Artikkel
Metüülsinine ei ole metüleensinine: CAS-numbrid, struktuurid ja kasutusalad

Töölaual seisab kaks pudelit. Ühele on kirjutatud metüülsinine. Teisele metüleensinine. Väsinud lugeja näeb sama sõna kaks korda. Keemia seisukohast on need kaks erinevat molekuli.
See on praktiliste tagajärgedega nimetuste segadus. Vale värvaine tellimisel toimib värvimine teisiti, redoksindikaatori värvus ei ilmu või sisaldab koostis ühendit, mille sobivust pole keegi kinnitanud. Lahendus on lihtne: käsitle üldnimetust vihjena ja tunnust otsuse alusena. Kõigepealt kontrolli CAS-numbrit, Colour Indexi numbrit ja hüdratatsiooniastet.
Lühivastus
Metüleensinine on väike katioonne fenotiasiinvärvaine, C.I. 52015, mille aluseks on kompaktne kolme rõngaga kromofoor ja kaks dimetüülaminorühma. Metüülsinine on suur anioonne triarüülmetaanvärvaine, C.I. 42780, mis koosneb sulfoneeritud trifenüülmetaani üksustest. Neil on ühine värviperekond ja osa nimetusest. Muus osas on neil ühist väga vähe.
Toluidiinsinine O on metüleensinisele lähedasem. Mõlemad on katioonsed tiasiinvärvained, kuid toluidiinsinisel O on üks aminorühm ja rõnga metüülasendaja seal, kus metüleensinisel on teine dimetüülaminorühm. See väike muutus nihutab neeldumismaksimumi ja muudab värvimise selektiivsust, nii et ka need kaks ei ole omavahel asendatavad.
Identifitseerimistabel: kontrolli neid välju iga tellimuse puhul
Katalooginimetused muutuvad. Müüjad kasutavad sünonüüme vabalt. Allolevad väljad ei muutu ning korralik analüüsisertifikaat loetleb need. PubChemis on metüleensinine kirjas metüültioniiniumkloriidina, C.I. Basic Blue 9, mis on kõige järgneva lähtepunkt.
| Värvaine | Levinud sünonüümid | CAS | C.I. | Valem ja molaarmass | Klass |
|---|---|---|---|---|---|
| Metüleensinine | Metüültioniiniumkloriid, Basic Blue 9 | 61-73-4 veevaba; 7220-79-3 trihüdraat; 122965-43-9 täpsustamata hüdraat | 52015 | C16H18ClN3S, 319.85 veevaba; C16H24ClN3O3S, 373.90 trihüdraat | Katioonne fenotiasiin- ehk tiasiinvärvaine |
| Metüülsinine | Acid Blue 93, Cotton Blue, Water Blue, lahustuv aniliinsinine | 28983-56-4 | 42780 | C37H27N3Na2O9S3, 799.80 (kaubanduslik sool) | Anioonne triarüülmetaani ehk trifenüülmetaani happeline värvaine |
| Toluidiinsinine O | Tolooniumkloriid, Basic Blue 17 | 92-31-9 | 52040 | C15H16ClN3S, 305.83 | Katioonne fenotiasiin- ehk tiasiinvärvaine, tugevalt metakromaatiline |
Enamik ostuvigu on seotud selle tabeli kahe üksikasjaga. Esiteks on metüleensinise eri hüdratatsiooniastmetel mitu CAS-numbrit ning 122965-43-9 tähistab täpsustamata hüdraati, mitte konkreetset trihüdraati (7220-79-3), nagu on märgitud USP monograafia vastavustabelis. Vale molaarmassi põhjal kaalumine nihutab märkamatult kõiki edaspidi arvutatavaid kontsentratsioone. Teiseks sisaldab ühe müüja toluidiinsinise O sünonüümide loend nimetust Methylene Blue T50, mis tähendab, et ainult nime järgi kataloogist otsides võib leida täiesti vale värvaine.
