Προκαλεί το μπλε του μεθυλενίου καρκίνο; Τοξικολογικά δεδομένα

Το μπλε του μεθυλενίου έχει δώσει ενδείξεις όγκων σε μακροχρόνια πειράματα σε ζώα και θετικά αποτελέσματα σε αρκετές εργαστηριακές δοκιμές γενετικής βλάβης. Αυτά τα ευρήματα απαιτούν προσοχή. Δεν καθορίζουν την πιθανότητα να αναπτύξει ένα άτομο καρκίνο μετά από μια συγκεκριμένη έκθεση.

Η αξιολόγηση του IARC που δημοσιεύθηκε το 2016 κατέταξε το μπλε του μεθυλενίου στην Ομάδα 3, πράγμα που σημαίνει ότι η καρκινογόνος δράση του στον άνθρωπο δεν μπορούσε να ταξινομηθεί. Η ομάδα εργασίας δεν διέθετε δεδομένα για καρκίνο στον άνθρωπο και έκρινε ότι τα δεδομένα από ζώα ήταν περιορισμένα. Η Ομάδα 3 δεν σημαίνει ότι έχει αποδειχθεί πως είναι ακίνδυνο. Αντίστοιχα, ένα εύρημα σε ζώα δεν σημαίνει ότι κάθε ανθρώπινη έκθεση αποτελεί αποδεδειγμένη αιτία καρκίνου.

Τρία ερωτήματα που χρειάζονται ξεχωριστές απαντήσεις

Η καρκινογόνος δράση αφορά την ανάπτυξη όγκων. Μια μακροχρόνια μελέτη σε ζώα μπορεί να εντοπίσει πρότυπα εμφάνισης όγκων μετά από καθορισμένη έκθεση. Η γονοτοξικότητα αφορά βλάβες στο γενετικό υλικό ή συναφή κυτταρικά συμβάντα. Μια θετική δοκιμή μεταλλαξιγένεσης παρέχει ένα προειδοποιητικό σήμα, αλλά δεν μετρά άμεσα περιστατικά καρκίνου σε ανθρώπους. Ο κίνδυνος για τον άνθρωπο αφορά την πιθανότητα βλάβης υπό πραγματικές συνθήκες έκθεσης.

Αυτά τα ερωτήματα απαιτούν διαφορετικές μετρήσεις. Η καταμέτρηση βακτηριακών μεταλλαγμένων στελεχών, η εξέταση κυττάρων αίματος ποντικών και η διάγνωση όγκων κατά τη νεκροψία δεν αποτελούν εναλλάξιμα τελικά σημεία. Ούτε ένα πείραμα θεραπείας που δείχνει ότι μια ουσία βλάπτει καρκινικά κύτταρα αποδεικνύει κατά πόσο η επαναλαμβανόμενη έκθεση μπορεί να προκαλέσει την έναρξη όγκων σε υγιή ιστό. Η ξεχωριστή συζήτηση για το μπλε του μεθυλενίου στην έρευνα για τον καρκίνο εξετάζει τους ισχυρισμούς σχετικά με τη θεραπεία.

Σύγκριση μελετών: οι πραγματικές χρόνιες εκθέσεις

Το βασικό πείραμα χρησιμοποίησε τριένυδρο μπλε του μεθυλενίου, χορηγούμενο σε υδατικό διάλυμα μεθυλοκυτταρίνης 0.5% μέσω στοματικής γαστρικής διασωλήνωσης, δηλαδή μετρημένης χορήγησης μέσω σωλήνα στο στομάχι. Κάθε ομάδα δόσης της χρόνιας μελέτης περιλάμβανε 50 αρσενικά και 50 θηλυκά ζώα από κάθε είδος. Η χορήγηση γινόταν πέντε ημέρες την εβδομάδα επί δύο χρόνια, σύμφωνα με την αναφορά μελέτης των Auerbach και συνεργατών.

Ο πίνακας διατηρεί τα συμπεράσματα του NTP ανά είδος. Οι ποσότητες είναι χιλιοστόγραμμα του υλικού που δοκιμάστηκε ανά κιλό σωματικού βάρους του ζώου τις ημέρες χορήγησης, όχι συστάσεις για ανθρώπους. Τα ζώα μηδενικής δόσης έλαβαν τον φορέα.

Μοντέλο	Ομάδες δόσης, mg/kg	Οδός και διάρκεια	Συμπέρασμα NTP και σχετικό εύρημα
Αρσενικοί αρουραίοι F344/N	0, 5, 25, 50	Στοματική γαστρική διασωλήνωση· πέντε ημέρες/εβδομάδα· δύο χρόνια	Κάποιες ενδείξεις: αυξήθηκαν τα αδενώματα των νησιδιακών κυττάρων του παγκρέατος και ο συνδυασμένος αριθμός αδενωμάτων/καρκινωμάτων.
Θηλυκοί αρουραίοι F344/N	0, 5, 25, 50	Ίδιο πρόγραμμα	Δεν υπήρχαν ενδείξεις καρκινογόνου δράσης υπό αυτές τις συνθήκες.
Αρσενικά ποντίκια B6C3F1	0, 2.5, 12.5, 25	Στοματική γαστρική διασωλήνωση· πέντε ημέρες/εβδομάδα· δύο χρόνια	Κάποιες ενδείξεις: αυξήθηκαν τα καρκινώματα του λεπτού εντέρου και ο συνδυασμένος αριθμός αδενωμάτων/καρκινωμάτων. Το κακόηθες λέμφωμα ενδέχεται επίσης να σχετιζόταν.
Θηλυκά ποντίκια B6C3F1	0, 2.5, 12.5, 25	Ίδιο πρόγραμμα	Αμφίβολες ενδείξεις: οριακές αυξήσεις στο κακόηθες λέμφωμα.

Ο όρος «κάποιες ενδείξεις» είναι κατηγορία του NTP για ένα θετικό πειραματικό εύρημα με μικρότερη ισχύ από τις «σαφείς ενδείξεις». Ο όρος «αμφίβολες» περιγράφει ένα αβέβαιο εύρημα. Αυτές οι κατηγορίες εκφράζουν την ισχύ των δεδομένων και όχι ένα ποσοστό κινδύνου ή μια κατάταξη της ισχύος μιας καρκινογόνου ουσίας.

Το αποτέλεσμα στους αρσενικούς αρουραίους δεν ακολουθούσε μια σταθερά αυξανόμενη κλιμάκωση. Αδένωμα ή καρκίνωμα των νησιδίων του παγκρέατος εμφανίστηκε σε 4/50 ζώα ελέγχου και σε 9/50, 14/50 και 8/50 ζώα στις αυξανόμενες δόσεις. Η δημοσιευμένη εργασία αναφέρει στατιστική σημαντικότητα μόνο για τη μεσαία δόση. Αυτό καθιστά ανακριβή μια απλή γραμμική ερμηνεία· δεν αποδεικνύει ότι η υψηλότερη δόση ήταν προστατευτική. Το αδένωμα είναι καλοήθης όγκος, ενώ το καρκίνωμα είναι κακοήθης. Ένα συνδυασμένο τελικό σημείο δεν πρέπει να περιγράφεται σαν κάθε όγκος που καταμετρήθηκε να ήταν καρκίνος.

Γιατί διαφορετικές περιλήψεις ακούγονται αντιφατικές

Οι τρέχουσες πληροφορίες συνταγογράφησης του PROVAYBLUE αναφέρουν τα παγκρεατικά ευρήματα στους αρσενικούς αρουραίους, αλλά δεν περιγράφουν νεοπλασματικά ευρήματα σχετιζόμενα με το φάρμακο στα ποντίκια. Η ερευνητική εργασία αναφέρει ότι οι αυξήσεις νεοπλασιών στα ποντίκια δεν ήταν στατιστικά σημαντικές, ενώ επισημαίνει θετικές τάσεις. Παρ' όλα αυτά, το NTP απέδωσε στα ποντίκια τις κατηγορίες που παρουσιάζονται παραπάνω.

Η ανάλυση του IARC για τις μελέτες σε ζώα διευκρινίζει μια σημαντική στατιστική διάκριση: τα εντερικά ευρήματα στα αρσενικά ποντίκια παρουσίαζαν σημαντικές τάσεις ανάλογα με τη δόση, αλλά οι επιμέρους ομάδες που έλαβαν δόση δεν ήταν σημαντικές στις κατά ζεύγη συγκρίσεις με τις ομάδες ελέγχου. Ο έλεγχος ενός συνολικού προτύπου μεταξύ των δόσεων διαφέρει από τον ξεχωριστό έλεγχο κάθε ομάδας. Οι αναγνώστες θα πρέπει να διατηρούν την πηγή και τη διατύπωσή της αντί να συμπυκνώνουν όλα αυτά τα ευρήματα είτε στο «τα ποντίκια ανέπτυξαν καρκίνο» είτε στο «η μελέτη στα ποντίκια ήταν αρνητική». Κανένα από αυτά τα δεδομένα δεν παρέχει μετρημένο ποσοστό καρκίνου στον άνθρωπο.

Σύγκριση μελετών: τελικά σημεία γενετικής βλάβης

Η ενότητα γενετικής τοξικολογίας της Τεχνικής Αναφοράς 540 του NTP περιγράφει ένα διαφορετικό σύνολο πειραμάτων. Το S9 είναι ένα εργαστηριακό μείγμα που περιέχει ηπατικά ένζυμα και χρησιμοποιείται για την προσομοίωση της μεταβολικής ενεργοποίησης. Η παρουσία του δεν μετατρέπει μια κυτταρική δοκιμή σε μελέτη έκθεσης ολόκληρου του οργανισμού.

