Ποιος ανέπτυξε τη μοβ χρώση του αίματος; Malachowski, Romanowsky, Giemsa

Η ηωσίνη είναι κόκκινη. Το κυανό του μεθυλενίου είναι μπλε. Αναμείξτε τα δύο, εφαρμόστε το μείγμα σε ένα αποξηραμένο επίχρισμα αίματος και ορισμένα τμήματά του γίνονται μοβ.

Όχι όλα. Σε ένα καλό παρασκεύασμα, οι πυρήνες των λευκών αιμοσφαιρίων παίρνουν ένα ερυθροϊώδες χρώμα και, μέσα σε ένα παράσιτο της ελονοσίας, η χρωματίνη παίρνει το ίδιο χρώμα, ενώ τα γύρω ερυθρά αιμοσφαίρια παραμένουν ροζ και το κυτταρόπλασμα παραμένει γκριζογάλανο. Το μοβ είναι αυτό που επιτρέπει τη διάκριση των κυτταρικών τύπων.

Κανένα από τα δύο φιαλίδια δεν περιέχει μοβ. Το χρώμα εμφανίζεται μόνο όταν ένα συγκεκριμένο προϊόν διάσπασης του κυανού του μεθυλενίου συναντά την ηωσίνη στην αντικειμενοφόρο πλάκα, και στις δεκαετίες του 1880 και του 1890 κανείς δεν γνώριζε ότι υπήρχε αυτό το προϊόν, πόσο μάλλον τι ήταν. Όσοι αναζητούσαν το χρώμα εργάζονταν μόνοι τους, με ακάθαρτες χρωστικές, χωρίς αξιόπιστο τρόπο να διαπιστώσουν τι περιείχε ένα φιαλίδιο αφού είχε μείνει σε ένα ράφι για δύο μήνες.

Γι' αυτό η ερώτηση του τίτλου έχει περισσότερες από μία τεκμηριώσιμες απαντήσεις και γι' αυτό η απάντηση άλλαξε το 2011.

Μια εικόνα που άλλαζε μαζί με το μείγμα

Η χρώση δεν εφευρέθηκε. Διαμορφώθηκε σταδιακά. Κάθε αλλαγή στο μείγμα πρόσθετε ακριβώς ένα νέο στοιχείο ορατής πληροφορίας, και η αλληλουχία αυτών των στοιχείων είναι ο σαφέστερος τρόπος να διαβάσει κανείς την ιστορία.

Έτος	Τι υπήρχε στο σκεύος	Τι μπορούσε να δει κανείς
1865	Πικρικό οξύ, η πρώτη συνθετική χρωστική που εφαρμόστηκε στο αίμα, από τον Wilhelm Erb	Ένα δαντελωτό μοτίβο μέσα σε ορισμένα ερυθρά αιμοσφαίρια.
1876	Κυανό του μεθυλενίου, από τους Heinrich Caro και Adolf von Baeyer στην BASF	Φυματιώδεις βάκιλοι, στα χέρια του Robert Koch. Αιμοσφαίρια σε έναν μόνο μπλε τόνο.
1880	Κυανό του μεθυλενίου μαζί με όξινη φουξίνη, η ουδέτερη χρώση του Ehrlich	Ερυθρά αιμοσφαίρια και ηωσινόφιλα κοκκία κόκκινα, πυρήνες βαθύ μπλε, κυτταρόπλασμα λεμφοκυττάρων ανοιχτό μπλε και σκούρα ιώδη κοκκία που προσλάμβαναν και τις δύο χρωστικές. Γι' αυτό το κύτταρο ονομάζεται ουδετερόφιλο. Η πρώτη διαφορική καταμέτρηση λευκών αιμοσφαιρίων.
1888	Κυανό του μεθυλενίου μαζί με ηωσίνη. Czesław Chęciński	Το ίδιο το παράσιτο: μπλε μορφές σαν μαργαρίτα (Plasmodium malariae) και δρεπανοειδείς μορφές (γαμετοκύτταρα του P. falciparum). Όχι ο πυρήνας του.
1890	Περισσότερο κυανό του μεθυλενίου, λιγότερη αλκοόλη και υδροξείδιο του καλίου. Albert Plehn	Ευρύτερο και εντονότερο χρωματικό φάσμα, με ρόδινα ερυθρά αιμοσφαίρια και ρόδινα ηωσινόφιλα κοκκία. Ακόμη μόνο κόκκινο και μπλε.
1890	Ηωσίνη μαζί με κυανό του μεθυλενίου που είχε γίνει αλκαλικό με βόρακα. Ernst Malachowski	Ερυθροϊώδης χρωματίνη μέσα στο παράσιτο, με τον πυρήνα να διακρίνεται από το κυτταρόπλασμα. Σκόπιμα και, σύμφωνα με την περιγραφή του, αναπαραγώγιμα.
1891	Ηωσίνη μαζί με κυανό του μεθυλενίου από ένα μουχλιασμένο φιαλίδιο ηλικίας άνω των δύο μηνών. Dmitri Romanowsky	Το ίδιο μοβ, μία φορά, με μια μέθοδο που οι άλλοι δεν μπορούσαν να επαναλάβουν.
1898 έως 1902	Πολυχρωματισμένη χρωστική εκχυλισμένη με χλωροφόρμιο (Nocht)· μεθανόλη (Jenner)· επαναδιάλυση του ιζήματος σε αλκοόλη (Leishman, Reuter, Wright)· χρωστικές σε μετρημένες ποσότητες με γλυκερόλη (Giemsa)	Το μοβ όποτε χρειαζόταν, σε ένα προϊόν που συμπεριφερόταν με τον ίδιο τρόπο και στο επόμενο εργαστήριο. Η εκδοχή του Jenner, χωρίς πολυχρωματισμένη χρωστική, δεν έδινε μοβ.
1940 έως 1943	Οι Lillie, Roe και Wilcox διαχώρισαν τα συστατικά και τα δοκίμασαν ένα προς ένα	Το Azure B, όχι το μείγμα, είναι το συστατικό που παράγει το μοβ.

