לייענען E. coli און אַנדערע קאָלאָניע־אויסזעענישן אויף EMB אַגאַר

אַ סטודענט שטרײַכט אַן אומבאַקאַנטן מוסטער אויף עאָסין־מעטילען־בלוי אַגאַר, אינקובירט אים איבער נאַכט, און קומט צוריק צו אַ פּלאַטע מיט טונקעלע קאָלאָניעס און אַ גרינעם שימער. דער אײַנטראָג אין העפֿט לייענט זיך: „E. coli, באַשטעטיקט.“ דער אײַנטראָג טענהט מער ווי די פּלאַטע קען שטיצן. די פּלאַטע ווײַזט אַ וואַקסן־ און פֿערמענטאַציע־פֿענאָטיפּ אונטער באַשטימטע באַדינגונגען. די אידענטיטעט פֿונעם מין איז אַ באַזונדערע טענה, וואָס דאַרף באַזונדערע באַווײַזן.

דער וועגווײַזער באַהאַנדלט EMB אַגאַר־רעזולטאַטן ווי אַן אויפֿגאַבע פֿון אויסטײַטשונג. ער דערקלערט דעם אונטערליגנדיקן געדאַנק, פֿירט דורך אַן אילוסטראַטיוון פּלאַטע־אַטלאַס מיט קאָנטראָלן, און באַצייכנט די פֿאַלן וווּ דאָס לערנבוך־בילד קען פֿאַרפֿירן.

דער געדאַנק הינטער דער פּלאַטע

EMB אַגאַר איז סײַ סעלעקטיוו, סײַ דיפֿערענציעל. די פֿאַרבשטאָפֿן עאָסין Y און מעטילען־בלוי אונטערדריקן אַ סך גראַם־פּאָזיטיווע אָרגאַניזמען, דערפֿאַר באַגינסט דאָס מעדיום גראַם־נעגאַטיוון וואַקסן. די זעלבע פֿאַרבשטאָפֿן דינען ווי אינדיקאַטאָרן: ווען אַן אָרגאַניזם פֿערמענטירט דעם פֿאַראַנענעם צוקער און פּראָדוצירט גענוג זויער לאָקאַל, נעמט די קאָלאָניע שטאַרק אויף דעם פֿאַרבשטאָף און ווערט טונקל־פֿיאַלקע ביז בלוי־שוואַרץ. בײַ שטאַרקער זויער־פּראָדוקציע קען די קאָלאָניע־אייבערפֿלאַך ווײַזן אַ מעטאַלישן גרינעם איריזירנדיקן גלאַנץ. דער ASM־פּראָטאָקאָל פֿאַר עאָסין־מעטילען־בלוי אַגאַר־פּלאַטעס באַשרײַבט די קאָמבינאַציע פֿון סעלעקציע און דיפֿערענצירונג און גיט רעפֿערענץ־פֿאָטאָגראַפֿיעס פֿאַרן לערנען.

איין פּרט איז וויכטיק איידער מע לייענט וועלכן־ניט־איז רעזולטאַט: קאָנטראָלירט וועלכע פֿאָרמולאַציע ווערט געניצט. די עלטערע Holt Harris Teague־פֿאָרמולאַציע אַנטהאַלט לאַקטאָז צוזאַמען מיט סאַכאַראָז, בשעת Levine EMB אַנטהאַלט נאָר לאַקטאָז. אַן אָרגאַניזם וואָס פֿערמענטירט סאַכאַראָז אָבער נישט לאַקטאָז, ווי אַ סך Serratia marcescens־איזאָלאַטן, קען אויסזען אַנדערש אויף די צוויי ווערסיעס. די פֿאַבריקאַנט־דאָקומענטאַציע פֿאַר EMB־מעדיומען גיט קלאָר אָן דעם אונטערשייד אין פֿאָרמולאַציע. פֿאַרשרײַבט דעם פֿאַבריקאַנט און די פֿאָרמולאַציע אין העפֿט צוזאַמען מיטן רעזולטאַט.

