EMB ඒගාර් මත E. coli සහ අනෙකුත් ජනපදවල පෙනුම කියවීම

ශිෂ්‍යයෙක් හඳුනා නොගත් සාම්පලයක් ඉයොසින් මෙතිලීන් බ්ලූ ඒගාර් මත ඉරි ඇඳීමේ ක්‍රමයෙන් වපුරා, රාත්‍රිය පුරා ඉන්කියුබේට් කර, නැවත පැමිණෙන විට කොළ පැහැති දිලිසීමක් ඇති තද පැහැති ජනපද සහිත තැටියක් දකියි. සටහන් පොතේ ලියා ඇත්තේ “E. coli, තහවුරු කරන ලදී” යනුවෙනි. එම සටහන තැටියෙන් සාධාරණීකරණය කළ හැකි දේට වඩා වැඩි යමක් ප්‍රකාශ කරයි. තැටිය පෙන්වන්නේ නිශ්චිත තත්ත්ව යටතේ ඇති වර්ධන සහ පැසවීම් ලක්ෂණ සමූහයකි. විශේෂය හඳුනාගැනීම වෙනම නිගමනයක් වන අතර, ඒ සඳහා වෙනම සාක්ෂි අවශ්‍ය වේ.

මෙම මාර්ගෝපදේශය EMB ඒගාර් ප්‍රතිඵල සලකන්නේ අර්ථකථනය කළ යුතු කාර්යයක් ලෙසය. එය මූලික අදහස පැහැදිලි කරයි, පාලක සමඟ නිදර්ශනාත්මක තැටි රූපාවලියක් විස්තර කරයි, සහ පෙළපොතේ දැක්වෙන පෙනුම නොමඟ යවන අවස්ථා හඳුන්වයි.

තැටිය පිටුපස ඇති අදහස

EMB ඒගාර් වරණීය මෙන්ම විභේදක මාධ්‍යයකි. ඉයොසින් Y සහ මෙතිලීන් බ්ලූ වර්ණක බොහෝ ග්‍රෑම් ධන ජීවීන්ගේ වර්ධනය මර්දනය කරන බැවින්, මෙම මාධ්‍යය ග්‍රෑම් ඍණ ජීවීන්ගේ වර්ධනයට හිතකර වේ. එම වර්ණකම දර්ශක ලෙසද ක්‍රියා කරයි: ජීවියෙකු ලබා ගත හැකි සීනි පැසවීමට ලක් කර ප්‍රමාණවත් දේශීය අම්ල ප්‍රමාණයක් නිපදවන විට, ජනපදය වැඩි වශයෙන් වර්ණක අවශෝෂණය කර තද දම් සිට නිල්-කළු දක්වා පැහැයක් ගනී. ප්‍රබල අම්ල නිෂ්පාදනයක් ඇති විට, ජනපද මතුපිට ලෝහමය කොළ පැහැති, බැලීමේ කෝණය අනුව වෙනස් වන දිලිසීමක් පෙන්විය හැකිය. ඉයොසින් මෙතිලීන් බ්ලූ ඒගාර් තැටි සඳහා ASM ක්‍රියාපටිපාටිය මෙම වරණය සහ විභේදනයේ සංයෝජනය විස්තර කරන අතර ඉගැන්වීම සඳහා යොමු ඡායාරූපද සපයයි.

ඕනෑම ප්‍රතිඵලයක් කියවීමට පෙර එක් විස්තරයක් වැදගත් වේ: භාවිත කරන සංයුතිය පරීක්ෂා කරන්න. පැරණි Holt Harris Teague සංයුතියෙහි ලැක්ටෝස් සහ සුක්‍රෝස් අඩංගු වන අතර, Levine EMB හි අඩංගු වන්නේ ලැක්ටෝස් පමණි. Serratia marcescens හි බොහෝ වෙන්කරගත් ප්‍රභේද මෙන්, සුක්‍රෝස් පැසවීමට ලක් කරන නමුත් ලැක්ටෝස් පැසවීමට ලක් නොකරන ජීවියෙකු මෙම වර්ග දෙක මත වෙනස් ලෙස දිස්විය හැකිය. EMB මාධ්‍ය සඳහා නිෂ්පාදකයාගේ ලේඛනය මෙම සංයුති වෙනස පැහැදිලිව සඳහන් කරයි. ප්‍රතිඵලය සමඟ නිෂ්පාදකයා සහ සංයුතියද සටහන් පොතේ සටහන් කරන්න.

