Кабуди метилен ва склерози сершумор: таҳқиқот дар ҳайвонот чиро санҷид

Агар кабуди метиленро барои MS ҷустуҷӯ кунед, мақолаҳоеро пайдо мекунед, ки зоҳиран ба як савол ҷавоб медиҳанд. Аммо чунин нест. Дар як мақола кабуди метиленро ба мушҳои бемор ҳамчун табобат доданд. Дар мақолаи дигар ҳеҷ ҳайвонро бо он табобат накарданд. Он ҷо кабуди метилен ҳамчун рангкунандаи кабуд барои буришҳои тунуки ҳароммағз истифода шуд, то патологоанатом миелинро зери микроскоп бинад.

Меҳвари тамоми мақола ҳамин фарқ аст. Ин рангкунанда дар биология ду нақш дорад ва ин нақшҳо, ғайр аз шишаи дорои модда, ҳеҷ умумияте надоранд. Ҳамчун номзади доруворӣ онро ба ҳайвони зинда бо вояи муайян медиҳанд ва мепурсанд, ки оё ҷараёни беморӣ тағйир меёбад. Ҳамчун рангкунанда онро пас аз таҷриба ба бофтаи мурдаи фиксатсияшуда мемоланд ва мепурсанд, ки бофта чӣ гуна намуд дошт. Агар ин фарқро ба назар нагиред, бахши усулҳои патологияро ҳамчун натиҷаи табобат мехонед.

EAE чист: бо забони сода

Энсефаломиелити таҷрибавии аутоиммунӣ, ки одатан EAE кӯтоҳ карда мешавад, модели стандартии ҳайвонии баъзе ҷанбаҳои склерози сершумор аст. Муҳаққиқ муши ҳассосро бо порчаи сафедаи миелин ва адъюванти қавӣ иммунизатсия мекунад. Сипас низоми масуният ба низоми марказии асаби худи ҳайвон ҳамла мекунад. Дар муш заъфи аз поён ба боло паҳншаванда пайдо мешавад, ки онро бо ҷадвали аз 0 то 5, аз думи сусту овезон то фалаҷи пойҳои қафо, ба осонӣ арзёбӣ кардан мумкин аст.

Ҳамин осонии арзёбӣ мефаҳмонад, ки чаро EAE маъмул аст ва ҳамзамон чаро метавонад ба иштибоҳ барад. MS дар инсон худ аз худ ба вуҷуд меояд, маҷмӯи васеътару камтар муайяни ҳадафҳоро дар бар мегирад ва аломатҳои биноӣ, ҳиссӣ, маърифатӣ, мағзчагӣ ва ҳаракатиро дар ҷараёни такроршаванда ё пешраванда ба вуҷуд меорад. EAE механизмҳои интихобшуда, аз қабили илтиҳоб, демиелинизатсия ва осеби аксонҳоро дар шароити назоратшаванда бозсозӣ мекунад. Он нусхаи хурди MS нест. Хонандагоне, ки мехоҳанд заминаи умумиро фаҳманд, метавонанд пеш аз арзёбии ягон иддаои алоҳида дар бораи беморӣ баррасӣ кунанд, ки таъсири кабуди метилен дар сатҳи ҳуҷайра чӣ гуна шарҳ дода мешавад.

Ду мақолаи дар поён овардашуда инчунин антигенҳои гуногуни EAE-ро истифода бурданд, ки ин муҳим аст. Таҳқиқоти табобатӣ бемориро бо MOG35-55, пептиди кӯтоҳе аз гликопротеини миелини олигодендроситҳо, ба вуҷуд овард. Таҳқиқоти патологӣ бемориро бо MP4, омезиши қисмҳои сафедаи асосии миелин ва сафедаи протеолипидӣ, ба вуҷуд овард. Интихоби хатти мушҳо ва антиген ба ҷойи пайдоиши осебҳо ва ҷараёни илтиҳоб таъсир мекунад, бинобар ин ин ду таҳқиқот ду такрори як таҷриба нестанд.

