Metyleenisinisen tunkeutumistestit injektiopulloille ja ampulleille

Metyleenisinisen tunkeutumistestillä selvitetään, voiko ulkopuolinen väriaineliuos päästä suljetun pakkauksen sisään määritellyissä rasitusolosuhteissa. Ampullin tai injektiopullon sisällä oleva sininen väriaine voi paljastaa tiiviyden rikkoutumisen. Jos väriainetta ei havaita, testi ei havainnut tunkeutumista kyseisissä olosuhteissa. Se ei yksinään osoita tuotteen steriiliyttä.

Tämä ero määrittää, miten testi tulisi suunnitella. Rikkoutuneella injektiopullolla on helppo tehdä silmämääräisesti vakuuttava demonstraatio. Sen osoittaminen, että menetelmä tunnistaa luotettavasti tietyn tuotteen kannalta olennaiset viat, vaatii huomattavasti enemmän työtä.

Seuraa väriaineen kulkua pakkauksen läpi

Tyypillisessä upotustestissä suljetut säiliöt asetetaan väriainekylpyyn ja altistetaan määritellylle painejaksolle. Ulkoisen paineen alentaminen voi päästää kaasua poistumaan vuotavasta säiliöstä. Paineen palauttaminen säiliön ollessa edelleen upotettuna voi ajaa väriaineliuosta sisään. Tämän jälkeen ulkopinta puhdistetaan ja sisältö tarkastetaan silmämääräisesti tai analysoidaan merkkiaineen havaitsemiseksi.

Koko kulkureitillä on merkitystä: rasituksen on kohdistuttava vuotokohtaan, nesteen on kuljettava sen läpi ja sisälle jäävän väriaineen määrän on oltava havaittavissa. Testi voi epäonnistua missä tahansa näistä vaiheista. Tuotteen tai loukkuun jääneen kaasun tukkima pieni kanava ei välttämättä käyttäydy kuten avoin reikä, jonka nimellishalkaisija on sama.

Umpeen sulatetussa lasiampullissa olennainen vika voi olla halkeama tai puutteellinen sulku. Tulpalla suljetun injektiopullon järjestelmään kuuluvat myös lasipullon suuosa, elastomeeri ja sulkimen kiinnitystapa. Puhkaistun tulpan uudelleentiivistymiskyvyn testaaminen vastaa lisäksi käytönaikaiseen kysymykseen. Nämä pakkausongelmat liittyvät toisiinsa, mutta niiden testikappaleet eivät ole keskenään vaihtokelpoisia.

Pitoisuus on osa menetelmää, ei koko menetelmä

Kysymykseen ”Mitä metyleenisinisen pitoisuutta vuototestissä käytetään?” ei ole yhtä vastausta ilman menettelyn yksilöimistä. Väriainepitoisuus, liuoksen koostumus, altistusaika, paine, täyttötilavuus ja havaitsemismenetelmä vaikuttavat yhdessä.

Vuodelta 2008 peräisin oleva arkistoitu USP Pharmacopeial Forum -asiakirja kuvaa 0.1% liuoksen, ilmaistuna pitoisuutena 1 g/L, tiettyä elastomeerisen sulkimen itsestään tiivistymisen testiä varten. Tämä historiallinen esimerkki ei ole yleispätevä ohje ampulleille, esitäytetyille ruiskuille tai kaikille nykyisille injektiopullojärjestelmille.

Nykyistä menetelmävalintaa varten USP:n luku 1207 tarjoaa steriilien tuotteiden pakkauseheyden viitekehyksen, kun taas luku 1207.2 käsittelee vuototestitekniikoita. Sen johdannossa lukijoita kehotetaan nimenomaisesti tarkistamaan viitattujen standardien soveltamisala ja uusimmat versiot. USP:n luku 382 käsittelee elastomeerisia osia sisältävien parenteraalisten pakkausjärjestelmien toiminnallista soveltuvuutta. Vanha työpajaluonnos ei voi korvata sovellettavaa virallista tekstiä ja validoitua menettelyä.

Käytännön kysymys on siis tämä: havaitseeko tämä kokonaismenetelmä kyseisen tuotteen ja pakkauksen kannalta olennaisen vuodon? Tummemman väriainekylvyn valitseminen ei vastaa siihen. Kirjaa liuoksen koostumus ja pitoisuus yksiselitteisesti, mukaan lukien lisäaineet ja kaikkien prosenttiosuuksien laskentaperuste.

Kontrollit erottavat käyttökelpoisen tuloksen epäonnistuneesta testistä

Käytä tätä tulkinnan työnkulkua arvioidessasi menetelmää tai testiraporttia. Kontrollien yksilöinti ja hyväksymiskriteerit on määritettävä ennen tuntemattomien näytteiden tulkintaa.

Vaihe	Vaadittava näyttö	Jos näyttö puuttuu	Vältettävä virheellinen päätelmä
Määritä tarkoitus	Tuote, pakkauksen kokoonpano, elinkaaren vaihe ja selvitettävä vuoto-ongelma	Testi saattaa vastata väärään pakkauksia koskevaan kysymykseen	”Mikä tahansa vuototesti soveltuu.”
Altista kulkureitti rasitukselle	Pakkaukset, joissa on tunnettuja vikoja ja jotka edustavat menetelmälle ilmoitettua havaitsemiskykyä	Kirkas tuntematon näyte voi johtua tehottomasta rasituksesta	”Pahasti rikkoutunut kontrolli toimi, joten pienet viat ovat havaittavissa.”
Tarkista tausta	Ehjät negatiiviset kontrollit, joita käsitellään näytteiden mukana	Ulkopinnan kontaminaatio tai näytematriisin väri voidaan tulkita virheellisesti tunkeutumiseksi	”Jokainen sininen signaali tuli vuotokohdan kautta.”
Tarkista mittaus	Sisältö, johon on lisätty väriainetta, tai soveltuvat analyyttiset standardit	Sisältö voi peittää pienen väriainepitoisuuden	”Herkkä laite takaa herkän pakkaustestin.”
Tulkitse näyte	Hyväksyttävät kontrollit ja ennalta määritetty päätössääntö	Tulos edellyttää selvitystä	”Väriaineen puuttuminen tarkoittaa steriiliyttä ja pyrogeenittomuutta.”

