Өзгөргөн калыбына келтирүүчү система жана сакталып калган активдүүлүк | Жылытуу текшерилип ырасталган пастерлөөгө барабар болгонун | Жылуулуктан жабыркоо, инкубация учурунда калыбына келүү, кийин булгануу |
| Ыкмасы көрсөтүлбөгөн каалаган жеке MBRT мааниси | Тесттин шарттары белгисиз экенин | Кандайдыр бир бааны же санды | Боёктун курамы, катышы, температура, аралаштыруу жана акыркы чек эрежеси — баары көрсөтүлгөн эмес |
Бактерияларды өстүрүүчү азык чөйрөлөрү сыяктуу өсүүгө негизделген текшерүүлөр санын аныктоонун жана бөлүп алуунун жолу бойдон калат. Калыбына келүү пробиркасы алдын ала текшерет. Табакча аныктайт жана санайт.
Тест коопсуздук жөнүндө эмнени далилдей албайт
Жай натыйжа патогендердин жоктугун далилдей албайт. Клиникалык жактан маанилүү өлчөмдө болгон патоген жалпы кычкылтек керектөөгө аз гана салым кошушу мүмкүн. Патогендерди аныктоо организмге мүнөздүү ыкмаларга таандык; учурдагы Standard Methods муну жалпы сапатты алдын ала текшерүүдөн өзүнчө багыт катары карайт.
Ал пастерлөөнү текшере албайт. Codexтин сүт гигиенасы боюнча көрсөтмөлөрүнө ылайык, жылуулук менен иштетүүнү текшерүүдө щелочтук фосфатаза тести же башка текшерилип ырасталган ыкма колдонулат. Ак же көк пробирка партиянын буга чейинки температурасы жана ошол температурада канча убакыт турганы жөнүндө эч нерсе айтпайт.
Ал тамак-аштын коопсуздугун ырастай албайт. Коопсуздук патогендерге, мурда пайда болгон токсиндерге, дары-дармек калдыктарына, химиялык булгоочу заттарга, муздак чынжырдын тарыхына жана үлгү алынгандан кийинки булганууга көз каранды. Codex сүт азыктарынын коопсуздугун бир алдын ала текшерүүнүн натыйжасы эмес, көзөмөл чараларынын чынжыры катары карайт.
Тамак-аш лабораториясындагы текшерүү үй шартындагы текшерүү эмес
Сүт лабораториясында бул тест кабыл алынган сүттү алдын ала текшерүү, жеткирүүчүлөрдү убакыттын өтүшү менен салыштыруу же көзөмөл алдында редокс микробиологиясын үйрөтүү үчүн колдонулат. Үлгүлөрдүн келип чыгышын көзөмөлдөөгө болот. Реагенттер стандартташтырылган. Температуралар катталат. Калдыктар лабораториялык тартипте жок кылынат.
Үй шартындагы текшерүүдө булардын бири да жок. Ашканада көлөмдөр болжолдуу өлчөнөт. Интернетте сатылган боёктордун концентрациялары абдан айырмаланат. Инкубация көбүнчө калибрленген суу мончосунда эмес, жылуу бөлмөдө жүргүзүлөт. Түс баары бир өзгөрөт, ошондуктан натыйжа ишенимдүүдөй сезилет, бирок ага маани берген бардык көзөмөл шарттары жок.
Андан да олуттуу коркунуч — адамдын жүрүм-туруму. Үйдөгү көк пробирка чийки сүттү ичүүгө түрткү берет, ал эми лаборатория аны дагы эле табакчада саноого, патогендерди текшерүүгө жана калдыктарды аныктоого жөнөтмөк. Сүт үчүн метилен көгү тести сүттү ичүүгө уруксат берүү үчүн эмес, кабыл алуу учурунда чийки сүттүн сапатын баалоо үчүн иштелип чыккан. Резазурин менен тезирээк алдын ала текшерүүнүн чеги да ушундай: түс боюнча натыйжа тезирээк чыгат, бирок патогендер жөнүндө баары бир жооп бербейт.
Лабораториялык иш үчүн кыска эреже
Боёкту, катышты, температураны, аралаштырууну, жарыкты жана акыркы чекти стандартташтырыңыз. Убакытты ыкманын аталышы жана баасы менен бирге көрсөтүңүз. Мүнөттөрдү сактоо тарыхын, микрофлоранын түрүн, калдыктарды жана үлгү алуунун сапатын эске алып чечмелеңиз. Кыска убакыт кошумча изилдөөгө татыктуу активдүүлүктү көрсөтөт. Узак убакыт эч качан коопсуздукту ырастабайт.