Харита: аз модел ба савол ва ҳудудҳо

Ин ҷадвалро дар пеши назар нигоҳ доред. Он такягоҳи асосии ин мақола аст. Ҳар сатр нишон медиҳад, ки модел ба кадом саволи клиникӣ ҷавоб дода метавонад, воқеан чӣ чен карда шуд ва татбиқи натиҷаҳо дар куҷо маҳдуд мешавад.

Ҳар касе, ки сарлавҳаи навбатиро месанҷад, метавонад бо ёрии роҳнамои хондани таҳқиқоти пешазклиникӣ ҳамин сутунҳоро аз нав истифода барад: навъи ҳайвон ва антиген, нақши модда, нишондиҳандаҳои натиҷа ва он ки натиҷа ҷараёни бемориро нишон медиҳад ё ҳолати бофта дар як лаҳзаро, муайян кунед.

Натиҷаи табобат: додани модда чиро тағйир дод

Таҳқиқоти табобатии соли 2016 дар Journal of Neuroimmunology мушҳои модинаи C57BL/6-и тақрибан 8 то 10-ҳафтаинаро истифода бурд, ки бо 250 микрограмм MOG35-55 барои ҳар муш иммунизатсия шуда буданд. Пас аз ба вуҷуд овардани EAE ҳайвонҳо ба таври тасодуфӣ ба гурӯҳи кабуди метилен ё гурӯҳи EAE-и бе табобат тақсим шуданд ва баҳои клиникии онҳо тақрибан то рӯзи 30 пайгирӣ гардид.

Аз рӯзи 15 то рӯзи 30 баҳои клиникии мушҳои табобатшуда нисбат ба мушҳои гурӯҳи назоратии EAE ба таври оморӣ назаррас пасттар буд, бо P камтар аз 0.01. Таҳлили ҳароммағз низ ҳамин самтро нишон дод: дар ҳайвонҳои табобатшуда инфилтратсияи илтиҳобӣ, демиелинизатсия ва талафи аксонҳо камтар буданд.

Қисми фарқкунандаи таҳқиқот маҷмӯи нишондиҳандаҳои сигналдиҳӣ буд. Табобат фаъолшавии AMPK ва ифодаи SIRT1-ро зиёд карда, фаъолшавии NF-kB — гузаргоҳи марказии илтиҳобиро — пахш намуд. Дар бахши масунияти мутобиқшаванда он ҷавоби Th17-ро коҳиш дода, ҷавоби Treg-ро тақвият бахшид. Аз ин рӯ, занҷири пешниҳодшуда чунин аст: кабуди метилен ба AMPK ва SIRT1 таъсир мекунад, сигналдиҳии NF-kB паст мешавад, тавозун аз Th17-и илтиҳобӣ ба Treg-и танзимкунанда мегузарад, осеби бофта сабуктар мешавад ва баҳои клиникӣ пасттар мегардад.

Ин занҷир тафсир аст, на пайдарпаии исботшудаи сабабу натиҷа. Таҳқиқот нишон медиҳад, ки истифодаи дору, тағйироти сигналҳо ва беҳтаршавии беморӣ ҳамроҳ рух медиҳанд. Он исбот намекунад, ки тамоми таъсири мусбат тавассути AMPK ва SIRT1 ба амал меояд. Матни дар пойгоҳҳои дастрас ба умум индексшуда низ вояи дақиқ бо миллиграмм ба ҳар килограмм, роҳи воридкунӣ, рӯзи оғоз ё давомнокиро он қадар равшан нишон намедиҳад, ки тартиби истифода танҳо аз рӯи хулосаи мақола такрор карда шавад. Ҳар рақами вояеро, ки саҳифаи фурӯш дар робита ба ин мақола меорад, тасдиқнашуда ҳисоб кунед, агар он ба бахши усулҳои матни пурра истинод накунад. Барои санҷидани он ки оё ин нишонаи ибтидоии таъсир ба масуният баъдан ба маълумоти клиникӣ расидааст, бояд ба маҷмӯи васеътари далелҳои кабуди метилен дар инсон нигарист.

