Azure B៖ ភាពមិនបរិសុទ្ធនៃ methylene blue មេតាបូលីត និងសារធាតុសម្រាប់ការស្រាវជ្រាវ

Azure B គឺជាសារធាតុដែលមានលក្ខណៈគីមីខុសគ្នា ប៉ុន្តែមានទំនាក់ទំនងជិតស្និទ្ធនឹង methylene blue។ វាអាចមានស្រាប់នៅក្នុងសំណាក methylene blue អាចលេចឡើងបន្ទាប់ពីរាងកាយបំប្លែង methylene blue ឬអាចត្រូវបានផ្គត់ផ្គង់ដោយឡែកសម្រាប់ការពិសោធន៍។ ការពិពណ៌នាទាំងនេះមិនផ្ទុយគ្នាទេ។ វាពិពណ៌នាថាសារធាតុនេះមកពីណា និងថាអ្នកស្រាវជ្រាវកំពុងសួរសំណួរអ្វីអំពីវា។

ភាពខុសគ្នានេះសំខាន់នៅពេលបកស្រាយវិញ្ញាបនបត្រវិភាគ ឬការអះអាងអំពីសកម្មភាពជីវសាស្ត្រ។ ការហៅ Azure B ថាជាមេតាបូលីតសកម្ម មិនមានន័យថាបរិមាណដែលមិនបានគ្រប់គ្រងនៅក្នុងដបគឺជាអ្វីដែលគួរឱ្យចង់បាននោះទេ។ ការហៅវាថាជាភាពមិនបរិសុទ្ធ ក៏មិនមានន័យថាវាគ្មានសកម្មភាពជីវសាស្ត្រដែរ។

តើមានអ្វីផ្លាស់ប្តូរផ្នែកគីមី?

Azure B គឺជាដេរីវេ monodemethylated របស់ methylene blue។ ក្រុម methyl មួយដែលភ្ជាប់នឹងអាសូតត្រូវបានជំនួសដោយអ៊ីដ្រូសែន។ ទំនាក់ទំនងនេះត្រូវបានពិពណ៌នានៅក្នុង ការពិភាក្សាផ្នែកគីមី និងរូបទី 1 ក្នុងអត្ថបទពិនិត្យឡើងវិញរបស់ Schirmer និងសហការី។ នេះជាការផ្លាស់ប្តូររចនាសម្ព័ន្ធជាក់លាក់ មិនមែនគ្រាន់តែជាឈ្មោះផ្សេងសម្រាប់ methylene blue ទេ។

វាក៏ខុសពីការកាត់បន្ថយទៅជា leucomethylene blue ផងដែរ។ ការកាត់បន្ថយផ្លាស់ប្តូរស្ថានភាពអុកស៊ីតកម្ម ខណៈ N-demethylation ផ្លាស់ប្តូរក្រុមជំនួសលើអាសូត។ ការចាត់ទុកដំណើរការទាំងពីរថាគ្រាន់តែជា “methylene blue ប្រែជាគ្មានពណ៌” នឹងបាត់បង់ភាពខុសគ្នាដែលចាំបាច់សម្រាប់បកស្រាយមេតាបូលីស។ ឈ្មោះថ្នាំជ្រលក់ដែលពាក់ព័ន្ធក៏ត្រូវការការប្រុងប្រយ័ត្នដូចគ្នា៖ Azure A, Azure B និង methylene blue មិនមែនជាស្លាកឈ្មោះដែលអាចប្រើជំនួសគ្នាបានទេ។ មគ្គុទ្ទេសក៍អំពីសារធាតុដែលមានឈ្មោះស្រដៀងគ្នា ពន្យល់អំពីបញ្ហានៃការដាក់ឈ្មោះនេះ។

ប្រភពបី សំណួរបីខុសគ្នា

ដ្យាក្រាមគម្របបែងចែកផ្លូវបីក្នុងការស៊ើបអង្កេត។ តារាងនេះបង្ហាញយ៉ាងច្បាស់នូវភស្តុតាងដែលត្រូវការសម្រាប់ផ្លូវនីមួយៗ។

