Ihe mere mmịkọrọ ìhè nke methylene blue ji agbanwe mgbe ịta ya gbanwere

Were otu karama ngwọta methylene blue e debere maka iji rụọ ọrụ, wụnye ya n'ime iko abụọ. Jupụta nke mbụ site na ngwọta ahụ, jupụtakwa nke abụọ site na ngwọta e mere ka ịta ya belata okpukpu iri. Agba iko nke abụọ adịchaghị omimi, dịka a tụrụ anya ya. Lezie anya, ị ga-ahụ na ihe ọzọ agbanweela. Ụdị agba ahụ agbanweela. Otu ngwọta dị ka anụnụ anụnụ mbara igwe doro anya, ebe nke ọzọ bụ anụnụ anụnụ nwere ntakịrị violet. Mbelata ịta emeghị naanị ka ịdị omimi agba belata. Ọ gbanwere ụdị kemịkal nke na-amịkọrọ ihe ka ukwuu n'ìhè ahụ.

Echiche dị n'azụ mgbanwe a dị mfe. Methylene blue gbazere abụghị naanị otu ụdị kemịkal. Otu kation ihe e ji agba agba, nke a na-akpọ monomer, nwere ike idowe ihu ya n'ihu kation nke abụọ iji mepụta dimer, dimer nwekwara ike ịchịkọta bụrụ nchịkọta ka ukwuu. Ụdị nke ọ bụla nwere spektrum mmịkọrọ ìhè nke ya. Ihe spectrophotometer na-egosi bụ ngụkọta nke mmịkọrọ ìhè sitere n'ụdị niile dị na cuvette ahụ, n'okpuru ọnọdụ ndị ahụ. Gbanwee ngwakọta ahụ, spektrum ahụ ga-agbanwe, ọbụna mgbe mkpokọta ihe e ji agba agba na-agbaso oke mbelata ịta kwụ ọtọ.

Monomer na dimer na-amịkọrọ ìhè n'ụzọ dị iche

Chee monomer ka ọ bụ kaadị dị larịị nke chaji dị mma gbasara n'usoro mgbanaka ya. Kaadị abụọ dị otu a nwere ike idina ihu na ihu. Chaji ndị dị mma na-achụpụ ibe ha, ma elu aromatik ndị dị larịị na-adọta ibe ha site na mmekọrịta ịdokọ; mmiri na ion ndị nwere chaji megidere ha nke gbara ha gburugburu na-ebelata ịchụpụ ahụ. Ihe si na ya pụta bụ ụzọ abụọ jikọtara ọnụ, nwere ọnọdụ elektrọn ndị ha na-ekekọrịta. Mgbanwe ọnọdụ elektrọn a na-ekwe ka ha mee dị n'ogo ume dị elu karịa mgbanwe monomer, ya mere eriri mmịkọrọ ìhè dimer na-apụta n'ogologo ebili dị mkpụmkpụ karịa eriri monomer. Nchịkọta ndị ka ukwuu na-etinyekwa aka n'akụkụ anụnụ anụnụ nke spektrum ahụ dị ka ubu eriri ahụ.

Mgbe ịta dị nnọọ ala n'ime mmiri dị ọcha, monomer na-akakarị, eriri ogologo ebili dị ogologo na-akakarịkwa. Ka mkpokọta ịta na-arị elu, ụdị jikọtara ụzọ abụọ na-enweta oke ka ukwuu, eriri ogologo ebili dị mkpụmkpụ na-etokwa ma e jiri ya tụnyere nke mbụ. Ya mere, oke dị n'etiti eriri abụọ ahụ na-egosi ụdị mejupụtara ngwakọta ahụ, ọ bụghị mkpokọta ịta ozugbo. Ntụọ e mere n'otu ogologo ebili enweghị ike ikewapụ ha abụọ ma ọ bụrụ na e nweghị echiche banyere ụdị dị na ngwọta ahụ.

