Àpilẹ̀kọ
Ìtúká methylene blue àti ìmúrasílẹ̀ ojútùú: ìtọ́sọ́nà yàrá ìdánwò

Àwọn onímọ̀ ẹ̀rọ méjì ṣe ojútùú methylene blue ìdá 1 nínú ọgọ́rùn-ún láti inú lulú, ọ̀kọ̀ọ̀kan lọ́tọ̀. Ọ̀kan wọn 1.00 gírámù, ó sì fi omi kún inú flask títí ó fi dé 100 mL. Èkejì wọn 1.00 gírámù, ó fi í sínú 100 mL omi, ó sì kà á sí ohun tí ó ti parí. Onímọ̀ ẹ̀rọ kẹta wọn 1.00 gírámù láti inú àkójọpọ̀ iṣelọpọ mìíràn, ó sì rí ìṣúpọ̀ tó yàtọ̀ tó bẹ́ẹ̀ tí a lè fi ohun èlò wọn ìyàtọ̀ náà. Àwọn àmì orí ìgò mẹ́tẹ̀ẹ̀ta jẹ́ bákan náà. Kò sí ọ̀kan nínú wọn tí ó ní ohun tí àmì rẹ sọ ní pípé, àwọn ìyàtọ̀ náà sì wá láti inú èrò mẹ́ta tí ó rọrùn láti dàpọ̀: ohun tí omi ìtúká lè gbà, ohun tí lulú tí a wọn jẹ́ ní tòótọ́, àti ohun tí ìdá ọgọ́rùn-ún tọ́ka sí.
Ìtọ́sọ́nà yìí dá lórí ìṣètò àdàlù ní yàrá ìdánwò nìkan: àwọn àwọ̀ fún fífi àmì sí àpẹẹrẹ, àwọn atọ́ka, àwọn ojútùú ìpìlẹ̀ fún ìtúpalẹ̀, àti àwọn ojútùú tí a fẹ́ fún lílò. Kì í ṣe ìlànà fún ṣíṣe oògùn tí a máa mu tàbí gún lábẹ́rẹ́, a kò sì gbọdọ̀ ka àwọn ìṣúpọ̀ tí a sọ níbí sí ìwọ̀n oògùn lílò.
Ohun tí ìtúká fi ààlà sí, àti ohun tí kò fi ààlà sí
Agbára methylene blue láti tú nínú omi ga fún ohun àwọ̀. Àkọsílẹ̀ kẹ́míkà methylene blue ní PubChem sọ pé ó tó 43.6 gírámù fún lítà kan ní 25 C, èyí tí ó jẹ́ bákan náà pẹ̀lú 4.36 gírámù fún 100 mL, tàbí ìdá 4.36 nínú ọgọ́rùn-ún w/v. Ìwádìí òmìnira kan lórí dídé ipò ìwọ́ntúnwọ̀nsì ní ìwọ̀n ooru kan náà wọn 43.21 g/L, ó sì fìdí iye àtijọ́ múlẹ̀ láàárín ààlà àṣìṣe ìdánwò.
Nọ́ńbà yẹn jẹ́ ààlà òkè, kì í ṣe ibi tí a fẹ́ dé. Ojútùú ìpìlẹ̀ ìdá 1 nínú ọgọ́rùn-ún jẹ́ 10 g/L, èyí tí kò tó ìdámẹ́rin ààlà òkè náà. Ojútùú ìpìlẹ̀ ìdá 0.1 nínú ọgọ́rùn-ún jẹ́ 1 g/L, tí ó fẹ́rẹ̀ẹ́ jẹ́ ìdá kan nínú ogójì rẹ̀. Bí ìmúrasílẹ̀ ìdá 1 nínú ọgọ́rùn-ún bá fi àwọn ohun líle sílẹ̀ tí kò tú lẹ́yìn dídàpọ̀ dáadáa ní ìwọ̀n ooru yàrá, ó ṣọ̀wọ́n gan-an kí ààlà ìtúká jẹ́ ìṣòro náà. Ó sábà máa ń jẹ́ pé omi kò tíì wọ lulú náà dáadáa, omi tutù, àwọn ìdì lulú tí ó nílò àkókò sí i, tàbí ohun tí a fẹ́ tú tí a kò dá mọ̀ dáadáa. Omi gbígbóná díẹ̀ àti rírú máa ń yanjú ọ̀pọ̀ jù lọ nínú ìwọ̀nyí. Bí a bá lo ooru, jẹ́ kí flask padà sí ìwọ̀n ooru tí a fi ṣe ìṣàtúnṣe ìwọ̀n rẹ̀ kí o tó fi omi kún un dé ìwọ̀n àyè ìkẹyìn.
