Изпитване за проникване на метиленово синьо: какво доказва флаконът без следи от багрило

Изпитването за проникване на метиленово синьо проверява дали външен разтвор на багрилото може да навлезе в запечатана опаковка при определени условия на въздействие. Синьото багрило в ампула или флакон може да разкрие нарушение на целостта. Липсата на откриваемо багрило означава, че изпитването не е установило проникване при тези условия. Сама по себе си тя не доказва, че продуктът е стерилен.

Това разграничение определя как трябва да бъде проектирано изпитването. Лесно е да се направи визуално убедителна демонстрация със счупен флакон. Доказването, че даден метод може надеждно да открива дефектите, които са от значение за конкретен продукт, изисква значително повече работа.

Проследете пътя на багрилото през опаковката

При типично изпитване чрез потапяне запечатани съдове се поставят във вана с багрило и се подлагат на определена последователност от промени в налягането. Намаляването на външното налягане може да позволи на газ да излезе от съд с теч. Възстановяването на налягането, докато съдът остава потопен, може да вкара разтвора на багрилото навътре. След това външната повърхност се почиства, а съдържанието се проверява визуално или се анализира за наличие на индикатора.

Важен е целият път: изпитвателното въздействие трябва да достигне до теча, течността трябва да премине през него и вътре трябва да остане достатъчно багрило, за да бъде открито. Изпитването може да се провали на всеки от тези етапи. Малък канал, запушен от продукт или задържан газ, не е задължително да се държи като отворен отвор със същия номинален диаметър.

При стъклена ампула, запечатана чрез стопяване, съответният дефект може да бъде пукнатина или непълно запечатване. При флакон със запушалка системата включва също гърловината на стъкления флакон, еластомера и начина на закрепване на затварящия елемент. Изпитването на способността на пробита запушалка да се самозапечатва разглежда допълнителен въпрос, свързан с употребата. Това са сходни проблеми на опаковките, но изпитваните образци не са взаимозаменяеми.

Концентрацията е част от метода, а не самият метод

Няма един-единствен отговор на въпроса „Каква концентрация на метиленово синьо се използва за изпитване за течове?“, ако не е посочена процедурата. Концентрацията на багрилото, съставът на разтвора, времето на експозиция, налягането, обемът на напълване и методът за откриване действат съвместно.

В архивен документ на USP Pharmacopeial Forum от 2008 г. е описан разтвор с концентрация 0.1%, изразена като 1 g/L, за конкретно изпитване на самозапечатването на еластомерни затварящи елементи. Този исторически пример не е универсална рецепта за ампули, предварително напълнени спринцовки или всички съвременни системи с флакони.

За избор на метод днес глава 1207 на USP предоставя рамката за цялост на опаковките за стерилни продукти, а глава 1207.2 разглежда технологиите за изпитване за течове. Въведението ѝ изрично предупреждава читателите да проверяват обхвата и последните версии на цитираните стандарти. Глава 382 на USP разглежда функционалната пригодност на опаковъчни системи за парентерални продукти, съдържащи еластомерни компоненти. Стар проект от работен семинар не може да замени приложимия официален текст и валидираната процедура.

Следователно практическият въпрос е: открива ли този цялостен метод течовете, които са от значение за този продукт и тази опаковка? Изборът на по-тъмна вана с багрило не отговаря на този въпрос. Записвайте недвусмислено състава и концентрацията на разтвора, включително добавките и основата, на която е изразен всеки процент.

Контролите разграничават полезния резултат от неуспешното изпитване

Използвайте тази последователност за интерпретация, когато преглеждате метод или протокол от изпитване. Видовете контроли и критериите за приемане трябва да бъдат установени преди интерпретирането на неизвестните проби.

Проба с добавено багрило и опаковка с умишлено създаден дефект отговарят на различни въпроси. Добавянето проверява дали багрило, което вече е вътре, може да бъде открито. Дефектната опаковка проверява дали багрилото може да проникне и след това да бъде открито чрез цялата процедура. Строго проведеното проучване трябва да разграничава тези способности.

Две граници на откриване лесно се объркват

Аналитичната граница на откриване се отнася до това какво количество багрило може да бъде разграничено от фона при отчитането. Способността за откриване при изпитване на опаковката се отнася до това кои дефекти открива целият метод и с каква повторяемост. Отличната аналитична граница не може да компенсира изпитвателно въздействие, което не успява да пренесе багрилото през теч от значение за опаковката.

Затова резултатите от изпитванията за проникване на багрило имат вероятностен характер: наличието на дефект не гарантира наблюдаемо преминаване на индикатора при всяко изпитвателно въздействие. За да се установят работните характеристики, са необходими повторни изпитвания и подходящо характеризирани дефекти, вместо да се задава универсален минимален размер на отвора.

Оригинални изследвания показват зависимостта от системата. В проучване от 2016 г. на предварително напълнени спринцовки Lu и колеги съобщават, че метиленовото синьо е неподходящо за надеждно откриване на малки нарушения на целостта в изследваните от тях спринцовки с лекарствен продукт. Те разработват подход с флуоресцентно багрило и спектроскопско откриване. Тази констатация подкрепя съвместната оценка на индикатора и отчитането; тя не установява един заместващ метод за всички опаковки.

Друго проучване на проникването на багрило, публикувано през 2000 г., използва FD&C Red No. 40, а не метиленово синьо, и сравнява проникването на багрило и микроорганизми чрез флакони с нарушена цялост, снабдени с микротръбички. Сходната чувствителност в тази експериментална система не прави всеки протокол със синьо багрило еквивалентен на изпитване с микроорганизми.

Разглеждайте отделно четири въпроса за качеството

Течове в опаковката: Може ли материал да премине през границата на опаковката при условията на изпитване? Проникването на багрило предоставя доказателства по този въпрос.

Микробиологична цялост: Може ли опаковката да запази бариерата си срещу микроорганизми при съответните условия на съхранение и употреба? Свързването на физическо изпитване с това твърдение изисква подходяща обосновка на валидацията. Насоките на FDA за изпитване на целостта в протоколите за стабилност подкрепят валидирани подходи за доказване на запазената цялост на опаковката. Те изрично изключват замяната на първоначалното изпитване за стерилност на продукта: неповредена опаковка може да е била напълнена със замърсен материал.

Пирогени и ендотоксини: Изпитването за течове не измерва тези замърсители. Насоките на FDA за контрол на производството и процесите разглеждат микробното замърсяване и изпитването за пирогени или бактериални ендотоксини като отделни изисквания за качество. Резултат без следи от багрило не може да предостави нито едно от тези измервания.

Устойчивост на стъклената повърхност: Съдът може да не пропуска течове, докато по вътрешната му повърхност се образуват частици или настъпва разслояване. Глава 1660 на USP разглежда устойчивостта на вътрешната повърхност и образуването на стъклени частици. Оцветяването на повърхността или микроскопията, използвани за изследване на стъклото, не са същото наблюдение като проникването на багрило в запечатан флакон.

И накрая, клиничните тестове с багрило за фистули и анатомични течове имат различен обект, цел и интерпретация. Изпитването на фармацевтична опаковка не предоставя клиничен протокол. Сред аналитичните приложения на метиленовото синьо багрилото тук служи като индикатор: заключението зависи от изпитвания път и неговите контроли, а не просто от наличието или отсъствието на син цвят.