Methylene blue sa pananaliksik sa sugat: mga dressing, liwanag, at mga resulta ng paghilom

Ang isang bendang nabahiran ng asul at isang boteng may patakan na naglalaman ng asul na likido ay mukhang iisang interbensiyon. Sa pananaliksik sa sugat, hindi sila pareho. Ang isa ay isang ginawang dressing na may nakatakdang dami ng pangkulay, na sinubok bilang isang kumpletong aparato. Ang isa naman ay isang solusyong manu-manong inilalapat, kung saan nag-iiba ang konsentrasyon, dami, at tagal ng pagkakadikit sa bawat paglalapat. Magkaibang tanong ang sinasagot ng mga pag-aaral sa dalawa, kaya magkaiba rin ang mga resultang sinusukat nila.

Pinaghihiwalay ng pagsusuring ito ang dalawa. Inilalatag nito kung ano ang inilapat ng mga mananaliksik, saan nila ito inilapat, at ano ang kanilang sinukat: lawak ng sugat, bilis ng pagsasara, bilang ng bakterya, o isang panukat sa laboratoryo na nagsisilbing pamalit, gaya ng pagsasara ng puwang na ginawa sa mga selula sa isang sisidlan.

Ang tatlong konteksto, sa payak na paliwanag

Ang pananaliksik sa sugat gamit ang methylene blue ay nahahati sa tatlong konteksto. Bawat isa ay may sariling paliwanag kung ano ang ginagawa ng pangkulay.

Una, mga foam dressing na may pangkulay. Ang mga produktong gaya ng polyvinyl alcohol foam na nilagyan ng methylene blue at gentian violet (ibinebenta bilang Hydrofera Blue antibacterial foam) ay may mga pangkulay na nakabigkis sa materyal ng dressing. Ang nakasaad na mekanismo ay aktibidad laban sa bakterya na kaugnay ng dressing, na nilalayong makatulong sa pamamahala ng dami ng bakterya sa paligid ng sugat habang sinisipsip ng foam ang likidong lumalabas dito. Ang mga desisyon sa paggamot gamit ang ganitong produkto ay nasa clinician na pumipili ng dressing para sa isang partikular na sugat; ang mga tagubilin sa paggamit ng dressing ang nagtatakda ng tagal ng pagkakalagay at dalas ng pagpapalit, hindi isang pangkalahatang resipe para sa asul na pangkulay.

Ikalawa, photodynamic therapy gamit ang methylene blue. Dito, inilalapat ang isang solusyon ng methylene blue bilang photosensitizer at saka tinatamaan ng liwanag, karaniwang pulang liwanag na malapit sa rurok ng pagsipsip ng liwanag ng pangkulay. Nakikilahok ang liwanag at oxygen sa pagbuo ng mga reaktibong kemikal na pumipinsala sa mga mikrobyo. Iba ang prosesong kemikal na ito sa paliwanag tungkol sa antioxidant na ginagamit sa pagmemerkado ng pangangalaga sa balat, isang pagkakaibang itinatampok din ng aming gabay sa methylene blue sa pangangalaga sa balat. Ang interbensiyon ay ang kombinasyon ng pangkulay, dosis ng liwanag, at oxygen, at ang pagbabago sa alinman sa tatlo ay nagbabago sa interbensiyon.

Ikatlo, methylene blue na walang liwanag sa mga selula at hayop. Sinusuri ng mga eksperimentong ito kung binabago ng pangkulay mismo ang kilos ng mga fibroblast, mga protina ng matrix, o pagsasara ng mga sugat na ginawa para sa eksperimento. Mga pag-aaral ito ng mekanismo, hindi mga pagsubok sa dressing.

Mapa ng mga pag-aaral at modelo: ano ang sinubok, saan, at ano ang nagbago

Gamitin ang talahanayang ito bilang mapa ng artikulo. Basahin ang bawat hanay mula kaliwa pakanan: ang materyal, ang modelo, at ang resultang kayang suportahan ng hanay na iyon. Walang hanay na humihiram ng resulta ng iba.