Натиҷаи патологӣ: бофта дар тӯли шаш моҳ чиро нишон дод

Таҳқиқоти MP4-и соли 2015 дар PLoS ONE мушҳои модинаи C57BL/6-ро истифода бурд, ки бо 200 микрограмм MP4 дар адъюванти пурраи Фрейнд иммунизатсия шуда буданд. Ба онҳо инчунин дар рӯзи иммунизатсия ва боз баъд аз 48 соат токсини сулфаи кабуд дода шуд. Ҳеҷ ҳайвон кабуди метиленро ҳамчун дору нагирифт. Пас аз фиксатсия ва ҷойгиркунӣ дар муҳити қолабсозӣ, буришҳои кӯндаланги ҳароммағз бо ғафсии як микрометр барои микроскопияи рӯшноӣ бо кабуди метилен ранг карда шуданд; барои дидани ҷузъиёти бештар микроскопияи электронии роҳи вентролатералӣ истифода шуд.

Намунаҳои бофта дар се марҳила гирифта шуданд: дар авҷи шадид аз 7 муш, се моҳ пас аз оғози беморӣ аз 5 муш ва шаш моҳ пас аз оғози беморӣ аз 10 муш. Баҳои миёнаи клиникӣ дар ин марҳилаҳо қариб яксон буданд: тақрибан 1.7 то 1.8 дар ҷадвали аз 0 то 5. Аммо бофта манзараи дигарро нишон дод. Осеби танҳо миелин аз тақрибан 569,000 нах дар ҳар миллиметри мураббаъ дар авҷи шадид то тақрибан 1,496,000 дар шаш моҳ афзуд; фарқи байни марҳилаи шадид ва дарозмуддат бо P баробар ба 0.027 аз ҷиҳати оморӣ назаррас буд. Осеби ҳамзамони миелин ва аксонҳо то шаш моҳ тақрибан ду баробар шуд. Нахҳои аз нав миелиншаванда дар ҳар марҳила камтар аз як фоиз боқӣ монданд — ҷузъиёте, ки умед ба барқароршавиро маҳдуд мекунад.

Осеби аксонҳо шакли U-монанд дошт: дар авҷи шадид баланд, дар се моҳ пасттар ва дар шаш моҳ аз ҳама баландтар буд. Он бо варами митохондрияҳо ва камшавии фосилаи байни нейрофиламентҳо ҳамбастагӣ дошт. Арзёбӣ бе огоҳӣ аз баҳои клиникӣ ва марҳила гузаронида шуд. Ин ба тафсире қувват мебахшад, ки баҳои клиникӣ осеби сохтории давомдорро камтар аз воқеият нишон медоданд.

Ҳамин номувофиқатӣ саҳми воқеии таҳқиқот барои хонандаи мавзӯи MS аст. Баҳои устувори маъюбӣ маънои устувор мондани бофтаро надошт. Ин инчунин нишон медиҳад, ки чаро ин мақола ҳеҷ иддаои табобатии кабуди метилен барои MS-ро дастгирӣ карда наметавонад. Он гузашти вақтро санҷид, на табобатро.

Чаро ҳеҷ яке аз ин таҳқиқот фоидаро барои беморон собит намекунад

Ҳар мақоларо ҳамчун таҳқиқоте бинед, ки ба як саволи маҳдуд хуб ҷавоб медиҳад, аммо ба саволи марбут ба беморон тамоман ҷавоб намедиҳад.

