Nani alibuni rangi ya zambarau ya damu? Bluu ya methilini, Malachowski, Romanowsky, na Giemsa

Eosini ni nyekundu. Bluu ya methilini ni bluu. Changanya hizo mbili, paka mchanganyiko huo kwenye tabaka jembamba la damu lililokaushwa, na sehemu za tabaka hilo hupata rangi ya zambarau.

Si kila sehemu. Katika sampuli iliyoandaliwa vizuri, viini vya seli nyeupe za damu hupata rangi nyekundu-zambarau, na ndani ya kimelea cha malaria kromatini hupata rangi hiyo hiyo, huku seli nyekundu zinazokizunguka zikibaki za waridi na saitoplazimu ikibaki kijivu-bluu. Zambarau ndiyo inayowezesha kutofautisha aina za seli.

Hakuna chupa kati ya hizo mbili yenye zambarau. Rangi hiyo hujitokeza tu wakati bidhaa fulani ya uvunjikaji wa bluu ya methilini inapokutana na eosini kwenye slaidi, na katika miaka ya 1880 na 1890 hakuna aliyejua kuwa bidhaa hiyo ilikuwapo, sembuse ilikuwa nini. Watu waliokuwa wakiitafuta rangi hiyo walifanya kazi kwa rangi zisizo safi, kila mmoja kivyake, bila njia ya kutegemeka ya kujua kilichokuwa ndani ya chupa baada ya kukaa kwenye rafu kwa miezi miwili.

Ndiyo maana swali lililo katika kichwa lina zaidi ya jibu moja linaloweza kutetewa, na ndiyo maana jibu lilibadilika mwaka 2011.

Taarifa zilizoonekana zilibadilika pamoja na mchanganyiko

Rangi hiyo haikubuniwa mara moja. Ilijengeka hatua kwa hatua. Kila badiliko la mchanganyiko lilileta taarifa moja tu mpya iliyoweza kuonekana, na mfuatano wa taarifa hizo ndiyo njia iliyo wazi zaidi ya kuelewa historia hii.

Mfuatano katika safu ya mwisho ndio muhimu. Kila hatua ya maendeleo ilipanua wigo wa rangi, na kila upanuzi ulifanya muundo mwingine mmoja uonekane. Zambarau si pambo la mbinu hiyo; ndiyo tofauti kati ya kuona kuwa kimelea kipo na kuona kinachokiunda. Jinsi rangi yenyewe ilivyotoka katika kiwanda cha rangi cha BASF na kuingia katika tiba ni historia ndefu zaidi yenye nyaraka zake. Mfuatano mzima ulio hapo juu, pamoja na chanzo cha kila ingizo, umehifadhiwa kama mfuatano wa wakati wa wachangiaji wenye viungo vya vyanzo.

Mchoro: michanganyiko ileile sita imechorwa kuonyesha kilichokuwa katika chombo na kilichotokana nacho. Miduara ina rangi zilizotumiwa; visanduku vya chini vina rangi ambazo rangi hizo ziliweza kuzalisha katika tabaka la damu. Hakuna kabla ya 1890 chenye kisanduku chekundu-zambarau, na hakuna baada yake kisichokuwa nacho.

Mtu aliyetumia boraksi kwa makusudi

Ernst Malachowski alikuwa daktari katika Breslau, sasa Wrocław, aliyetumia maisha yake ya kitaaluma katika huduma binafsi na katika kliniki ndogo aliyoiendesha pamoja na mwenzake, akifanya kazi za maabara katika muda wake wa ziada. Alizaliwa Strzelno tarehe 12 Machi 1857, alisomea udaktari katika Chuo Kikuu cha Breslau, na alifanya kazi kuanzia 1882 hadi 1887 kama msaidizi katika idara ya magonjwa ya ndani katika Hospitali ya Watakatifu Wote, iliyokuwa hospitali ya pili kwa ukubwa nchini Ujerumani wakati huo.

Alianza mwaka 1888 na njia ya kutia rangi mbili ya Chęciński na Plehn. Katika sampuli iliyoandaliwa mwaka 1889, aliona kromatini ya kiini cha plasmodiamu ikipata rangi tofauti na saitoplazimu, kisha akagundua kuwa hakuweza kurudia matokeo hayo. Alijaribu kuifanya bluu ya methilini kuwa ya asidi, jambo lililozidisha tatizo. Alijaribu kuifanya ya alkali kwa boraksi, jambo lililofanya kazi kila mara. Alionyesha njia hiyo hadharani tarehe 15 Juni 1890 na kuchapisha maelezo ya kina zaidi Agosti 1891, yakiwemo maagizo ya kutumia boraksi. Alibainisha kuwa kutia rangi kulichukua saa ishirini na nne na kwamba matokeo yaliweza kurudiwa kwa urahisi.

