Канды күлгүн түскө боёо ыкмасын ким иштеп чыккан? Малаховский, Романовский, Гимза

Эозин кызыл. Метилен көгү көк. Экөөнү аралаштырып, аралашманы кургатылган кан сүртүндүсүнө сүйкөсөңүз, анын айрым бөлүктөрү күлгүн болуп калат.

Баары эмес. Жакшы даярдалган препаратта ак кан клеткаларынын ядролору кызыл-күлгүн түскө боёлот, безгек митесинин ичиндеги хроматин да ошондой түскө кирет, ал эми айланасындагы кызыл кан клеткалары кызгылт, цитоплазма боз-көк бойдон калат. Дал ушул күлгүн түс клеткалардын түрлөрүн айырмалоого мүмкүндүк берет.

Эки бөтөлкөнүн биринде да күлгүн түс жок. Бул түс метилен көгүнүн белгилүү бир ажыроо продуктусу предметтик айнекте эозин менен жолукканда гана пайда болот. Ал эми 1880-жылдары жана 1890-жылдары эч ким ал продуктунун эмне экенин турсун, бар экенин да билген эмес. Бул түстүн сырын издегендер таза эмес боёктор менен, жалгыз иштешкен. Текчеде эки ай турган бөтөлкөнүн ичинде эмне бар экенин ишенимдүү аныктоого алардын мүмкүнчүлүгү болгон эмес.

Ошондуктан аталыштагы суроонун бирден көп негиздүү жообу бар жана ошол себептен жооп 2011-жылы өзгөргөн.

Аралашмага жараша өзгөргөн көрүнүш

Бул боёк бир жолку ойлоп табуу болгон эмес. Ал акырындап калыптанган. Аралашмадагы ар бир өзгөртүү көзгө көрүнгөн маалыматтын дагы бир түрүн берген. Ошол маалыматтардын ырааты — бул тарыхты түшүнүүнүн эң ачык жолу.

Жыл	Идиште эмне болгон	Эмнени көрүүгө мүмкүн болгон
1865	Вильгельм Эрб канга колдонгон биринчи синтетикалык боёк — пикрин кислотасы	Айрым кызыл кан клеткаларынын ичиндеги тор сымал көрүнүш.
1876	BASF компаниясында Генрих Каро менен Адольф фон Байер алган метилен көгү	Роберт Кохтун колунда — кургак учук бациллалары. Кан клеткалары бирдей көк түстө.
1880	Метилен көгү менен кычкыл фуксин, Эрлихтин нейтралдуу боёгу	Кызыл кан клеткалары менен эозинофилдердин гранулалары кызыл, ядролор кочкул көк, лимфоциттердин цитоплазмасы ачык көк, ал эми эки боёкту тең сиңирген гранулалар кочкул кызгылт көк болгон. Ошондуктан бул клетка нейтрофил деп аталат. Ак кан клеткаларын биринчи дифференциалдык эсептөө.
1888	Метилен көгү менен эозин. Чеслав Ченчинский	Митенин өзү: көк, ромашка сымал формалар (Plasmodium malariae) жана орок сымал формалар (P. falciparum гаметоциттери). Анын ядросу эмес.
1890	Метилен көгү көбүрөөк, спирт азыраак, ага кошумча калий гидроксиди. Альберт Плен	Түстөрдүн кененирээк жана каныгыраак диапазону, анын ичинде роза өңдүү кызыл кан клеткалары жана роза өңдүү эозинофил гранулалары. Дагы эле кызыл менен көк гана.
1890	Эозин жана бура менен щелочтоштурулган метилен көгү. Эрнст Малаховский	Митенин ичиндеги кызыл-күлгүн хроматин, ядро цитоплазмадан айырмаланган. Атайылап алынган жана анын айтымында, кайталанган.
1891	Эозин жана эки айдан ашык турган, көк баскан бөтөлкөдөгү метилен көгү. Дмитрий Романовский	Ошол эле күлгүн түс, бир жолу, башкалар кайталай албаган ыкма менен.
1898-жылдан 1902-жылга чейин	Хлороформ менен экстракцияланган полихромдук боёк (Нохт); метанол (Женнер); чөкмөнү спиртте кайра эритүү (Лейшман, Рейтер, Райт); глицерин кошулган, өлчөнгөн боёктор (Гимза)	Керек болгон сайын алынган күлгүн түс, башка лабораторияда да бирдей натыйжа берген продуктуда. Женнердин полихромдоштурулган боёксуз варианты күлгүн түс берген эмес.
1940-жылдан 1943-жылга чейин	Лилли, Роу жана Уилкокс компоненттерди бөлүп, аларды бирден сынашкан	Күлгүн түстү бүт аралашма эмес, анын Azure B компоненти берет.

