خون کو بنفشی رنگ دینے والا رنگ آمیزہ کس نے تیار کیا؟ میتھیلین بلیو، ملاخوفسکی، رومانوفسکی اور گیمسا

ایوسن سرخ ہے۔ میتھیلین بلیو نیلا ہے۔ دونوں کو ملائیں، آمیزہ خون کی خشک تہہ پر لگائیں، تو تہہ کے کچھ حصے بنفشی ہو جاتے ہیں۔

ہر حصہ نہیں۔ اچھی تیاری میں خون کے سفید خلیوں کے مرکزے سرخی مائل بنفشی رنگ لیتے ہیں، اور ملیریا کے طفیلیے کے اندر کرومیٹن بھی یہی رنگ لیتا ہے، جبکہ اردگرد کے سرخ خلیے گلابی اور سائٹوپلازم سرمئی مائل نیلا رہتا ہے۔ یہی بنفشی رنگ خلیوں کی مختلف اقسام کو ایک دوسرے سے ممتاز کرتا ہے۔

کسی بھی بوتل میں بنفشی رنگ موجود نہیں ہوتا۔ یہ رنگ صرف اس وقت ظاہر ہوتا ہے جب میتھیلین بلیو کے ٹوٹنے سے بننے والا ایک مخصوص مادّہ سلائیڈ پر ایوسن سے ملتا ہے۔ 1880 اور 1890 کی دہائیوں میں کسی کو اس مادّے کے وجود کا بھی علم نہیں تھا، اس کی شناخت تو بہت دور کی بات تھی۔ اس رنگ کی کھوج کرنے والے لوگ ناخالص رنگ مادّوں کے ساتھ، اپنے طور پر کام کر رہے تھے۔ ان کے پاس یہ معلوم کرنے کا کوئی قابلِ اعتماد طریقہ نہیں تھا کہ دو ماہ شیلف پر پڑی رہنے کے بعد بوتل میں کیا موجود ہے۔

اسی لیے عنوان میں پوچھے گئے سوال کے ایک سے زیادہ قابلِ دفاع جواب ہیں، اور اسی لیے 2011 میں اس کا جواب بدل گیا۔

آمیزے کے ساتھ بدلنے والی مشاہداتی معلومات

یہ رنگ آمیزہ یکبارگی ایجاد نہیں ہوا۔ یہ بتدریج بنتا گیا۔ آمیزے میں ہر تبدیلی سے ٹھیک ایک نئی چیز دکھائی دینے لگی، اور ان نئی چیزوں کی ترتیب اس تاریخ کو سمجھنے کا سب سے واضح طریقہ ہے۔

آخری کالم میں نظر آنے والا تسلسل اہم ہے۔ ہر پیش رفت نے رنگوں کی حد وسیع کی، اور ہر توسیع سے ایک اور ساخت دکھائی دینے لگی۔ بنفشی رنگ اس تکنیک کی آرائش نہیں؛ یہ طفیلیے کی موجودگی دیکھنے اور اس کی اندرونی ساخت دیکھنے کے درمیان فرق ہے۔ خود یہ رنگ مادّہ BASF کے رنگ سازی کے کارخانے سے طب تک کیسے پہنچا، اس کی ایک طویل تاریخ ہے، جس کی اپنی دستاویزات ہیں۔ اوپر دی گئی پوری ترتیب، ہر اندراج کے ماخذ سمیت، معاونین کی ماخذ سے منسلک زمانی ترتیب میں محفوظ ہے۔

شکل: انہی چھ آمیزوں کو اس طرح دکھایا گیا ہے کہ برتن میں کیا تھا اور اس سے کیا نتیجہ نکلا۔ دائرے رنگ مادّے دکھاتے ہیں؛ نیچے کے خانے وہ رنگ دکھاتے ہیں جو یہ مادّے خون کی تہہ میں پیدا کر سکتے تھے۔ 1890 سے پہلے کسی میں سرخی مائل بنفشی خانہ نہیں، اور اس کے بعد کسی میں یہ خانہ غائب نہیں۔