Saa ishirini na nne ni muda mrefu katika maabara ya uchunguzi, na makala yake haikusisitiza rangi ya zambarau-nyekundu ya kiini cha kimelea. Kwa sababu yoyote ile, hakuna aliyefuatilia kuifanya bluu ya methilini kuwa ya alkali kwa makusudi hadi Nocht alipofanya hivyo tena mwaka 1898. Malachowski hakuandika tena kuhusu kutia damu rangi.

Sababu ya kujulikana machache sana kumhusu hadi hivi karibuni inahusu kumbukumbu zilizohifadhiwa, si fumbo. Karibu hakuna taarifa za maisha yake zilizobaki katika maandiko ya tiba, na zilizobaki zilifika kupitia njia moja. Binti yake Marie aliondoka Ujerumani kwenda London mwaka 1939, akatumikia Jeshi la Uingereza, na akaishi Kanada, na mkusanyo wake wa nyaraka za familia ukaishia katika Taasisi ya Leo Baeck huko New York. Kaka yake Leo aliuawa katika Vita vya Kwanza vya Dunia. Dada yake Eva alifukuzwa kutoka Breslau na kupelekwa katika kambi ya mpito ya Izbica Aprili 1942, na hakurudi kamwe. Mama yake Hedwig alijiua tarehe 22 Aprili 1942 badala ya kusubiri kufukuzwa kwa namna hiyo hiyo. Malachowski alikuwa amefariki mwaka 1934, kabla ya yote hayo.

Historia ya familia inayoishia hivyo ni historia ya familia ambayo huacha kurejelewa. Makala mbili zilizomrudisha Malachowski katika historia ya maendeleo ya rangi hiyo, zote zikichapishwa mwaka 2011, ziliandaliwa kwa kutumia nyaraka za kumbukumbu za Poznań na Wrocław na nyaraka za Marie zilizokuwa New York.

Chupa yenye ukungu na Mrusi mwenye bahati

Dmitri Romanowsky alisomea udaktari katika Chuo cha Kijeshi cha Tiba huko St Petersburg na alifanya kazi kuhusu malaria katika sehemu kubwa ya maisha yake ya kitaaluma. Mwaka 1890 alichapisha njia ambayo, kwa maandishi, ilikuwa karibu sawa kabisa na ya Chęciński: bluu ya methilini isiyobadilishwa na eosini, huku eosini ikiwa zaidi kidogo.

Septemba 1891 alichapisha njia iliyompatia umaarufu, na maelezo muhimu yalikuwa yamefichika ndani ya maagizo. Matokeo yake bora zaidi yalitokana na myeyusho wa methilini uliokuwa umehifadhiwa, myeyusho wa akiba wa bluu ya methilini uliokuwa umekaa kwa zaidi ya miezi miwili huku ukungu ukikua juu yake. Ukungu na muda wa kukaa vilikuwa vimeondoa baadhi ya vikundi vya methili katika rangi hiyo. Romanowsky hakujua hilo wala hakuweza kulidhibiti, na watafiti wengine waliojaribu njia yake hawakuweza kupata zambarau. Tasnifu yake ilikuwa imewasilishwa St Petersburg Juni 1891, ndiyo maana simulizi iliyozoeleka hutaja 1891 kuwa mwaka wa ugunduzi.

Onyesho la Malachowski lilikuwa Juni 1890, zaidi ya mwaka mmoja kabla, na njia yake ilifanya kazi kwa makusudi.

Kwa nini rangi ilipewa jina la mtu asiyehusika

Hoja ya kumpa Malachowski sifa iliandaliwa na Kristine Krafts, Ernst Hempelmann na Barbara Oleksyn, na inategemea mambo manne. Tarehe ya onyesho la hadharani, Juni 1890 dhidi ya Septemba 1891. Neno kwa makusudi dhidi ya neno kwa bahati. Ukweli kwamba Malachowski alichapisha njia yake, pamoja na boraksi na kila kitu kingine, huku ya Romanowsky ikitegemea kigezo kisichodhibitiwa. Na uchunguzi kwamba maelezo ya kiini cha plasmodiamu, pamoja na zambarau iliyokifanya kionekane, yalitoweka kwa kiasi kikubwa katika maandiko kwa miaka saba, kwa sababu hakuna aliyeweza kurudia toleo la bahati.