Акыркы мамычадагы ырааттуулук маанилүү. Ар бир жетишкендик түстөрдүн диапазонун кеңейткен, ал эми ар бир кеңейүү дагы бир түзүлүштү көрүнүктүү кылган. Күлгүн түс бул ыкманын кооздугу гана эмес; ал митенин бар экенин көрүү менен анын эмнеден түзүлгөнүн көрүүнүн ортосундагы айырма. Боёктун BASF боёк заводунан медицинага кантип келгендиги — өз документтери бар кеңири тарых. Жогорудагы толук ырааттуулук, ар бир жазуунун булагы менен бирге, булактарга шилтемеленген салым кошуучулардын хронологиясында берилген.

Сүрөт: ошол эле алты аралашма идиште эмне болгону жана андан эмне алынганы түрүндө көрсөтүлгөн. Тегеректерде боёктор, ал эми алардын астындагы блоктордо ошол боёктор кан сүртүндүсүндө бере алган түстөр көрсөтүлгөн. 1890-жылга чейинкилердин биринде да кызыл-күлгүн блок жок, андан кийинкилердин баарында ал бар.

Бураны атайылап колдонгон адам

Эрнст Малаховский Бреслауда, азыркы Вроцлавда, дарыгер болгон. Ал кесиптик өмүрүн жеке практикада жана кесиптеши менен бирге башкарган чакан клиникада өткөрүп, лабораториялык иштерди бош убактысында жасаган. Ал 1857-жылдын 12-мартында Стшельнодо туулган, Бреслау университетинде медицина окуган жана 1882-жылдан 1887-жылга чейин ошол кездеги Германиянын экинчи чоң ооруканасы болгон Бардык ыйыктар ооруканасында ички оорулар боюнча ассистент болуп иштеген.

Ал 1888-жылы Ченчинский менен Плендин кош боёгунан баштаган. 1889-жылы даярдалган препаратта плазмодий ядросунун хроматини цитоплазмадан башкача боёлгонун көргөн, бирок кийин муну кайталай алган эмес. Метилен көгүн кычкылдандырууга аракет кылганда, натыйжа начарлаган. Аны бура менен щелочтоштурууга аракет кылганда, ыкма ар бир жолу иштеген. Ал ыкманы 1890-жылдын 15-июнунда эл алдында көрсөтүп, 1891-жылдын августунда бураны колдонуу көрсөтмөсүн камтыган кеңири сүрөттөмөсүн жарыялаган. Ал боёо жыйырма төрт саатка созуларын жана натыйжаларды оңой кайталоого болорун белгилеген.

Диагностикалык лаборатория үчүн жыйырма төрт саат узак убакыт, ал эми анын макаласында мите ядросунун күлгүн-кызыл түсүнө көп көңүл бурулган эмес. Себеби кандай болбосун, Нохт 1898-жылы муну кайра жасаганга чейин эч ким метилен көгүн атайылап щелочтоштурууну колго алган эмес. Малаховский канды боёо жөнүндө кайра жазган эмес.

