Artikel
Uji réduksi métilén biru pikeun susu: prinsip jeung watesanana
Hiji mahasiswi ngangkat dua tabung susu. Hiji jadi bodas dina sajam. Hiji deui tetep biru salila lima jam. Manéhna nunjuk kana tabung anu biru sarta nyebutkeun yén éta aman diinum.
Kacindekan éta némbongkeun modél pamahaman anu salah. Uji métilén biru pikeun susu henteu ngadeteksi kaamanan. Uji ieu ngalaporkeun sabaraha gancang populasi mikroba dina éta tabung nurunkeun poténsial redoks dina kaayaan anu ditetepkeun. Hasil anu laun hartina aktivitas métabolik total dina sampel handap. Éta henteu méré katerangan ngeunaan organisme naon anu aya, naha aya patogén di antarana, atawa naha susu dipasteurisasi kalayan leres.
Bédana ieu penting sabab ujina katingali ngayakinkeun. Warna biru ngaleungit. Jam ngahasilkeun angka. Angka bisa ngadorong jalma nyieun tafsiran anu kaleuleuwihi. Artikel ieu ngajaga tafsiran anu mangpaat sarta nyegah tafsiran anu henteu aman.
Naon anu sabenerna diukur ku réduksi
Métilén biru warnana biru nalika dioksidasi sarta ampir teu warnaan nalika diréduksi jadi leukométilén biru. Susu seger ngandung oksigén leyur, anu ngajaga zat warna tetep biru. Baktéri anu ngalakukeun réspirasi jeung férméntasi ngagunakeun éta oksigén sarta ngaluarkeun sanyawa pangréduksi. Nalika poténsial redoks turun cukup jauh, zat warna narima éléktron sarta kaleungitan warnana. Téks mikrobiologi susu ti University of Guelph ngajelaskeun runtuyan anu sarua: oksigén dileungitkeun, tuluy zat pangréduksi kabentuk salila métabolisme baktéri.
Panalungtikan klasik dina Journal of Dairy Science ngajelaskeunana salaku prosés dua tahap: flora mimiti ngurangan oksigén nepi ka béak, tuluy komponén susu ngaréduksi zat warna kalayan gancang. Ku kituna, uji réduksi métilén biru pikeun susu paling merenah dipikaharti salaku uji fungsional aktivitas métabolik gabungan, lain minangka alat pangitung sél. Paripolah redoks métilén biru ngajelaskeun kimia anu jadi dasar parobahan éta.
Oksigén ngabalikeun kaayaan dina titik ahir. Zat warna leuko anu geus diréduksi, lamun kakeunaan hawa, bakal dioksidasi deui sarta balik jadi biru. Ku sabab éta, ngocok, ngocorkeun, tabung anu lega, jeung rohangan hawa anu gedé di luhur cairan bakal ngalambatkeun hasil. Cingcin biru ipis mindeng tetep aya dina beungeut anu padeukeut jeung hawa sanggeus bagian utama eusi tabung geus teu warnaan. Prosedur baku narima ayana éta cingcin, lain nungguan nepi ka ngaleungit.
Jinis organisme nambahan pangaruh pangganggu anu kadua. Koliform jeung loba organisme asam laktat ngaréduksi zat warna kalayan gancang. Loba organisme psikrotrof jeung térmodurik ngaréduksina lalaunan atawa ampir henteu pisan. Dua sampel susu anu boga jumlah koloni dina lempeng anu sarua bisa kaleungitan warna biruna dina waktu anu béda sababaraha jam. Éta fakta waé geus cukup pikeun némbongkeun yén waktu henteu bisa dirobah jadi jumlah koloni.
Prosedur laboratorium anu dikontrol
Vérsi lapangan jeung vérsi buku pangajaran béda dina rincianna, jadi hasil ngan sah dina kerangka métode anu ngahasilkeunana. Vérsi konvénsional laboratorium pangan dilaksanakeun kieu:
- Kumpulkeun susu atah kalayan aerasi seminimal mungkin sarta geuwat tiiskeun. Campur ku cara ngabalikkeun wadah lalaunan saméméh nyokot sampel.
- Asupkeun 10 mL susu kana tabung stéril anu ngandung 1 mL larutan zat warna pikeun pamakéan. Salah sahiji konséntrasi anu loba dipaké nyaéta 0.005 persén zat warna, kalayan babandingan susu jeung zat warna 10 ka 1.
