Artikel
Tés réduksi métilén biru pikeun cairan rumen
Hiji lulusan anyar nelepon ti peternakan bari nyekel tabung anu eusina biru. Manéhna nambahan métilén biru kana cairan rumen sapuluh menit ka tukang, tapi warna biruna masih kénéh aya. Manéhna nanya naha kudu méré deui zat pewarna ka sapi éta.
Éta patarosan némbongkeun pamahaman dasar anu salah. Dina tés réduksi métilén biru pikeun cairan rumen, zat pewarna diasupkeun kana tabung, lain kana sato. Sakabéh pangujian lumangsung dina tabung éta. Ngukur sabaraha gancang warna biru leungit méré gambaran ngeunaan mikroba dina sampel éta, lain ngeunaan pangobatan anu diperlukeun ku sato.
Kabingungan ieu bisa kaharti lantaran métilén biru dipaké dina tilu kontéks kadokteran hewan anu béda. Artikel ieu ngabédakeun éta tilu kontéks sarta némbongkeun cara maca waktu réduksi babarengan jeung pH, protozoa, kualitas pangambilan sampel, jeung tanda klinis.
Naon anu sabenerna diukur ku tés ieu
Métilén biru warnana biru nalika kaoksidasi jeung ampir teu boga warna nalika karéduksi. Cairan rumen seger tina sato séhat boga daya réduksi anu kuat lantaran baktéri anaérob keur aktip ngaférméntasi pakan. Lamun sajumlah leutik zat pewarna dicampurkeun kana cairan éta, métabolisme baktéri ngaleungitkeun warnana dina sababaraha menit.
Ku kituna, prinsip gawéna basajan: flora anaérob anu aktip gancang ngaleungitkeun warna biru, ari flora anu teu aktip atawa ruksak ngalakukeunana lalaunan. Waktu anu pondok hartina kapasitas réduksi dina sampel éta leuwih gedé. Waktu anu leuwih lila nunjukkeun turunna kagiatan mikroba, asal sampelna dicokot jeung diurus kalayan hadé.
Tés ieu henteu langsung ngukur poténsial rédoks rumen. Hiji studi métode dina sapi anu ngabandingkeun tés réduksi jeung pangukuran langsung dina milivolt henteu manggihan korélasi liniér antara waktu réduksi jeung poténsial rédoks anu diukur, sarta nyimpulkeun yén duanana henteu meunang dianggap minangka bacaan anu bisa silih gentos pikeun variabel anu sarua. Babandingan lengkepna diringkes dina PubMed. Anggap tés réduksi minangka uji fungsi populasi mikroba, lain minangka éléktroda murah.
Pedaran Merck/MSD ngeunaan gangguan pencernaan basajan dina ruminansia nempatkeun waktu réduksi anu leuwih lila dina pola anu sarua jeung pH rumen anu teu normal sarta jumlah protozoa anu turun. Hiji nilai tunggal henteu nangtukeun diagnosis. Polana anu nangtukeun.
Prosedur standar di sisi sato
Protokol bisa rada béda antara lembaga atikan, jadi catet volume jeung suhu anu pasti dipaké, sarta bandingkeun hasil ngan dina protokol anu sarua. Salah sahiji vérsi anu loba diajarkeun nyaéta:
- Candak sahenteuna 10 nepi ka 20 mL cairan rumen seger, kalayan campuran ciduh, paparan hawa, jeung pendinginan seminimal mungkin. Geura laksanakeun tés.
- Siapkeun métilén biru 0.03 persén, nyaéta 0.3 mg per mL.
- Tambahkeun zat pewarna sabanyak 5 persén tina volume cairan. Hartina 1.0 mL zat pewarna pikeun 20 mL cairan, atawa 0.5 mL zat pewarna pikeun 10 mL cairan. Duanana ngahasilkeun babandingan cairan jeung zat pewarna anu sarua, nyaéta 20 banding 1.
- Simpen tabung kadua anu eusina cairan tanpa tambahan zat pewarna tina sampel anu sarua minangka kontrol warna.
- Campurkeun lalaunan, geura mimitian pangukur waktu, sarta jaga tabung dina suhu anu deukeut kana suhu awak, kira-kira 37 nepi ka 39 darajat Celsius gumantung kana protokol satempat.
- Catet waktu nepi ka warna dina tabung tés sarua jeung kontrol. Cingcin biru ipis dina beungeut cairan anu nyanghareup hawa bisa tetep aya lantaran oksigén ngaoksidasi deui zat pewarna di dinya. Ulah ngadagoan cingcin éta leungit.