Жакынкы убакка чейин ал жөнүндө аз белгилүү болушунун себеби табышмактуу эмес, архивдерге байланыштуу. Анын өмүрүнүн дээрлик эч кандай изи медициналык адабиятта сакталган эмес, ал эми сакталганы бир гана жол менен жеткен. Анын кызы Мари 1939-жылы Германиядан Лондонго кетип, британ армиясында кызмат өтөп, кийин Канадага отурукташкан. Анын үй-бүлөлүк документтеринин жыйнагы Нью-Йорктогу Лео Бек институтуна келип түшкөн. Анын агасы Лео Биринчи дүйнөлүк согушта каза болгон. Эжеси Ева 1942-жылдын апрелинде Бреслаудан Избица транзиттик лагерине сүргүнгө айдалып, кайтып келген эмес. Апасы Хедвиг да ошондой сүргүндү күтпөстөн, 1942-жылдын 22-апрелинде өз өмүрүн кыйган. Малаховский мунун баарынан мурда, 1934-жылы каза болгон.

Ушундай аяктаган үй-бүлөнүн тарыхы шилтеме берилбей калган тарыхка айланат. Малаховскийди боёктун иштелип чыгышынын тарыхына кайра киргизген, экөө тең 2011-жылы жарыяланган эки макала Познань менен Вроцлавдагы архивдик документтердин жана Нью-Йорктогу Маринин документтеринин негизинде даярдалган.

Көк баскан бөтөлкө жана жолу болгон орус

Дмитрий Романовский Санкт-Петербургдагы Аскердик медициналык академияда медицина окуп, кесиптик өмүрүнүн көпчүлүк бөлүгүн безгекти изилдөөгө арнаган. 1890-жылы ал кагаз жүзүндө Ченчинскийдикине дээрлик окшош ыкманы жарыялаган: өзгөртүлбөгөн метилен көгү жана эозин, болгону эозин бир аз көбүрөөк болгон.

1891-жылдын сентябрында ал өзүнүн атын чыгарган ыкманы жарыялаган. Маанилүү жагдай көрсөтмөлөрдүн арасында калган. Анын эң жакшы натыйжалары die vorräthige Methylenlösung — эки айдан ашык туруп, үстүн көк баскан метилен көгүнүн запастык эритмеси менен алынган. Көк басуу жана узак туруу боёктун жарым-жартылай деметилденишине алып келген. Романовский муну билген эмес жана көзөмөлдөй алган эмес; анын ыкмасын сынаган башка изилдөөчүлөр күлгүн түстү ала алышкан эмес. Анын диссертациясы Санкт-Петербургда 1891-жылдын июнунда тапшырылгандыктан, жалпы кабыл алынган баянда 1891-жыл ачылыш жылы деп эсептелет.

Малаховский болсо өз ыкмасын мындан бир жылдан ашык мурда, 1890-жылдын июнунда көрсөткөн жана анын ыкмасы натыйжаны атайылап алууга мүмкүндүк берген.

Эмне үчүн боёк башка адамдын аты менен аталган

Малаховскийдин пайдасына далилдерди Кристине Крафтс, Эрнст Хемпельман жана Барбара Олексын чогулткан. Алар төрт нерсеге таянат. Биринчиси — эл алдында көрсөтүүнүн датасы: 1891-жылдын сентябрына каршы 1890-жылдын июну. Экинчиси — кокусунан дегенге каршы атайылап деген сөз. Үчүнчүсү — Малаховский өз ыкмасын, анын ичинде бураны колдонууну да жарыялаган, ал эми Романовскийдин ыкмасы көзөмөлдөнбөгөн өзгөрмөгө көз каранды болгон. Төртүнчүсү — плазмодий ядросунун сүрөттөмөсү жана аны ачып көрсөткөн күлгүн түс адабияттан иш жүзүндө жети жылга жоголгон, анткени кокусунан алынган вариантты эч ким кайталай алган эмес.

Алар корутундусун түз айтышат. Биографиялык макалада ачылышты башка адамга таандык кылууну «бурмалоо» деп атап, 1978-жылы «балким, боёктордун бул тобун Малаховский боёктору деп аташыбыз керек» деп жазган Ральф Лиллинин сөзүн келтиришет.

