Հոդված
Պաուլ Էրլիխը և մեթիլենային կապույտը․ ինչպես ներկանյութն օգնեց ձևավորել դեղերի հայտնագործման մոտեցումը
Պաուլ Էրլիխի ներդրումը բժշկության մեջ դեղը չէր։ Դա հիմնավորում էր, թե ինչպես պետք է մոտենալ դեղի ուսումնասիրությանը։
1878 թվականին նա ներկայացրեց դոկտորական ատենախոսություն, որի առաջին բաժինը վերնագրված էր «Ներկման քիմիական հայեցակարգը»։ Դրանում պնդվում էր, որ հյուսվածքային կտրվածքի ներկումը և կտորի ներկումը հետևում են նույն տրամաբանությանը։ Երկու դեպքում էլ գույնն ամրանում է ներկանյութի և նյութի միջև քիմիական խնամակցության շնորհիվ, այլ ոչ թե այն պատճառով, որ հյուսվածքը ներծծող է, ճարպոտ կամ ունի գունանյութը պահող կառուցվածք։ Էրլիխը մեծացել էր՝ հետևելով, թե ինչպես է իր զարմիկը՝ ախտաբան Կարլ Վայգերտը, պատրաստում ներկված կտրվածքներ, և նրա ուշադրությունը գրավում էին ոչ թե պատկերները, այլ այն փաստը, որ ներկանյութն ինքն էր ընտրում՝ ուր գնալ։
Այս պնդումը համեստ է հնչում։ Բայց այդպիսին չէ։ Եթե ներկանյութը հյուսվածքին կապվում է քիմիական պատճառներով, ապա ներկման պատկերը տեղեկություն է տալիս այդ հյուսվածքի քիմիայի մասին։ Ներկված առարկայական ապակին դադարում է պարզապես պատկեր լինել և դառնում է չափում։
Նա անմիջապես զարգացրեց այդ միտքը։ 1880 թվականին մեթիլենային կապույտը համակցեց թթվային ֆուքսինի հետ և խառնուրդն անվանեց չեզոք ներկանյութ՝ չեզոք ներկող նյութ։ Այն տարբերակում էր լեյկոցիտների տարբեր տեսակները, ինչը այդ ժամանակ առանձին օգտագործվող ներկանյութերը չէին կարողանում անել։ Երկու տարի անց նա ներկայացրեց տուբերկուլոզի ցուպիկները մեթիլ մանուշակագույնով ներկելու մեթոդ, և Կոխն այդ ընթացակարգը կիրառեց իր աշխատանքում։
Այդ գործելակերպերին հետագայում ընդհանուր հիմք տված տեսությունն առանձին հարց է, և դրա ժամանակագրությունը հաճախ անհարկի միախառնվում է։ Էրլիխի կողմնային շղթաների տեսությունը՝ այն գաղափարը, որ նյութն ազդում է բջջի վրա, քանի որ դրանք քիմիապես համատեղելի են, պատկանում է 1890-ականներին, ոչ թե ներկանյութերով աշխատանքի տարիներին։ Ավելի վաղ աշխատանքը տվել էր նախորդող համոզմունքը․ ընտրողականությունը քիմիական է, հետևաբար այն կարելի է նպատակային որոնել, ոչ թե պատահաբար գտնել։
Փորձը, որը ներկանյութը վերածեց քարտեզի
1885 թվականին Էրլիխը հրատարակեց օրգանիզմի թթվածնային պահանջների մասին մենագրություն՝ «գունավերլուծական ուսումնասիրություն» ենթավերնագրով։ Մեթոդը հետևյալն էր․ ներարկել ներկանյութեր, որոնց գույնը կախված է օքսիդացման վիճակից, ապա համեմատել, թե տարբեր օրգաններն ինչպես են դրանք վերականգնում կամ պահպանում։ Ներկանյութն օգտագործվում էր որպես գործիք, ինչպես ջերմաչափը․ այն տեղեկություն էր տալիս հյուսվածքի ներսում այնպիսի պայմանների մասին, որոնք հնարավոր չէր ուղղակիորեն ուսումնասիրել։ Էրլիխն ինքը նպատակը ձևակերպել էր որպես որոշակի ներկանյութերի օգնությամբ կենդանի օրգանների վերականգնող ունակության որոշում։