- Tutup tabung ku sumbat, balikkeun lalaunan dua kali, sarta lebetkeun kana bak cai dina sababaraha menit. Inkubasi biasana dina 35 nepi ka 38 darajat Celsius, gumantung kana standar anu dirujuk. Catet standar mana anu dituturkeun.
- Jaga tabung tina cahaya salila inkubasi, sabab cahaya ngagancangkeun réduksi.
- Baca hasil dina 30 menit, tuluy dina interval anu tetep. Titik ahir nyaéta waktu nalika warna dina tabung sarua jeung sampel rujukan susu anu geus dikulub atawa ngahontal leungitna warna anu ditetepkeun ku prosedur.
- Simpen hiji tabung tina susu anu sarua tanpa perlakuan minangka kontrol visual lamun métodena merlukeun.
Manual uji susu FAO méré vérsi lapangan anu écés pikeun runtuyan ieu, kalayan 10 mL susu ditambah 1 mL zat warna, nutup ku sumbat, ngabalikkeun lalaunan, inkubasi kira-kira 37 nepi ka 38 darajat, sarta maca hasil unggal 30 menit. Tabung kontrolna ngagunakeun susu anu geus dikulub pikeun ngancurkeun sistem pangréduksi alami sarta jadi patokan ngabandingkeun warna.
Skéma di luhur netepkeun wates kontrol. Volume sarua, zat warna sarua, suhu sarua, cara nyampur sarua, panyalindungan tina cahaya sarua, aturan titik ahir sarua. Lamun salah sahijina dirobah, waktuna ogé robah. Éta sababna vérsi di imah anu ngagunakeun konséntrasi zat warna sakahayang henteu bisa dibandingkeun jeung kelas hasil laboratorium.
Naon anu dituduhkeun ku waktu réduksi
Waktu anu leuwih lila hartina aktivitas total leuwih handap dina kaayaan anu disebutkeun. Waktu anu leuwih pondok hartina aktivitas total leuwih luhur. Tabél pangajaran ngeunaan susu méré kelas perkiraan pikeun éta waktu, contona 5 jam atawa leuwih minangka alus pisan sarta kurang ti 30 menit minangka goréng dina hiji skéma anu diturunkeun tina BIS.
Rupa-rupa patokan éta téh palajaranana. Hasil 5 jam henteu boga kelas anu lumaku sacara universal. Éta hasil kudu ditafsirkeun dina prosedur anu netepkeunana. Ku kituna, format laporan anu bisa dipertanggungjawabkeun nyaéta:
MBRT sarua jeung X jam dina métode anu ngaranna disebutkeun, saluyu jeung kelas dina éta métode.
Éta henteu kungsi hartina MBRT sarua jeung X unit pembentuk koloni per mL. Pituduh anu diturunkeun tina Standard Methods nétélakeun yén hasil réduksi zat warna henteu meunang dilaporkeun minangka jumlah baktéri. Prosedur ngawarnaan basajan ku métilén biru ogé ngajawab patalékan anu béda, sabab némbongkeun wangun sél dina mikroskop, lain aktivitas total dina tabung.
Tabél tafsiran jeung watesan
Tabél ieu mangrupa rujukan asli pikeun artikel ieu. Baca unggal baris nepi ka réngsé. Henteu aya hiji sél tabél anu bisa ditafsirkeun nyorangan.
| Paniténan atawa klaim | Naon anu dituduhkeun | Naon anu henteu bisa dibuktikeun | Faktor pangganggu utama |
|---|---|---|---|
| Warna biru gancang leungit, kurang ti 2 jam dina hiji skéma susu atah | Aktivitas pangréduksi luhur, saluyu jeung beban mikroba anu luhur atawa daya simpen anu goréng | Spésiés, jumlah anu pasti, toksin, atawa kagagalan pasteurisasi | Panyimpenan dina suhu haneut, flora anu loba koliformna, cahaya, dosis zat warna anu handap |
| Waktu panengah, 2 nepi ka 4 jam | Aktivitas sedeng; kelas ngan lumaku dina skéma anu disebutkeun | Kaamanan atawa henteuna organisme anu ngaréduksi lalaunan | Suhu inkubasi luhur, bédana aerasi, misahna lemak |
| Réduksi laun, 5 jam atawa leuwih | Aktivitas total handap dina éta skéma | Henteuna patogén, pasteurisasi, atawa kaamanan kimiawi | Résidu antibiotik, bahan pangawét, tambahan oksigén leyur, dosis zat warna anu luhur |
| Cingcin biru tetep aya di beungeut bari bagian utama eusi tabung jadi teu warnaan | Oksidasi deui dina wates antara cairan jeung hawa, pangaruh pinggir anu normal | Uji gagal atawa réaksi henteu lengkep | Tabung lega, sumbat kurang rapet, dibuka sababaraha kali pikeun mariksa |
| Tabung bodas sanggeus inkubasi susu anu geus dipanaskeun | Sistem pangréduksi anu robah ditambah aktivitas organisme anu salamet | Yén pemanasan sarua jeung pasteurisasi anu geus divalidasi | Karuksakan akibat panas, pamulihan salila inkubasi, kontaminasi saterusna |
| Hiji nilai MBRT naon waé anu dicutat tanpa métode | Kaayaan uji henteu dipikanyaho | Kelas atawa jumlah naon waé | Formulasi zat warna, babandingan, suhu, cara nyampur, jeung aturan titik ahir kabéh henteu dilaporkeun |
Pamariksaan dumasar kana tumuwuhna mikroba, saperti pamakéan média kultur baktéri, tetep jadi cara pikeun ngitung jeung ngaisolasi. Tabung réduksi dipaké pikeun panyaringan awal. Lempeng kultur dipaké pikeun ngaidéntifikasi jeung ngitung.