Ачылыштагы биринчилик тууралуу дооматтар адатта талаштуу болот, бул доомат да талашка түшкөн. Аны чечүүгө аракет кылгандан көрө, талаштын эмнеге байланыштуу экенин түшүндүргөн маанилүү. Биринчилик жөнүндө талаш адегенде эмненин ачылыш деп эсептелерин аныкташы керек. Эгер ачылыш күлгүн түстүн өзү болсо, Малаховскийдин документтештирилген көрсөтүүсү эртерээк болгон. Эгер ачылыш жарыяланган ыкма болсо, экөө тең 1891-жылы жарыялаган, бирок боёк Романовскийдин аты менен аталган. Эгер ачылыш түшүндүрмө болсо, экөөнүн тең ага дооматы жок, анткени экөө тең жетилүү деметилденүү экенин билген эмес жана түс эмне үчүн пайда болорун түшүндүрө алган эмес. Популярдуу баяндар дал ушул акыркы жагдайды өткөрүп жиберет. Таасир берүүчү компонент эч ким аныктай элек бөтөн кошулма болгон. Түстү биринчи жолу атайылап алган адам аны рецепттин кандай иштээрин түшүнгөндүктөн эмес, кайталана турган эмпирикалык рецепт аркылуу алган.

2011-жылдагы эки макала Малаховскийдин пайдасына далилдерди жарыяланган материалдардын ичинен эң толук баяндайт. Экөөнү тең PubMed аркылуу акысыз окууга болот: кеңири сереп PMID 21235291 дарегинде, биографиялык макала PMID 21660627 дарегинде. Серептин PubMed жазуусунда ошол эле журналда ошол жылдын кийинчерээк чыккан 86(5):366 санында жарыяланган пикир да көрсөтүлгөн. Бул жүйөлөр жарыяланары менен басма бетинде талашка түшкөнүн эске салат.

Бул талаш химия боюнча пикир келишпестик эмес. Ага катышкандардын баары күлгүн түстүн эмне экенине жана аны кайсы компоненттер берерине макул. Пикир келишпестик ага ким биринчи жеткени жана эч ким кайталай албаган кокустукту чындап эле жетишкендик деп эсептөөгө болобу деген суроолорго байланыштуу.

Кийинки ысымдар эмнени кошкон

Эгер Малаховский күлгүн түстү биринчи алган болсо, эмне үчүн боёк Романовскийдин, Райттын жана Гимзанын аттарын алып жүрөт?

Анткени ойлоп табуучунун колунда бир жолу гана иштеген боёк али реагент эмес. Кийинки иштер туруксуз аралашманы башка өлкөдөгү лаборант шейшемби күнү кадимкидей колдоно ала турган нерсеге айланткан.

Нохт буга ой жүгүртүү менен жеткен. Жөнөкөй нейтралдуу боёктон ишенимдүү натыйжа ала албагандан кийин, ал күлгүн түс метилен көгүнүн курамындагы, бирок метилен көгүнүн өзү эмес болгон бир заттан чыгат деген тыянакка келип, аны издей баштаган. Унна мурда эле эскирген метилен көгүнүн эритмелери семиз клеткалардын гранулаларын кызыл түскө боёрун байкап, боёк жетилген сайын жаңы зат пайда болот деген божомол айткан. Бернтсен 1885-жылы щелочтуу шарттар метилен көгүнөн метил топторун ажыратарын жана бул продуктулар азыр биз азурлар деп атаган заттар экенин көрсөткөн. Нохт активдүү фракцияны хлороформ менен экстракциялап, аны болгону Rot aus Methylenblau, башкача айтканда, метилен көгүнөн алынган кызыл зат деп атай алган; Михаэлис 1901-жылы аны азур I деп атаган. Женнер практикалык маселени чечкен. Метилен көгү менен эозиндин чөкмөсүн абсолюттук метанолдо кайра эритүү бирдиктүү туруктуу эритме берген. Ал сүртүндүнү боёп жатып эле бекиткендиктен, ысытып бекитүүнүн кереги жок болгон. Лейшман менен Рейтер полихромдоштурулган боёкту спирттик эриткич менен айкалыштырып, туруктуулукту да, күлгүн түстү да алышкан. Райт 65 °C температурада он эки саат инкубациялоону жана он күн күтүүнү агып турган бууда бир саат кармоо менен алмаштырган. Гимза туш келди жетилген эритмеге таянууну таптакыр токтотуп, белгилүү боёктордун өлчөнгөн көлөмдөрүн колдонгон. Продукт тропикалык ысыкта сакталсын деп метанолго глицерин кошкон. Ал таза метилен азурун кантип алганын эч качан жарыялаган эмес. Аны Лейпцигдеги доктор Грюблердин лабораториясына саткан. Лаборатория аны азур I деген ат менен рынокко чыгарып, өзүнүн варианты гана чыныгы Гимза боёгу экенин билдирген.