Մեթիլենային կապույտի վերաբերյալ արդյունքը հրապարակվեց 1886 թվականին՝ կենդանի նյարդային նյութի հետ ներկանյութի ռեակցիայի մասին հոդվածում, որը նախորդ դեկտեմբերին ներկայացվել էր բժշկական ընկերությանը։ Մեթիլենային կապույտը ներմուծվել էր կենդանի կենդանու արյան շրջանառության մեջ, այնուհետև վերցվել էին հյուսվածքի բարակ կտրվածքներ և ենթարկվել օդի ազդեցությանը, որպեսզի կուտակված անգույն ներկանյութը օքսիդանար, նորից կապույտ դառնար և ցույց տար, թե որտեղ էր հավաքվել։ Նյարդային բջիջներն ու նյարդաթելերը ներկվում էին այնքան ընտրողաբար, որ տեխնիկան դարձավ նյարդային հյուսվածքը պատկերելու ստանդարտ մեթոդ։ Միացությունն այլևս միայն աշխատասեղանի վրա դրված մեռած կտրվածքին կիրառվող ներկող նյութ չէր։ Այն նշիչ էր, որը բաշխվում էր կենդանի մարմնի ներսում, և այդ բաշխումը հնարավոր էր տեսնել ու մեկնաբանել։
Երկու փորձերի հիմքում ընկած հատկությունն արժե հստակ նշել, քանի որ այս պատմության մնացած ամեն ինչ կախված է դրանից։ Մեթիլենային կապույտի փոխակերպումը դարձելի է։ Դրա վերականգնված ձևը՝ լեյկոմեթիլենային կապույտը, անգույն է, իսկ թթվածնի հետ շփվելիս կրկին վերածվում է կապույտ կատիոնի։ Փակ տարայում ներկանյութի գլյուկոզային լուծույթն անգույն է․ բացելիս այն կապույտ է դառնում։ Հաղորդվում է, որ Էրլիխն այս երևույթը ցուցադրել է ուղղակիորեն՝ ներկված կտրվածքները մշակելով երկաթի քլորիդով, ինչպես նաև օդով, և հետևելով գույնի վերականգնմանը։ Ներկանյութը, որը փոխում է գույնը՝ կախված իր միջավայրի օքսիդավերականգնման վիճակից, այդ միջավայրն ուսումնասիրելու զոնդ է։
Այսպիսով, կողք կողքի էին երկու հատկություններ։ Ներկանյութը կարող էր մի հյուսվածքը տարբերակել մյուսից։ Եվ օքսիդացման վիճակի փոփոխությամբ հնարավոր էր ներկանյութի գույնը միացնել ու անջատել։
Հետահայաց դիտարկմամբ՝ երկրորդ հատկությունը քիմիաթերապիայի սկիզբն է։ Եթե միացությունը կապվում է հյուսվածքի մի տեսակի հետ, բայց ոչ մյուսի, ապա նույն միացությունը կարող է հասնել օրգանիզմի մի տեսակի, բայց ոչ մյուսի։ Էրլիխն այս հետևությունն ուղիղ ձևակերպեց․ եթե ախտածինը հնարավոր է ընտրողաբար ներկել, ապա ներկումը կարող է վկայել այդ ախտածինին հասցվող հատուկ վնասի մասին։ Ուստի ներկանյութը կարող էր օգտագործվել որպես դեղ՝ ուղղված ներխուժողին, ոչ թե հիվանդին։
Հիվանդի վրա առաջին փորձարկումը մալարիայի համար չէր։ 1890 թվականին հոգեբույժ Արթուր Լեպմանի հետ Էրլիխը հաղորդեց, որ մեթիլենային կապույտը մեղմել է մկանների, հոդերի և ջլերի նևրալգիկ ու ռևմատիկ վիճակների ժամանակ առաջացող ցավը։ Նրանք քննարկեցին՝ արդյոք դեղը կարող է ազդել հոգեկան հիվանդության վրա, և որոշեցին չփորձարկել այն։ Ջենովայից իտալացի բժիշկ Պիետրո Բոդոնին, այնուամենայնիվ, փորձեց։ Նրա 1899 թվականի հոդվածի վերնագիրը վերաբերում էր փսիխոզի տարբեր ձևերի ժամանակ հանգստացնող ազդեցությանը․ նա նկարագրեց տասնչորս գրգռված հիվանդների հանգստացումը և նշեց, որ Ջենովայի այլ բժիշկներ արդեն օգտագործում էին ներկանյութը նույն նպատակով։ Հանգստացնող ազդեցությունը հիվանդության վրա ազդեցություն չէ, և այս պատմության մեջ այդ տարբերությունը շարունակաբար ի հայտ է գալիս։