Ọ bụ ya mere a ga-eji na-ejikọta spektrum ntụaka na ọnọdụ e ji nweta ha mgbe niile. Ntụaka spektrum maka methylene blue na-edepụta ọnọdụ eriri mmịkọrọ ìhè, tinyere ihe mgbaze, nnu dị na ngwọta, pH, okpomọkụ, na oke ịta e ji nweta ha. Ọ bụrụ na ị kpọọ ọnụ ọgụgụ ebe mmịkọrọ ìhè kacha elu n'enweghị ọnọdụ ndị ahụ, nkọwa ọnụ ọgụgụ ahụ ezughị ezu. Ụlọ nyocha abụọ nwere ike ikwu eziokwu banyere spektrum dị iche sitere n'otu ihe e ji agba agba, n'ihi na ha tụrụ ngwakọta dị iche.

Ihe na-agbanwe nha anya ahụ

Ịta bụ isi ihe na-achịkwa mgbanwe ahụ. Ịmepụta dimer chọrọ ka monomer abụọ zute, ya mere oke dimer na-arị elu karịa otú mkpokọta ihe e ji agba agba si arị elu n'ụzọ kwụ ọtọ. Ụkpụrụ nkwụsi ike nke nhazi dimer n'ime mmiri a kọrọ dị n'ọtụtụ puku per molar nso okpomọkụ ụlọ, ya mere oke dimer na-arị ngwa ngwa n'oke micromolar. Ntụnyere mgbakọ sara mbara nke gụnyere ịta ihe e ji agba agba site na micromolar ruo millimolar chọpụtara na tetramer etinyelarị aka ọbụna n'okpuru 34 micromolar. Nke a na-adọ aka ná ntị ka a ghara ịtụkwasị ntụnyere dabere naanị n'ụdị abụọ obi mgbe ịta dị n'ọtụtụ iri micromolar. Oke ziri ezi nke ụdị ọ bụla dabere na gburugburu ngwọta ahụ; ọ bụ ya mere isiokwu a ji akọwa ntụziaka mgbanwe kama inye tebụl ntụgharị ga-arụ ọrụ n'ọnọdụ niile.

Nnu bụ ihe nke abụọ na-achịkwa ya. Ion gbazere na-ebelata ịchụpụ dị n'etiti kation abụọ, ya mere ịgbakwunye sodium chloride na electrolyte ndị yiri ya na-akwalite dimer na nchịkọta ndị ọzọ ọbụna mgbe ịta ihe e ji agba agba agbanweghị. A na-ahụ mmetụta a na nnyocha banyere nchịkọta methylene blue n'ime ngwọta nnu na ngwọta mmiri, ebe a tụrụ ihe e ji agba agba site n'ihe dị ka 1 micromolar ruo 3.4 millimolar n'ime sodium chloride dị site na 0 ruo 0.15 molar. Na ntụnyere mgbakọ ahụ, oke tetramer ruru ihe dị ka 0.93 n'ebe ịta ihe e ji agba agba na ịta nnu kacha elu. Ya mere, spektrum e dekọrọ n'ime mmiri na nke e dekọrọ n'ime ngwọta nnu kwekọrọ na nke ahụ mmadụ abụghị ụkpụrụ ntụaka a pụrụ iji dochie ibe ha.

Okpomọkụ na-akpali mgbanwe n'akụkụ nke ọzọ. Ịdokọ na-ahapụ mmiri e jikọtara, mmegharị sitere na okpomọkụ na-emegidekwa ya. Ya mere, ime ka ngwọta kpoo ọkụ na-ekewakarị ụfọdụ dimer ka ha laghachi bụrụ monomer, ebe ime ka ọ jụọ oyi na-akwado njikọ. Entalpi nkewa nke ntụnyere mgbakọ nyere dị na-adịghị mma, ihe dị ka minus 30 kilojoules per mole n'oke 282 ruo 333 kelvin, nke na-akwado na njikọ ahụ na-ewepụta okpomọkụ. Ihe nlele oyi a tụrụ ozugbo e wepụchara ya na friji nwere ike ịdị ka ọ nwere nchịkọta ka ukwuu karịa otu ihe nlele ahụ mgbe e chere ka ọ ruo nha anya na okpomọkụ ụlọ.