Ошол азурдун так курамы жөнүндө талаш дагы эле бар. Айрымдар аны жөн гана полихромдоштурулган метилен көгү болгон дешет, башкалар Azure B көп болгон деп эсептешет. Жооп согуштун натыйжасында табылган. Германиялык боёкторду алуу мүмкүн болбой калганда, АКШнын Коомдук саламаттыкты сактоо кызматынын тобу — Ральф Лилли, Морис Роу жана Эми Уилкокс — эң жакшы боёо өзүнчө бөлүнгөн үч компоненттен алынарын аныктаган: өзгөртүлбөгөн метилен көгү, анын деметилденген ажыроо продуктусу Azure B жана эозин. Azure B жеткиликсиз болуп калган азур I ордун ээлеген. Бүгүнкү күндө безгекти аныктоо үчүн колдонулган боёктун негизин дагы эле ушул үч компонент түзөт.

Бул үч компоненттин предметтик айнекте өз ара аракеттенүү химиясы — өзүнчө суроо жана башка барактын темасы. Романовский тибиндеги боёктордун химиясы жана боёочу заттардын ролдору барагында Azure B менен эозиндин ар бири эмне кылары жана эмне үчүн экөө бирге өз-өзүнчө бере албаган түстү жаратары түшүндүрүлөт. Ал эми микроскопия жана лабораториялык колдонмолор барагы практикалык жагын камтыйт: белгилүү бир препарат эмнени көрсөтөт жана белгилүү бир продукт сиз колдоно турган ыкмага ылайыктуубу — муну кантип баалоо керек.

Тарыхтын бүгүн да актуалдуу бөлүгү

Бул окуядагы бир жагдай 1902-жылдан кийин да өзгөргөн эмес. Болжол менен элүү жыл бою дүйнөдөгү стандарттуу безгек боёгунун эң маанилүү компоненти аты коюлбаган бөтөн кошулма болгон. Ал кокусунан пайда болгон, көлөмү бөтөлкөдөн бөтөлкөгө өзгөрүп турган, ошол мезгилдин бир бөлүгүндө анын эмне экени коммерциялык сыр болгон, ал эми үлүшү жөнүндө 1940-жылдарга чейин талаш жүргөн. Боёкту колдонгон адамдар шалаакы болгон эмес. Алардын бөтөлкөдө эмне бар экенин билүүгө мүмкүнчүлүгү болгон эмес.

Ушул эле көйгөйдүн азыркы көрүнүшү — материалдын касиеттеринин бир бөлүгүн гана сүрөттөгөн спецификация. USP талаптарына шайкештик — рынок сунуштаган эң жогорку тазалыкка жетүүнүн жолу, анткени ал бир эле өлчөөгө эмес, толук жарыяланган стандартка таянат: заттын аныктыгы, тазалыгы, анын ичинде азур боёктору да бар органикалык кошулмалар, калдык эриткичтер, элементтик кошулмалар, күйгүзгөндөн кийинки калдык, микробдук чектер жана бактериялык эндотоксиндер. Blupreme метилен көгүн фармацевтикалык өндүрүүчүдөн алат жана толук талдоо сертификатын жарыялайт. Ошентип, бул тизмедеги ар бир пункт жөн гана билдирилбестен, текшериле алат. Оор металлдар боюнча натыйжаны гана көрсөтүп, аны USP талаптарына шайкештик деп атаган сертификат — «жетилген метилен көгү» деген этикеткалуу бөтөлкөнүн бүгүнкү аналогу: ал жакшы реагент болушу мүмкүн, бирок этикетка анын ичинде эмне бар экенин айтпайт.