සකස් කර ඇති, ජීවීන් වපුරා නොමැති EMB ඒගාර් සාමාන්‍යයෙන් රතු-දුඹුරු සිට රතු පැහැයට හුරු දම් දක්වා වේ; සමහර විට කොළ පැහැයට හුරු ස්වභාවයක් හෝ සියුම් අවක්ෂේපයක්ද තිබිය හැකිය. එම පසුබිම් වර්ණය වර්ධනයක් නොවේ. සෑම කියවීමක්ම ජීවීන් වපුරා නොමැති තැටියක් හෝ ලේඛනගත මූලික පෙනුම සමඟ සසඳන්න. ඉගැන්වීමේ ක්‍රියාපටිපාටිය වෙනත් ආකාරයක් නියම නොකරන්නේ නම්, 35 සිට 37 C දක්වා උෂ්ණත්වයක වායුගෝලීය ඔක්සිජන් සහිතව පැය 18 සිට 24 පමණ ඉන්කියුබේට් කිරීමෙන් පසු ප්‍රාථමික තැටිය කියවන්න. දිගු වේලාවක් ඉන්කියුබේට් කිරීමෙන් පැසවීමේ පෙනුම වෙනස් විය හැකිය.

තැටිය නිරීක්ෂණය කරන ආකාරය

ආලෝක ආකාර දෙකක් භාවිත කරන්න. පළමුව පරාවර්තිත හෝ ආනත ආලෝකය යටතේ තැටිය නිරීක්ෂණය කර එය ඇල කරන්න: ලෝහමය දිලිසීම බැලීමේ කෝණය අනුව වෙනස් වන අතර පෙනී සිටීමට හෝ අතුරුදන් වීමට හැකිය. ඉන්පසු ජනපදවල පැහැය සහ තද පැහැති මධ්‍යයන් ඇගයීමට ඒ හරහා ගමන් කරන ආලෝකයෙන් එය පරීක්ෂා කරන්න. තදබදය සහ අසල්වැසි ජනපද දේශීය අම්ල එකතුව වෙනස් කරමින් වර්ණය අඩු කිරීමට හෝ වැඩි කර පෙන්වීමට හැකි බැවින්, හොඳින් වෙන්වූ ජනපද භාවිත කරන්න. ASM රූප එකතුව මෙය සෘජුවම පෙන්වයි: මිශ්‍ර වගාවක ඇති E. coli හි අපේක්ෂිත දිලිසීම, අවට ජීවීන් අම්ල පරිසරය වෙනස් කරන නිසා නැති විය හැකිය.

අභ්‍යාසය ඉඩ දෙන සෑම විටම පාලක ඇතුළත් කරන්න. EMB මාධ්‍ය සඳහා සම්මත තත්ත්ව පාලන වගු වල දැක්වෙන පරිදි, සාමාන්‍ය ඉගැන්වීම් කට්ටලයක නිල්-කළු පැහැය සහ ලෝහමය දිලිසීමේ ලක්ෂණ සඳහා E. coli ATCC 25922 ද, අවර්ණ ලක්ෂණ සඳහා Salmonella Typhimurium ATCC 14028 හෝ Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 වැනි පැසවීම නොකරන ජීවියෙකුද, වර්ධන නිෂේධන පාලකයක් ලෙස Enterococcus faecalis හෝ Staphylococcus aureus වැනි ග්‍රෑම් ධන ජීවියෙකුද ඇතුළත් වේ. ධන පාලකයෙහි දිලිසීම නොමැති නම්, හඳුනා නොගත් සාම්පලය ගැන සැක කිරීමට පෙර ඉන්කියුබේට් කිරීම, තදබදය හෝ සංයුතිය ගැන සැක කරන්න.

නිදර්ශනාත්මක තැටි රූපාවලිය

පහත තැටි නිර්මාණය කළ නිදර්ශන මිස සැබෑ වගාවල ඡායාරූප නොවේ. ඒවා පෙන්වන්නේ සොයා බැලිය යුතු රටාව මිස එක් නිශ්චිත ප්‍රභේදයක හරියටම ඇති පැහැය නොවේ. ඒවා ASM යොමු ඡායාරූප සහ ඉගැන්වීම් විද්‍යාගාරයේ සැබෑ තැටි සමඟ සසඳන්න.