ជួរកណ្ដាលងាយត្រូវបានមើលរំលង។ ប្រសិនបើ Azure B មានស្រាប់ក្នុងវត្ថុដែលបានផ្តល់ នោះសំណាកជីវសាស្ត្រដែលយកនៅពេលក្រោយអាចមានទាំងសារធាតុដែលមានស្រាប់ និងសារធាតុដែលទើបបង្កើតថ្មី។ ការបញ្ជាក់ថាវាត្រូវបានបង្កើតឡើង ត្រូវការច្រើនជាងការរកឃើញ peak មួយបន្ទាប់ពីការប៉ះពាល់។

Azure B ក្នុងវត្ថុធាតុដើម

ការសិក្សាវិភាគប្រវត្តិសាស្ត្រមួយផ្តល់ឧទាហរណ៍មានប្រយោជន៍ថាហេតុអ្វីសមាសធាតុតិចតួចមួយអាចមានសារៈសំខាន់។ អ្នកស្រាវជ្រាវដែលសិក្សា ការធ្វើ iodination នៃ methylene blue ដោយ HPLC–mass spectrometry បានរកឃើញថាផលិតផល iodinated សំខាន់កើតចេញពីភាពមិនបរិសុទ្ធ Azure B។ សំណាក methylene blue ដែលបានសិក្សាមាន Azure B ប្រហែល 7–8%។ ក្រោមលក្ខខណ្ឌប្រតិកម្មរបស់ពួកគេ Azure B ដែលត្រូវបាន iodinated មានបរិមាណច្រើនជាង methylene blue ដែលត្រូវបាន iodinated យ៉ាងខ្លាំង។

ភាគរយទាំងនោះពិពណ៌នាអំពីវត្ថុធាតុក្នុងការសិក្សាឆ្នាំ 1999 នោះ។ វាមិនកំណត់កម្រិតភាពមិនបរិសុទ្ធដែលអាចទទួលយកបានសម្រាប់សព្វថ្ងៃនេះ ឬសមាសភាពផលិតផលរបស់អ្នកផ្គត់ផ្គង់ផ្សេងទៀតទេ។ ការពិសោធន៍នេះបង្ហាញចំណុចចង្អៀតមួយ៖ សារធាតុចម្បងនៅដំណាក់កាលចាប់ផ្តើម មិនចាំបាច់បង្កើតផលិតផលប្រតិកម្មចម្បងនោះទេ។

សម្រាប់វិញ្ញាបនបត្រវិភាគ សូមពិនិត្យលទ្ធផល Azure B ជាក់លាក់ ឯកតា វិធីសាស្ត្រធ្វើតេស្ត កម្រិតរាយការណ៍ និងអត្តសញ្ញាណ lot។ ការធ្វើតេស្តបរិមាណថ្នាំជ្រលក់សរុប និងការធ្វើតេស្តសារធាតុពាក់ព័ន្ធ ឆ្លើយសំណួរខុសគ្នា។ លទ្ធផល “រកមិនឃើញ” ក៏ត្រូវការកម្រិតរកឃើញ ឬកម្រិតរាយការណ៍ផងដែរ ទើបអាចបកស្រាយបាន។ សូមមើល របៀបអានវិញ្ញាបនបត្រវិភាគ methylene blue សម្រាប់ការត្រួតពិនិត្យឯកសារទូលំទូលាយជាងនេះ។

Azure B ដែលបង្កើតឡើងក្នុងអំឡុងពេលមេតាបូលីស

ការសិក្សាមេតាបូលីសត្រូវការការបំបែកតាមវិធីវិភាគរវាងសារធាតុដើម និងមេតាបូលីតរបស់វា។ Kim និងសហការីបានបង្កើត វិធីសាស្ត្រ LC–MS/MS សម្រាប់វាស់សារធាតុទាំងពីរនៅក្នុងប្លាស្មាកណ្ដុរ។ ជួរក្រិតតម្រូវរបស់ពួកគេគឺ 1–1,000 ng/mL សម្រាប់សារធាតុនីមួយៗ ដោយមានកម្រិតកំណត់បរិមាណទាបបំផុត 1 ng/mL ដោយប្រើប្លាស្មាកណ្ដុរ 20 microlitres។ បន្ទាប់មក ពួកគេបានអនុវត្តវិធីសាស្ត្រនេះក្នុងការសិក្សាឱសថចលនវិទ្យាលើកណ្ដុរ។