Hawafichi hitimisho lao. Katika makala ya wasifu wanaita utoaji huo wa sifa “upotoshaji mkubwa”, na wanamnukuu Ralph Lillie, ambaye mwaka 1978 aliandika kuwa “labda tunapaswa kuuita mkusanyiko huu wa rangi rangi za Malachowski”.

Dai hilo linapingwa, kama madai ya kuwa wa kwanza yanavyokuwa kwa kawaida, na namna ya mabishano hayo inastahili kufafanuliwa badala ya kuamuliwa. Hoja kuhusu nani alikuwa wa kwanza lazima itaje ugunduzi ulikuwa nini. Ikiwa ugunduzi ni rangi ya zambarau, Malachowski ana onyesho la mapema zaidi lililoandikwa. Ikiwa ugunduzi ni njia iliyochapishwa, wote wawili walichapisha mwaka 1891 na rangi ikapewa jina la Romanowsky. Ikiwa ugunduzi ni maelezo ya kisayansi, hakuna kati yao mwenye dai halali, kwa sababu hakuna aliyejua kuwa kukomaa kulikuwa kuondolewa kwa vikundi vya methili, na hakuna aliyeweza kusema kwa nini rangi hiyo ilijitokeza hata kidogo. Hoja hiyo ya mwisho ndiyo simulizi maarufu huruka. Kiambato kilichofanya kazi kilikuwa kichafuzi ambacho hakuna aliyekuwa amekitambua, na mtu wa kwanza kuzalisha rangi hiyo kwa makusudi alifanya hivyo kwa kufuata utaratibu wa majaribio uliotoa matokeo yanayoweza kurudiwa, si kwa kuelewa utaratibu huo ulifanya nini.

Makala hizo mbili za 2011 ndizo maelezo yaliyochapishwa yenye ukamilifu zaidi kuhusu hoja ya kumpa Malachowski sifa, na zote zinaweza kusomwa bila malipo katika PubMed: mapitio marefu katika PMID 21235291 na makala ya wasifu katika PMID 21660627. Rekodi ya PubMed ya mapitio hayo pia inaorodhesha maoni kuyahusu, yaliyochapishwa katika jarida hilohilo baadaye mwaka huo katika 86(5):366, jambo linalokumbusha ipasavyo kuwa hoja hiyo ilipingwa katika maandiko mara tu ilipojitokeza.

Mabishano hayo si kutokubaliana kuhusu kemia. Wote wanaohusika wanakubaliana kuhusu zambarau hiyo ni nini na viambato gani huizalisha. Kutokubaliana kunahusu nani aliifikia kwanza, na kama tukio la bahati ambalo hakuna aliyeweza kulirudia linahesabika kuwa kuifikia hata kidogo.

Majina yaliyokuja baadaye yalileta nini

Ikiwa Malachowski alizalisha zambarau kwanza, kwa nini rangi hiyo ina majina ya Romanowsky, Wright na Giemsa?

Kwa sababu rangi inayofanya kazi mara moja mikononi mwa mvumbuzi wake si kitendanishi. Kazi iliyofuata iligeuza mchanganyiko usiotabirika kuwa kitu ambacho fundi katika nchi nyingine angeweza kutumia siku ya Jumanne.

Nocht aliifikia kwa kutumia hoja. Baada ya kushindwa kupata matokeo ya kutegemeka kwa rangi rahisi isiyoegemea upande wowote, alihitimisha kuwa zambarau lazima itokane na kitu kilichomo katika bluu ya methilini ambacho si bluu ya methilini, na akaanza kukitafuta. Unna alikuwa tayari ameona kuwa miyeyusho ya bluu ya methilini iliyokaa muda mrefu ilitia chembechembe za seli za masti rangi nyekundu, na alipendekeza kuwa dutu mpya ilitokea rangi ilipokomaa. Bernthsen alikuwa ameonyesha mwaka 1885 kuwa hali za alkali huondoa vikundi vya methili kutoka bluu ya methilini, na kwamba bidhaa hizo ndizo tunazoziita sasa rangi za azure. Nocht alitoa sehemu iliyofanya kazi kwa klorofomu na aliweza kuiita tu nyekundu kutoka bluu ya methilini; Michaelis aliipa jina azure I mwaka 1901. Jenner alitatua changamoto za maandalizi na matumizi. Kuyeyusha tena mashapo ya bluu ya methilini na eosini katika methanoli isiyo na maji kulitoa myeyusho mmoja thabiti uliofunga tabaka la damu kwenye slaidi huku ukilitia rangi, na kukomesha hitaji la kulifunga kwa joto. Leishman na Reuter waliunganisha rangi iliyokomazwa kuwa na rangi nyingi na kiyeyushi cha alkoholi, na kupata uthabiti pamoja na zambarau. Wright alibadilisha hatua ya kuacha mchanganyiko kwa saa kumi na mbili katika 65 °C na kuusimamisha kwa siku kumi, na kutumia saa moja katika mvuke unaotiririka. Giemsa aliacha kabisa kutegemea myeyusho uliokomaa bila kudhibitiwa, akitumia kiasi kilichopimwa cha rangi zinazojulikana pamoja na gliseroli katika methanoli ili bidhaa ihimili joto la maeneo ya tropiki. Hakuchapisha kamwe jinsi alivyotengeneza azure safi ya methilini. Aliiuza kwa maabara ya Dkt Grübler huko Leipzig, ambayo iliitangaza kama azure I na kudai kuwa toleo lake pekee ndilo lilikuwa rangi halisi ya Giemsa.