Struktuur selgitab käitumist
Kujutle neid kahte kromofoori kõrvuti ja segadus kaob. Metüleensinise keskmes on fenotiasiiniumisüsteem: kolm kokkusulanud rõngast, millest keskmises on väävel ja lämmastik, ning kummaski otsas dimetüülaminorühm. Värvust andev osake on metüültioniiniumkatioon koos kloriidse vastasiooniga. See on väike, tasapinnaline, positiivse laenguga ja valmis seostuma negatiivse laenguga rakukomponentidega.
Metüülsinise mass on ligikaudu kaks ja pool korda suurem. Selle värvus tuleneb trifenüülmetaani tuumast, mille küljes on sulfoneeritud anilinofenüülrühmad; seda turustatakse dinaatriumsoolana. Need sulfonaatrühmad teevad sellest anioonse happelise värvaine, mille laeng on vastupidine ja afiinsus kudede suhtes täiesti erinev. Kui metüleensinine siseneb rakkudesse ja osaleb redokstsüklis, siis metüülsinist kasutatakse kollageeni ja sidekoe värvimiseks ning Cotton Blue värvainena seenepreparaatides, näiteks laktofenool-puuvillasinise protokollides. Ühe asendamine teisega ei anna sama tulemuse nõrgemat versiooni. See annab teistsuguse katse.
Toluidiinsinine O säilitab fenotiasiiniumi põhistruktuuri, mistõttu selle käitumine sarnaneb metüleensinisega, kuid ei kattu sellega. Selle neeldumismaksimum on ligikaudu 626 nm, metüleensinisel aga umbes 660 kuni 665 nm. Happeliste koekomponentide (nuumrakkude graanulite, mutsiinide, kõhre ja nukleiinhapperikaste struktuuride) metakromaatiline värvimine järgib oma selektiivsust, mida kirjeldatakse histoloogia ülevaadetes. Labor, mis asendab metüleensinise TBO-ga, peaks ootama nihkunud spektreid ja teistsugust kontrasti, mitte soodsat asendusainet.
Milleks iga värvainet tegelikult kasutatakse
Metüleensinist kasutati algul tekstiilivärvina, seejärel bakterioloogias, hematoloogias ja mikroskoopias; seda arengut võtab kokku selle ajalugu käsitlev kirjandus. Selle teine kasutussuund on keemiline: oksüdeeritud vorm on sinine ja redutseeritud leukometüleensinine peaaegu värvitu, mistõttu see toimib redoksindikaatorina. Kolmas kasutussuund on farmaatsia. Metüültioniiniumkloriid on retseptiravimi PROVAYBLUE toimeaine, mille näidustus on omandatud methemoglobineemia, ning just see meditsiiniline roll tõstab puhtusnõuded märksa kõrgemale kui värvimiseks või tekstiilitööstuseks mõeldud kvaliteediklassidel. Artiklis kuidas metüleensinine toimib redoksvärvainena selgitatakse nende kasutusalade taga olevat mehhanismi.
Metüülsinine sellist arenguteed ei läbinud. See on endiselt paberi, tekstiili ja naha värvaine ning mikroskoopias kasutatav värv: sertifitseeritud kollageenivärv Mallory-tüüpi sidekoe värvimismeetodites, Fast Greeni asendaja Gomori trikroomvärvimise variantides ja seente värv mükoloogias. Mõne metüülsinise toote pH-indikaatori vahemik on ligikaudu 9.4 kuni 14. Ükski neist omadustest ei tee sellest redokstoimelist raviainet ning ükski värvimissertifikaat ei muuda seda selliseks.
Toluidiinsinine O on eelkõige metakromaatiliste omadustega bioloogiline värv, mida kasutatakse histoloogias ja mikrobioloogias, ning eraldi ka kliiniline vitaalvärv, mis aitab enne biopsiat piiritleda kahtlasi suuõõne kahjustusi. See on abivahend biopsiakohtade valimiseks, mitte histopatoloogia asendus. Igaüks, kes võrdleb toluidiinsinist ja metüleensinist diagnostiliseks kasutuseks või koostise väljatöötamiseks, peaks võrdlema spektreid, sihtkudesid ja kvaliteediklassi dokumentatsiooni, mitte nimetusi.