Näyte, johon on lisätty väriainetta, ja tarkoituksellisesti viallinen pakkaus vastaavat eri kysymyksiin. Väriaineen lisääminen selvittää, voidaanko jo sisällä oleva väriaine havaita. Viallinen pakkaus selvittää, voiko väriaine päästä sisään ja tulla sitten havaituksi koko työnkulun kautta. Huolellisessa tutkimuksessa nämä kyvyt on erotettava toisistaan.

Kaksi havaitsemisrajaa sekoitetaan helposti

Analyyttinen toteamisraja koskee sitä, kuinka pienen väriainemäärän mittaus voi erottaa taustasta. Pakkaustestin havaitsemiskyky koskee sitä, mitkä viat koko menetelmä havaitsee ja kuinka johdonmukaisesti. Erinomainen analyyttinen toteamisraja ei voi korjata rasitusta, joka ei saa väriainetta kulkemaan olennaisen vuotokohdan läpi.

Tästä syystä väriaineen tunkeutumistestin tulokset ovat todennäköisyyspohjaisia: olemassa oleva vika ei takaa havaittavaa merkkiaineen kulkua jokaisella rasituskerralla. Suorituskyvyn osoittaminen edellyttää toistettuja testejä ja asianmukaisesti karakterisoituja vikoja sen sijaan, että määritettäisiin yleispätevä reiän vähimmäiskoko.

Alkuperäistutkimukset havainnollistavat riippuvuutta järjestelmästä. Vuoden 2016 esitäytettyjä ruiskuja koskevassa tutkimuksessa Lu ja hänen kollegansa raportoivat, ettei metyleenisininen soveltunut pienten tiiviysvikojen luotettavaan havaitsemiseen heidän tutkimissaan lääkevalmistetta sisältävissä ruiskuissa. He kehittivät lähestymistavan, jossa käytettiin fluoresoivaa väriainetta ja spektroskooppista havaitsemista. Havainto tukee merkkiaineen ja mittaustavan arviointia yhdessä; se ei määritä yhtä korvaavaa menetelmää kaikille pakkauksille.

Toisessa vuonna 2000 julkaistussa väriaineen tunkeutumistutkimuksessa käytettiin FD&C Red No. 40 -väriainetta, ei metyleenisinistä, ja verrattiin väriaineen ja mikrobien tunkeutumista käyttäen mikroputkilla varustettuja injektiopulloja, joiden tiiviys oli rikottu. Samankaltainen herkkyys kyseisessä koejärjestelmässä ei tee jokaisesta siniseen väriaineeseen perustuvasta menettelystä mikrobialtistustestiä vastaavaa.

Pidä neljä laatukysymystä erillään

Pakkauksen vuotaminen: Voiko materiaali kulkea pakkauksen rajan yli testiolosuhteissa? Väriaineen tunkeutuminen antaa näyttöä tästä kysymyksestä.

Mikrobiologinen eheys: Voiko pakkaus säilyttää mikrobeilta suojaavan esteensä olennaisissa säilytys- ja käyttöolosuhteissa? Fyysisen testin yhdistäminen tähän väitteeseen edellyttää asianmukaisia validointiperusteluja. FDA:n ohje eheystestauksesta säilyvyystutkimusten protokollissa tukee validoituja lähestymistapoja pakkauksen eheyden säilymisen osoittamiseen. Se sulkee nimenomaisesti pois tuotteen alkuperäisen steriiliystestauksen korvaamisen: ehjä pakkaus on voitu täyttää kontaminoituneella materiaalilla.

Pyrogeenit ja endotoksiinit: Vuototesti ei mittaa näitä epäpuhtauksia. FDA:n tuotantoa ja prosessivalvontaa koskevassa ohjeessa mikrobiologista kontaminaatiota sekä pyrogeeni- tai bakteeriendotoksiinitestausta käsitellään erillisinä laatuvaatimuksina. Kirkas väriainekoetulos ei anna kumpaakaan mittaustulosta.

Lasipinnan kestävyys: Säiliö voi pysyä vuotamattomana, vaikka sen sisäpinnalle muodostuu hiukkasia tai siitä irtoaa kerroksia. USP:n luku 1660 käsittelee sisäpinnan kestävyyttä ja lasihiukkasten muodostumista. Lasin tutkimiseen käytetty pintavärjäys tai mikroskopia ei ole sama havainto kuin väriaineen pääsy suljettuun injektiopulloon.

Lopuksi fistelien ja anatomisten vuotojen kliinisillä väriainetesteillä on eri kohde, tarkoitus ja tulkinta. Lääkepakkauksen testi ei tarjoa kliinistä tutkimusprotokollaa. Metyleenisinisen analyyttisissä käyttötarkoituksissa väriaine toimii tässä merkkiaineena: päätelmä riippuu testatusta kulkureitistä ja sen kontrolleista, ei pelkästään sinisen värin esiintymisestä tai puuttumisesta.