Kimia rédoks métilén biru ngajelaskeun naha oksigén penting di dieu. Ngocok kuat-kuat, tabung anu muka lega, atawa reureuh anu lila ngamungkinkeun oksigén asup sarta ngajaga zat pewarna tetep biru leuwih lila tibatan dina kaayaan rumen sorangan. Rincian ngeunaan téhnik pangambilan cairan rumen anu bébas tina kontaminasi penting ku alesan anu sarua. Ciduh ngéncérkeun sampel jeung naékkeun pH, ku kituna nalika maké selang lambung, loba klinisi miceun bagian kahiji lamun volumenna nyukupan.
Naon anu diukur ku rupa-rupa pangamatan
Waktu réduksi ngan ngajawab hiji patarosan. Penilaian rumen di handap némbongkeun naon sumbangan unggal pangamatan di sisi sato. Paké sakabéh informasi dina hiji baris, lain ngan hiji sél.
| Pangamatan | Naon anu diukur | Papanggihan ilahar di sisi sato | Faktor pangganggu anu umum |
|---|---|---|---|
| Waktu réduksi métilén biru | Kagiatan réduksi fungsional baktéri anaérob dina sampel | Dina sapi mindeng 2 nepi ka 6 menit; dina domba jeung embé mindeng leuwih gancang, kalayan 6 menit dipaké minangka wates praktis pikeun kagiatan anu nyukupan sarta waktu leuwih ti 10 menit dianggap kacida teu normalna | Sampel anu tiis, lila diantep, kakeunaan hawa, atawa éncer ku ciduh; kurang substrat sanggeus anoréksia berkepanjangan; antimikroba oral; ngabandingkeun hasil tina babandingan zat pewarna atawa suhu anu béda |
| pH rumen | Lingkungan kimia, beban asam atawa alkali | Sapi anu dibéré pakan serat kasar mindeng deukeut 6.0 nepi ka 7.2; buku ngeunaan ruminansia leutik mindeng nyebut kira-kira 6.5 nepi ka 7.5; pakan jeung lilana waktu ti saprak dahar ngarobah nilaina | Kontaminasi ciduh naékkeun pH dina sampel tina selang lambung; leungitna karbon dioksida sanggeus pangambilan; pakan séréal nurunkeun pH |
| Jumlah jeung motilitas protozoa | Kaayaan populasi siliata, utamana wangun badag anu sénsitip kana gangguan | Loba organisme tina sababaraha ukuran, kalayan gerakan anu kuat jeung boga arah dina tetesan seger anu haneut | Pendinginan ngalambatkeun gerakan; asidosis parna bisa ngaleungitkeun protozoa; reureuh ngajadikeun sampel normal katingali lesu |
| Bau, warna, jeung konsisténsi | Sipat férméntasi jeung kontaminasi | Cairan anu rada aromatik, coklat kahéjo-héjoan, jeung rada kentel | Bau buruk atawa haseum dina disbiosis parna; cairan anu encer atawa loba campuran ciduh alatan pangambilan anu goréng |
| Kontraksi rumen jeung napsu dahar | Fungsi lambung hareup jeung asupan dina sato sacara gembleng | Kontraksi anu teratur jeung mamah biak anu ajeg dina sato anu sigap | Parobahan ransum anyar-anyar ieu, nyeri, déhidrasi, panyakit sistemik |
Tabél éta inti pesenna. Waktu réduksi anu leuwih lila ditambah protozoa anu lesu, pH anu teu normal, jeung kontraksi anu lemah nunjukkeun turunna kagiatan mikroba anu sabenerna. Waktu réduksi anu leuwih lila salaku hiji-hijina papanggihan dina sato anu sigap, mamah biak, sarta boga protozoa anu aktip nunjuk kana masalah sampel, lain rumen. Candak deui sampel saméméh ngalakukeun tindakan.
Maca waktu babarengan jeung pH sarta riwayat
Pakan nangtukeun patokan dasarna. Ransum anu loba konséntrat gancang ngaférméntasi sarta bisa ngaleungitkeun warna zat pewarna dina kira-kira samenit, sedengkeun pakan jarami garing bisa merlukeun sababaraha menit, sanajan dina sato séhat. Ku kituna, waktu anu gancang henteu otomatis ngabuktikeun kaséhatan anu leuwih hadé. Éta ngabuktikeun yén leuwih loba substrat anu bisa diférméntasi papanggih jeung mikroba anu aktip.
Asupan séréal kaleuleuwihi anu parna ngarobah pola basajan éta. Férméntasi karbohidrat dina awalna bisa kacida kuatna, tuluy karuksakan ku asam neken flora normal jeung protozoa, sarta waktu réduksi jadi leuwih lila. Éta sababna hiji aturan pangajaran nyebutkeun yén tés ieu henteu valid lamun pH rumen di handap kira-kira 5.5. Dina kaayaan éta, flora anu diuji geus robah.
Pituduh pola anu praktis:
- pH normal kalayan réduksi dina kira-kira 6 menit nunjukkeun flora anu aktip sacara fungsional.