ព័ត៌មានលម្អិតនេះសំខាន់ ព្រោះវិធីសាស្ត្រវាស់វែងមួយមានបរិបទសំណាកជាក់លាក់។ ការផ្ទៀងផ្ទាត់នៅក្នុងប្លាស្មាកណ្ដុរ មិនបញ្ជាក់ដោយស្វ័យប្រវត្តិពីភាពត្រឹមត្រូវក្នុងប្លាស្មាមនុស្ស ទឹកនោម ឬសូលុយស្យុងពាណិជ្ជកម្មដែលមានកំហាប់ខ្ពស់ទេ។ វិធីសាស្ត្រនេះបង្ហាញពីរបៀបដែលអ្នកស្រាវជ្រាវអាចតាមដានសារធាតុពីរដោយឡែកពីគ្នា ប៉ុន្តែវាមិនផ្តល់ក្បួនកំណត់ដូសសម្រាប់មនុស្សទេ។

ទិន្នន័យការប៉ះពាល់ក្នុងមនុស្សក៏បង្ហាញផងដែរថា ហេតុអ្វីភាគរយមេតាបូលីតថេរតែមួយមិនគ្រប់គ្រាន់។ ផ្នែកឱសថវិទ្យាគ្លីនិកនៃស្លាកថ្នាំចាក់ methylene blue រាយការណ៍ពីការកើនឡើងនៃការប៉ះពាល់នឹង Azure B ក្នុងអ្នកចូលរួមដែលមានការខ្សោយមុខងារតម្រងនោម។ ការប៉ះពាល់តាមពេលវេលាឆ្លុះបញ្ចាំងពីការបង្កើត ការចែកចាយ និងការបញ្ចេញ មិនមែនតែសមាសភាពក្នុងដបប៉ុណ្ណោះទេ។ ផ្លូវនៃការផ្តល់ ពេលវេលាយកសំណាក និងផ្នែកដែលត្រូវបានវាស់ សុទ្ធតែមានសារៈសំខាន់នៅពេលប្រៀបធៀបលទ្ធផលទាំងនេះ។

អ្វីដែលការពិសោធន៍ដោយផ្ទាល់បង្ហាញ

Azure B មានសកម្មភាពឱសថវិទ្យាដែលអាចវាស់បាន។ សំណួរដែលមានប្រយោជន៍ជាងគេគឺថា វាប៉ះពាល់គោលដៅណា ក្រោមលក្ខខណ្ឌណា។

ក្នុង ការសិក្សាឆ្នាំ 2012 ដោយប្រើ monoamine oxidase របស់មនុស្សដែលផលិតឡើងវិញ Azure B បានទប់ស្កាត់ MAO-A ដោយមាន IC50 ស្មើ 11 nM ប្រៀបធៀបនឹង 70 nM សម្រាប់ methylene blue ក្រោមលក្ខខណ្ឌដូចគ្នា។ IC50 គឺជាកំហាប់ដែលពាក់ព័ន្ធនឹងការទប់ស្កាត់ 50% ក្នុងការធ្វើតេស្តនោះ។ Azure B ក៏បានទប់ស្កាត់ MAO-B ផងដែរ ប៉ុន្តែនៅកំហាប់ខ្ពស់ជាងយ៉ាងច្រើន៖ 968 nM។ អ្នកស្រាវជ្រាវបានរាយការណ៍ថាការទប់ស្កាត់នេះអាចត្រឡប់វិញបាន។