Якум, сабаб фарқ мекунад. EAE қасдан бо антиген ва адъюванти муайян ба вуҷуд оварда мешавад. MS дар инсон худ аз худ бо маҷмӯи васеътари ҷузъҳои масуният, аз ҷумла ҳуҷайраҳои T, ҳуҷайраҳои B, масунияти модарзодӣ ва ҳуҷайраҳои глиалии муқими бофта, инкишоф меёбад. Моддае, ки дар муш ҷавоби асосан ба MOG равонашударо тағйир медиҳад, ҳатман он ҷавоби васеътари инсонро тағйир намедиҳад.

Дуюм, фенотип фарқ мекунад. Заъфи аз дум ба пойҳои қафо паҳншаванда дар муш нишондиҳандаи қулай аст. Он гуногуншаклии MS-и инсонро ба як рақами ҳаракатӣ фишурда мекунад. Доруҳо аксар вақт баҳои кӯтоҳмуддати EAE-ро тағйир медиҳанд, бе он ки ҷараёни бемориро дар инсон дигар кунанд. Аз ин рӯ, EAE воситаи санҷиши ибтидоӣ ва омӯзиши механизмҳо аст, на клиникаи хурд.

Сеюм, таъсиррасонии модда ва вақти истифода ҳанӯз норӯшананд. Додани пайвастаи модда аз марҳилаи барвақт дар таҷрибаи 30-рӯзаи муш бо истифодаи дарозмуддати даҳонӣ дар шахси дорои бемории ташаккулёфта яксон нест. Ҳеҷ яке аз ин ду таҳқиқот сатҳи доруро дар низоми асаб чен накард. Бе ин пайванд аз консентратсия дар лавҳаи лабораторӣ ё воя дар муш ба тартиби истифода дар инсон гузаштан мумкин нест.

Чорум, ин ду мақола якдигарро такрор намекунанд. Антигенҳо, саволҳо ва нишондиҳандаҳои натиҷа гуногунанд ва дар як маврид умуман табобат вуҷуд надорад. Якҷо зикр кардани онҳо ҳамчун ду таҳқиқоти мусбати табобати MS хатои гурӯҳбандӣ аст.

Ин барои хонандагоне, ки далелҳоро месанҷанд, чӣ маъно дорад

Дар ин мақолаҳо ягон протоколи собитшудаи истифодаи кабуди метилен барои MS вуҷуд надорад. Таҳқиқоти табобатӣ идомаи омӯзиши AMPK, SIRT1, NF-kB ва тавозуни Th17 ва Treg-ро дар MOG EAE дастгирӣ мекунад. Таҳқиқоти патологӣ хотиррасон мекунад, ки осеби бофта метавонад пеш равад, дар ҳоле ки баҳоҳо бетағйир менамоянд, ва кабуди метилен дар бахши усулҳо баъзан маънои зарфи рангкунандаро дорад, на ҷевони доруро. Хонандагоне, ки таҳқиқоти ҷории склерози сершумор-ро пайгирӣ мекунанд, бояд ин фарқи байни рангкунанда ва доруро дар назар дошта бошанд. Пеш аз он ки касе бар асоси сарлавҳаҳои лабораторӣ амал кунад, масъалаҳои бехатарӣ, аз ҷумла хатарҳои марбут ба хун ва таъсири мутақобила, бояд дар суҳбат бо мутахассиси тиб ҳамроҳ бо маълумоти умумӣ дар бораи бехатарии кабуди метилен баррасӣ шаванд.

Хулоса дар як ҷумла ҷой мегирад. Як таҳқиқоти зикршуда кабуди метиленро ба мушҳои MOG EAE дода, бемории сабуктар ва гузариши масуният ба самти зиддиилтиҳобиро гузориш кард, дар ҳоле ки таҳқиқоти дигари зикршуда ҳеҷ моддаеро ҳамчун табобат надод ва кабуди метиленро танҳо барои ранг кардани ҳароммағз истифода бурд, то ҷамъшавии осеби миелин ва аксонҳоро дар тӯли шаш моҳ ҳуҷҷатгузорӣ кунад; бинобар ин ин ду таҳқиқот собит намекунанд, ки кабуди метилен ба MS дар инсон кумак мекунад.