Το σημαντικό είναι το μοτίβο στην τελευταία στήλη. Κάθε πρόοδος διεύρυνε το χρωματικό φάσμα και κάθε διεύρυνση έκανε ορατή μία ακόμη δομή. Το μοβ δεν είναι διακοσμητικό στοιχείο της τεχνικής· είναι η διαφορά ανάμεσα στο να βλέπει κανείς ότι υπάρχει ένα παράσιτο και στο να βλέπει από τι αποτελείται. Το πώς η ίδια η χρωστική πέρασε από ένα εργοστάσιο χρωστικών της BASF στην ιατρική είναι μια εκτενέστερη ιστορία, με τα δικά της τεκμήρια. Η πλήρης παραπάνω αλληλουχία, με την πηγή για κάθε καταχώριση, διατηρείται ως χρονολόγιο συντελεστών με συνδέσμους στις πηγές.

Εικόνα: τα ίδια έξι μείγματα, σχεδιασμένα με βάση το τι υπήρχε στο σκεύος και τι προέκυπτε από αυτό. Οι κύκλοι περιέχουν τις χρωστικές· τα πλαίσια από κάτω περιέχουν τα χρώματα που μπορούσαν να παράγουν αυτές οι χρωστικές σε ένα επίχρισμα αίματος. Πριν από το 1890 δεν υπάρχει κανένα ερυθροϊώδες πλαίσιο και μετά από αυτό δεν λείπει από κανένα μείγμα.

Ο άνθρωπος που χρησιμοποίησε σκόπιμα βόρακα

Ο Ernst Malachowski ήταν γιατρός στο Breslau, το σημερινό Wrocław, ο οποίος πέρασε τη σταδιοδρομία του ασκώντας ιδιωτικά την ιατρική και εργαζόμενος σε μια μικρή κλινική που διηύθυνε μαζί με έναν συνάδελφο, κάνοντας εργαστηριακή δουλειά στον ελεύθερο χρόνο του. Γεννήθηκε στο Strzelno στις 12 Μαρτίου 1857, σπούδασε ιατρική στο Πανεπιστήμιο του Breslau και εργάστηκε από το 1882 έως το 1887 ως βοηθός στην παθολογική κλινική του Νοσοκομείου των Αγίων Πάντων, τότε του δεύτερου μεγαλύτερου νοσοκομείου στη Γερμανία.

Ξεκίνησε το 1888 με τη διπλή χρώση των Chęciński και Plehn. Σε ένα παρασκεύασμα που έφτιαξε το 1889, είδε τη χρωματίνη του πυρήνα του πλασμωδίου να χρωματίζεται διαφορετικά από το κυτταρόπλασμα και στη συνέχεια διαπίστωσε ότι δεν μπορούσε να το αναπαραγάγει. Δοκίμασε να οξινίσει το κυανό του μεθυλενίου, πράγμα που έκανε τα πράγματα χειρότερα. Δοκίμασε να το αλκαλοποιήσει με βόρακα, πράγμα που λειτουργούσε κάθε φορά. Παρουσίασε τη μέθοδο δημόσια στις 15 Ιουνίου 1890 και δημοσίευσε μια πληρέστερη περιγραφή τον Αύγουστο του 1891, συμπεριλαμβάνοντας την οδηγία για τον βόρακα. Σημείωσε ότι η χρώση διαρκούσε είκοσι τέσσερις ώρες και ότι τα αποτελέσματα ήταν εύκολα αναπαραγώγιμα.

Οι είκοσι τέσσερις ώρες είναι μεγάλο χρονικό διάστημα για ένα διαγνωστικό εργαστήριο, και η δημοσίευσή του δεν στάθηκε ιδιαίτερα στο πορφυροκόκκινο χρώμα του πυρήνα του παρασίτου. Όποιος κι αν ήταν ο λόγος, κανείς δεν υιοθέτησε τη σκόπιμη αλκαλοποίηση του κυανού του μεθυλενίου μέχρι που ο Nocht την έκανε ξανά το 1898. Ο Malachowski δεν έγραψε ποτέ ξανά για τη χρώση του αίματος.

Ο λόγος για τον οποίο γνωρίζαμε τόσο λίγα γι' αυτόν μέχρι πρόσφατα αφορά τα αρχεία και δεν είναι μυστηριώδης. Σχεδόν κανένα ίχνος της ζωής του δεν διασώθηκε στην ιατρική βιβλιογραφία, και ό,τι διασώθηκε έφτασε μέσω μίας μόνο διαδρομής. Η κόρη του Marie έφυγε από τη Γερμανία για το Λονδίνο το 1939, υπηρέτησε στον βρετανικό στρατό και εγκαταστάθηκε στον Καναδά, και η συλλογή της με οικογενειακά έγγραφα κατέληξε στο Ινστιτούτο Leo Baeck στη Νέα Υόρκη. Ο αδελφός της Leo σκοτώθηκε στον Πρώτο Παγκόσμιο Πόλεμο. Η αδελφή της Eva εκτοπίστηκε από το Breslau στο στρατόπεδο διέλευσης της Izbica τον Απρίλιο του 1942 και δεν επέστρεψε ποτέ. Η μητέρα της Hedwig έβαλε τέλος στη ζωή της στις 22 Απριλίου 1942, αντί να περιμένει τον ίδιο εκτοπισμό. Ο Malachowski είχε πεθάνει το 1934, πριν συμβούν όλα αυτά.

Μια οικογενειακή ιστορία που τελειώνει έτσι είναι μια οικογενειακή ιστορία στην οποία παύουν να γίνονται αναφορές. Οι δύο δημοσιεύσεις που επανέφεραν τον Malachowski στην ιστορία της ανάπτυξης της χρώσης, και οι δύο δημοσιευμένες το 2011, συντάχθηκαν από αρχειακά έγγραφα στο Poznań και στο Wrocław και από τα έγγραφα της Marie στη Νέα Υόρκη.

Ένα μουχλιασμένο φιαλίδιο και ένας τυχερός Ρώσος

Ο Dmitri Romanowsky σπούδασε ιατρική στη Στρατιωτική Ιατρική Ακαδημία της Αγίας Πετρούπολης και ασχολήθηκε με την ελονοσία στο μεγαλύτερο μέρος της σταδιοδρομίας του. Το 1890 δημοσίευσε μια μέθοδο που, στα χαρτιά, ήταν σχεδόν ίδια με εκείνη του Chęciński: μη τροποποιημένο κυανό του μεθυλενίου και ηωσίνη, με λίγο περισσότερη ηωσίνη.

Τον Σεπτέμβριο του 1891 δημοσίευσε τη μέθοδο που τον έκανε γνωστό, και η λεπτομέρεια που είχε σημασία ήταν κρυμμένη στις οδηγίες. Τα καλύτερα αποτελέσματά του προέρχονταν από το αποθηκευμένο διάλυμα μεθυλενίου, ένα διάλυμα παρακαταθήκης κυανού του μεθυλενίου που είχε μείνει για πάνω από δύο μήνες και είχε αναπτύξει μούχλα. Η μούχλα και ο χρόνος παραμονής είχαν απομεθυλιώσει εν μέρει τη χρωστική. Ο Romanowsky δεν το γνώριζε και δεν μπορούσε να το ελέγξει, και άλλοι ερευνητές που δοκίμασαν τη μέθοδό του δεν μπορούσαν να πετύχουν το μοβ. Η διατριβή του είχε υποβληθεί στην Αγία Πετρούπολη τον Ιούνιο του 1891, γι' αυτό η καθιερωμένη αφήγηση θεωρεί το 1891 ως το έτος της ανακάλυψης.

Η επίδειξη του Malachowski είχε γίνει τον Ιούνιο του 1890, περισσότερο από έναν χρόνο νωρίτερα, και η μέθοδός του λειτουργούσε χάρη σε σκόπιμη παρέμβαση.

Γιατί η χρώση πήρε το όνομα του λάθος ανθρώπου

Τα επιχειρήματα υπέρ του Malachowski συγκεντρώθηκαν από τους Kristine Krafts, Ernst Hempelmann και Barbara Oleksyn και στηρίζονται σε τέσσερα στοιχεία. Την ημερομηνία της δημόσιας επίδειξης, Ιούνιος 1890 έναντι Σεπτεμβρίου 1891. Τη λέξη σκόπιμη έναντι της λέξης τυχαία. Το γεγονός ότι ο Malachowski δημοσίευσε τη μέθοδό του, μαζί με τον βόρακα και όλες τις λεπτομέρειες, ενώ εκείνη του Romanowsky εξαρτιόταν από μια ανεξέλεγκτη μεταβλητή. Και την παρατήρηση ότι η περιγραφή του πυρήνα του πλασμωδίου, μαζί με το μοβ που τον αποκάλυπτε, ουσιαστικά εξαφανίστηκε από τη βιβλιογραφία για επτά χρόνια, επειδή κανείς δεν μπορούσε να αναπαραγάγει την τυχαία εκδοχή.

Δεν μασούν τα λόγια τους ως προς το συμπέρασμα. Στη βιογραφική δημοσίευση χαρακτηρίζουν την απόδοση της αναγνώρισης «παρωδία» και παραθέτουν τον Ralph Lillie, ο οποίος το 1978 έγραψε ότι «ίσως θα έπρεπε να αναφερόμαστε σε αυτή την οικογένεια χρώσεων ως χρώσεις Malachowski».

Ο ισχυρισμός αμφισβητείται, όπως συμβαίνει συνήθως με τις διεκδικήσεις προτεραιότητας, και η μορφή της διαμάχης αξίζει να εξηγηθεί παρά να επιλυθεί. Ένα επιχείρημα για την προτεραιότητα πρέπει να ορίζει ποια ήταν η ανακάλυψη. Αν η ανακάλυψη είναι το μοβ χρώμα, ο Malachowski έχει την παλαιότερη τεκμηριωμένη επίδειξη. Αν η ανακάλυψη είναι η δημοσιευμένη μέθοδος, και οι δύο δημοσίευσαν το 1891 και η χρώση πήρε το όνομα του Romanowsky. Αν η ανακάλυψη είναι η εξήγηση, κανένας από τους δύο δεν μπορεί να τη διεκδικήσει, επειδή κανένας δεν γνώριζε ότι η ωρίμανση ήταν απομεθυλίωση και κανένας δεν μπορούσε να εξηγήσει γιατί εμφανιζόταν το χρώμα. Αυτό το τελευταίο σημείο είναι εκείνο που παραλείπουν οι εκλαϊκευμένες αφηγήσεις. Το δραστικό συστατικό ήταν μια πρόσμειξη που κανείς δεν είχε ταυτοποιήσει, και ο πρώτος άνθρωπος που παρήγαγε σκόπιμα το χρώμα το έκανε με μια αναπαραγώγιμη εμπειρική συνταγή, όχι κατανοώντας τι έκανε η συνταγή.

Οι δύο δημοσιεύσεις του 2011 αποτελούν την πληρέστερη δημοσιευμένη παρουσίαση των επιχειρημάτων υπέρ του Malachowski και είναι και οι δύο ελεύθερα διαθέσιμες για ανάγνωση στο PubMed: η εκτενής ανασκόπηση στο PMID 21235291 και η βιογραφική δημοσίευση στο PMID 21660627. Η εγγραφή της ανασκόπησης στο PubMed παραθέτει επίσης ένα σχόλιο γι' αυτήν, που δημοσιεύτηκε στο ίδιο περιοδικό αργότερα εκείνο το έτος στο 86(5):366, μια εύλογη υπενθύμιση ότι το επιχείρημα αμφισβητήθηκε σε δημοσιευμένο κείμενο αμέσως μόλις εμφανίστηκε.