Mga dressing: isang kumpletong aparato, hindi resipe ng pangkulay

Ang mga foam dressing na pinag-aralan sa pangangalaga ng sugat ay mga ginawang aparato. Pinagsasama ng hanay ng Hydrofera Blue na inilalarawan sa pahina ng produkto ng tagagawa ang dalawang pangkulay sa isterilisadong foam: ang bersiyong CLASSIC na polyvinyl alcohol ay may hindi hihigit sa 0.00025 g ng bawat pangkulay kada gramo ng foam, at ang bersiyong READY na polyurethane ay may hindi hihigit sa 0.00035 g kada gramo. Dahil inilalagay ang mga pangkulay habang ginagawa ang produkto, may tiyak na dami ang bawat dressing, at inilalarawan ng mga klinikal na ulat ang produkto ayon sa pangalan, tagal ng pagkakalagay, at iskedyul ng pagpapalit.

Mga medikal na aparatong may clearance ang mga ito, hindi mga aprubadong gamot. Ang orihinal na dressing ay may FDA clearance K013462 mula 2002, ang bersiyong polyurethane ng Hydrofera Blue ay may clearance K130670 mula 2014, at ang bersiyong READY na may pandikit na gilid ay may clearance K190268 mula 2019. Ang clearance sa pamamagitan ng prosesong 510(k) ay nagtatatag ng malaking pagkakatulad sa isang naunang aparato; hindi ito pag-apruba ng bisa. Ang mga pahayag tungkol sa aktibidad laban sa mikrobyo sa dokumentasyon ng aparato ay higit na nakabatay sa aktibidad sa loob ng dressing at sa pagsusuri sa laboratoryo. Hindi ito dapat ipakahulugan bilang pahayag na iniisterilisa ng dressing ang tisyu na may impeksiyon sa pamamagitan ng isang nakasaad na logaritmikong pagbawas.

Ang mga nailathalang klinikal na karanasan ay pangunahing binubuo ng maliliit na seryeng walang kontrol na pangkat. Sa isang prospektibong pag-aaral sa 29 talamak na sugat nina Woo at Heil, kung saan pinalitan ang Hydrofera Blue Classic tatlong beses bawat linggo sa loob ng apat na linggo, bumaba ang karaniwang lawak ng sugat mula 21.4 tungong 12.3 cm² (isang 42.5% na pagbawas) at bumaba ang mga marka sa PUSH mula 13.3 tungong 10.7. Sa isang serye ng kaso ng 15 sugat sa mga binti at paa nina Coutts, Ryan at Sibbald, nakita ang pagliit ng sugat sa ikaapat na linggo sa 8 sa 14 na sugat na maaaring suriin, at nabawasan ang pananakit ng ilang pasyente, lalo na ng mga may ulser sa paa na kaugnay ng diabetes. Pinagsama ng isang retrospektibong cohort ng 53 sugat na iniulat ni Lullove ang foam at isang matrix ng collagen mula sa tupa, kaya hindi maiaangkop sa foam lamang ang 91.3% na karaniwang pagbawas sa lawak sa ikalabindalawang linggo. Iniulat ng isang malaking retrospektibong pagsusuri ng programa ni Hurd ang mas mabilis na paghilom kung saan ginamit ang mga dressing bilang bahagi ng isang pamantayang pakete ng pangangalaga, na muli ay sumusubok sa buong pakete sa halip na sa pangkulay.

Iisa ang limitasyong makikita sa lahat ng ito: ang dami ng bakterya ay inilalahad bilang mga klinikal na marka ng impeksiyon o mga semikwantitatibong pagsusuri sa sampol na kinuha gamit ang swab, hindi bilang sunod-sunod na kwantitatibong kultura ng tisyu. Ang tapat na buod ay nag-uulat ang mga pag-aaral sa foam na may dalawang pangkulay ng pagbawas sa lawak, pagbuti ng mga marka ng pinakailalim ng sugat, at kung minsan ay pagbawas ng pananakit, nang hindi naitatatag ang isang tugon sa dosis na partikular sa methylene blue o isang sinukat na bilis ng pagpatay sa bakterya sa tisyu. At walang anuman sa mga pag-aaral sa dressing ang nagpapatunay na katumbas nito ang pagbabad ng gasa sa solusyon mula sa boteng may patakan. Magkakaiba ang konsentrasyon, pagkakabahagi, bilis ng paglabas, pagiging isterilisado, at tagal ng pagkakalagay.

Liwanag at pangkulay: mga photodynamic na pag-aaral sa sugat

Idinaragdag ng photodynamic na pananaliksik sa sugat ang pag-iilaw sa protokol. Ang mga konsentrasyon sa mga pag-aaral sa tao ay karaniwang nasa pagitan ng 0.01% at 1% methylene blue, na may pulang liwanag na malapit sa 635 hanggang 660 nm at enerhiya bawat yunit ng lawak mula sa ilang joule kada sentimetrong parisukat hanggang higit sa isang daan. Iba-iba ang mga kontrol na pangkat: inihahambing ng ilang pag-aaral ang interbensiyon sa pamantayang pangangalaga, habang iniuulat ng iba ang bilang ng bakterya bago at pagkatapos sa parehong mga sugat.