Sarnased nimetused, mis eksitavad ostjaid
Kontrollnimekirja tasub lisada veel kolm nimetust. Uus metüleensinine N ei ole metüleensinine. See on C.I. 52030 (CAS 1934-16-3), etüülitud ja rõngas metüülitud fenotiasiin, mida kasutatakse histoloogias ja hematoloogias, ning uue metüleensinisega värvimise meetodeid käsitleb eraldi kirjandus. Azure B on lähedasem: ühe N-demetüülimisega saadud metüleensinise analoog (CAS 531-55-5, C.I. 52010), mis on ühtlasi metüleensinise peamine metaboliit ja metüleensinisematerjalis dokumenteeritud lisand. Seetõttu seob USP programm metüleensinise võrdlusmaterjali Azure B standardiga. Nende kahe seost ja lisandiprofiili määramise olulisust käsitleb artikkel Azure B kui lisand ja metaboliit. Kristallviolett, mida mõnikord müüakse vana nimetuse gentsiaanviolett all, on triarüülmetaanvärvaine (CAS 548-62-9, C.I. 42555), millel puudub tiasiinrõngas täielikult.
Kontrolli aine identsust enne maksmist
Põhjalik ostuspetsifikatsioon nimetab täpse kemikaali, CAS-numbri, C.I.-numbri, hüdratatsiooniastme ja kvaliteediklassi ning kontrollib neid analüüsisertifikaadi, mitte esikülje etiketi järgi. Neeldumismaksimum on kiire sõltumatu kontroll: metüleensinisel ligikaudu 665 nm, toluidiinsinisel O ligikaudu 626 nm ja metüülsinisel ligikaudu 595 kuni 605 nm sellele ette nähtud happelistes tingimustes. Vales kohas asuv maksimum tähendab valet värvainet, ükskõik mida pudelil väidetakse.
Kvaliteediklassi dokumentatsioon vastab teisele küsimusele kui aine keemilise identsuse kontroll. Biological Stain Commissioni sertifitseerimisel kontrollitakse konkreetse partii värvainesisaldust ja värvimisomadusi, mis on oluline siis, kui eesmärk on värvimise korratavus. USP nõuetele vastavus hõlmab farmatseutilise aine identsust, puhtust, orgaanilisi lisandeid, lahustijääke, elementlisandeid ja mikrobioloogilist kontrolli, mis on oluline siis, kui ainet tarvitatakse. Nende kahe programmi eesmärgid kattuvad, kuid sisu erineb, mistõttu üks sertifikaat ei saa teist asendada.
Siin muutub kvaliteetne ostmine konkreetseks. Kõrge puhtus on oluline, sest USP nõuetele mittevastav metüleensinine on tavaliselt tekstiilikvaliteediga ning sisaldab lisandeid, nagu Azure B, raskmetallid või lahustijäägid, mida ükski värvimisprotokoll ei kontrolli. Enamik müüjaid, kes väidavad vastavust USP nõuetele, kontrollivad ainult raskmetalle ja kuulutavad töö tehtuks. Täielik vastavus hõlmab identsust, sisaldust, orgaanilisi lisandeid, lahustijääke, elementlisandeid, kuumutusjääki, mikrobioloogilisi piirnorme ja bakteriaalseid endotoksiine. Artikkel kuidas valida farmatseutilise kvaliteediga metüleensinist selgitab selle dokumentatsiooni lugemist. Blupreme teeb koostööd metüleensinise farmaatsiatootjaga, kontrollib kogu USP spetsifikatsiooni ja avaldab täieliku analüüsisertifikaadi (COA). See ongi selles artiklis soovitatud järjekindla identsuskontrolli praktiline tähendus.