צוגעגרייטער, ניט־אינאָקולירטער EMB אַגאַר איז געוויינטלעך רויט־ברוין ביז רויטלעך־פֿיאַלקע, טייל מאָל מיט אַ גרינלעכן טאָן אָדער אַ פֿײַנעם אָפּזאַץ. דער הינטערגרונט־קאָליר איז נישט קיין וואַקסן. פֿאַרגלײַכט יעדע אָבסערוואַציע מיט אַ ניט־אינאָקולירטער פּלאַטע אָדער דעם דאָקומענטירטן אויסגאַנג־צושטאַנד, און לייענט די ערשטיקע פּלאַטע נאָך בערך 18 ביז 24 שעה אַעראָבישער אינקובאַציע בײַ 35 ביז 37 C, סײַדן דער לערן־פּראָטאָקאָל באַשטימט אַנדערש. אַ פֿאַרלענגערטע אינקובאַציע קען ענדערן דעם פֿערמענטאַציע־אויסזען.

ווי צו באַטראַכטן די פּלאַטע

ניצט צוויי סאָרטן ליכט. באַטראַכט ערשט די פּלאַטע אונטער אָפּגעשפּיגלטן אָדער שיפֿן ליכט און נייגט זי: דער מעטאַלישער גלאַנץ איז איריזירנדיק און קען דערשײַנען אָדער פֿאַרשווינדן לויטן באַטראַכטונג־ווינקל. באַטראַכט זי דערנאָך מיט דורכגייענדיקן ליכט, כּדי אָפּצושאַצן דעם קאָלאָניע־קאָליר און די טונקעלע צענטערס. אַרבעט מיט גוט אָפּגעזונדערטע קאָלאָניעס, ווײַל געדיכטקייט און שכנותדיקע קאָלאָניעס ענדערן די לאָקאַלע זויער־אָנזאַמלונג און קענען פֿאַרשוואַכן אָדער פֿאַרשטאַרקן דעם קאָליר. די ASM־בילדער־זאַמלונג ווײַזט דאָס דירעקט: E. coli אין אַ געמישטער קולטור קען פֿאַרלירן זײַן דערוואַרטן גלאַנץ, ווײַל די אַרומיקע אָרגאַניזמען ענדערן די זויערע סבֿיבֿה.

שליסט אײַן קאָנטראָלן ווען די געניטונג דערלויבט עס. אַ געוויינטלעכער לערן־סעט באַשטייט פֿון E. coli ATCC 25922 פֿאַרן בלוי־שוואַרצן און מעטאַליש־גלאַנציקן פֿענאָטיפּ, אַ ניט־פֿערמענטירער ווי Salmonella Typhimurium ATCC 14028 אָדער Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 פֿאַרן קאָלירלאָזן פֿענאָטיפּ, און אַ גראַם־פּאָזיטיוון אָרגאַניזם ווי Enterococcus faecalis אָדער Staphylococcus aureus ווי אַן אינהיביציע־קאָנטראָל, ווי אויסגערעכנט אין די סטאַנדאַרט־טאַבעלעס פֿאַר קוואַליטעט־קאָנטראָל פֿון EMB־מעדיומען. אויב דער פּאָזיטיווער קאָנטראָל האָט נישט קיין גלאַנץ, פֿאַרדעכטיקט אינקובאַציע, געדיכטקייט אָדער פֿאָרמולאַציע איידער איר פֿאַרדעכטיקט דעם אומבאַקאַנטן מוסטער.

אילוסטראַטיווער פּלאַטע־אַטלאַס

די פּלאַטעס אונטן זענען גענערירטע אילוסטראַציעס, נישט פֿאָטאָגראַפֿיעס פֿון אמתע קולטורן. זיי ווײַזן דעם מוסטער וואָס מע זאָל זוכן, נישט דעם גענויען קאָליר־שאָטן פֿון אַ באַזונדערן שטאַם. פֿאַרגלײַכט זיי מיט די ASM־רעפֿערענץ־פֿאָטאָגראַפֿיעס און מיט אמתע פּלאַטעס פֿונעם לערן־לאַבאָראַטאָריע.

