ሜቲሊን ብሉን ናይ ነድሪ ምልክት ምትሕልላፍን፦ ኢንፍላማሶማት፣ IL-6ን STAT3ን

ሰለስተ ላቦራቶሪታት ሓደ ዓይነት ሰማያዊ ውህድ ነድሪ ከም ዝንኪ ጸብጻብ ኣቕሪበን ንበል። ሓንቲ ካብ ማክሮፋጃት ዝወጽእ IL-1beta ከም ዝነከየ ተርኢ። ሓንቲ ኣብቲ ተመሳሳሊ ዓይነት ዋህዮ ኤንዛይም iNOS ከም ዝነከየ ተርኢ። ሓንቲ ድማ ኣብ ደም IL-6፣ ኣብ ሓንጎል ከኣ ንጥፈት STAT3 ከም ዝነከየ ተርኢ። ነተን ሰለስተ ውጽኢታት ኣብ ሓደ ጥርዓን ናይ ምጥቕላል ፈተና ኣሎ። እቲ ምጥቕላል ግን ነቲ ርኽበት ይሓብኦ።

ነፍሲ ወከፍ ውጽኢት ናቱ መበገሲ፣ ደረጃ ምትእኽኻብን ዝዕቀን መርኣዪ ውጽኢትን ዘለዎ፣ ዝተፈላለየ ኣምር ምልክት ምትሕልላፍ ይምልከት። ሜቲሊን ብሉ ንነፍሲ ወከፍ ኣምር ኣብ ዝተፈላለየ ነጥቢ ይጸልዎ። ካብዚ ዝኾነ ይኹን ውጽኢት ጥዕና የመሓይሽ ድዩ ዝብል ዝተፈልየ ሕቶ እዩ፤ ኣብ ሓፈሻዊ መግለጺና ብዛዕባ ሜቲሊን ብሉን ነድርን ድማ ተዘርዚሩ ኣሎ። እዚ ገጽ ኣብቶም መንገድታት ምልክት ምትሕልላፍ ጥራይ የተኩር።

መንገዲ 1፦ ምትእኽኻብ ኢንፍላማሶምን caspase-1ን

ኢንፍላማሶም ኣብ ውሽጢ ማይሎይድ ዋህዮ፣ ኣድላዪ ምስ ዝኸውን ዝህነጽ ፕሮቲናዊ መዋቕራዊ መደገፊ እዩ። ክፋላቱ ሓደ ሰንሰር፣ ASC ዝበሃል መራኸቢ፣ ከምኡውን caspase-1 ዝበሃል ፈጻሚ ኤንዛይም እዮም። ምስ ተኣከበ፣ caspase-1 ን pro-IL-1betaን pro-IL-18ን ቆሪጹ ናብ ዝምንጨዉ ቅርጽታቶም ይቕይሮም፤ ፓይሮፕቶሲስ ዝበሃል፣ ምስ ነድሪ ዝተኣሳሰር ዓይነት ሞት ዋህዮ እውን ከበግስ ይኽእል። እቲ ሰንሰር ዓይነት ኢንፍላማሶም ይውስኖ፦ NLRP3 ንክሪስታላትን ከም nigericinን ATPን ዝኣመሰሉ ቀዳዳ ዝፈጥሩ መርዝታትን ምላሽ ይህብ፣ NLRC4 ንባክተርያዊ flagellin ምላሽ ይህብ፣ AIM2 ንኣብ ሳይቶሶል ዘሎ ድርብ-ፈትሊ DNA ምላሽ ይህብ፣ እቲ ካብ ልሙድ መንገዲ ዝፍለ መንገዲ ድማ ንኣብ ውሽጢ ዋህዮ ዘሎ ሊፖፖሊሳካራይድ ምላሽ ይህብ።