Ìtúká nínú àwọn omi ìtúká mìíràn kéré sí i, àwọn orísun ìsọfúnni kò sì fi bẹ́ẹ̀ fohùn ṣọ̀kan lórí rẹ̀, ní apá kan nítorí pé ipò hydrate ohun tí a dán wò yàtọ̀. Omi ṣì ni omi ìtúká àfiwé fún àwọn ojútùú ìpìlẹ̀ yàrá ìdánwò tí a ń ṣe déédéé. Ethanol ń tú àwọ̀ náà, ṣùgbọ́n iye tí ó lè gbà kéré púpọ̀ sí ti omi; chloroform náà ń tú u, pyridine ń tú u díẹ̀ nìkan, diethyl ether sì fẹ́rẹ̀ẹ́ má tú u rárá. Acetone àti ethyl acetate kéré gan-an sí omi nínú àwọn àgbékalẹ̀ ìwọ̀n tí a ṣe. Fún iṣẹ́ tí kì í lo omi, ka nọ́ńbà èyíkéyìí nínú ìwé ìtọ́sọ́nà sí ìfojúdíwọ̀n àkọ́kọ́, kí o sì fi àkójọpọ̀ iṣelọpọ tí o ní gan-an ṣàyẹ̀wò rẹ̀, dípò kí o kà á sí ààlà ìṣètò àdàlù. Kókó tó wúlò rọrùn: bí ète rẹ bá jẹ́ ìṣúpọ̀ kan tí a sọ kedere nínú omi, tí ó jẹ́ ìdá 1 nínú ọgọ́rùn-ún tàbí tí ó kéré sí i, omi fún ọ ní àyè tó pọ̀ kí o tó dé ààlà.
Lulú náà kì í ṣe ohun kan ṣoṣo
Lulú methylene blue tí a ń tà fún lílò ní yàrá ìdánwò jẹ́ iyọ̀ chloride tí ó ní omi nínú ètò kristali rẹ̀, iye omi náà sì máa ń yàtọ̀. Ion tí kò ní omi ní ìwọ̀n molikula 319.85 g/mol. Trihydrate tí a sábà ń tọ́ka sí jẹ́ 373.90 g/mol, pentahydrate sì jẹ́ 409.93 g/mol; a ṣàkọsílẹ̀ àwọn iye wọ̀nyí sínú tábìlì nínú àwọn dátà monograph USP tí a ṣe àkótán lẹ́gbẹ̀ẹ́ àkọsílẹ̀ PubChem.
Àwọn ìgò tí a ń tà sábà máa ń ní àmì trihydrate, CAS 7220-79-3, ṣùgbọ́n ìwádìí lórí ipò líle ti rí i pé ohun náà gan-an lè jẹ́ pentahydrate, hydrate alápá kan tí ó sún mọ́ 2.2 molikula omi, dihydrate, tàbí monohydrate; àwọn ìtúpalẹ̀ kan kò sì rí ipò kristali trihydrate tó yàtọ̀. Àwọ̀ náà tún ń fa ọ̀rinrin, nítorí náà iye omi inú ìgò tí a ti ṣí máa ń yí padà. Fún fífi àwọ̀ sí àpẹẹrẹ láti mọ irú rẹ̀, èyí kò fi bẹ́ẹ̀ ṣe pàtàkì. Fún iṣẹ́ ìtúpalẹ̀ tí ó ń wọn iye, ó ṣe pàtàkì gan-an. Ìdí nìyẹn tí ìtọ́sọ́nà lórí kíka àbájáde ìwọ̀n àkóónú àti iye omi lórí ìwé ẹ̀rí ìtúpalẹ̀ fi ka ìwé àkójọpọ̀ iṣelọpọ sí orísun tó láṣẹ ju ọ̀rọ̀ trihydrate tó wà lórí àmì iwájú lọ.