פּלאַטע 1: Escherichia coli אויף EMB אַגאַר, אַ שטאַרקער לאַקטאָז־פֿערמענטירער

E. coli אויף EMB אַגאַר איז געוויינטלעך טונקל־פֿיאַלקע ביז בלוי־שוואַרץ, אָפֿט מיט אַ טונקעלן צענטער און אַ מעטאַלישן גרינעם גלאַנץ פֿון שטאַרקער זויער־פּראָדוקציע. דער גלאַנץ איז די באַקאַנטע דערשײַנונג וואָס סטודענטן זוכן, אָבער באַהאַנדלט אים ווי אַ שטיצנדיקן באַווײַז, נישט ווי אַ דעפֿיניציע. די שטאַרקייט פֿונעם גלאַנץ בײַט זיך לויטן שטאַם, דער אינקובאַציע־צײַט, דער קאָלאָניע־געדיכטקייט און דעם באַטראַכטונג־ווינקל. דאָס פֿעלן פֿון גלאַנץ שליסט נישט אויס E. coli, און אַ טונקעלע קאָלאָניע אָן גלאַנץ ווײַזט אויף עטלעכע אַנדערע פֿערמענטירער. פֿאַר יעדן ווײַטערדיקן אַרבעט קלײַבט אויס אַ גוט אָפּגעזונדערטע קאָלאָניע, אַנשטאָט צו לייענען פֿון אַ געדיכט באַוואַקסענעם סעקטאָר.

פּלאַטע 2: Klebsiella pneumoniae אויף EMB אַגאַר, אַ שליימיקער פֿערמענטירער

Klebsiella pneumoniae אויף EMB אַגאַר פֿאָרמירט געוויינטלעך גרויסע, בלאַנקנדיקע, שליימיקע קאָלאָניעס אין ראָזעווע־פֿיאַלקע ביז ברוין־פֿיאַלקע שאָטנס, אָפֿט מיט טונקעלע צענטערס, אָבער בדרך־כּלל אָן אַ שטאַרקן מעטאַלישן גלאַנץ. אַן ענלעכע מאָרפֿאָלאָגיע קומט פֿאָר בײַ פֿאַרוואַנדטע פֿערמענטירער ווי Enterobacter. די שליימיקע טעקסטור און די קאָלאָניע־גרייס זענען אַ טייל פֿונעם לייענען: אַ ראָזעווע קאָלאָניע וואָס איז קליין און פֿלאַך האָט אַן אַנדער וואָג ווי אַ גרויסע, קופּלדיקע, שליימיקע. ווי בײַ E. coli, גיט די פּלאַטע אַן אָנווײַז אויף אַ פֿערמענטאַציע־פֿענאָטיפּ, און אַ באַשטימונג אויפֿן מין־ניוואָ דאַרף די ביאָכעמישע באַשטעטיקונג וואָס ווערט באַשריבן אונטן.

פּלאַטע 3: Salmonella אויף EMB אַגאַר און אַנדערע ניט־פֿערמענטירער, קאָלירלאָזע קאָלאָניעס

Salmonella אויף EMB אַגאַר און פֿאַרוואַנדטע ניט־לאַקטאָז־פֿערמענטירער, אַרײַנגערעכנט Shigella און אַ סך Pseudomonas־איזאָלאַטן, וואַקסן געוויינטלעך ווי קאָלירלאָזע ביז האַלב־דורכזיכטיקע אָדער בלאַס־בורשטינפֿאַרביקע קאָלאָניעס. געוויסע פֿאָרמולאַציעס און באַדינגונגען געבן אַ שוואַכן ראָזעוון טאָן, דערפֿאַר איז אַ בלאַס־ראָזעווע קאָלאָניע נישט אויטאָמאַטיש אַ פֿערמענטירער. EMB אונטערשיידט נישט Salmonella פֿון Shigella אָדער פֿון אַנדערע ניט־פֿערמענטירער; יענער אונטערשייד געהערט צו שפּעטערדיקע טעסטן. באַמערקט אויך אַז לאַקטאָז־פּאָזיטיווע Salmonella־שטאַמען מיט מעטאַלישע קאָלאָניעס ענלעך צו E. coli זענען דאָקומענטירט געוואָרן, וואָס איז נאָך אַ סיבה פֿאַר וואָס איין פּלאַטע קען נישט שליסן די פֿראַגע.