තැටිය 1: EMB ඒගාර් මත Escherichia coli, ප්‍රබල ලෙස ලැක්ටෝස් පැසවීමට ලක් කරන ජීවියෙක්

EMB ඒගාර් මත E. coli සාමාන්‍යයෙන් තද දම් සිට නිල්-කළු දක්වා පැහැයක් ගන්නා අතර, බොහෝ විට තද පැහැති මධ්‍යයක් සහ ප්‍රබල අම්ල නිෂ්පාදනයෙන් ඇති වන ලෝහමය කොළ දිලිසීමක් දක්වයි. ශිෂ්‍යයන් සොයන ප්‍රකට ලක්ෂණය මෙම දිලිසීම වුවත්, එය නිර්වචනයක් ලෙස නොව සහායක සාක්ෂියක් ලෙස සලකන්න. දිලිසීමේ තීව්‍රතාව ප්‍රභේදය, ඉන්කියුබේට් කරන කාලය, ජනපද ඝනත්වය සහ බැලීමේ කෝණය අනුව වෙනස් වේ. දිලිසීම නොමැති වීමෙන් E. coli බැහැර කළ නොහැකි අතර, දිලිසීමක් නොමැති තද පැහැති ජනපදයක් වෙනත් පැසවීම සිදු කරන ජීවීන් කිහිපයකටද ඉඟි කරයි. ඕනෑම පසු විමර්ශන කටයුත්තක් සඳහා තදබදය ඇති කොටසකින් කියවීමක් ගැනීම වෙනුවට හොඳින් වෙන්වූ ජනපදයක් තෝරන්න.

තැටිය 2: EMB ඒගාර් මත Klebsiella pneumoniae, ශ්ලේෂ්මලමය පැසවීම සිදු කරන ජීවියෙක්

EMB ඒගාර් මත Klebsiella pneumoniae සාමාන්‍යයෙන් රෝස-දම් සිට දුඹුරු-දම් දක්වා පැහැවලින් යුත් විශාල, දිලිසෙන, ශ්ලේෂ්මලමය ජනපද සාදයි. ඒවාට බොහෝ විට තද පැහැති මධ්‍යයන් ඇතත්, සාමාන්‍යයෙන් ප්‍රබල ලෝහමය දිලිසීමක් නොමැත. Enterobacter වැනි ආශ්‍රිත පැසවීම සිදු කරන ජීවීන්ටද සමාන හැඩලක්ෂණ ඇත. ශ්ලේෂ්මලමය ස්වභාවය සහ ජනපද ප්‍රමාණයද කියවීමේ කොටසකි: කුඩා සහ පැතලි රෝස ජනපදයකින් ලැබෙන සාක්ෂියේ බර, විශාල ගෝලාකාර උස්වූ ශ්ලේෂ්මලමය ජනපදයකින් ලැබෙන සාක්ෂියේ බරට වඩා වෙනස් වේ. E. coli මෙන්ම මෙහිදීත් තැටියෙන් යෝජනා කරන්නේ පැසවීම් ලක්ෂණ සමූහයක් වන අතර, විශේෂ මට්ටමින් නම් කිරීමට පහත විස්තර කරන ජෛවරසායනික තහවුරු කිරීම අවශ්‍ය වේ.

තැටිය 3: EMB ඒගාර් මත Salmonella සහ අනෙකුත් පැසවීම නොකරන ජීවීන්, අවර්ණ ජනපද

EMB ඒගාර් මත Salmonella සහ Shigella හා බොහෝ වෙන්කරගත් Pseudomonas ප්‍රභේද ඇතුළු ආශ්‍රිත ලැක්ටෝස් පැසවීම නොකරන ජීවීන් සාමාන්‍යයෙන් අවර්ණ සිට අර්ධපාරදෘශ්‍ය හෝ ලා ඇම්බර් පැහැති ජනපද ලෙස වර්ධනය වේ. ඇතැම් සංයුති සහ තත්ත්ව යටතේ යන්තම් රෝස පැහැයට හුරු පෙනුමක් ඇති වන නිසා, ලා රෝස ජනපදයක් පැසවීම සිදු කරන ජීවියෙකු ලෙස ස්වයංක්‍රීයව සැලකිය නොහැකිය. EMB මඟින් Salmonella, Shigella හෝ වෙනත් පැසවීම නොකරන ජීවීන් එකිනෙකාගෙන් වෙන්කර හඳුනා නොගනී; එම වෙනස තීරණය කරන්නේ පසුකාලීන පරීක්ෂණවලිනි. E. coli වැනි ලෝහමය ජනපද ඇති, ලැක්ටෝස් පැසවීමට ලක් කරන Salmonella ප්‍රභේදද ලේඛනගත කර ඇති බව සලකන්න. එකම තැටියකින් අවසාන නිගමනයකට පැමිණිය නොහැකි බවට එය තවත් හේතුවකි.