Մալարիայի վերաբերյալ աշխատանքը կատարվեց 1891 թվականին՝ ախտաբան Պաուլ Գուտմանի հետ, Բեռլինի Մոաբիթ հիվանդանոցում։ Մեթիլենային կապույտը տրվեց երկու հիվանդի, իսկ զեկույցը հրապարակվեց 1891 թվականի սեպտեմբերի 28-ի Berliner klinische Wochenschrift-ում։ Առաջին դեպքում հիվանդը հունիսի 29-ի երեկոյան միանգամից ընդունեց ներկանյութի 0.5 g․ սպասվող նոպան ամբողջությամբ չզարգացավ, իսկ դրանից հետո գրանցված միակ գանգատը թեթև ստրանգուրիան էր՝ ցավոտ, դժվարացած միզարձակումը, կապույտ մեզով։ Առաջին օրերի ընթացքում տենդային նոպաներն անհետացան, իսկ մակաբույծներն արյունից վերացան ամենաուշը ութերորդ օրը։ Հեղինակների ամփոփմամբ՝ իրենց ակնկալիքներն ամբողջովին իրականացել էին։ Առանց վերահսկիչ խմբի երկու դեպքը ապացույց չէ։ Մեթիլենային կապույտի և մալարիայի ավելի ամբողջական պատմությունը, ներառյալ ժամանակակից փորձարկումները, ներկայացվում է առանձին էջում, իսկ այստեղ հետաքրքրող հարցն ավելի նեղ է․ Էրլիխի հիմնավորումներից որքանն էր դիմանում մակաբույծի հետ առնչվելուն։
Որտեղ հիմնավորումը հաստատվեց, և որտեղ՝ ձախողվեց
Մեխանիզմի մասին պատկերացումից քիչ բան պահպանվեց, առնվազն այն ձևով, որով Էրլիխն էր առաջարկել։ Պարզեցված տարբերակը, ըստ որի հարթ եռացիկլ կատիոնը մտնում է մակաբույծի ԴՆԹ-ի հիմքերի զույգերի միջև, չի հաստատվում Plasmodium-ի դեպքում։ Վարակված էրիթրոցիտն այնքան հեշտությամբ է վերականգնում մեթիլենային կապույտը, որ այն ընդհանրապես չի հասնում մակաբույծին որպես հարթ կատիոն, և ինտերկալացիայի բացատրությունը, որը համապատասխանում է ակրիդինային ներկանյութերին, այս մեկին չի համապատասխանում։
Ապացույցներով հաստատվող պատկերը պակաս հստակ է։ Մեթիլենային կապույտը արգելակում է մակաբույծի գլուտաթիոն ռեդուկտազը այնպիսի կոնցենտրացիաներում, որոնց կարելի է հասնել հիվանդի օրգանիզմում։ Այն արգելափակում է հեմի փոխակերպումը հեմոզոինի՝ իներտ գունանյութի, որը մակաբույծը ստեղծում է հեմոգլոբինի սեփական մարսումից չթունավորվելու համար, մոտավորապես քլորոքինի չափ արդյունավետ և քինինից շատ ավելի արդյունավետ։ Դրա օքսիդավերականգնման ցիկլը նաև առաջացնում է թթվածնի ռեակտիվ ձևեր մի բջջում, որն արդեն արտադրում է դրանք։ Դրանցից որն է իրական մեխանիզմը, կամ արդյոք բոլորն էլ մասնակցում են, դեռ պարզված չէ։
Կա ևս մեկ բարդություն, որը պետք է հաշվի առնել այս միացության մասին ցանկացած պատմական պնդում կարդալիս։ Այդ ժամանակաշրջանի առևտրային մեթիլենային կապույտը մեկ նյութ չէր։ Նմուշները պարունակում էին Azure B՝ նույն շարքի մոնոդեմեթիլացված միացություն, և հին լուծույթներում դրա քանակն ավելանում էր։ Azure B-ն մետաքրոմատիկ ներկանյութ է՝ այլ թիրախներով․ այն երկշղթա ԴՆԹ-ն ներկում է մուգ կապույտ, իսկ ՌՆԹ-ն՝ կանաչ։ Տարբեր տեղեր հասնող երկու ներկանյութերի խառնուրդը, որոնց հարաբերակցությունը ոչ ոք չէր գրանցել, չի կարող հիմք դառնալ հստակ պնդման համար, թե դրանում եղած մեթիլենային կապույտն ինչ է արել։