Ihe mgbaze na-ekpebi ọnọdụ ntọala. Mmiri, n'ihi mmetụta siri ike ọ na-enwe n'ịwepụ ihe ndị na-adịghị amasị mmiri n'ebe ọ nọ, na-akwado ka kation ihe e ji agba agba ndị dị larịị dokọọ. Mmanya dịka ethanol na methanol na-agba mgbanaka ndị ahụ gburugburu nke ọma karịa ma na-ekewa nchịkọta, ya mere otu ịta ihe e ji agba agba na-adị ka ọ nwere monomer karịa n'ime ethanol karịa n'ime mmiri. Ihe mgbaze ndị a na-agwakọta na mmiri nke na-adịghị enye proton na-emekwa otu ihe ahụ: n'ime ngwakọta mmiri na DMSO na 293 kelvin, DMSO e tinyere belatara nhazi dimer, nke na-egosi na nhazi mmiri so na ihe na-akwalite ịdokọ. A chọrọ ịkpachara anya maka surfactant n'akụkụ abụọ. Mgbe ịta ha karịrị ịta oke nke micelle, micelle nwere ike ime ka monomer nke ọ bụla gbazee iche iche ma weghachite spektrum yiri nke monomer. N'okpuru ebe ahụ, surfactant nwere chaji megidere nke ihe e ji agba agba nwere ike ịkwalite ịdokọ kama: n'ịta ihe e ji agba agba dị 100 micromolar, nhazi polima nke SDS kpalitere ruru elu kacha ya nso 4 millimolar SDS, ihe dị ka ọkara ịta ebe micelle na-amalite, tupu nkesa ahụ agbanweghachi mgbe ịta surfactant dị elu karịa. Ọrụ banyere mmetụta mmekọrịta ihe e ji agba agba na ihe mgbaze, na gburugburu ahaziri ahazi, na spektrum methylene blue na-egosi otú gburugburu molekul dị ya nso si achịkwa eriri ndị a na-ahụ nke ukwuu, ọ bụghị naanị mkpokọta ịta.

pH na-akacha nwee mmetụta n'ọnọdụ ndị dị n'akụkụ oke. N'oke pH dị nso na-anọpụ iche nke a na-eji n'ọtụtụ ọrụ ụlọ nyocha, methylene blue na-anọ n'ụdị anụnụ anụnụ kation a maara, nchịkọta molekul na-abụkwa isi ihe na-achịkwa spektrum. Acid ma ọ bụ beis siri ike, kemịkal redox nke na-emepụta ụdị leuco na-enweghị agba, ma ọ bụ njikọ na protein na obere irighiri ihe, nke ọ bụla na-agbakwunye ọnọdụ ndị ọzọ karịa ụzọ monomer-dimer. Mgbe spektrum gbanwere mgbe e tinyere buffer, lelee ihe mejupụtara buffer ahụ maka nnu na ihe ndị nwere ike ijikọ tupu ị sị na ọ bụ naanị pH kpatara ihe niile. Ntụaka kemịkal na mgbakwunye proton na-edobe ajụjụ ndị a banyere ụdị kemịkal iche na ajụjụ nchịkọta a na-atụle ebe a.

Ihe mere ahịrị kwụ ọtọ Beer-Lambert ji ehulata

Mmekọrịta Beer-Lambert na-ekwu na absọbans hà ike mmịkọrọ ìhè mụbaa ịta mụbaa ogologo ụzọ ìhè. Ọ bụ iwu ịgụ ọnụ. Ọ na-eche na ihe ndị a na-agụ anaghị agbanwe ụdị ha mgbe ọnụ ọgụgụ ha gbanwere: otu ụdị na-amịkọrọ ìhè, spektrum na-adịghị agbanwe, enweghị mgbanwe kemịkal n'ihi ịta, ìhè nyocha nwere naanị otu ogologo ebili, enweghị ịgbasa ìhè ma ọ bụ ịwepụtaghachi ya, na ìhè na-agafe ogologo ụzọ ekwuru n'ezie.