- pH normal kalayan réduksi anu kacida lilana nunjukkeun kurangna kagiatan alatan anoréksia, pangaruh antimikroba, atawa sampel anu kualitasna kaganggu.
- pH luhur kalayan réduksi anu leuwih lila mindeng nuturkeun anoréksia berkepanjangan kalayan saeutik substrat, tapi pertimbangkeun kontaminasi ciduh tina selang.
- pH handap kalayan kagiatan protozoa anu turun nimbulkeun kacurigaan kana disbiosis anu patali jeung karbohidrat. Pituduh interpretasi pH rumen mantuan dina ieu hal. Nilai di handap 5.5 anu dibarengan ku turunna kaayaan sistemik nunjukkeun yén masalahna lain saukur gangguan pencernaan basajan, tapi leuwih ka asupan séréal kaleuleuwihi jeung asidosis parna.
Salawasna catet pamakéan tétrasiklin oral anyar-anyar ieu, ionofor dina pakan, antimikroba sistemik berkepanjangan, parobahan ransum dadakan, lilana anoréksia, jeung asupan cai. Manual MSD sacara husus ngingetkeun yén tétrasiklin oral bisa neken mikroflora rumen sacara nyata. Ionofor ngahaja ngarobah populasi baktéri. Tanpa riwayat éta, waktu anu leuwih lila henteu bisa diinterpretasi.
Kualitas pangambilan sampel kudu dibéré perhatian anu sarua. Panalungtikan anu dikontrol manggihan yén sampel tina selang lambung boga pH leuwih luhur jeung asam lemak volatil leuwih handap tibatan sampel tina kanula dina sato anu sarua, utamana alatan ciduh. Waktu réduksi jadi leuwih lila sacara signifikan dina 60 menit sanggeus pangambilan pikeun unggal volume anu diuji, kalayan sampel leutik anu pangkapangaruhanana. Candak sahenteuna 10 mL, laksanakeun tés dina 30 menit, pigawé tés réduksi ti heula, jaga sampel tetep haneut, sarta minimalkeun kontak jeung hawa.
Tilu pamakéan anu ulah disaruakeun
Zat pewarna anu sarua, tilu sistem anu béda.
Kahiji, uji cairan rumen anu dijelaskeun di dieu. Spésiménna nyaéta cairan rumen anu geus dicokot. Zat pewarna ditambahkeun sacara in vitro dina 0.03 persén. Titik ahirna nyaéta waktu nepi ka warna leungit. Tujuanana pikeun meunteun kagiatan réduksi mikroba.
Kadua, métilén biru anu dibikeun ka ruminansia hirup. Conto anu geus diaku nyaéta terapi intravéna pikeun toksikosis nitrat atawa nitrit kalayan methemoglobinemia, nalika ubar éta mulangkeun hémoglobin anu fungsional. Aturan dosis, formulasi, résidu, jeung waktu tunggu kudu diturutan. Kaputusan éta henteu aya patalina jeung ngukur waktu dina tabung. Lamun zat pewarna dipaké minangka panglacak in vivo dina prosedur nu tangtu, prinsipna nyaéta ka mana zat pewarna ngalir, lain sabaraha gancang mikroba rumen ngaréduksina.
Katilu, tés réduksi susu. Spésiménna nyaéta susu. Zat pewarna ditambahkeun kana sampel susu. Leungitna warna biru anu gancang umumna nunjukkeun kagiatan mikroba anu leuwih gedé jeung daya simpen anu leuwih goréng, sedengkeun réduksi anu laun nunjukkeun kualitas anu leuwih hadé. Ieu kaasup kana mikrobiologi pangan jeung pangujian kualitas susu, lain kadokteran rumen, sarta lain pangitungan jumlah baktéri.
Nyebutkeun ngaranna sacara écés nyegah kasalahan: waktu réduksi cairan rumen, terapi métilén biru sistemik atawa pamakéan minangka panglacak, jeung tés réduksi susu. Aturan kaamananna bisa diringkes dina hiji kalimah. Zat pewarna pikeun uji rumen tetep dina tabung laboratorium sarta tabung éta dipiceun. Zat pewarna éta henteu kungsi dibikeun ka sato pikeun ngalaksanakeun tés ieu.
Aturan ringkes pikeun telepon ti peternakan
Standarkeun zat pewarna dina 0.03 persén jeung 1 bagian zat pewarna pikeun 20 bagian cairan, uji cairan seger dina suhu anu deukeut kana suhu awak ku ngabandingkeunana jeung kontrol tanpa tambahan zat pewarna, sarta baca waktuna dina menit babarengan jeung pH, motilitas protozoa, kualitas pangambilan, pakan, ubar, kontraksi, napsu dahar, tai, jeung hidrasi. Hiji angka anu nyorangan henteu kungsi nangtukeun diagnosis gangguan pencernaan. Pola anu saluyu anu nangtukeun.