وہ شخص جس نے دانستہ بوریکس استعمال کیا

ایرنسٹ ملاخوفسکی بریسلاؤ، جو اب وروتسواف ہے، میں طبیب تھے۔ انہوں نے اپنا پیشہ ورانہ وقت نجی طبابت اور ایک چھوٹے کلینک میں گزارا، جسے وہ ایک ساتھی کے ساتھ چلاتے تھے، اور اپنے فارغ وقت میں تجربہ گاہ کا کام کرتے تھے۔ وہ 12 مارچ 1857 کو سٹشیلنو میں پیدا ہوئے، بریسلاؤ یونیورسٹی میں طب پڑھی، اور 1882 سے 1887 تک آل سینٹس ہسپتال میں داخلی طب کے معاون رہے۔ اس وقت یہ جرمنی کا دوسرا سب سے بڑا ہسپتال تھا۔

انہوں نے 1888 میں خینچنسکی اور پلین کے دوہرے رنگ آمیزے سے آغاز کیا۔ 1889 میں تیار کردہ ایک نمونے میں انہوں نے دیکھا کہ پلازموڈیم کے مرکزے کا کرومیٹن سائٹوپلازم سے مختلف رنگ لیتا ہے، مگر پھر وہ اس نتیجے کو دہرا نہ سکے۔ انہوں نے میتھیلین بلیو کو تیزابی بنانے کی کوشش کی، جس سے صورتِ حال مزید خراب ہوئی۔ انہوں نے اسے بوریکس سے قلوی بنانے کی کوشش کی، جو ہر بار کامیاب ہوئی۔ انہوں نے 15 جون 1890 کو عوامی طور پر اس طریقے کا مظاہرہ کیا اور اگست 1891 میں اس کی مزید تفصیلی وضاحت شائع کی، جس میں بوریکس کی ہدایت بھی شامل تھی۔ انہوں نے لکھا کہ رنگ آمیزی میں چوبیس گھنٹے لگتے تھے اور نتائج آسانی سے دہرائے جا سکتے تھے۔

تشخیصی تجربہ گاہ میں چوبیس گھنٹے بہت طویل وقت ہے، اور ان کے مقالے میں طفیلیے کے مرکزے کے بنفشی مائل سرخ رنگ پر زیادہ توجہ نہیں دی گئی تھی۔ وجہ جو بھی رہی ہو، کسی نے میتھیلین بلیو کو دانستہ قلوی بنانے کا طریقہ نہیں اپنایا، یہاں تک کہ نوخت نے 1898 میں دوبارہ ایسا کیا۔ ملاخوفسکی نے اس کے بعد خون کی رنگ آمیزی کے بارے میں کبھی کچھ نہیں لکھا۔

حالیہ عرصے تک ان کے بارے میں بہت کم معلومات ہونے کی وجہ کوئی اسرار نہیں، بلکہ محفوظ دستاویزات کی کمی ہے۔ طبی لٹریچر میں ان کی زندگی کا تقریباً کوئی سراغ باقی نہیں رہا، اور جو باقی رہا وہ ایک ہی راستے سے ملا۔ ان کی بیٹی ماری 1939 میں جرمنی چھوڑ کر لندن چلی گئیں، برطانوی فوج میں خدمات انجام دیں اور کینیڈا میں آباد ہو گئیں۔ ان کے خاندانی کاغذات کا مجموعہ بالآخر نیویارک کے لیو بیک انسٹی ٹیوٹ پہنچا۔ ان کے بھائی لیو پہلی جنگِ عظیم میں مارے گئے۔ ان کی بہن ایوا کو اپریل 1942 میں بریسلاؤ سے ازبیتسا کے عبوری کیمپ جلاوطن کیا گیا، اور وہ کبھی واپس نہ آئیں۔ ان کی والدہ ہیڈوگ نے اسی جلاوطنی کا انتظار کرنے کے بجائے 22 اپریل 1942 کو اپنی جان لے لی۔ ملاخوفسکی ان سب واقعات سے پہلے، 1934 میں وفات پا چکے تھے۔