තැටිය 4: Serratia marcescens සහ සංයුතිය නිසා ඇති වන උගුල

Serratia marcescens සඳහා වෙනම කොටසක් අවශ්‍ය වන්නේ ශිෂ්‍යයන් බොහෝ විට රතු ජනපද අපේක්ෂා කර පසුව තැටිය වැරදි ලෙස කියවන නිසාය. බොහෝ සායනිකව වෙන්කරගත් ප්‍රභේද ලැක්ටෝස් පැසවීමට ලක් නොකරන බැවින්, Levine EMB මත ඒවා සාමාන්‍යයෙන් ලා පැහැයෙන් හෝ මඳ වර්ණයකින් දිස්වේ. බොහෝ වෙන්කරගත් ප්‍රභේද සුක්‍රෝස් පැසවීමට ලක් කරන නිසා, සුක්‍රෝස් අඩංගු සංයුතියක් තද පැහැති හෝ අම්ලය සමඟ වඩාත් සම්බන්ධ ප්‍රතික්‍රියාවක් ලබා දිය හැකිය. 35 සිට 37 C දක්වා උෂ්ණත්වයේදී සුපුරුදු රතු ප්‍රොඩිජියොසින් වර්ණකයද අපේක්ෂා නොකරන්න; ඉන්කියුබේටරයේ උෂ්ණත්වයේදී වර්ණක නිෂ්පාදනය විශ්වාසදායක නොවේ. ක්‍රියාපටිපාටිය EMB ඒගාර් මත Serratia marcescens ගැන සඳහන් කරන විට, එම ප්‍රකාශය පදනම් කරගන්නේ කුමන සංයුතියදැයි පරීක්ෂා කරන්න. Serratia පරිවෘත්තීය පිළිබඳ සමාලෝචනයක් මෙම උගුලට හේතු වන ලැක්ටෝස් පැසවීම නොකරන සහ සුක්‍රෝස් පැසවීම විචල්‍ය වන රටාව සාරාංශ කරයි.

තැටිය 5: පාලක සහ වර්ධනය නිෂේධනය වූ ජීවීන්

Staphylococcus, Enterococcus, Streptococcus සහ Bacillus වැනි ග්‍රෑම් ධන ජීවීන්ගේ වර්ධනය EMB ඒගාර් මත සාමාන්‍යයෙන් නිෂේධනය වේ හෝ කැපී පෙනෙන ලෙස මර්දනය වේ. එහෙත් සෑම ප්‍රභේදයකටම එම නිෂේධනය සම්පූර්ණ නොවේ. පාලක කට්ටලයක් කියවීම විශ්වාසදායක කරයි: E. coli පාලකය නිල්-කළු පැහැය සහ දිලිසීම සමඟ හොඳ වර්ධනයක් පෙන්විය යුතුය; පැසවීම නොකරන ජීවියාගේ පාලකය අවර්ණ වර්ධනයක් පෙන්විය යුතුය; නිෂේධන පාලකය ඉතා සුළු වර්ධනයක් හෝ කිසිදු වර්ධනයක් නොපෙන්විය යුතුය. නිෂේධන පාලකය හොඳින් වර්ධනය වේ නම්, වරණීය පියවර අසාර්ථක වී ඇති අතර එම කාණ්ඩයේ අනෙකුත් සෑම කියවීමක්ම සැක සහිතය. වර්ණ ගැන්වීමේ ක්‍රම පිළිතුරු දෙන්නේ වගා මාධ්‍යවලින් පිළිතුරු දෙන ප්‍රශ්නයට වඩා වෙනස් ප්‍රශ්නයකටය; විද්‍යාගාරයේ ස්ලයිඩ් වර්ණ ගැන්වීම පිළිබඳව දැනගැනීමට මෙතිලීන් බ්ලූ වර්ණ ගැන්වීමේ රූපාවලිය බලන්න.