ምንቅስቓስ ክልተ ምልክታት የድልዮ። ቀዳማይ ምልክት ቅድመ-ምድላው እዩ፦ ምስ Toll ዝመሳሰል ተቐባሊ ዝተኣሳሰር ሊጋንድ፣ ኣብ NF-kB ዝምርኮስ ትራንስክሪፕሽን NLRP3ን pro-IL-1betaን የበግስ፣ እዚ ድማ እቶም ክፋላት ንኽህልዉ ይገብር። ካልኣይ ምልክት ምትእኽኻብ እዩ፦ ካልኣይ መበገሲ ን ASC ኣብ ንኣሽቱ ጥርኑፋት ኦሊጎመራት ክእከብ፣ caspase-1 ናብ ቁራጹ p20 ክቑረጽ፣ ዝበሰለ IL-1beta p17 ድማ ክወጽእ ይገብር። ምላሽ ዝህቡ ዝርያታት ኦክስጅን ሚቶኮንድርያን ምውሳድ ክሪስታላትን፣ ኣብ NLRP3 ንካልኣይ ምልክት ኣበርክቶ ከም ዘለዎም ይፍለጥ።

እቲ ኣብ 2017 ዝተኻየደ መጽናዕቲ ማክሮፋጃት ብዛዕባ ሰፊሕ ክልከላ ኢንፍላማሶም ንሜቲሊን ብሉ ኣብ ክልቲኦም ምልክታት ፈቲንዎ። ብሊፖፖሊሳካራይድ ቅድመ-ምድላው ኣብ ዝተገብረሎም ማክሮፋጃት ሕቖ ዓጽሚ ኣናጹ፣ nigericin፣ ATPን ክሪስታላት ሞኖሶድየም ዩሬትን ነፍሲ ወከፎም ምውጻእ IL-1betaን caspase-1ን፣ ከምኡውን ምፍጣር ንኣሽቱ ጥርኑፋት ASC ኣበጊሶም። ሜቲሊን ብሉ ኣብ 20 ክሳብ 200 ማይክሮሞላር ድማ፣ ነቶም ዋህዮታት ከይቀተለ፣ ንሰለስቲኦም ብመጠን ዝምርኮስ መንገዲ ኣንኪይዎም። ን NLRC4 ዝተጠቕሙሎም flagellinን Salmonellaን፣ ን AIM2 ዝተጠቕሙሎም ድርብ-ፈትሊ DNAን Listeriaን፣ ከምኡውን ነቲ ካብ ልሙድ መንገዲ ዝፍለ መንገዲ ዝተጠቕሙሎም ብትራንስፈክሽን ናብ ዋህዮ ዝኣተወ ሊፖፖሊሳካራይድ ወይ ህያው E. coli፣ ተመሳሳሊ ኣብነት ኣርእዮም። እቲ ውህድ በይኑ ምውጻእ ኣየበገሰን፣ ናይ ቁጽጽር ሰሌዳታት ድማ ጸረ-ባክተርያዊ ጽልዋ ኣየርኣያን። ስለዚ እቲ ውጽኢት ምስ ምላሽ እቲ ኣአንጋዲ ኣካል ዝተኣሳሰረ እዩ።

ኣብ ቅድሚኡ ዘለዉ ደረጃታት፣ ሰለስተ ነጥብታት ጽልዋ ተዓቂኖም። ብ rotenone ዝተበገሰ ሚቶኮንድርያዊ ሱፐርኦክሳይድ ብሜቲሊን ብሉ ነኪዩ፣ ብ rotenone ዝተበገሰ ምውጻእ IL-1beta እውን ምስኡ ነኪዩ። ምውሳድ ፍሎረሰንት ንኣሽቱ ኩዕሶታት ነኪዩ፣ እዚ ድማ ቅድሚ ክሪስታላት ምልላይ ፋጎሳይቶሲስ ምንካይ ከም ዝነበረ ይድግፍ። ክልተ መተኣሳሰሪ ቦታታት NF-kB ብዘለዎ ፕሮሞተር NLRP3 ዝንቀሳቐስ ሪፖርተር፣ ብሜቲሊን ብሉ ዝወሓደ ንጥፈት ኣርእዩ፤ እቶም ቦታታት ዘይብሉ ዝተቖርጸ ፕሮሞተር ግን ምላሽ ኣይሃበን። ኣብ ዋህዮታት ዘይብሉ ቱቦ፣ ሜቲሊን ብሉ ንንጥፈት ብሪኮምቢናንት ቴክኖሎጂ ዝተሰርሐ ናይ ሰብ caspase-1 እውን ብቐጥታ ኣንኪይዎ። ነቲ ውህድ ኣብ ቅድመ-ምድላው ጥራይ ወይ ኣብ ምንቅስቓስ ጥራይ ምውሳኽ እውን ምውጻእ IL-1beta፣ IL-18ን caspase-1ን ኣንኪዩ፤ ስለዚ ክልቲኦም ደረጃታት ይሳተፉ እዮም።