លទ្ធផលទាំងនេះគាំទ្រលទ្ធភាពនៃការរួមចំណែកដល់ឥទ្ធិពល និងអន្តរកម្មជីវសាស្ត្រ រួមទាំងសំណួរអំពី methylene blue និងសារធាតុបញ្ជូនសរសៃប្រសាទ។ វាមិនមានន័យថា Azure B ល្អជាងជាឱសថប្រាំមួយដងនោះទេ។ អនុបាតនេះពិពណ៌នាតែការទប់ស្កាត់អង់ស៊ីមមួយក្នុងការប្រៀបធៀបពិសោធន៍មួយប៉ុណ្ណោះ។

ការពិសោធន៍ cholinesterase ក្នុងមនុស្សដោយឡែកមួយ បង្ហាញពីដែនកំណត់នៃការធ្វើសន្និដ្ឋានទូទៅបែបនោះ។ តម្លៃ IC50 របស់ Azure B គឺ 0.486 micromolar សម្រាប់ acetylcholinesterase និង 1.99 micromolar សម្រាប់ butyrylcholinesterase។ Methylene blue មានឥទ្ធិពលខ្លាំងជាងក្នុងការធ្វើតេស្តដូចគ្នាទាំងនោះ ដោយមានតម្លៃរៀងគ្នា 0.214 និង 0.389 micromolar។ លំដាប់ប្រៀបធៀបបានបញ្ច្រាសនៅពេលគោលដៅជីវសាស្ត្រផ្លាស់ប្តូរ។ លទ្ធផលណាមួយក្នុងចំណោមនេះ ដោយឯករាជ្យ មិនបញ្ជាក់ពីការកែលម្អសមត្ថភាពការយល់ដឹង ឬការព្យាបាលជំងឺ Alzheimer ទេ។

ពីសកម្មភាពពិសោធន៍ទៅការបកស្រាយគ្លីនិក

ការពិសោធន៍លើសត្វទាំងមូលបន្ថែមកម្រិតភស្តុតាងមួយទៀត ប៉ុន្តែមិនអាចដោះស្រាយសំណួរអំពីប្រសិទ្ធភាពគ្លីនិកបានទេ។ ក្នុង ការសិក្សាលើកណ្ដុររបស់ Delport និងសហការី Azure B បានកាត់បន្ថយភាពអសកម្មក្នុងការធ្វើតេស្ត forced-swim ស្រួចស្រាវ ដោយមាន methylene blue និង imipramine ជាសារធាតុប្រៀបធៀបមួយចំនួន។ អត្ថបទនោះហៅវាថាជាឥទ្ធិពលស្រដៀងនឹងថ្នាំប្រឆាំងជំងឺធ្លាក់ទឹកចិត្ត។ វាជាការពិសោធន៍អាកប្បកិរិយាលើកណ្ដុរ មិនមែនជាការសាកល្បងដែលវាស់ការជាសះស្បើយពីជំងឺធ្លាក់ទឹកចិត្តក្នុងអ្នកជំងឺទេ។

សម្រាប់ការអះអាងណាមួយអំពី Azure B ជំហានដំបូងគឺកំណត់ថាវត្ថុធាតុអ្វីត្រូវបានធ្វើតេស្ត។ បន្ទាប់មក កំណត់សារពាង្គកាយ ឬការធ្វើតេស្ត កម្រិតការប៉ះពាល់ និងចំណុចបញ្ចប់។ ចុងក្រោយ ពិនិត្យថាសន្និដ្ឋាននោះពាក់ព័ន្ធនឹងសមាសភាព មេតាបូលីស សកម្មភាពអង់ស៊ីម អាកប្បកិរិយាសត្វ ឬអត្ថប្រយោជន៍គ្លីនិក។ ជំហានទាំងនេះជួយការពារកុំឱ្យលទ្ធផលគុណភាពនៃបាច់មួយត្រូវបានយល់ច្រឡំថាជាការអះអាងអំពីការព្យាបាល និងកុំឱ្យយន្តការពិសោធន៍ត្រូវបានយល់ច្រឡំថាជាលទ្ធផលដែលបានបញ្ជាក់ក្នុងអ្នកជំងឺ។