ميٿيلين بلو جي مائيٽوڪانڊريائي اثرن جي ماپ: آڪسيجن، ATP، ۽ جھليءَ جو پوٽينشل

فرض ڪريو ته هڪ ليبارٽري تنفس ۾ خرابي رکندڙ مائيٽوڪانڊريا ۾ ميٿيلين بلو شامل ڪري ٿي ۽ آڪسيجن جو استعمال وڌندي ڏسي ٿي. فطري طور لکڻ لاءِ جملو اهو ٿيندو ته رنگ مائيٽوڪانڊريا جي ڪارڪردگي بحال ڪئي. اهو جملو غلط ