Ble metilèn ak vizyon: sa rechèch sou retin montre ak kote li sispann

Yon lektè jwenn yon etid kote ble metilèn te pwoteje retin nan, epi li poze kesyon ki vin natirèlman an: èske yo ta dwe mete l nan je? Rechèch sou ble metilèn ak vizyon pa reponn kesyon sa a, paske okenn nan etid kle yo pa t teste itilizasyon sa a. Youn te enjekte koloran an nan kò vitre je sourit ansanm ak yon toksin. Youn te ajoute l nan mwayen ki te benyen selil izole nan yon bwat kilti. Youn te mete l nan dlo sourit mitan yo t ap bwè. Chak rezilta depann de wout administrasyon li ak modèl li.

Atik sa a egzamine twa etid preklinik, de kalite selil retin, ak limit ki separe pwoteksyon nan laboratwa ak tretman klinik pou je. Tandans lan rete menm: ble metilèn ka modifye estrès mitokondri nan selil retin anba kondisyon kontwole, epi rezilta sa a pa jistifye mete solisyon komèsyal sou je.

De kalite selil, de maladi diferan

Retin nan gen plizyè kouch, epi kouch la gen enpòtans. Limyè frape fotoreseptè ki nan pati ekstèn retin nan an premye. Siyal yo pase nan newòn entèmedyè pou rive nan selil gangliyonè ki nan pati entèn retin nan, kote akson yo soti atravè nè optik la. Dyagram ki anba a bay non kouch yo nan lòd.

Selil gangliyonè retin yo se selil ki afekte nan glokòm ak newopati optik. Lè rechèch sou entènèt mansyone ble metilèn ak glokòm, an jeneral yo vle di kouch entèn sa a ak akson li yo. Fotoreseptè yo se selil ki afekte nan dejenerasyon pati ekstèn retin nan. Se yo ki gen pi gwo bezwen enèji nan retin nan, epi yo fonksyone toupre limit respirasyon selilè yo, sa ki kite yo ak ti rezèv lè konplèks I mitokondri a pa fonksyone. Yon rezilta nan yon kalite selil pa aplike otomatikman nan lòt la, epi twa etid ki anba yo kenbe yo separe. Yo eksplike fason jeneral pou separe modèl ak konklizyon nan kijan pou li rechèch sou ble metilèn.

Selil gangliyonè nan je yon sourit vivan

Nan premye nan twa etid yo, chèchè yo te kreye yon modèl newopati optik lè yo te fè mikwo-enjeksyon rotenòn nan kò vitre youn nan je yon sourit, pandan yo te sèvi ak lòt je a kòm kontwòl ki te resevwa sèlman likid transpòtè a. Rotenòn bloke konplèks I mitokondri a, pwen antre ki fè elektwon yo pase soti nan NADH pou kontinye nan chèn nan. Move fonksyònman konplèks I a se tou karakteristik ki konekte modèl sa a ak newopati optik ereditè Leber, yon maladi selil gangliyonè yo ak nè optik la.

Vennkat èdtan apre, kouch selil gangliyonè nan je ki te resevwa rotenòn yo te pi mens epi li te gen mwens selil pase je kontwòl yo. Lè yo te enjekte ble metilèn ansanm ak rotenòn, yo te anpeche domaj sa a nan yon fason ki te depann de dòz la; pi gwo dòz yo te teste a (0.07 mg/kg, byen pi ba pase LD50 pou sourit) te prezève ni epesè a ni kantite selil yo. Tès paralèl sou omojena sèvo te montre de efè: ble metilèn te ranvèse estrès oksidatif rotenòn te pwovoke a epi li te ranvèse bès nan konsomasyon oksijèn nan. Otè yo te pwopoze yon mekanis eksitotoksik, kote rotenòn domaje selil amakrin ki fè modulasyon yo, selil gangliyonè yo tire twòp siyal, epi aksyon antioksidan an koupe domaj ki soti ladan l. Chimi yo pwopoze pou esplike pwoteksyon sa a dekri an detay nan mekanis mitokondri ble metilèn yo.

Rezilta sa a gen twa limit. Yo te enjekte koloran an ansanm ak toksin nan dirèkteman nan je a; sa se yon metòd administrasyon, pa yon pwogram tretman. Peryòd obsèvasyon an te 24 èdtan. Epi mezi sitokwòm oksidaz yo te monte nan toude gwoup ki te sibi domaj yo, yon bagay otè yo te entèprete kòm twòp aktivite olye kòm prèv respirasyon selilè te retabli nan retin vivan an.

Selil gangliyonè izole nan yon bwat kilti

Dezyèm etid la te retire je a nèt nan eksperyans lan. Chèchè yo te izole selil gangliyonè retin primè nan jèn rat epi yo te ekspoze yo ak rotenòn, stawosporin ki pwovoke apoptoz, oswa 72 èdtan ak oksijèn ba, epi yo te mezire siviv yo ak yon koloran ki distenge selil vivan ak selil mouri. Ble metilèn nan konsantrasyon 1 ak 10 micromolar nan mwayen kilti a te amelyore siviv kont chak agresyon, apeprè 1.5 a 1.9 fwa selon kondisyon an. Yon tès konplemantè te montre ble metilèn te prezève aktivite sitokwòm c oksidaz pandan yon ekspozisyon ak peroksid idwojèn.

Sa se famakoloji sou selil izole. Konpoze a te rive jwenn selil yo pa difizyon atravè mwayen kilti a nan yon konsantrasyon defini, san kòn, fim dlo nan je, kristalen, kò vitre, sikilasyon san, oswa sistèm iminitè sou chemen an. Senplisite sa a se objektif modèl la: li montre selil gangliyonè yo menm ka jwenn pwoteksyon lè konpoze a rive jwenn yo. Li pa di anyen sou si yon gout sou sifas kòn nan ta pote nenpòt konsantrasyon defini nan pati entèn retin nan. Yo te evite konsantrasyon ki pi wo pase 10 micromolar akoz toksisite pou menm selil sa yo, yon rapèl ke relasyon ant dòz ak repons nan yon bwat kilti mache nan toude sans.

Fotoreseptè nan sourit mitan ak yon liy selil

Twazyèm etid la konsène pati ekstèn retin nan. Chèchè yo te sèvi ak sourit Harlequin, ki gen yon defisyans nan faktè ki pwovoke apoptoz la, sa ki kite konplèks I a pa fin asanble, epi yo te egzamine estrikti fotoreseptè yo, makè segman ekstèn yo, ak entegrite mitokondri yo lè sourit yo te gen 11 mwa. Yo te bay ble metilèn pou li aji nan tout kò a atravè dlo pou bwè apre sevraj, nan apeprè 10 mg/kg pa jou. Sourit mitan ki te resevwa li yo te kenbe plis epesè retin, plis makè rodopsin ak opsin, ak yon estrikti mitokondri ki te pi an sante pase sourit mitan ki pa t resevwa li yo.

Travay konplemantè sou selil la te sèvi ak selil 661W, yon liy selil sourit imòtalize ki sanble ak fotoreseptè, yo te ekspoze ak rotenòn avèk oswa san ble metilèn pandan 24 èdtan. Siviv te amelyore nan 30 micromolar, epi konsantrasyon ki pi ba yo te nòmalize rapò NADH ak NAD+ la epi yo te diminye estrès oksidatif. Detay ki frape a se sa ble metilèn pa t fè: li pa t retabli ATP. Pwoteksyon an te mache ansanm ak soulajman estrès redoks ak kalmasyon chemen repons a estrès yo, tankou repons mitokondri a fas ak pwoteyin ki pa pliye yo ak makè mitofaji yo, olye li te retabli rezèv enèji a.

Distenksyon sa a enpòtan pou deklarasyon sou ble metilèn ak retin. Yon konpoze ka kenbe yon fotoreseptè ki anba estrès vivan san li pa korije defisi enèji li, sa ki limite nenpòt eksplikasyon terapetik ak estrès redoks olye ak yon rajenisman jeneral.

Twa etid yo kòtakòt

Konparezon ki anba a idantifye chak etid selon modèl ak wout administrasyon, paske se de kolòn sa yo ki detèmine sa rezilta a ka sipòte.

Chak liy se preklinik. Okenn liy pa t gen pasyan, pa t mezire vizyon, ni pa t teste yon fòmilasyon pou je.

Poukisa sa pa yon tretman pou glokòm

Swen pou glokòm bese presyon andedan je a. Newopwoteksyon eseye yon lòt bagay: kenbe selil gangliyonè yo ak akson yo vivan anba estrès. Etid ki anwo yo fè pati dezyèm objektif la, pa premye a. Okenn ladan yo pa t bese presyon, epi okenn pa t konpare ble metilèn ak yon tretman ki bese presyon. Se poutèt sa apwòch etabli pou glokòm ak kontwòl presyon rete yon kesyon separe de newopwoteksyon redoks, epi se poutèt sa yon rezilta sou siviv selil pa ka entèprete kòm vizyon ki sove.

Diferans nan wout administrasyon ranfòse pwen sa a. Yon enjeksyon nan kò vitre ansanm ak toksin nan mete yon kantite konnen toupre retin nan nan moman domaj la. Administrasyon nan dlo pou bwè ekspoze tout bèt la pandan plizyè mwa ak yon konsantrasyon nan retin ki pa konnen. Mwayen kilti a ekspoze selil ki san lòt baryè yo dirèkteman. Okenn nan sa yo pa pèmèt predi ki fraksyon nan yon dòz yo mete sou sifas je a ki ta travèse kòn nan, reziste eliminasyon pa dlo nan je, travèse kristalen an ak kò vitre a, epi rive nan youn nan kouch retin yo nan yon konsantrasyon ki itil. Pwoblèm administrasyon sa a fè pati kesyon ki pi laj sou wout administrasyon ak distribisyon ble metilèn, kote chak wout bezwen pwòp mezi konsantrasyon li.

Diferans nan tisi yo ajoute yon dezyèm baryè. Yon koloran ki rive devan je a pa rive dèyè li, epi yon konsantrasyon ki ede yon kouch ka domaje yon lòt. Solisyon komèsyal yo pa fabrike, esterilize, ajiste ak tanpon pH, ni prezève tankou preparasyon pou je, epi pite, pH, osmolalite ak eksipyan yo tout gen enpòtans pou ekspozisyon kòn nan ak anndan je a. Pa gen anyen nan rezilta sa yo sou retin ki valide mete solisyon konsa nan je oswa sou je. Kesyon sou estanda preparasyon yo dwe trete nan kad sekirite ak manipilasyon ble metilèn.

Kote prèv yo sispann

Lè yo li twa atik syantifik yo ansanm, yo sipòte yon deklarasyon limite: anba kondisyon kontwole, ble metilèn ka soulaje estrès redoks mitokondri nan newòn retin yo epi prezève estrikti yo. Deklarasyon an sispann kote kondisyon yo sispann. Modèl toksin ak modèl defo jenetik konplèks I pa glokòm, drizen, ni maladi ki gen rapò ak dyabèt. Peryòd kout ak mezi estrikti pa vle di vizyon ki konsève sou lontan. Epi yon konsantrasyon ki pwoteje nan yon konpatiman pa yon dòz pou yon lòt.

Pou gen yon agiman ki pi solid, yo ta bezwen plizyè eleman separe: yon ekspozisyon retin ki defini apre yon wout administrasyon ki ka sèvi nan klinik, mezi vizyon fonksyonèl nan bèt, yon benefis endepandan de presyon nan yon modèl ki enpòtan pou glokòm, epi apre sa done sou sekirite ak efikasite nan moun. Jiskaske eleman sa yo egziste, ble metilèn ak vizyon rete yon ipotèz rechèch ki gen limit klè: yon aksyon famakolojik mitokondri ki plozib nan retin nan, ki demontre sèlman nan selil ak bèt, san okenn chemen ki mennen soti nan etid sa yo pou rive nan tretman je.