እቶም ኣብ ኣናጹ ዝተኻየዱ ፈተነታት ምስዚ መሪጽካ ዝካየድ ጽልዋ ተሰማሚዖም። ቀታሊ መጠን ሊፖፖሊሳካራይድ ነቶም ናይ ቁጽጽር ኣናጹ ኣብ ውሽጢ ሰዓታት ቀቲልዎም፣ ሜቲሊን ብሉ ግን ብህይወት ምጽናሕ ኣመሓይሹ፤ ኣብ ፈሳሲ ፐሪቶኒየም IL-1beta ነኪዩ፣ ኣብቲ ተመሳሳሊ ፈሳሲ IL-6 ግን ኣይነከየን። ኣብ ብ Listeria ዝተበገሰ ሞዴል ፐሪቶናይቲስ፣ ኣብ ፐሪቶኒየም IL-1beta ነኪዩ፣ ጠቕላላ ቁጽሪ ዋህዮታት ግን ኣይተቐየረን። ናይ ሰብ THP-1 ሞኖሳይታት ኣብ ኩሎም ኣርባዕተ ዓይነታት ኢንፍላማሶም፣ ከም ማክሮፋጃት ኣናጹ ምላሽ ሂቦም። ውጽኢት ኢንፍላማሶም ምብሳል IL-1betaን IL-18ን እዩ ዝገልጽ፣ ንኹሉ ሳይቶኪን ኣይገልጽን። በዚ ምኽንያት እውን፣ ኣብ ፈተነታት ማይክሮግልያን ኣስትሮሳይታትን ዝርአ ቅርጺ ዋህዮታት ስርዓት መከላኸሊ ኣብ ሓንጎል፣ ካብ ምትእኽኻብ እቲ መዋቕራዊ መደገፊ ዝተፈልየ ሕቶ ይምልስ።

መንገዲ 2፦ ብምትእስሳር NF-kBን STAT1ን ዝካየድ ትራንስክሪፕሽን iNOS

ብምብጋስ ዝፍጠር ናይ ናይትሪክ ኦክሳይድ ሲንታዝ፣ ወይ iNOS፣ ኣብ ኩነታት ዕረፍቲ ኣዝዩ ውሑድ እዩ፣ ኣድላዪ ምስ ዝኸውን ድማ ትራንስክሪፕሽን ይካየደሉ። ሊፖፖሊሳካራይድ ብቐንዱ ብምፍራስ IkB-alpha፣ ድሕሪኡ ድማ ብፎስፎሪሌሽን NF-kBን ናብ ኒውክለስ ምእታዉን እዩ ዘበግሶ። ኢንተርፌሮን-ጋማ ብቐንዱ STAT1 ብ Janus kinase ፎስፎሪሌሽን ክግበረሉ፣ ድሕሪኡ ድማ STAT1 ናብ ኒውክለስ ክኣቱ ብምግባር እዩ ዘበግሶ። ነፍሲ ወከፍ ፋክተር ድማ ኣብ ፕሮሞተር iNOS ምስ ዘሎ ናቱ ቦታ ይተኣሳሰር። ንጥፈት ኤንዛይምን ምብጋስ ጂንን ዝተፈላለዩ ነጥብታት ቁጽጽር እዮም፣ ሓደ መድሃኒት ድማ ኣብ ሓዲኦም ወይ ኣብ ክልቲኦም ክሰርሕ ይኽእል።