Ang pinakapare-parehong mga palatandaan sa tao ay tungkol sa kalagayan at lawak ng sugat sa halip na sa bilang ng bakterya. Sa isang kontroladong pag-aaral sa 12 ulser na kaugnay ng diabetes ni Carrinho at mga kasamahan, ang 0.01% methylene blue na may 660 nm na liwanag sa 6 J/cm², tatlong beses bawat linggo sa loob ng sampung sesyon, ay nagbunga ng makabuluhang mas malaking pagbawas sa lawak kaysa sa paggamot sa kontrol na pangkat. Iniulat ng isang serye ng kaso ng limang sugat na may impeksiyon ni Shen at mga kasamahan ang ganap na paghilom pagkatapos ng karaniwang apat na sesyon ng 1% na pangkulay na may 635 nm na liwanag, nang walang mga kwantitatibong sukatan ng bakterya. Ang pinakamalaking pagsubok na may random na pagtatalaga hanggang ngayon, isang double-blind na pagsubok sa mga ulser sa paa na kaugnay ng diabetes na may 94 kalahok ni Chagas at mga kasamahan, ay nakakita ng pagbuti ng mga marka ng sugat sa Bates-Jensen mula sa ikatlong sesyon hanggang sa follow-up sa tatlumpung araw gamit ang 1% na pangkulay at 660 nm na laser, nang walang mga hindi kanais-nais na pangyayaring kaugnay ng paggamot, ngunit muli ay walang kwantitatibong sukatan ng dami ng bakterya.

Dalawang paglilinaw ang nagpapanatiling tapat sa mga pag-aaral na ito. Una, ang malaking resulta tungkol sa pagputol ng bahagi ng katawan na kung minsan ay sinisipi mula kay Tardivo at mga kasamahan ay gumamit ng methylene blue na pinagsama sa toluidine blue, kaya hindi ito maiaangkop sa methylene blue lamang. Ikalawa, hindi maaaring awtomatikong iugnay ang paghilom pagkatapos ng isang sesyon ng liwanag sa photochemistry na laban sa mikrobyo, dahil ang pulang liwanag mismo ay maaaring magbago sa proseso ng pagkukumpuni ng tisyu. Sa isang eksperimento sa sugat ng daga ni Sperandio at mga kasamahan na may mga pangkat para sa pangkulay lamang, liwanag lamang, pinagsamang dalawa, at kontrol, nakaimpluwensiya sa paghilom ang laser lamang. Kailangan ang pagsusuring mikrobyolohikal at ang angkop na mga kontrol upang maiugnay ang resulta sa pagpatay sa bakterya. Mas malinaw ang pananaliksik sa hayop sa puntong iyon: sa isang modelo ng sugat na may impeksiyon sa daga ni Pérez at mga kasamahan, nagbunga ang photodynamic therapy ng pinakamagandang nakikitang resulta ng paghilom, samantalang nagbunga ang mupirocin ng pinakamalaking pagbawas sa bakterya, na malinaw na naghihiwalay sa dalawang resulta. Inilalagay ng aming pangkalahatang pagsusuri ng ebidensiya tungkol sa methylene blue at pulang liwanag ang mga protokol na ito para sa sugat katabi ng mga paggamit ng liwanag na hindi para sa sugat, upang hindi mapagkamalan ang magkaparehong photochemistry bilang magkaparehong indikasyon.

Mga selula at modelo ng balat: kung saan nagsisimula ang palatandaan ng paghilom

Ang pinagmulan sa laboratoryo ng pahayag tungkol sa paghilom ng sugat ay isang pag-aaral noong 2017 ni Xiong at mga kasamahan sa mga dermal fibroblast ng tao at binuong muli na balat. Ang mga fibroblast mula sa dalawang donor, na paunang nilagyan ng 100 nM methylene blue, ay muling pumuno sa isang puwang na ginawa sa pamamagitan ng paggasgas nang makabuluhang mas mabilis kaysa sa mga selulang hindi nilagyan nito sa loob ng 24 oras. Sa binuong muli na balat na may buong kapal, pinataas ng mas mahabang pagkakalantad ang sinukat na kahalumigmigan at kapal ng dermis, at kabilang sa mga pagbabago sa matrix ang pagtaas ng ekspresyon ng elastin at COL2A1.