Nchịkọta molekul na-emebi echiche mbụ ahụ. N'ụdị mgbakọ, mkpokọta absọbans ka bụ ngụkọta sitere n'ụdị niile: ogologo ụzọ ìhè mụbaa ike mmịkọrọ ìhè nke ụdị ọ bụla mụbaa ịta nke ụdị ahụ. Ụdị nke ọ bụla na-agbaso iwu ahụ. Ngwakọta ahụ anaghị agbaso ya, n'ihi na ịta nke ụdị ndị ahụ anaghị agbanwe n'ụzọ kwụ ọtọ dịka mkpokọta ihe e ji agba agba si agbanwe. Ya mere, ahịrị nhazi e sere site na absọbans n'eriri monomer megide mkpokọta ihe e ji agba agba na-amalite kwụ ọtọ mgbe ịta dị nnọọ ala, ma na-ehulata ala ka ịta na-arị elu, n'ihi na mgbakwunye nke ọ bụla na-eweta oke monomer dị nta ma e jiri ya tụnyere mkpokọta ahụ. Ahịrị a gụrụ n'eriri dimer na-ehulata n'akụkụ nke ọzọ. Ọrụ nchịkọta molekul na-akọwapụta kpọmkwem usoro a dịka ihe kpatara ndapụ Lambert-Beer a hụrụ. Ịtụnye ahịrị kwụ ọtọ n'akụkụ gbagọrọ agbagọ ahụ ma ịgbatị ya gafee data ahụ bụ mmejọ a na-emekarị. Ahịrị ahụ bara uru naanị n'ime oke na gburugburu ngwọta e ji wuo ya.

Mbelata ịta na-emepụta ọnyà yiri nke a. Ịgbaze ngwọta ịta dị elu e debere ka ọ ruo n'oke ngwa ahụ nwere ike ịtụ anaghị echekwa oke dị n'etiti ụdị kemịkal ndị ahụ. Ngwọta a gbazere n'ime cuvette na-eru nha anya ọhụrụ nke na-akwado monomer, ya mere spektrum ya na-akọwa ngwọta ịta dị ala nke ọma, ma ọ naghị akọwa ngwọta mbụ ahụ nke ọma. Ịgbakọ spektrum ngwọta mbụ ahụ azụ site n'ịmụba absọbans na-eweghachite atụmatụ mkpokọta ihe dị na ya naanị ma ọ bụrụ na nhazi ahụ etinyelarị mgbanwe ahụ n'uche. Ọ naghị eweghachite ọdịdị mbụ nke eriri mmịkọrọ ìhè. Onye ọ bụla na-atụnyere spektrum ngwọta ịta dị elu na ntụaka ịta dị ala na-atụnyere ngwakọta abụọ dị iche.

Ogologo ụzọ ìhè so n'ihe nchoputa ahụ

Absọbans na-agbanwe dịka anya ìhè si aga n'ime ihe nlele ahụ. Cuvette 10 mm na-enye absọbans okpukpu iri nke cuvette 1 mm nwere otu ngwọta ahụ. Ntụgharị ahụ ziri ezi naanị ma ọ bụrụ na ọ bụ otu ngwọta ahụ, nchịkọta molekul na-emekwa ka ọnọdụ a dị oke mkpa.