פּלאַטע 4: Serratia marcescens און די פֿאָרמולאַציע־פּאַסטקע

Serratia marcescens פֿאַרדינט אַן אייגענעם אָפּטייל, ווײַל סטודענטן דערוואַרטן אָפֿט רויטע קאָלאָניעס און לייענען דערנאָך די פּלאַטע פֿאַלש. רובֿ קלינישע איזאָלאַטן פֿערמענטירן נישט לאַקטאָז, דערפֿאַר זעען זיי אויף Levine EMB אָפֿט אויס בלאַס ביז שוואַך פֿאַרביק. ווײַל אַ סך איזאָלאַטן פֿערמענטירן סאַכאַראָז, קען אַ פֿאָרמולאַציע וואָס אַנטהאַלט סאַכאַראָז געבן אַ טונקעלערע רעאַקציע אָדער אַ רעאַקציע מער פֿאַרבונדן מיט זויער. דערוואַרט אויך נישט דעם קלאַסישן רויטן פּראָדיגיאָסין־פּיגמענט בײַ 35 ביז 37 C; פּיגמענט־פּראָדוקציע איז נישט פֿאַרלאָזלעך בײַ אינקובאַטאָר־טעמפּעראַטור. ווען דער פּראָטאָקאָל דערמאָנט Serratia marcescens אויף EMB אַגאַר, קאָנטראָלירט וועלכע פֿאָרמולאַציע די דערקלערונג נעמט אָן. אַן איבערבליק פֿון Serratia־מעטאַבאָליזם פֿאַסט צונויף דעם לאַקטאָז־נעגאַטיוון און סאַכאַראָז־וואַריאַבלען מוסטער הינטער דער פּאַסטקע.

פּלאַטע 5: קאָנטראָלן און אינהיבירטע אָרגאַניזמען

גראַם־פּאָזיטיווע אָרגאַניזמען ווי Staphylococcus, Enterococcus, Streptococcus און Bacillus ווערן בדרך־כּלל אינהיבירט אָדער שטאַרק אונטערדריקט אויף EMB אַגאַר, כאָטש די אינהיביציע איז נישט אַבסאָלוט פֿאַר יעדן שטאַם. אַ קאָנטראָל־פּאַנעל מאַכט דאָס לייענען פֿאַרלאָזלעך: דער E. coli־קאָנטראָל זאָל ווײַזן גוטן וואַקסן מיט אַ בלוי־שוואַרצן קאָליר און גלאַנץ, דער ניט־פֿערמענטירער־קאָנטראָל זאָל ווײַזן קאָלירלאָזן וואַקסן, און דער אינהיביציע־קאָנטראָל זאָל ווײַזן ווייניק אָדער גאָר קיין וואַקסן. אויב דער אינהיביציע־קאָנטראָל וואַקסט גוט, האָט דער סעלעקטיווער שריט דורכגעפֿאַלן, און יעדע אַנדערע אויסלייענונג פֿון יענעם באַטש איז פֿאַרדעכטיק. פֿאַרב־מעטאָדן ענטפֿערן אויף אַן אַנדער פֿראַגע ווי קולטור־מעדיומען; פֿאַר דער פֿאַרבונג פֿון אָביעקט־גלעזלעך אין לאַבאָראַטאָריע, זעט דעם מעטילען־בלוי־פֿאַרבונג־אַטלאַס.