Naon anu henteu bisa dibuktikeun ku uji ieu ngeunaan kaamanan
Hasil anu laun henteu bisa ngabuktikeun henteuna patogén. Patogén anu aya dina dosis anu penting sacara klinis bisa waé ngan nyumbang saeutik kana konsumsi oksigén total. Detéksi patogén kudu ngagunakeun métode husus pikeun organismena, anu dina Standard Methods ayeuna diperlakukeun minangka widang anu misah ti panyaringan kualitas umum.
Uji ieu henteu bisa mastikeun pasteurisasi. Verifikasi perlakuan panas ngagunakeun uji fosfatase alkali atawa métode séjén anu geus divalidasi luyu jeung pituduh kabersihan produk susu Codex. Tabung bodas atawa biru henteu méré katerangan ngeunaan riwayat waktu jeung suhu éta bets susu.
Uji ieu henteu bisa ngesahkeun kaamanan pangan. Kaamanan gumantung kana patogén, toksin anu geus kabentuk, résidu obat, kontaminan kimia, riwayat ranté tiis, jeung kontaminasi sanggeus sampel dicokot. Codex nganggap kaamanan produk susu minangka runtuyan ukuran pangendalian, lain hiji hasil panyaringan.
Kontéks laboratorium pangan lain tés di imah
Di laboratorium susu, uji ieu dipaké pikeun nyaring susu anu ditarima, ngabandingkeun panyadia ti waktu ka waktu, atawa ngajarkeun mikrobiologi redoks dina pangawasan. Asal-usul sampel bisa dilacak. Réagén distandardisasi. Suhu dicatet. Runtah diolah ngaliwatan sistem pembuangan laboratorium.
Tés di imah henteu boga éta sadayana. Volume di dapur ngan perkiraan. Konséntrasi zat warna anu dijual sacara daring rupa-rupa pisan. Inkubasi mindeng dilakukeun di rohangan haneut, lain dina bak cai anu dikalibrasi. Warna tetep robah, anu ngajadikeun hasil karasa bisa dipercaya, padahal sakabéh kontrol anu méré harti kana éta hasil henteu aya.
Résiko anu leuwih nyata aya dina paripolah. Tabung biru di imah bisa ngadorong jalma nginum susu atah anu ku laboratorium masih bakal dikirim pikeun pangitungan koloni dina lempeng, panyaringan patogén, jeung pamariksaan résidu. Uji métilén biru pikeun susu dirancang pikeun nangtukeun kelas susu atah nalika ditarima, lain pikeun nyatakeun yén susu meunang dikonsumsi. Panyaringan résazurin anu leuwih gancang boga watesan anu sarua: hasil warna leuwih gancang kabaca, tapi tetep henteu ngajawab ngeunaan patogén.
Aturan ringkes pikeun méja laboratorium
Standardisasikeun zat warna, babandingan, suhu, cara nyampur, cahaya, jeung titik ahir. Laporkeun waktu babarengan jeung ngaran métode sarta kelasna. Tafsirkeun waktu dina menit babarengan jeung riwayat panyimpenan, jinis flora, résidu, jeung kualitas nyokot sampel. Waktu anu pondok nandakeun aktivitas anu perlu ditalungtik. Waktu anu lila henteu kungsi ngesahkeun kaamanan.