Ներկանյութն ինքն այդպես էլ չփոխարինեց քինինին։ Մեթոդն ավելի հաջող եղավ։ Էրլիխի աշակերտ Վիլհելմ Ռյոլը, որն աշխատում էր ներկանյութերի և դեղերի IG Farben միավորման համար, շարունակում էր առաջ մղել ներկանյութերի ածանցյալները որպես արևադարձային հիվանդությունների դեղեր և տրամադրեց բացակայող գործիքը․ թռչնային մալարիայով վարակված դեղձանիկը դարձավ թեկնածու միացությունները նախնական գնահատելու սովորական միջոց։ Այնուհետև Վերներ Շուլեմանը փոփոխեց կողմնային շղթան, և ստացված ֆենոթիազինիումի աղը բուժեց փորձարարական վարակը։ Այն դեռևս հիվանդներին կապույտ էր դարձնում։
Երկարատև արդյունքը, պարզվեց, ո՛չ ներկանյութն էր, ո՛չ էլ օղակային համակարգը, այլ կողմնային շղթան։ Դիալկիլամինոալկիլամինո խմբի ավելացումը փոխեց մոլեկուլի վարքը, և այդ հատվածը պահպանվեց հետագա բոլոր վերափոխումներում։ Եթե պահպանենք այդ խումբը և ֆենոթիազինիումի օղակը փոխարինենք ակրիդինայինով, կստանանք քինակրին։ Եթե փոխարենը ներմուծենք քինոլինային օղակ, կստանանք քլորոքին։ Պամաքին, պրիմաքին և ամոդիաքին դեղերը, որոնք դեռևս հակամալարիային դեղերի ցանկում են, կրում են նույն խումբը։ Որպես բուժման միջոց չհաջողված միացությունը տվեց այն հատվածը, որը հաջողություն ունեցավ։
Հակափսիխոտիկների հետ կապն անցնում է օղակի, ոչ թե դեղի միջոցով։ Մեթիլենային կապույտի կառուցվածքի պարզաբանումն էր, որ 1883 թվականին Հայնրիխ Ավգուստ Բեռնթսենին բերեց ֆենոթիազինի ելակետային միջուկին, և հենց այդ հիմքային կառուցվածքն էին տարբեր փոխարինումներով ուսումնասիրում Rhône-Poulenc-ի քիմիկոսները 1940-ականներին՝ հակահիստամինային միջոցներ փնտրելիս։ Այդ միացություններից մեկը սինթեզվեց մոտավորապես 1950 թվականի վերջին և փորձարկվեց վիրաբույժ Անրի Լաբորիի կողմից, որը նկատեց, որ այն հիվանդներին թողնում է հանգիստ ու անտարբեր վիճակում։ Դրա հոգեբուժական կիրառման առաջին հրապարակումը՝ մանիայով հիվանդի դեպքում, եղավ 1952 թվականի հունվարին։ Առաջին հակափսիխոտիկը ոչ այնքան Էրլիխի հակամալարիային դեղի ժառանգն է, որքան այն ներկանյութի հեռավոր ազգականը, որով նա սկսել էր։
Երեք մոտեցում, որոնք արժե պահպանել այս պատմությունից
- «Բժշկության մեջ օգտագործված առաջին սինթետիկ դեղը» նկարագրում է մի կատեգորիա, և անհրաժեշտ վերապահումներն ավելի լայն են, քան արտահայտությունը հուշում է։ Այս արտահայտությունն արդեն հաստատուն տեղ է զբաղեցնում․ Neurobiology of Aging-ում Շիրմերի և գործընկերների հաճախ մեջբերվող ակնարկը մեթիլենային կապույտն անվանում է բժշկության մեջ օգտագործված ամենաառաջին լիովին սինթետիկ դեղը։ Քլորալհիդրատը որպես սինթետիկ հանգստացնող միջոց կիրառության էր մտել 1869 թվականին՝ ավելի քան քսան տարի առաջ։ 1891 թվականի հոդվածն ինքն է պատասխանի մի մասը տալիս, քանի որ հեղինակները թվարկում են սինթետիկ ջերմիջեցնող միջոցներ, որոնք արդեն ձախողվել էին մալարիայի դեմ, այդ թվում՝ քինոլինը, անտիպիրինը և անտիֆեբրինը։ Սիֆիլիսի համար Էրլիխի սեփական մկնդեղային դեղն ի հայտ եկավ ավելի ուշ։ Պնդման հիմնավոր տարբերակը վերաբերում է մեթոդին, ոչ թե առաջնությանը․ մեթիլենային կապույտն ամենավաղ սինթետիկ միացություններից է, որն ընտրվել է որոշակի օրգանիզմի դեմ ազդելու համար՝ ընտրողականության քիմիական տեսության հիման վրա։