Ọ̀nà àtúnṣe méjì ló jáde láti inú èyí, ọ̀kan ṣoṣo sì ni a gbọdọ̀ lò nígbà kan. Bí ìwé ẹ̀rí bá fún ọ ní àbájáde ìwọ̀n àkóónú àti iye omi tàbí ìwọ̀n tí ó sọnù nígbà gbígbẹ, lo àwọn nọ́ńbà yẹn tààrà. Bí dátà ìwé ẹ̀rí kò bá sí, tí a sì gbọdọ̀ sọ ìṣúpọ̀ gẹ́gẹ́ bí iye tó dọ́gba pẹ̀lú ohun tí kò ní omi, lo ifosiwewe hydrate tí ìṣirò fi hàn: 373.90 pín sí 319.85, tàbí 1.169, fún ohun tí a pè ní trihydrate, àti 409.93 pín sí 319.85, tàbí 1.282, fún ohun tí a pè ní pentahydrate. Má ṣe lo àtúnṣe méjèèjì lẹ́ẹ̀kan náà. Ìyẹn máa ń ka omi náà lẹ́ẹ̀mejì.
Ohun tí ìdá ọgọ́rùn-ún túmọ̀ sí
Ìdá ọgọ́rùn-ún w/v túmọ̀ sí gírámù ohun tí a sọ pé a fẹ́ tú fún 100 mL ojútùú ìkẹyìn, kì í ṣe fún 100 mL omi tí a fi bẹ̀rẹ̀. Nítorí náà, ìdá 1 nínú ọgọ́rùn-ún w/v jẹ́ 1.000 g fún 100 mL ìkẹyìn, tí ó dọ́gba pẹ̀lú 10 mg/mL tàbí 10 g/L. Ojútùú ìdá 0.1 nínú ọgọ́rùn-ún jẹ́ 0.100 g fún 100 mL ìkẹyìn, tí ó dọ́gba pẹ̀lú 1 mg/mL. Àṣìṣe tí ó wọ́pọ̀, láti ka ìdá 1 nínú ọgọ́rùn-ún sí 1 mg/mL, jẹ́ àṣìṣe ìlọ́po mẹ́wàá, ó sì yẹ kí a ṣàyẹ̀wò gbogbo àmì nítorí rẹ̀.
Ìdajì kejì ìtumọ̀ náà ni sísọ ohun tí a fẹ́ tú ní pàtó. Ojútùú ìdá 1 nínú ọgọ́rùn-ún ti lulú trihydrate gẹ́gẹ́ bí a ṣe wọn ọn àti ojútùú ìdá 1 nínú ọgọ́rùn-ún tí a sọ gẹ́gẹ́ bí iye tó dọ́gba pẹ̀lú ohun tí kò ní omi jẹ́ àwọn ojútùú tí ó yàtọ̀. Àwọn àpẹẹrẹ ìṣirò ní ìsàlẹ̀ sọ ìwọ̀n àyè ìkẹyìn àti ìpìlẹ̀ ìṣirò ní gbogbo ìgbà; àṣà yìí ni ó ń dènà ìṣòro àwọn onímọ̀ ẹ̀rọ mẹ́ta tí a sọ lókè.
Àwọn ìmúrasílẹ̀ tí a ṣe ìṣirò wọn, pẹ̀lú àwọn àròjinlẹ̀ hydrate tí a sọ kedere
Gbogbo àpẹẹrẹ dá lórí pé lulú jẹ́ mímọ́, ó jẹ́ irú hydrate tí a sọ, omi sì ni omi ìtúká ní ìwọ̀n ooru yàrá. Fún àwọn ìwọ̀n àyè mìíràn, pọ̀ sí i tàbí dín kù ní ìbámu tààrà.