እቲ ኣብ 2015 ዝተኻየደ መጽናዕቲ ምብጋስ iNOS ኣብ ማክሮፋጃትን ኢንዶቶክሲን ኣብ ደሞም ዘለዎም ኣናጹን ነቲ ጽልዋ ኣብ ደረጃ መልእኽቲ RNA ኣቐሚጥዎ። ኣብ RAW 264.7 ዋህዮታትን ቀዳሞት ማክሮፋጃት ኣናጹን፣ ቅድሚ ሊፖፖሊሳካራይድ፣ ኢንተርፌሮን-ጋማ ወይ ክልቲኦም ብ 30 ደቓይቕ ዝተዋህበ 1 ማይክሮሞላር ሜቲሊን ብሉ፣ ኣብ ውሽጢ 8 ክሳብ 24 ሰዓታት ፕሮቲን iNOSን mRNAን ኣንኪዩ። ኣብ መራብሒ ፈሳሲ ናይትራይት እውን ውሑድ ነይሩ፣ ብህይወት ምጽናሕ ዋህዮታት ግን ኣይነከየን። ኣብ ነፍሲ ወከፍ kg 25 mg ሊፖፖሊሳካራይድ ኣብ ዝተዋህቦም ኣናጹ፣ ሓደ ሰዓት ኣቐዲሙ ዝተዋህበ ሓደ መጠን ሜቲሊን ብሉ፣ ኣብ ነፍሲ ወከፍ kg 5 mg፣ ኣብ ሳንቡእ፣ ጸላም ከብድን ልብን ፕሮቲን iNOSን mRNAን ኣንኪዩ።

እቲ ፍሉይ ዝርዝር፣ እቲ ዘይተቐየረ ነገር እዩ። ምፍራስ IkB-alpha፣ ፎስፎሪሌሽን NF-kB፣ ፎስፎሪሌሽን STAT1ን ኣብ ኒውክለስ ምእካብ ክልቲኦም ፋክተራትን ከም ዝነበሩ ጸኒሖም። እቲ ምቁራጽ ሓደ ደረጃ ድሕሪኡ እዩ ተራእዩ፦ ካብ ኒውክለስ ዝተወስዱ ቅምጣታት፣ ድሕሪ ሊፖፖሊሳካራይድ NF-kB ምስ ናቱ ክፋል DNA ዝተኣሳሰረሉ መጠን ከም ዝነከየ፣ ድሕሪ ኢንተርፌሮን-ጋማ ድማ ምትእስሳር STAT1 ከም ዝነከየ ኣርእዮም። ናይ ክሮማቲን ኢሚዩኖፕሪሲፒቴሽን መርመራ ድማ፣ ኣብ ውሽጢ ዋህዮታት ክልቲኦም ፋክተራት ኣብ ፕሮሞተር iNOS ዝተኣሳሰሩሉ መጠን ከም ዝነከየ ኣረጋጊጹ። ፕሮሞተሩ እውን NF-kB ዝጥቀም ናይ ዕጢ ነክሮሲስ ፋክተር ኣልፋ እውን ነኪዩ። እቶም ፋክተራት ተነቒሎም ናብ ዕላማኦም በጺሖም እዮም፣ ምስቲ ዕላማኦም ዝኾነ DNA ግን ብድኹም መንገዲ ተኣሳሲሮም።

ነቲ ምስ መንገዲ 1 ዘሎ ፍልልይ ኣስተብህሉ። እዚ ምትእስሳር ፋክተር ምስ DNA ይምልከት፣ ኣብ ክንዲ STAT3 ን STAT1 ይጥቀም፣ ኣብ ክንዲ ንኣሽቱ ጥርኑፋት ASCን ቁራጻት caspase-1ን ድማ mRNA፣ ፕሮቲንን ናይትራይትን ይዕቅን። እቲ ኣብ ዝተፈላለዩ ሞዴላት ዋህዮ ዘለዉ ዕላማታት ሜቲሊን ብሉ ዘርኢ ካርታና፣ ነዚ ደረጃ ትራንስክሪፕሽን ካብ ቀጥታዊ መለክዒታት ኤንዛይምን ሚቶኮንድርያን ፈልዩ የቐምጦ።