- Ընտրողական բաշխումը ընտրողական օգուտ չէ։ Էրլիխի 1886 թվականի արդյունքն այն էր, որ ներկանյութը հասնում է նյարդային հյուսվածք։ Թե ուր է հասնում միացությունը և ինչ է անում այնտեղ հասնելուց հետո, երկու տարբեր չափումներ են, և առաջինը շատ ավելի հեշտ է կատարել։ Մեթիլենային կապույտի և ուղեղի մասին պնդումների մեծ մասն այդ ժամանակից ի վեր տեղավորվել է հենց այդ բացի մեջ։
- Մաքրությունն ապացույցների հարց է, ոչ թե շուկայավարման։ Պատմական տվյալները երկիմաստ են հենց այս պատճառով։ Կառուցվածքային փոքր տարբերությունները փոխում են, թե ուր է հասնում այս միացությունը, ուստի անալիզի վկայականը պետք է կապված լինի որոշակի խմբաքանակի հետ, ոչ թե ներկայացվի որպես ընդհանրական հավաստում, որ ապրանքը փորձարկված է։ Դեղագրքային մենագրությանը համապատասխանություն հայտարարող վաճառողը, որը ստուգում է միայն ծանր մետաղները, պնդում է ավելին, քան հիմնավորում է հաշվետվությունը։ Blupreme-ը մեթիլենային կապույտը ձեռք է բերում դեղագործական արտադրողից և ստուգում մենագրությամբ սահմանված պահանջների ամբողջությունը՝ նույնականացում, մաքրություն, օրգանական խառնուկներ, մնացորդային լուծիչներ, տարրային խառնուկներ, շիկացումից հետո մնացորդ, մանրէաբանական սահմանաչափեր և բակտերիալ էնդոտոքսիններ։ Հաշվետվությունը հրապարակվում է ապրանքի հետ միասին, իսկ USP որակի մեթիլենային կապույտի էջը բացատրում է այդ սահմանաչափերը և այն, թե ինչու առաջին հերթին պետք է փնտրել Azure B-ի արդյունքը։
Աղբյուրների ժամանակագրական ուղին
| Ամսաթիվ | Ինչ է կատարվել | Որտեղ է արձանագրված |
|---|---|---|
| 1878 | Դոկտորական ատենախոսությունը պնդում է, որ հյուսվածքների և գործվածքների ներկումը հետևում են քիմիական խնամակցության նույն տրամաբանությանը | Էրլիխ, ատենախոսություն, Լայպցիգ, 1878․ առաջին մասը վերնագրված է «Ներկման քիմիական հայեցակարգը» |
| 1880 | Մեթիլենային կապույտը թթվային ֆուքսինի հետ՝ «չեզոք ներկանյութը», տարբերակում է լեյկոցիտների տեսակները | Կրաֆթս, Հեմպելման և Սկորսկա-Ստանիա, Parasitol Res 111:1-6, 2012 |
| 1882 | Տուբերկուլոզի ցուպիկները մեթիլ մանուշակագույնով ներկելու մեթոդը ներկայացվում է Բեռլինի բժշկական ընկերությանը և հրապարակվում հաջորդ տարի | Էրլիխ, Berliner klinische Wochenschrift 20:13, 1883 |
| 1885 | Գունավերլուծական մենագրությունն օգտագործում է օքսիդավերականգնման ներկանյութեր՝ օրգանների վերականգնող ունակությունը համեմատելու համար | Էրլիխ, Օրգանիզմի թթվածնային պահանջը, Բեռլին, 1885 |
| 1886 | Կենդանի կենդանուն ներարկված մեթիլենային կապույտն ընտրողաբար նշում է նյարդային հյուսվածքը | Էրլիխ, «Կենդանի նյարդային նյութի մեթիլենային կապույտի ռեակցիայի մասին», Deutsche Medizinische Wochenschrift 12(4):49-52, 1886 |
| 1888 | Մեթիլենային կապույտը էոզինի հետ ներկում է մալարիայի մակաբույծը արյան քսուքներում | Խենցինսկի, Centralblatt für Bakteriologie und Parasitenkunde 3(15):457-460, 1888 |
| 1890 | Հաղորդվում է, որ մեթիլենային կապույտը մեղմում է նևրալգիկ և ռևմատիկ ցավը | Էրլիխ և Լեպման, Deutsche Medizinische Wochenschrift 16(23):493-494, 1890 |
| 1891 | Բեռլինի Մոաբիթ հիվանդանոցում մեթիլենային կապույտ է տրվում մալարիայով երկու հիվանդի | Գուտման և Էրլիխ, «Մալարիայի ժամանակ մեթիլենային կապույտի ազդեցության մասին», Berliner klinische Wochenschrift 28(39):953-956 |
| 1897 | Կողմնային շղթաների տեսությունը ներկայացվում է իր հասուն ձևով՝ դիֆթերիայի շիճուկի մասին հոդվածում | Էրլիխ, Klinisches Jahrbuch 6:299-326, 1897 |
| 1899 | Հաղորդվում է մեթիլենային կապույտի հանգստացնող ազդեցության մասին փսիխոզի տարբեր ձևերի դեպքում | Բոդոնի, Clinica Medica Italiana 24:217-222, 1899 |
| 1926 | Վարակված դեղձանիկը դառնում է հակամալարիային միացությունների նախնական գնահատման սովորական միջոց | Ռյոլ, Deutsche Medizinische Wochenschrift 52, 1926 |
| 1932 | Կողմնային շղթայի փոխարինումը բուժում է փորձարարական վարակը | Շուլեման, Proc R Soc Med 25:897-905, 1932 |
| 1934 | Ակրիդինային օղակը փոխարինվում է քինոլինայինով՝ առաջացնելով քլորոքին | Կրաֆթս և գործընկերներ, 2012՝ հիմնվելով Bayer-ի արխիվային նյութերի վրա |
| 1950 | Rhône-Poulenc-ում սինթեզվում է տեղակալված ֆենոթիազին, որը հետագայում անվանվում է քլորպրոմազին․ հրապարակվում է 1952-ին | Շարպանտիե և գործընկերներ, Comptes rendus de l'Académie des Sciences 235:59-60, 1952 |
| 1952 | Քլորպրոմազինի հոգեբուժական կիրառման առաջին հրապարակումը | Դելե, Դենիկեր և Առլ, Annales médico-psychologiques 110:112-117, 1952 |
Հիմնական իրադարձությունների ժամանակագրությունը, ներառյալ Էրլիխին նախորդած ներկանյութերի քիմիան և նրանից հետո ձևավորված որակի դասերն ու պահանջները, առանձին ներկայացված է մեթիլենային կապույտի պատմության էջում, իսկ միացությունն ինքնին նկարագրված է ինչ է մեթիլենային կապույտը էջում։
Այս պատմության հիմքում ընկած պատկերաթերթերը, որոնք վերարտադրված են Կրաֆթսի, Հեմպելմանի և Սկորսկա-Ստանիայի 2012 թվականի ակնարկում, համարժեք չեն, և մեկ օրինակ ցույց է տալիս՝ ինչու։ 1891 թվականի պատկերաթերթը փորձարկման առաջնային արձանագրությունն է․ դրա կողքին դրված 1910 թվականի դիմանկարը թվագրում է հեղինակությունը և ուրիշ ոչինչ։ Անդերսագի 1934 թվականի նոթատետրի էջերը քինոլինային փոխարինման ուղղակի հետքն են՝ հենց քիմիկոսի ձեռագրով։
Էրլիխի ներկանյութային փորձերի ազնիվ ամփոփումն այն է, որ նա ճիշտ էր ընտրողականության և թիրախի հարցում, բայց սխալվում էր մեխանիզմի հարցում։ Մեթիլենային կապույտն իսկապես կուտակվում է նյարդային հյուսվածքում և իսկապես վնասում է մալարիայի մակաբույծին։ Երկրորդը չի կատարվում առաջինի պատճառով, և երկուսի համար էլ նրա առաջարկած քիմիական պատճառը սխալ էր։ Այն, ինչ նա անվիճելիորեն ցույց տվեց, ավելի հարատև էր, քան ճիշտ մեխանիզմը․ միացությունը կարելի է ընտրել, ոչ թե պարզապես գտնել, և ընտրել այն ապացույցներով, որոնք հավաքվել են նախքան որևէ մեկն այն կտա հիվանդին։