Mga tunay na resultang may kaugnayan sa sugat ang mga ito, at limitado ang mga ito sa kani-kanilang modelo. Sinusukat ng scratch assay ang sama-samang paglipat ng mga selula sa isang puwang sa loob ng sisidlan. Wala itong tugon ng sistemang immune, walang pagdami ng bakterya, walang likidong lumalabas sa sugat, at walang dressing. Nagdaragdag ang binuong muli na balat ng estruktura ng tisyu ngunit wala pa rin itong sirkulasyon at kumpletong sunod-sunod na proseso ng paghilom. Wala sa dalawang modelo ang sumusubok sa foam dressing o photodynamic na protokol, at wala sa dalawa ang nagbibigay ng konsentrasyon para sa paglalapat sa bahay.

Sinubok din ang methylene blue na nasa isang formulation sa mga sugat ng rodent. Ang isang niosomal na 0.005% gel na pinag-aralan ni Farmoudeh at mga kasamahan ay nagpabilis sa maagang pagsasara ng mga sugat sa daga na ginawa sa pamamagitan ng pagtanggal ng tisyu, kumpara sa pangkulay na hindi nakapaloob sa niosome at sa base ng formulation, na may mas kanais-nais na histolohiya at mga sukatan ng oxidative stress. Ang isang 0.1 mg/mL na nanoemulsion na pinag-aralan ni Gao at mga kasamahan sa mga dagang may diabetes ay nagpabilis ng pagsasara kasabay ng pagtaas ng mga palatandaan ng pagbuo ng bagong mga daluyan ng dugo at pagbawas ng mga palatandaan ng oksidasyon at apoptosis. Mahalaga ang formulation sa parehong kaso; hindi awtomatikong naaangkop ang alinmang resulta sa simpleng pangkulay na tinunaw sa tubig.

At hindi pare-pareho ang direksiyon ng epekto. Sa isang eksperimento sa anastomosis sa daga ni Dinc at mga kasamahan, ang 1% methylene blue na inilagay sa loob ng tiyan ay nagpababa sa presyong kinakailangan upang pumutok ang pinagdugtong na tisyu at sa hydroxyproline sa ikatlong araw, na nagpapakita ng paghina ng maagang paghilom sa dosis at paraang iyon ng paglalapat. Ang konsentrasyon, tisyu, formulation, at paraan ng paglalapat ang nagtatakda ng resulta.

Ano ang dapat itanong sa anumang pahayag tungkol sa sugat

Dapat makasagot sa apat na tanong ang bawat pahayag tungkol sa methylene blue at sugat. Una, ano mismo ang inilapat: isang pinangalanang ginawang dressing, isang tiyak na protokol ng photosensitizer at liwanag, o isang hindi tinukoy na solusyon? Ikalawa, saan: sa mga selula, sa sugat ng hayop, o sa mga sugat ng tao na may nakasaad na uri? Ikatlo, ano ang ginamit na paghahambingan, at sa loob ng gaanong katagal? Ikaapat, ano ang sinukat na resulta: pagbabago sa lawak, pagsasara, bilang ng bakterya, o isang panukat sa laboratoryo na nagsisilbing pamalit?

Ang mga pahayag na nagpapalabo sa unang tanong ang pinakakaraniwang pagkukulang. Ang resultang nakuha gamit ang foam na may pangkulay ay hindi nagpapatunay na wasto ang pagpahid ng asul na pangkulay sa sugat, at ang palatandaan ng aktibidad laban sa mikrobyo pagkatapos ng photodynamic na sesyon ay hindi nagpapatunay na wasto ang pagpahid ng solusyon nang walang liwanag. Ang paparating na gabay sa pagbabasa ng mga pahayag tungkol sa methylene blue at sugat ay magiging permanenteng sanggunian para sa listahang ito, kasama ang mga halimbawang may paliwanag; hanggang noon, ang talahanayan sa itaas ang nagsisilbing mapa.

Ang mga sugat na malalim, lumalawak, mabaho, may kasamang lagnat, o hindi bumubuti ay nangangailangan ng klinikal na pagsusuri sa halip na pangkulay. Mahalagang subaybayan ang pananaliksik na sinuri rito dahil tiyak ito sa mga materyal, modelo, at pagsukat. Panatilihing kaugnay ang tatlong iyon sa bawat pahayag upang maging malinaw ang pag-unawa sa larangang ito.