Àpẹẹrẹ A: 100.0 mL ti ìdá 1 nínú ọgọ́rùn-ún w/v, lórí ìpìlẹ̀ trihydrate gẹ́gẹ́ bí a ṣe wọn ọn. Wọn 1.000 g methylene blue trihydrate. Fi bí 70 mL omi tí a ti sọ di mímọ́ kún un, rú u tàbí yí i ká títí yóò fi tú pátápátá, gbé gbogbo rẹ̀ sínú flask ìwọ̀n àyè 100.0 mL pẹ̀lú omi ìfiṣan, lẹ́yìn náà fi omi kún un dé àmì náà. Trihydrate fúnra rẹ̀ ni ohun tí a ń tú, nítorí náà kò sí àtúnṣe ìwọ̀n molikula tí a gbọdọ̀ ṣe. Àbájáde: 1.000 g fún 100.0 mL ìkẹyìn, tàbí 10 mg/mL ti lulú gẹ́gẹ́ bí a ṣe wọn ọn.
Àpẹẹrẹ B: 100.0 mL ti 1 mg/mL, lórí ìpìlẹ̀ iye tó dọ́gba pẹ̀lú ohun tí kò ní omi, láti inú ohun tí a pè ní trihydrate. Ète ni 100.0 mg methylene blue tí kò ní omi nínú 100.0 mL ìkẹyìn. Fi 1.169 pọ̀ ọ́n láti ṣe àtúnṣe fún molikula omi mẹ́ta: 100.0 mg lọ́po 1.169 dọ́gba pẹ̀lú 116.9 mg. Wọn 116.9 mg ohun tí a pè ní trihydrate, tú u sínú bí 70 mL omi, kí o sì fi omi kún un dé 100.0 mL ìkẹyìn nínú flask ìwọ̀n àyè. Láti inú ohun tí a pè ní pentahydrate, ifosiwewe náà jẹ́ 1.282, nítorí náà ète kan náà nílò 128.2 mg. Ṣàkọsílẹ̀ ifosiwewe tí o lò lórí àmì.
Àpẹẹrẹ C: fífẹ́ ojútùú methylene blue láti ojútùú ìpìlẹ̀ ìdá 1 nínú ọgọ́rùn-ún sí ìdá 0.1 nínú ọgọ́rùn-ún. Lo C1V1 dọ́gba pẹ̀lú C2V2. Láti ṣe 100.0 mL ti ìdá 0.1 nínú ọgọ́rùn-ún láti ojútùú ìpìlẹ̀ ìdá 1.0 nínú ọgọ́rùn-ún, ìwọ̀n àyè ojútùú ìpìlẹ̀ tí a nílò jẹ́ 0.1 lọ́po 100.0 pín sí 1.0, tí ó jẹ́ 10.0 mL. Fi pipette gbé 10.0 mL ojútùú ìpìlẹ̀ ìdá 1 nínú ọgọ́rùn-ún sínú flask 100.0 mL, kí o sì fi omi kún un dé àmì. Fún àwọn olùtúpalẹ̀ tí ó fẹ́ràn ẹyọ ìwọ̀n ìwúwo: ìdá 1 nínú ọgọ́rùn-ún jẹ́ 10 mg/mL, nítorí náà 10.0 mL ní 100 mg, 100 mg nínú 100.0 mL ìkẹyìn sì jẹ́ 1 mg/mL, èyí tí ó jẹ́ ìdá 0.1 nínú ọgọ́rùn-ún.
Àpẹẹrẹ D: 1.000 L ojútùú fún lílò ti 10 mg/L láti ojútùú ìpìlẹ̀ 1 mg/mL. Ojútùú ìpìlẹ̀ 1 mg/mL jẹ́ 1000 mg/L. Ìwọ̀n àyè tí a nílò jẹ́ 10 lọ́po 1.000 pín sí 1000, tí ó jẹ́ 0.0100 L, tàbí 10.0 mL. Fi pipette gbé 10.0 mL ojútùú ìpìlẹ̀, kí o sì fi omi fẹ́ ẹ dé 1.000 L ìkẹyìn. Láti ojútùú ìpìlẹ̀ ìdá 1 nínú ọgọ́rùn-ún ní 10,000 mg/L, ète kan náà nílò 1.00 mL nìkan tí a fi omi kún dé 1.000 L. Fífẹ́ ojútùú ní ìtẹ̀lé ní ìgbésẹ̀ méjì ń fúnni ní ìpéye tó dára ju gbígbé ìwọ̀n microlitre lẹ́ẹ̀kan ṣoṣo lọ nígbà tí ìpín bá ju bí ọgọ́rùn-ún kan lọ.