N'ọrụ, ogologo ụzọ ìhè bụ ụzọ e si anọ n'ime oke ziri ezi. Ụzọ ogologo na-eme ka a nwee ike ịchọpụta ngwọta ịta dị ala nke nwere monomer karị. Ụzọ dị mkpụmkpụ na-eme ka ihe nlele ịta dị elu nọrọ n'oke nha ngwa ahụ n'enweghị nnukwu mbelata ịta nke ga-emegharị nha anya ahụ. Usoro nyocha nchịkọta nke nyere ọnụ ọgụgụ ndị dị n'elu mere kpọmkwem nke a: cell 1 centimeter maka ihe e ji agba agba dị 1.1 ruo 34 micromolar, na cell 0.01 centimeter maka 94 micromolar ruo 3.4 millimolar. Ebe a na-edobe obere olu ihe nlele na ngwa na-agụ efere na-agbakwunye nhazi nke ha, nwere ụzọ ìhè dị mkpụmkpụ nke na-agbanwekwa mgbe ụfọdụ, tinyere elu ebe kation ihe e ji agba agba nwere ike ịrapara. Kọọ ogologo ụzọ ahụ tinyere ọnụ ọgụgụ ahụ, dịka ntụaka spektrum si akọ ihe mgbaze na nnu. Absọbans na-enweghị ogologo ụzọ ìhè abụghị ihe nchoputa. Ọ bụ asịrị.

Usoro a na-egosi ihe ndị a ga-akpachapụ anya na ha mgbe a na-atụ ihe. Mee ka ihe nlele niile ruo otu okpomọkụ tupu ịgụ ha. Jiri otu ụdị cuvette na otu ụzọ o si chere ihu, ihe nlele ntụaka na-enweghị ihe e ji agba agba nke nwere otu nnu na buffer, na akụrụngwa iko dị ọcha, n'ihi na methylene blue na-arapara n'elu iko na plastik, cuvette nwere ntụpọ agba na-ebukwa ihe fọdụrụ n'ihe nlele ịta dị elu e ji ya tụọ ikpeazụ. Gụọ ngwa ngwa mgbe akwadochara ihe nlele ma ọ bụrụ na ọsọ nhazi nchịkọta dị mkpa, wuokwa ahịrị nhazi ọ bụla n'otu gburugburu ngwọta na n'otu ogologo ụzọ ìhè dịka ihe nlele ndị a na-amaghị ịta ha. Maka nyocha anya, cheta na anya abụghị spectrometer dị mma. Ajụjụ ma agba ngwọta ọ nwere ike igosi ịdị ọcha bụ ajụjụ dị iche nke azịza ya bụ mba, mgbanwe ụdị agba sitere na nchịkọta molekul bụkwa otu ihe kpatara ya.

Eserese ị ga-edobe n'akụkụ ngwa ahụ

Ihe oyiyi dị n'okpuru chịkọtara isiokwu a ka ọ bụrụ otu ntụaka maka tebụl ọrụ ụlọ nyocha. Ngwọta atọ nwere otu ihe e ji agba agba, mana mkpokọta ịta ha na nnu dị na ha dị iche. Spektrum ihe atụ ha na-egosi otú oke eriri monomer nke ogologo ebili dị ogologo si ebelata, ebe oke eriri dimer nke ogologo ebili dị mkpụmkpụ na-abawanye ka ịdokọ na-abawanye. E dere ọnọdụ ndị ahụ n'ihe oyiyi ahụ n'ihi na a pụghị iji ahịrị ndị ahụ rụọ ọrụ ọzọ ma ọ bụrụ na a maghị ọnọdụ ndị ahụ. Maka ọnọdụ eriri mmịkọrọ ìhè a tụrụ n'okpuru ọnọdụ akọwapụtara, jiri ntụaka spektrum. Maka otú ihe e ji agba agba si abanye na cell mgbe ọ nọworị n'ime ngwọta, lee ịbanye na cell site na nnweta elektrọn na nkesa n'etiti gburugburu dị iche. Maka otú oke ìhè na nhazi ya si emetụtakwu ihe a na-agụ n'omume kemịkal nke ìhè na-akpali, lee ikpughe n'ìhè na nhazi ebe a na-atụ ihe.

Iwu ị ga-eburu n'uche nwere akụkụ abụọ. Spektrum na-egosi ngwakọta dị na cuvette n'okpuru ọnọdụ ndị akọwapụtara. Naanị nhazi e wuru n'okpuru otu ọnọdụ ndị ahụ nwere ike ịtụgharị absọbans ka ọ bụrụ mkpokọta ịta.