جس خاندان کی تاریخ اس طرح ختم ہو، اس کے حوالے بھی دیے جانے بند ہو جاتے ہیں۔ ملاخوفسکی کو اس رنگ آمیزے کی ترقی کی تاریخ میں دوبارہ جگہ دینے والے دونوں مقالے 2011 میں شائع ہوئے۔ انہیں پوزنان اور وروتسواف کی محفوظ دستاویزات اور نیویارک میں ماری کے کاغذات سے مرتب کیا گیا۔

پھپھوندی لگی بوتل اور ایک خوش قسمت روسی

دمتری رومانوفسکی نے سینٹ پیٹرزبرگ کی ملٹری میڈیکل اکیڈمی میں طب پڑھی اور اپنے پیشہ ورانہ عرصے کا بیشتر حصہ ملیریا پر کام کرتے ہوئے گزارا۔ 1890 میں انہوں نے ایک طریقہ شائع کیا جو تحریری طور پر خینچنسکی کے طریقے سے تقریباً یکساں تھا: بغیر کسی تبدیلی کے میتھیلین بلیو اور ایوسن، مگر ایوسن کی مقدار کچھ زیادہ۔

ستمبر 1891 میں انہوں نے وہ طریقہ شائع کیا جس سے ان کا نام مشہور ہوا، اور اہم تفصیل ہدایات میں دبی ہوئی تھی۔ ان کے بہترین نتائج میتھیلین بلیو کے پہلے سے موجود محلول سے آئے، جو دو ماہ سے زیادہ پڑا رہا تھا اور اس پر پھپھوندی اگ رہی تھی۔ پھپھوندی اور پڑا رہنے کی مدت نے رنگ مادّے سے جزوی طور پر میتھائل گروپ الگ کر دیے تھے۔ رومانوفسکی کو اس کا علم نہیں تھا اور وہ اسے قابو نہیں کر سکتے تھے۔ دوسرے کارکنوں نے جب ان کا طریقہ آزمایا تو بنفشی رنگ حاصل نہ کر سکے۔ ان کا تحقیقی مقالہ جون 1891 میں سینٹ پیٹرزبرگ میں جمع ہو چکا تھا، اسی لیے رائج تاریخی بیان 1891 کو دریافت کا سال قرار دیتا ہے۔

ملاخوفسکی کا مظاہرہ جون 1890 میں، ایک سال سے بھی زیادہ پہلے ہوا تھا، اور ان کا طریقہ دانستہ طور پر مطلوبہ نتیجہ دیتا تھا۔

رنگ آمیزہ غلط شخص کے نام سے کیوں منسوب ہوا

ملاخوفسکی کے حق میں دلائل کرسٹین کرافٹس، ایرنسٹ ہیمپلمن اور باربرا اولیکسِن نے جمع کیے، اور یہ چار باتوں پر مبنی ہیں۔ عوامی مظاہرے کی تاریخ: جون 1890، بمقابلہ ستمبر 1891۔ لفظ دانستہ، بمقابلہ لفظ اتفاقی۔ یہ حقیقت کہ ملاخوفسکی نے بوریکس سمیت اپنا پورا طریقہ شائع کیا، جبکہ رومانوفسکی کا طریقہ ایک بے قابو متغیر پر منحصر تھا۔ اور یہ مشاہدہ کہ پلازموڈیم کے مرکزے کی تفصیل، اسے نمایاں کرنے والے بنفشی رنگ سمیت، عملاً سات سال تک لٹریچر سے غائب رہی، کیونکہ کوئی اتفاقی طریقے کے نتائج دہرا نہیں سکتا تھا۔