Ọ̀kọ̀ọ̀kan nínú ìwọ̀nyí jẹ́ àlàyé pípé nítorí pé ó ní òtítọ́ mẹ́ta: ìwúwo tí a wọn pẹ̀lú àròjinlẹ̀ hydrate rẹ̀, ìwọ̀n àyè ìkẹyìn ojútùú náà, àti ìpìlẹ̀ ìṣúpọ̀ tí a sọ. Àkọsílẹ̀ inú ìwé iṣẹ́ tí kò ní ọ̀kan nínú mẹ́tẹ̀ẹ̀ta kò ṣeé tún ṣe ní pípé.
Ìlànà tí ó ń yẹra fún àwọn àṣìṣe tí ó wọ́pọ̀
Kọ́kọ́ tú lulú náà sínú omi tí ìwọ̀n àyè rẹ̀ kéré sí ìwọ̀n àyè ìkẹyìn, lẹ́yìn náà fi omi kún un dé ìwọ̀n náà. Fífi lulú sínú gbogbo ìwọ̀n àyè ìkẹyìn omi tààrà ń mú ojútùú kan jáde tí àpapọ̀ ìwọ̀n àyè rẹ̀ ju àmì tí a pinnu lọ, ìṣúpọ̀ rẹ̀ sì máa ń kéré sí ète. Fi omi ṣan beaker sínú flask kí àwọ̀ kankan má bàa kù sí ẹ̀yìn; àwọ̀ tó jinlẹ̀ náà ń mú kí ohun kékeré tí ó sọnù hàn, èyí sì jẹ́ àǹfààní bí ó bá jẹ́ kí a gbé gbogbo ohun náà lọ láìsí àdánù.
Dà á pọ̀ títí kò fi ní sí ẹyọ kékeré kankan mọ́ kí o tó fi omi kún un dé ìwọ̀n àyè, kí o sì fi síwájú ìmọ́lẹ̀ láti ṣàyẹ̀wò rẹ̀. Ṣàlẹ̀ rẹ̀ nígbà tí ọ̀nà iṣẹ́ bá béèrè fún un nìkan. Methylene blue máa ń lẹ̀ mọ́ ojú àwọn ohun èlò àlẹ̀ onífẹ́lẹ̀fẹ́lẹ̀ kan, nítorí náà ṣíṣàlẹ̀ lè dín ìṣúpọ̀ ojútùú ìpìlẹ̀ tí a ṣẹ̀ṣẹ̀ fi ìwọ̀n boṣewa múlẹ̀ kù. A ti ṣàkọsílẹ̀ èyí nínú àwọn ìwádìí lórí lílẹ̀ mọ́ ojú fẹ́lẹ̀fẹ́lẹ̀ àlẹ̀, ó sì yẹ kí a rántí rẹ̀ nígbà gbogbo tí ṣíṣàlẹ̀ tàbí ṣíṣàyẹ̀wò ìṣúpọ̀ bá jẹ́ apá ọ̀nà iṣẹ́. Bí ojútùú ìpìlẹ̀ tí a ṣàlẹ̀ bá gbọdọ̀ ní ìṣúpọ̀ tí a jẹ́rìí sí, ṣàyẹ̀wò ìṣúpọ̀ lẹ́yìn ṣíṣàlẹ̀ dípò ṣáájú rẹ̀.
Pa àwọn ojútùú tí a ti ṣe mọ́ sínú ìgò àwọ̀ amber tàbí ìgò tí ìmọ́lẹ̀ kò lè kọjá, ní ìwọ̀n ooru yàrá, kí o dáàbò bò wọ́n lọ́wọ́ ìmọ́lẹ̀ líle. Fi àmì sí wọn pẹ̀lú ohun tí a tú, ìpìlẹ̀ hydrate, ìṣúpọ̀, omi ìtúká, ọjọ́, àti ẹni tí ó ṣe wọn. Ṣíṣán àwọ̀ kúrò nítorí ìmọ́lẹ̀ tí ó ń tàn sí i fún ìgbà pípẹ́ jẹ́ ọ̀nà ìbàjẹ́ tí a mọ̀, nítorí náà etí fèrèsé àti firiji tí ìmọ́lẹ̀ ń tàn nínú rẹ̀ kì í ṣe ibi ìpamọ́ tó dára, bí ó tilẹ̀ jẹ́ pé àwọ̀ náà dà bí ẹni pé kò yí padà. Àwọn ohun tí a lè retí nípa ìdúróṣinṣin àti àkókò àárín àwọn ìdánwò àtúnṣe wà nínú ìtọ́sọ́nà ìpamọ́ àti ìdúróṣinṣin fún àwọn ojútùú tí a ti ṣe, ṣùgbọ́n gẹ́gẹ́ bí ìlànà iṣẹ́, ó yẹ kí a ṣe àwọn ojútùú ìpìlẹ̀ fún ìtúpalẹ̀ tuntun tàbí kí a tún ṣàyẹ̀wò wọn, dípò kí a gbẹ́kẹ̀ lé wọn láìlópin.