פֿאַרגלײַך מיט באַגרענעצונגען

דרײַ זאַצן פֿאַסן צונויף די פֿאַרפֿירנדיקע אויסזעענישן. טונקל מיינט נישט E. coli, ווײַל Klebsiella, Enterobacter און אַנדערע פֿערמענטירער אַנטוויקלען טונקעלע צענטערס אָן גלאַנץ. ראָזעווע מיינט נישט Klebsiella, ווײַל מעסיקע אָדער פּאַמעלעכע פֿערמענטירער און געוויסע נאָמינעלע ניט־פֿערמענטירער זעען אויס ראָזעווע אָדער לאַווענדל־פֿאַרביק. גלאַנץ מיינט נישט דעפֿיניטיוו E. coli, ווײַל אַנדערע שטאַרקע פֿערמענטירער קענען אים פּראָדוצירן. דער לערן־פּראָטאָקאָל און זײַנע געמישטע־קולטור־אילוסטראַציעס ווײַזן יעדן פֿון די פֿאַלשע אויספֿירן.

גרענעצן פֿון באַשטעטיקונג

EMB אַגאַר גיט אָן אַ פֿענאָטיפּ, נישט אַ מין. פֿאַרשידענע אָרגאַניזמען קענען האָבן דעם זעלבן קאָלאָניע־אויסזען, און איין אָרגאַניזם קען אָפּווײַכן פֿון זײַן לערנבוך־בילד לויטן שטאַם, עלטער, געדיכטקייט, פֿאָרמולאַציע און אינקובאַציע. דערפֿאַר באַהאַנדלען לערן־ און קלינישע אַרבעט־פּראָצעסן EMB־מאָרפֿאָלאָגיע ווי אַ פֿאַרלויפֿיקן אָנווײַז.

אַ באַגרינדבאַרער סטודענטישער אַרבעט־פּראָצעס איז: באַשרײַבן די אָפּגעזונדערטע קאָלאָניע — גרייס, קאָליר, צענטער, גלאַנץ אונטער שיפֿן ליכט און שליימיקן כאַראַקטער — און פֿאַרשרײַבן די פֿאָרמולאַציע, אינקובאַציע־צײַט און טעמפּעראַטור, און די קאָנטראָלן; דערנאָך איבערזייען אַ גוט אָפּגעזונדערטע קאָלאָניע, כּדי צו באַקומען אַ ריינע קולטור איידער וועלכן־ניט־איז באַשטעטיקונג־טעסט. געוויינטלעכע ווײַטערדיקע שריט שליסן אײַן גראַם־פֿאַרבונג צוזאַמען מיט IMViC־רעאַקציעס פֿאַר דער פֿאַרלויפֿיקער אידענטיפֿיקאַציע פֿון E. coli און קאָליפֿאָרמען, TSI אָדער KIA און אָרגאַניזם־ספּעציפֿישע ביאָכעמישע טעסט־פּאַנעלן פֿאַר קישקע־אָרגאַניזמען, מיט סעראָלאָגישער, MALDI TOF אָדער אַנדערער וואַלידירטער אידענטיפֿיקאַציע ווען די אויפֿגאַבע פֿאָדערט עס. פֿאַר הינטערגרונט וועגן דעם אָרט פֿון EMB צווישן סעלעקטיווע און דיפֿערענציעלע קישקע־מעדיומען, זעט אַרײַנפֿירונגען צו קולטור־מעדיומען פֿאַר קישקע־אָרגאַניזמען און ווײַטערדיקע שריט נאָך גראַם־פֿאַרבונג. פֿאַר דער פֿאַרוואַנדטער פֿראַגע וואָס אַ בלויע פֿאַרבונג אויף אַן אָביעקט־גלעזל קען און קען נישט באַווײַזן, האַלט דער מעטילען־בלוי־פֿאַרבונג־אַטלאַס אָבסערוואַציע און אויספֿיר באַזונדער אין דעם זעלבן גײַסט.

שרײַבט די אָבסערוואַציע פֿאַרן אויספֿיר. „טונקל־בלוי־שוואַרצע קאָלאָניעס מיט אַ ווינקל־אָפּהענגיקן גרינעם גלאַנץ אויף Levine EMB נאָך 24 שעה, קאָנסיסטענט מיט שטאַרקער לאַקטאָז־פֿערמענטאַציע“ איז באַגרינדבאַר. „E. coli, באַשטעטיקט“ פֿאָדערט דעם באַשטעטיקונג־שריט וואָס די פּלאַטע אַליין קען נישט צושטעלן.