Utambulisho wa azure hiyo bado unabishaniwa. Wengine wanaamini kuwa ilikuwa tu bluu ya methilini iliyokomazwa kuwa na rangi nyingi, wengine kuwa ilikuwa na azure B kwa wingi. Jibu lilitokana na vita. Rangi za Ujerumani zilipokosa kupatikana, timu ya Huduma ya Afya ya Umma ya Marekani, Ralph Lillie pamoja na Maurice Roe na Aimee Wilcox, iligundua kuwa matokeo bora zaidi ya kutia rangi yalitokana na viambato vitatu vilivyotenganishwa: bluu ya methilini isiyobadilishwa, bidhaa yake ya uvunjikaji iliyoondolewa vikundi vya methili, azure B, na eosini. Azure B ilichukua nafasi ya azure I iliyokuwa haipatikani, na viambato hivyo vitatu bado ni msingi wa rangi inayotumiwa kutambua malaria leo.

Kemia ya jinsi viambato hivyo vitatu vinavyoingiliana kwenye slaidi ni swali tofauti na ukurasa mwingine. Ukurasa wa majukumu ya rangi na kemia ya rangi za aina ya Romanowsky unaeleza kazi ya azure B na eosini kila moja, na kwa nini jozi hiyo huzalisha rangi ambayo hakuna inayozalisha peke yake. Ukurasa wa matumizi katika hadubini na maabara unaeleza upande wa vitendo: sampuli fulani iliyoandaliwa inaonyesha nini, na jinsi ya kutathmini ikiwa bidhaa fulani inafaa kwa njia unayokusudia kutumia.

Sehemu ya historia ambayo bado ina umuhimu leo

Jambo moja katika simulizi hii halikuacha kuwa kweli mwaka 1902. Kwa takriban miaka hamsini, kiambato muhimu zaidi cha rangi iliyotumiwa duniani kote kama kiwango cha kawaida cha kuchunguza malaria kilikuwa kichafuzi kisichokuwa na jina. Kilikuwapo kwa bahati, kiasi chake kilitofautiana kati ya chupa, utambulisho wake ulikuwa siri ya biashara kwa sehemu ya muda huo, na uwiano wake ulibishaniwa hadi miaka ya 1940. Watu waliotumia rangi hiyo hawakuwa wazembe. Hawakuwa na njia ya kujua kilichokuwa ndani ya chupa.

Toleo la kisasa la tatizo hilo hilo ni vipimo vinavyoeleza sehemu tu ya dutu. Kuzingatia USP ndiyo njia ya kufikia usafi wa juu zaidi unaopatikana sokoni, kwa sababu ni kiwango kamili kilichochapishwa badala ya kipimo kimoja: utambulisho, usafi, vichafuzi vya kikaboni vikiwemo rangi za azure, mabaki ya viyeyushi, vichafuzi vya elementi, mabaki baada ya uchomaji, viwango vya kikomo vya vijidudu na endotoksini za bakteria. Blupreme hupata bluu yake ya methilini kutoka kwa mtengenezaji wa dawa na huchapisha cheti kamili cha uchanganuzi, ili kila kipengele cha orodha hiyo kiweze kukaguliwa badala ya kudaiwa tu. Cheti kinachoripoti matokeo ya metali nzito na kuyaita uzingatiaji wa USP ni mfano wa siku hizi wa chupa iliyoandikwa “bluu ya methilini iliyokomaa”: huenda ni kitendanishi kizuri, lakini lebo haikuambii kilichomo ndani yake.