መንገዲ 3፦ ኣብ ሴረም ዘሎ IL-6ን ኣብ ቲሹ ምንቅስቓስ STAT3ን

IL-6 ብስድራቤት ተቐበልቲ gp130 ኣቢሉ፣ ናብቲ ካብ Janus kinase ናብ STAT3 ዝኸይድ ተኸታታሊ መንገዲ ምልክት የመሓላልፍ። ፎስፎሪሌሽን ዝተገብረሉ STAT3 ክልተ ሞለኪዩላት ብምጽማድ፣ ናብ ኒውክለስ ይኣቱን ፕሮግራማት ነድሪ የበግስን። IL-6 ባዕሉ ድማ ዕላማ NF-kB ስለ ዝኾነ፣ እቶም ክልተ ብዙሕ ግዜ ናይ IL-6 ናብ STAT3 ዘንጊ ዝበሃል ናይ ግብረ-መልሲ ዑደት ይፈጥሩ። እቶም ልሙዳት መለክዒታት፣ ኣብ ቅድሚኡ ዘሎ ደረጃ ናይ ሴረም IL-6፣ ሬሽዮ ፎስፎሪሌሽን ዝተገብረሉ STAT3 ናብ ጠቕላላ STAT3፣ ከምኡውን ኣብ ድሕሪኡ ዘሎ ደረጃ ከም iNOSን COX2ን ዝኣመሰሉ ፈጸምቲ ኤንዛይማት እዮም።

እቲ ኣብ 2023 ዝተኻየደ መጽናዕቲ IL-6ን STAT3ን ኣብ ኣናጹ ድሕሪ ሊፖፖሊሳካራይድ፣ ነቲ ዘንጊ ኣብ ዝተፈላለዩ ክፍልታት ኣካል ዓቂንዎ። ተባዕትዮ C57BL/6 ኣናጹ ንሰለስተ መዓልታት፣ መዓልታዊ ኣብ ነፍሲ ወከፍ kg 1 mg ሊፖፖሊሳካራይድ ተዋሂብዎም፣ ድሕሪ ነፍሲ ወከፍ መጠን ብ 30 ደቓይቕ ድማ ኣብ ነፍሲ ወከፍ kg 5 ወይ 10 mg ሜቲሊን ብሉ ተዋሂብዎም። ኣብ ሳልሳይ መዓልቲ፣ ኣብ ክልቲኦም ጉጅለታት ሜቲሊን ብሉ ዘሎ ናይ ሴረም IL-6፣ ካብቶም ሊፖፖሊሳካራይድ ጥራይ ዝተዋህቦም ዝወሓደ ነይሩ። ኣብቲ ዝተመርመረ ጉጅለ ዝነበሩ መብዛሕትኦም ካልኦት ሳይቶኪናት ግን በቲ ዝተዋህበ ውህድ ኣይተቐየሩን። ሬሽዮታት ፎስፎሪሌሽን ዝተገብረሉ STAT3 ናብ ጠቕላላ STAT3፣ ኣብ ኮርተክስ፣ ሂፖካምፐስን ቆርበት እዝንን ዝወሓዱ ነይሮም። ናይ ማይክሮግልያ Iba-1 ምሕብራት ዝወሓደ፣ iNOSን COX2ን ዝነከዩ፣ ክብደት ምጉዳል ድማ ብኸፊል ዝተገትአ ነይሩ።