Αυτό που δεν αφορά η διαμάχη είναι μια διαφωνία για τη χημεία. Όλοι οι εμπλεκόμενοι συμφωνούν για το τι είναι το μοβ και ποια συστατικά το παράγουν. Η διαφωνία αφορά το ποιος έφτασε πρώτος εκεί και το αν ένα τυχαίο αποτέλεσμα που κανείς δεν μπορούσε να επαναλάβει μετρά καθόλου ως επίτευγμα.

Τι πρόσφεραν τα μεταγενέστερα ονόματα

Αν ο Malachowski παρήγαγε πρώτος το μοβ, γιατί η χρώση φέρει τα ονόματα των Romanowsky, Wright και Giemsa;

Επειδή μια χρώση που λειτουργεί μία φορά στα χέρια του δημιουργού της δεν είναι αντιδραστήριο. Η μεταγενέστερη δουλειά μετέτρεψε ένα ιδιότροπο μείγμα σε κάτι που ένας τεχνικός σε άλλη χώρα θα μπορούσε να χρησιμοποιήσει μια Τρίτη.

Ο Nocht έφτασε εκεί μέσω συλλογισμού. Αφού δεν κατάφερε να πάρει αξιόπιστο αποτέλεσμα από μια απλή ουδέτερη χρωστική, συμπέρανε ότι το μοβ πρέπει να προερχόταν από κάτι μέσα στο κυανό του μεθυλενίου που δεν ήταν κυανό του μεθυλενίου και άρχισε να το αναζητά. Ο Unna είχε ήδη παρατηρήσει ότι τα παλαιωμένα διαλύματα κυανού του μεθυλενίου έβαφαν κόκκινα τα κοκκία των μαστοκυττάρων και πρότεινε ότι σχηματιζόταν μια νέα ουσία καθώς η χρωστική ωρίμαζε. Ο Bernthsen είχε δείξει το 1885 ότι οι αλκαλικές συνθήκες αφαιρούν ομάδες μεθυλίου από το κυανό του μεθυλενίου και ότι αυτά τα προϊόντα είναι όσα σήμερα ονομάζουμε αζούρες. Ο Nocht εκχύλισε το δραστικό κλάσμα με χλωροφόρμιο και μπορούσε να το ονομάσει μόνο κόκκινο από κυανό του μεθυλενίου· ο Michaelis το ονόμασε azure I το 1901. Ο Jenner έλυσε τα πρακτικά ζητήματα. Η επαναδιάλυση του ιζήματος κυανού του μεθυλενίου και ηωσίνης σε απόλυτη μεθανόλη έδωσε ένα ενιαίο σταθερό διάλυμα που μονιμοποιούσε το επίχρισμα καθώς το χρωμάτιζε και κατάργησε τη μονιμοποίηση με θερμότητα. Οι Leishman και Reuter συνδύασαν πολυχρωματισμένη χρωστική με αλκοολικό διαλύτη και πέτυχαν ταυτόχρονα σταθερότητα και μοβ χρώμα. Ο Wright αντικατέστησε μια δωδεκάωρη επώαση στους 65 °C και δέκα ημέρες παραμονής με μία ώρα σε ρέοντα ατμό. Ο Giemsa σταμάτησε εντελώς να βασίζεται σε ένα διάλυμα που είχε ωριμάσει τυχαία, χρησιμοποιώντας μετρημένες ποσότητες γνωστών χρωστικών με γλυκερόλη στη μεθανόλη, ώστε το προϊόν να αντέχει την τροπική ζέστη. Δεν δημοσίευσε ποτέ πώς παρασκεύαζε καθαρή αζούρα του μεθυλενίου. Την πούλησε στο εργαστήριο του Dr Grübler στη Λειψία, το οποίο τη διέθετε στην αγορά ως azure I και ισχυριζόταν ότι μόνο η δική του εκδοχή ήταν αυθεντική χρώση Giemsa.