Lo ibọwọ́, ohun ìdáàbòbo ojú, aṣọ yàrá ìdánwò, àti ìbòrí tábìlì iṣẹ́ nígbà tí o bá ń ṣiṣẹ́ pẹ̀lú lulú àti àwọn ojútùú ìpìlẹ̀ tí ìṣúpọ̀ wọn ga; tún ní ohun ìdènà kejì fún ìgò láti gba omi tí ó lè dà síta. Àwọ̀ náà máa ń fi àbàwọ́n sí awọ ara, aṣọ, tábìlì iṣẹ́, àti ohun ṣiṣu kíákíá, àwọn ìwé dátà ààbò olùpèsè sì pín lulú náà sí ohun tó lè ṣe ìpalára bí a bá gbé e mì, tí ó sì lè mú ojú àti awọ ara bínú, ní ìbámu pẹ̀lú ipele didara rẹ̀. Àwọn ìṣọ́ra kíkún wà nínú àwọn àṣà mímú àti ìpamọ́ láìléwu, ṣùgbọ́n dídènà àbàwọ́n fúnra rẹ̀ jẹ́ ọ̀nà ìṣàkóso didara: àwọ̀ tí ó lọ síbi tí kò yẹ lórí ohun èlò gíláàsì àti pipette jẹ́ orísun ìdọ̀tí láti ohun kan sí òmíràn fún ìtúpalẹ̀ iye tó kéré gan-an.
Àkíyèsí lórí ipele didara
Fún àwọn àwokòtò fífi àwọ̀ sí àpẹẹrẹ àti ìfihàn, ohun èlò ipele yàrá ìdánwò mímọ́ èyíkéyìí tí a ṣe ní ìṣúpọ̀ tó tọ́ máa ń ṣiṣẹ́. Fún iṣẹ́ ìwọ̀n iye tàbí ìfiwéra, ipele didara ṣe pàtàkì nítorí pé àwọn ohun àìmọ́ yàtọ̀: Azure B tí ó kù àti àwọn thiazine tó jọ ọ́, àwọn irin wúwo, àwọn omi ìtúká tí ó kù, àti iye àwọn ohun alààyè kéékèèké. Ìdí nìyẹn tí yíyan ipele didara tí ìwé ẹ̀rí ìtúpalẹ̀ kíkún fi ẹ̀rí múlẹ̀ fi jẹ́ apá ìṣètò àdàlù dípò ohun tí a ronú lé lórí lẹ́yìn náà. Ìwé àkójọpọ̀ iṣelọpọ pípé máa ń sọ ohun tí ohun èlò náà jẹ́, àbájáde ìwọ̀n àkóónú pẹ̀lú ìpìlẹ̀ rẹ̀, iye omi, àti àkójọ àwọn ohun àìmọ́ tí a dán wò gan-an. Nípa bẹ́ẹ̀, àtúnṣe hydrate nínú àwọn àpẹẹrẹ lókè máa ń lo àwọn iye tí a wọn dípò àròjinlẹ̀ pé ohun náà jẹ́ trihydrate. Nígbà tí àkójọpọ̀ iṣelọpọ méjì bá fúnni ní ìṣúpọ̀ tí ó yàtọ̀ láti ìwúwo tí a wọn kan náà, ìwé ẹ̀rí máa ń ṣàlàyé ìdí rẹ̀ ní ọ̀pọ̀ ìgbà.