ኣብዚ ክልተ መጠንቀቕታታት ኣድለይቲ እዮም። ምንካይ ናይ ሴረም IL-6 ምስ ምንካይ ፎስፎሪሌሽን STAT3 ኣብ ቲሹ፣ ምስ ምቕያር ንጥፈት እቲ ዘንጊ ይሰማማዕ፣ ነቲ ቀንዲ ነጥቢ ጽልዋ ግን ኣይፈልዮን። ምኽንያቱ፣ ኣብ ቅድሚኡ ዘሎ ሳይቶኪን ምንካይ፣ ናይ ተቐባሊ ምልክት ምትሕልላፍ ምንካይ፣ ወይ ንጥፈት ፎስፋቴዝ ምቕያር፣ ነፍሲ ወከፎም ነቲ ተመሳሳሊ ሬሽዮ ከምጽእዎ ይኽእሉ። ብተወሳኺ፣ ኣብ ሰለስተ መዓልታት ሓጺርን ብርቱዕን ምብጋስ ዝዕቀን ክብደት፣ መለክዒ ምሉእ እንስሳ እዩ፣ ናይ ምልክት ሕማም ወይ ምህዳእ ሕማም ነጥቢ ግን ኣይኮነን። ካብ ብሎት ምስሊ ንላዕሊ ኣውድ ይውስኽ፣ ውጽኢት ምልክት ምትሕልላፍ ግን ናብ ናይ ሕክምና ጥርዓን ኣይቅይሮን። እቲ ዝተፈልየ ኬሚስትሪ ናይ ሚቶኮንድርያ ረዶክስ ቁጽጽር፣ ጎኒ ጎኒ ምስዚ ናይ ሳይቶኪን መግለጺ ይካየድ፣ ምስኡ ግን ክጥቕለል የብሉን።

ምንጽጻር መንገድታት፦ ነጥብታት ጽልዋን መለክዒታትን

እዚ ሰደቓ ሰለስተ ዘይቅኑዓት ምስግጋራት ውጽኢት ይኽልክል። ናይ ንኣሽቱ ጥርኑፋት ASC ውጽኢት፣ ናይ STAT3 ውጽኢት ኣየረጋግጽን። STAT1 ምስ ፕሮሞተር iNOS ዝተኣሳሰረሉ ውጽኢት፣ ክልቲኦም ፕሮቲናት ኣባላት ስድራቤት STAT እኳ እንተኾኑ፣ ናይ STAT3 ውጽኢት ኣየረጋግጽን። ናይ ሴረም IL-6 ውጽኢት፣ ምትእኽኻብ ኢንፍላማሶም ከም ዝነከየ ኣየረጋግጽን፦ ኣብቲ ናይ ፐሪቶኒየም ፈተነ IL-1beta ነኪዩ፣ IL-6 ግን ኣይነከየን። ነፍሲ ወከፍ መስርዕ ናቱ መበገስን መለክዕን የድልዮ። በዚ ምኽንያት፣ ናይ ዋህዮ፣ እንስሳን ክሊኒካዊን መጽናዕታት ሜቲሊን ብሉ ክንበቡ ከለዉ፣ ነፍሲ ወከፍ ጥርዓን ምስቲ ዝተዓቀነ ደረጃኡ ምስማሙ ኣድላዪ እዩ።

ካብዚ ዝኾነ ይኹን ኣብ ሰባት መጠን ኣወሃህባ፣ ድሕነት ወይ ረብሓ ኣየረጋግጽን። ሞዴላት ሊፖፖሊሳካራይድ፣ ንመካኒዝም ንምፍታን ዝጥቀሙ ቁጽጽር ዝተገብረሎም መበገስታት እዮም፣ ቅዳሓት ሕዱር ሕማም ግን ኣይኮኑን። መጠን መድሃኒት ምስቲ መበገሲ ምሃብ ድማ፣ ኣቐዲሙ ዝተረጋገጸ ሕማም ንምቕልባስ ዘይኮነስ፣ ብፈተነ ዝተበገሰ ለውጢ ንምክልኻል ዝግበር ፈተነ እዩ። ነዚ መግለጺ መካኒዝም ካብ ውጽኢታት ሕሙማት ፈሊኹም ሓዝዎ፣ ዝኾነ ይኹን ናይ ጥዕና ጥርዓን ድማ በቲ ንዕኡ ዝድግፍ መጽናዕቲ ሕሙማት መዝንዎ።