وہ اپنے نتیجے کے بارے میں دوٹوک ہیں۔ سوانحی مقالے میں وہ اس نسبت کو «ایک سنگین ناانصافی» کہتے ہیں، اور رالف للی کا حوالہ دیتے ہیں، جنہوں نے 1978 میں لکھا تھا کہ «شاید ہمیں رنگ آمیزوں کے اس خاندان کو ملاخوفسکی کے رنگ آمیزے کہنا چاہیے»۔

یہ دعویٰ متنازع ہے، جیسا کہ اولین دریافت کے دعوے عموماً ہوتے ہیں۔ اس اختلاف کی نوعیت کو فیصلہ کرنے کے بجائے سمجھانا مفید ہے۔ اولین دریافت کی بحث میں یہ واضح کرنا ضروری ہے کہ دریافت کیا تھی۔ اگر دریافت بنفشی رنگ ہے، تو ملاخوفسکی کا دستاویزی مظاہرہ پہلے ہوا تھا۔ اگر دریافت شائع شدہ طریقہ ہے، تو دونوں نے 1891 میں اپنا طریقہ شائع کیا، اور رنگ آمیزہ رومانوفسکی کے نام سے منسوب ہوا۔ اگر دریافت اس کی وضاحت ہے، تو دونوں میں سے کسی کا دعویٰ نہیں بنتا، کیونکہ کسی کو بھی معلوم نہیں تھا کہ رنگ مادّے کی پختگی دراصل میتھائل گروپوں کا الگ ہونا ہے، اور کوئی بھی یہ نہیں بتا سکتا تھا کہ رنگ ظاہر کیوں ہوتا ہے۔ عام فہم بیانات یہی آخری نکتہ چھوڑ دیتے ہیں۔ فعال جز ایک ایسی آمیزش تھی جس کی کسی نے شناخت نہیں کی تھی، اور جس شخص نے پہلی بار دانستہ یہ رنگ پیدا کیا، اس نے ایسا ایک قابلِ تکرار تجرباتی نسخے سے کیا تھا، اس سمجھ کی بنیاد پر نہیں کہ وہ نسخہ کیا عمل کرتا ہے۔

2011 کے دونوں مقالے ملاخوفسکی کے حق میں دلائل کا سب سے مکمل شائع شدہ بیان ہیں، اور دونوں PubMed پر مفت پڑھے جا سکتے ہیں: تفصیلی جائزہ PMID 21235291 پر، اور سوانحی مقالہ PMID 21660627 پر۔ جائزے کا PubMed ریکارڈ اس پر ایک تبصرہ بھی درج کرتا ہے، جو اسی سال بعد میں اسی جریدے میں 86(5):366 پر شائع ہوا۔ یہ اس بات کی مناسب یاد دہانی ہے کہ یہ استدلال سامنے آتے ہی مطبوعہ لٹریچر میں متنازع ہو گیا تھا۔

یہ تنازع کیمیا کے بارے میں اختلاف نہیں ہے۔ اس میں شامل سب لوگ اس پر متفق ہیں کہ بنفشی رنگ کیا ہے اور کون سے اجزا اسے پیدا کرتے ہیں۔ اختلاف اس پر ہے کہ پہلے کون وہاں پہنچا، اور کیا ایسا اتفاق جسے کوئی دہرا نہ سکے، وہاں پہنچنا شمار بھی ہوتا ہے۔

بعد کے ناموں نے کیا اضافہ کیا

اگر ملاخوفسکی نے بنفشی رنگ پہلے پیدا کیا، تو رنگ آمیزے کے ساتھ رومانوفسکی، رائٹ اور گیمسا کے نام کیوں جڑے ہیں؟

کیونکہ جو رنگ آمیزہ اپنے موجد کے ہاتھوں ایک بار کام کرے، وہ ابھی قابلِ استعمال ری ایجنٹ نہیں بنتا۔ بعد کے کام نے ایک غیر مستقل آمیزے کو ایسی چیز میں بدل دیا جسے دوسرے ملک کا تکنیکی کارکن کسی عام منگل کے دن بھی استعمال کر سکتا تھا۔