සීමා සහිත සැසඳීම

නොමඟ යවන පෙනුම් වාක්‍ය තුනකින් සාරාංශ කළ හැකිය. තද පැහැය යනු E. coli නොවේ, මන්ද Klebsiella, Enterobacter සහ වෙනත් පැසවීම සිදු කරන ජීවීන්ද දිලිසීමකින් තොරව තද පැහැති මධ්‍යයන් ඇති කරයි. රෝස පැහැය යනු Klebsiella නොවේ, මන්ද මධ්‍යස්ථ හෝ මන්දගාමී පැසවීම සිදු කරන ජීවීන් සහ සාමාන්‍යයෙන් පැසවීම නොකරන ලෙස සැලකෙන සමහර ජීවීන් රෝස හෝ ලා දම් පැහැයෙන් දිස්වේ. දිලිසීම යනු නිශ්චිත E. coli හඳුනාගැනීමක් නොවේ, මන්ද ප්‍රබල පැසවීම සිදු කරන වෙනත් ජීවීන්ටද එය නිපදවිය හැකිය. ඉගැන්වීමේ ක්‍රියාපටිපාටිය සහ එහි මිශ්‍ර වගා රූප මෙම වැරදි නිගමන සෑම එකක්ම නිදර්ශනය කරයි.

තහවුරු කිරීමේ සීමා

EMB ඒගාර් වාර්තා කරන්නේ ලක්ෂණ සමූහයක් මිස විශේෂයක් නොවේ. වෙනස් ජීවීන්ට එකම ජනපද පෙනුම තිබිය හැකි අතර, එක් ජීවියෙකුගේ පෙනුම ප්‍රභේදය, වයස, තදබදය, සංයුතිය සහ ඉන්කියුබේට් කිරීම අනුව පෙළපොතේ පෙනුමෙන් වෙනස් විය හැකිය. ඉගැන්වීම් සහ සායනික කාර්ය ප්‍රවාහයන් EMB හැඩලක්ෂණ මූලික අනුමානයක් ලෙස සලකන්නේ ඒ නිසාය.

සාධාරණීකරණය කළ හැකි ශිෂ්‍ය කාර්ය ප්‍රවාහයක් මෙසේය: වෙන්වූ ජනපදය විස්තර කරන්න (ප්‍රමාණය, පැහැය, මධ්‍යය, ආනත ආලෝකය යටතේ දිලිසීම, ශ්ලේෂ්මලමය ස්වභාවය), සංයුතිය, ඉන්කියුබේට් කළ කාලය සහ උෂ්ණත්වය, සහ පාලක සටහන් කරන්න; ඉන්පසු ඕනෑම තහවුරු කිරීමේ පරීක්ෂණයකට පෙර හොඳින් වෙන්වූ ජනපදයක් උපවගා කර ශුද්ධ වගාවක් ලබා ගන්න. සාමාන්‍ය පසු පරීක්ෂණවලට, අනුමානිත E. coli සහ කෝලිෆෝම් හඳුනාගැනීම සඳහා ග්‍රෑම් වර්ණ ගැන්වීම සහ IMViC ප්‍රතික්‍රියාත්, ආන්ත්‍රික ජීවීන් සඳහා TSI හෝ KIA සහ ජීවියාට විශේෂිත ජෛවරසායනික පරීක්ෂණ කට්ටලත් ඇතුළත් වේ. කාර්යයට අවශ්‍ය විට සීරම් විද්‍යාත්මක ක්‍රම, MALDI TOF හෝ වෙනත් වලංගුකරණය කළ හඳුනාගැනීමේ ක්‍රමද භාවිත වේ. වරණීය සහ විභේදක ආන්ත්‍රික මාධ්‍ය අතර EMB හි ස්ථානය පිළිබඳ පසුබිම් තොරතුරු සඳහා, ආන්ත්‍රික වගා මාධ්‍ය පිළිබඳ හැඳින්වීම් සහ ග්‍රෑම් වර්ණ ගැන්වීමේ පසු විමර්ශනය බලන්න. නිල් ස්ලයිඩ් වර්ණ ගැන්වීමකින් ඔප්පු කළ හැකි සහ නොහැකි දේ පිළිබඳ ආශ්‍රිත ප්‍රශ්නය සඳහා, මෙතිලීන් බ්ලූ වර්ණ ගැන්වීමේ රූපාවලිය ද එම ප්‍රවේශයෙන්ම නිරීක්ෂණය සහ නිගමනය වෙන් කර තබයි.

නිගමනයට පෙර නිරීක්ෂණය ලියන්න. “පැය 24 දී Levine EMB මත බැලීමේ කෝණය අනුව වෙනස් වන කොළ දිලිසීමක් සහිත තද නිල්-කළු ජනපද, ප්‍රබල ලැක්ටෝස් පැසවීම සමඟ ගැළපේ” යන්න සාධාරණීකරණය කළ හැකිය. “E. coli, තහවුරු කරන ලදී” යන්න සඳහා තැටියෙන් පමණක් සැපයිය නොහැකි තහවුරු කිරීමේ පියවර අවශ්‍ය වේ.