Η ταυτότητα αυτής της αζούρας εξακολουθεί να αποτελεί αντικείμενο διαφωνίας. Κάποιοι υποστηρίζουν ότι ήταν απλώς πολυχρωματισμένο κυανό του μεθυλενίου, άλλοι ότι ήταν πλούσια σε Azure B. Η απάντηση προέκυψε μέσα από έναν πόλεμο. Όταν οι γερμανικές χρωστικές έπαψαν να είναι διαθέσιμες, μια ομάδα της Υπηρεσίας Δημόσιας Υγείας των Ηνωμένων Πολιτειών, ο Ralph Lillie μαζί με τους Maurice Roe και Aimee Wilcox, διαπίστωσε ότι η καλύτερη χρώση προερχόταν από τρία διαχωρισμένα συστατικά: μη τροποποιημένο κυανό του μεθυλενίου, το απομεθυλιωμένο προϊόν διάσπασής του Azure B και ηωσίνη. Το Azure B αντικατέστησε το μη διαθέσιμο azure I, και αυτά τα τρία συστατικά παραμένουν η βάση της χρώσης που χρησιμοποιείται σήμερα για τη διάγνωση της ελονοσίας.

Η χημεία του τρόπου με τον οποίο αυτά τα τρία συστατικά αλληλεπιδρούν σε μια αντικειμενοφόρο πλάκα είναι ένα ξεχωριστό ερώτημα και το θέμα μιας άλλης σελίδας. Το άρθρο για τους ρόλους των χρωστικών και τη χημεία των χρώσεων τύπου Romanowsky καλύπτει τι κάνει ξεχωριστά το Azure B και η ηωσίνη και γιατί το ζεύγος παράγει ένα χρώμα που κανένα από τα δύο δεν παράγει μόνο του. Η σελίδα για τη μικροσκοπία και τις εργαστηριακές εφαρμογές καλύπτει την πρακτική πλευρά: τι δείχνει ένα δεδομένο παρασκεύασμα και πώς να κρίνετε αν ένα συγκεκριμένο προϊόν είναι κατάλληλο για τη μέθοδο που σκοπεύετε να χρησιμοποιήσετε.

Το κομμάτι της ιστορίας που παραμένει επίκαιρο

Μια λεπτομέρεια αυτής της ιστορίας δεν έπαψε να ισχύει το 1902. Για περίπου πενήντα χρόνια, το σημαντικότερο συστατικό της καθιερωμένης παγκοσμίως χρώσης για την ελονοσία ήταν μια ανώνυμη πρόσμειξη. Υπήρχε εκεί κατά τύχη, η ποσότητά της διέφερε από φιαλίδιο σε φιαλίδιο, η ταυτότητά της ήταν εμπορικό μυστικό για μέρος εκείνου του διαστήματος και η αναλογία της αποτελούσε αντικείμενο διαφωνίας μέχρι τη δεκαετία του 1940. Οι άνθρωποι που χρησιμοποιούσαν τη χρώση δεν ήταν απρόσεκτοι. Δεν είχαν τρόπο να γνωρίζουν τι περιείχε το φιαλίδιο.

Η σύγχρονη εκδοχή του ίδιου προβλήματος είναι μια προδιαγραφή που περιγράφει μόνο μέρος του υλικού. Η συμμόρφωση με το USP είναι ο δρόμος προς την υψηλότερη καθαρότητα που προσφέρει η αγορά, επειδή πρόκειται για ένα πλήρες δημοσιευμένο πρότυπο και όχι για μία μόνο μέτρηση: ταυτοποίηση, καθαρότητα, οργανικές προσμείξεις συμπεριλαμβανομένων των χρωστικών αζούρας, υπολειμματικοί διαλύτες, στοιχειακές προσμείξεις, υπόλειμμα μετά από πύρωση, μικροβιακά όρια και βακτηριακές ενδοτοξίνες. Η Blupreme προμηθεύεται το κυανό του μεθυλενίου της από έναν φαρμακευτικό παρασκευαστή και δημοσιεύει το πλήρες πιστοποιητικό ανάλυσης, ώστε κάθε στοιχείο αυτού του καταλόγου να μπορεί να ελεγχθεί αντί απλώς να δηλώνεται. Ένα πιστοποιητικό που αναφέρει ένα αποτέλεσμα για βαρέα μέταλλα και το ονομάζει συμμόρφωση με το USP είναι το σημερινό ισοδύναμο ενός φιαλιδίου με την ετικέτα «ωριμασμένο κυανό του μεθυλενίου»: ενδεχομένως ένα καλό αντιδραστήριο, αλλά η ετικέτα δεν σας λέει τι περιέχει.