نوخت استدلال کے ذریعے اس نتیجے تک پہنچے۔ ایک سادہ نیوٹرل رنگ مادّے سے قابلِ اعتماد نتیجہ حاصل کرنے میں ناکامی کے بعد انہوں نے اخذ کیا کہ بنفشی رنگ میتھیلین بلیو میں موجود کسی ایسی چیز سے ضرور آتا ہے جو خود میتھیلین بلیو نہیں، اور وہ اسے تلاش کرنے لگے۔ اُنا پہلے ہی دیکھ چکے تھے کہ پرانے میتھیلین بلیو محلول ماسٹ خلیوں کے دانوں کو سرخ رنگ دیتے ہیں، اور انہوں نے تجویز کیا تھا کہ رنگ مادّے کے پختہ ہونے پر ایک نیا مادّہ بنتا ہے۔ برنتھسن نے 1885 میں دکھایا تھا کہ قلوی حالات میتھیلین بلیو سے میتھائل گروپ الگ کرتے ہیں، اور یہی پیدا ہونے والے مادّے ہیں جنہیں ہم اب ایژور کہتے ہیں۔ نوخت نے کلوروفارم سے فعال حصہ الگ کیا اور اسے صرف میتھیلین بلیو سے حاصل شدہ سرخ مادّہ کہہ سکے؛ میخائلس نے 1901 میں اسے ایژور I کا نام دیا۔ جینر نے تیاری اور استعمال کا مسئلہ حل کیا۔ میتھیلین بلیو اور ایوسن کے رسوب کو خالص میتھانول میں دوبارہ حل کرنے سے ایک واحد مستحکم محلول ملا، جو رنگ آمیزی کے ساتھ خون کی تہہ کو فکس بھی کرتا تھا، اور یوں حرارت سے فکس کرنے کی ضرورت ختم ہوئی۔ لیشمن اور روئٹر نے کثیر رنگی بنائے گئے رنگ مادّے کو الکحل والے محلّل کے ساتھ ملا کر استحکام اور بنفشی رنگ دونوں حاصل کیے۔ رائٹ نے 65 °C پر بارہ گھنٹے رکھنے اور پھر دس دن پڑا رہنے دینے کے عمل کو بہتی بھاپ میں ایک گھنٹے سے بدل دیا۔ گیمسا نے اتفاقاً پختہ ہونے والے محلول پر انحصار بالکل ختم کر دیا۔ انہوں نے معلوم رنگ مادّوں کی نپی ہوئی مقداریں استعمال کیں اور میتھانول میں گلیسرول شامل کیا، تاکہ مصنوع حارّہ علاقوں کی گرمی میں بھی برقرار رہے۔ انہوں نے کبھی شائع نہیں کیا کہ وہ خالص میتھیلین ایژور کیسے بناتے تھے۔ انہوں نے اسے لائپزگ میں ڈاکٹر گرُوبلر کی تجربہ گاہ کو فروخت کیا، جس نے اسے ایژور I کے نام سے بازار میں پیش کیا اور دعویٰ کیا کہ صرف اسی کا تیار کردہ رنگ آمیزہ مستند گیمسا رنگ آمیزہ ہے۔