Σύστημα δοκιμής	Πραγματικές συνθήκες έκθεσης	Μετρούμενο τελικό σημείο και αποτέλεσμα
Δοκιμές βακτηριακής μεταλλαξιγένεσης, δεύτερη παρτίδα που δοκιμάστηκε	Salmonella: 0.25–150 µg/plate; E. coli: 0.25–1,500 µg/plate; με και χωρίς S9 από ήπαρ αρουραίου	Αυξημένες μεταλλάξεις στα στελέχη που εξετάστηκαν.
Καλλιεργημένα κύτταρα ωοθήκης κινεζικού χάμστερ	Η δοκιμή ανταλλαγής αδελφών χρωματίδων περιλάμβανε 0.17–2.5 µg/mL χωρίς S9, έως 5 µg/mL με S9· η δοκιμή χρωμοσωμικών ανωμαλιών χρησιμοποίησε 4.7–22 µg/mL	Θετικά αποτελέσματα για ανταλλαγές και χρωμοσωμικές ανωμαλίες.
Αρσενικά ποντίκια, οξύ πείραμα	Εφάπαξ ενδοπεριτοναϊκή ένεση: 25, 50 ή 150 mg/kg· δείγματα στις 48 ώρες	Καμία αύξηση στα μικροπυρηνωμένα ερυθροκύτταρα του μυελού ή του αίματος.
Αρσενικά και θηλυκά ποντίκια, επαναλαμβανόμενο πείραμα	Στοματική γαστρική διασωλήνωση: 25, 50, 100 ή 200 mg/kg· πέντε ημέρες/εβδομάδα επί τρεις μήνες	Καμία αύξηση στα μικροπυρηνωμένα ερυθροκύτταρα του περιφερικού αίματος.

Ο μικροπυρήνας είναι ένα μικρό πρόσθετο πυρηνικό σωμάτιο που μπορεί να αντανακλά θραύση ή απώλεια χρωμοσώματος κατά την κυτταρική διαίρεση. Μια αρνητική δοκιμή σε κύτταρα αίματος απαντά σε αυτό το συγκεκριμένο ερώτημα στα κύτταρα που εξετάστηκαν. Δεν μπορεί να αποκλείσει κάθε είδος βλάβης του DNA σε κάθε όργανο. Αντίστροφα, μια θετική δοκιμή σε καλλιεργημένα κύτταρα δεν μας λέει ποια συγκέντρωση έφτασαν οι ιστοί ενός ανθρώπου.

Οι πληροφορίες συνταγογράφησης καταγράφουν επίσης αυτό το συνολικό πρότυπο: θετικές βακτηριακές δοκιμές και δοκιμές σε καλλιεργημένα κύτταρα, αρνητικές δοκιμές μικροπυρήνων σε ποντίκια. Το να χαρακτηρίζεται το μπλε του μεθυλενίου απλώς ως «γονοτοξικό» ή «μη γονοτοξικό» παραλείπει πληροφορίες που είναι σημαντικές για την ερμηνεία.

Τι σημαίνει αυτό για μια ανθρώπινη έκθεση

Οι μελέτες δεν παρέχουν ένα επικυρωμένο ημερήσιο όριο για τον άνθρωπο κάτω από το οποίο δεν υπάρχει κίνδυνος καρκίνου. Η διαίρεση μιας δόσης αρουραίου με έναν συντελεστή σωματικού βάρους δεν θα έλυνε τις διαφορές στην απορρόφηση, τον μεταβολισμό, την οδό, τη συχνότητα έκθεσης ή τη διάρκεια σε όλη τη ζωή. Θα παρήγαγε μια μετατρεμμένη ποσότητα, όχι απόδειξη ασφάλειας.

Ένα διετές πείραμα γαστρικής διασωλήνωσης και μια σύντομη ενδοφλέβια θεραπεία υπό ιατρική επίβλεψη εξετάζουν διαφορετικά ερωτήματα. Αυτή η διάκριση εμποδίζει την άμεση αριθμητική αναγωγή· δεν αναιρεί τα ευρήματα στα ζώα. Μια χρήσιμη αξιολόγηση ξεκινά από την ακριβή ένωση και σύνθεση, την ποσότητα, την οδό, τη συχνότητα, τη διάρκεια και τον λόγο χρήσης. Η φράση «μερικές σταγόνες» παραλείπει τόσο τη συγκέντρωση όσο και τον μετρημένο όγκο.

Εάν το μπλε του μεθυλενίου χορηγήθηκε για ιατρικό λόγο, τα ευρήματα για τους όγκους από μόνα τους δεν μπορούν να καθορίσουν αν τα οφέλη αυτής της θεραπείας υπερίσχυσαν των κινδύνων της. Εάν εξετάζεται η επαναλαμβανόμενη προαιρετική χρήση, ένας μη μετρημένος μακροπρόθεσμος κίνδυνος καρκίνου δεν θα πρέπει να περιγράφεται ως μηδενικός. Πιο άμεσα ζητήματα, συμπεριλαμβανομένων των αλληλεπιδράσεων με φάρμακα και της ευαισθησίας στην αιμόλυση, εξετάζονται στις ανεπιθύμητες ενέργειες και αντενδείξεις.

Για περαιτέρω ανάγνωση, χρησιμοποιήστε τη βιβλιοθήκη ερευνών για να διακρίνετε τις μελέτες σε ανθρώπους από τα πειράματα σε ζώα και κύτταρα. Το βασικό ερώτημα για κάθε εργασία είναι ποια έκθεση εξέτασε και ποιο αποτέλεσμα μέτρησε πραγματικά.