اس ایژور کی شناخت پر اب بھی بحث ہوتی ہے۔ بعض کا خیال ہے کہ یہ محض کثیر رنگی بنایا گیا میتھیلین بلیو تھا، جبکہ دوسرے اسے Azure B سے بھرپور سمجھتے ہیں۔ جواب جنگ کے دوران سامنے آیا۔ جب جرمن رنگ مادّے دستیاب نہ رہے، تو ریاستہائے متحدہ کی پبلک ہیلتھ سروس کی ایک ٹیم، جس میں رالف للی، موریس رو اور ایمی ولکوکس شامل تھے، نے پایا کہ بہترین رنگ آمیزی تین الگ اجزا سے ہوتی ہے: غیر تبدیل شدہ میتھیلین بلیو، میتھائل گروپ الگ ہونے سے بننے والا اس کا تجزیاتی مادّہ Azure B، اور ایوسن۔ Azure B نے غیر دستیاب ایژور I کی جگہ لے لی، اور یہی تین اجزا آج بھی ملیریا کی تشخیص میں استعمال ہونے والے رنگ آمیزے کی بنیاد ہیں۔

سلائیڈ پر ان تین اجزا کے باہمی عمل کی کیمیا ایک الگ سوال ہے، جس کے لیے الگ صفحہ ہے۔ رومانوفسکی قسم کے رنگ آمیزوں میں رنگ مادّوں کے کردار اور کیمیا میں بتایا گیا ہے کہ Azure B اور ایوسن میں سے ہر ایک کیا کرتا ہے، اور دونوں مل کر ایسا رنگ کیوں پیدا کرتے ہیں جو کوئی ایک تنہا پیدا نہیں کرتا۔ خوردبینی مشاہدے اور تجربہ گاہ کے استعمالات کا صفحہ عملی پہلو بیان کرتا ہے: کوئی مخصوص تیاری کیا دکھاتی ہے، اور یہ کیسے جانچا جائے کہ کسی خاص مصنوع کا استعمال آپ کے مطلوبہ طریقے کے لیے موزوں ہے یا نہیں۔

تاریخ کا وہ حصہ جو آج بھی موجود ہے

اس کہانی کی ایک حقیقت 1902 کے بعد بھی برقرار رہی۔ تقریباً پچاس سال تک دنیا کے معیاری ملیریا رنگ آمیزے کا سب سے اہم جز ایک بے نام آمیزش تھا۔ وہ اتفاقاً موجود تھی، اس کی مقدار بوتلوں کے درمیان مختلف ہوتی تھی، اس عرصے کے کچھ حصے میں اس کی شناخت تجارتی راز رہی، اور 1940 کی دہائی تک اس کے تناسب پر بحث ہوتی رہی۔ رنگ آمیزہ استعمال کرنے والے لوگ لاپرواہ نہیں تھے۔ ان کے پاس یہ جاننے کا کوئی طریقہ نہیں تھا کہ بوتل میں کیا ہے۔

اسی مسئلے کی جدید صورت ایسی تخصیص ہے جو مادّے کے صرف کچھ حصے کی وضاحت کرتی ہے۔ USP کی مطابقت بازار میں دستیاب اعلیٰ ترین خالصیت تک پہنچنے کا راستہ ہے، کیونکہ یہ کسی ایک پیمائش کے بجائے ایک مکمل شائع شدہ معیار ہے: شناخت، خالصیت، ایژور رنگ مادّوں سمیت نامیاتی ناخالصیاں، باقی ماندہ محلّل، عنصری ناخالصیاں، جلانے کے بعد باقی رہنے والا مادّہ، خرد حیاتیاتی حدود اور بیکٹیریائی اینڈوٹاکسن۔ Blupreme اپنا میتھیلین بلیو ایک دوا ساز ادارے سے حاصل کرتا ہے اور تجزیے کا مکمل سرٹیفکیٹ شائع کرتا ہے، تاکہ اس فہرست کی ہر شق کی جانچ کی جا سکے، محض دعویٰ نہ کیا جائے۔ جو سرٹیفکیٹ بھاری دھاتوں کا ایک نتیجہ بتائے اور اسے USP کی تعمیل قرار دے، وہ آج کے دور میں «پختہ میتھیلین بلیو» کا لیبل لگی بوتل کے برابر ہے: ممکن ہے وہ عمدہ ری ایجنٹ ہو، مگر لیبل یہ نہیں بتاتا کہ اس میں کیا موجود ہے۔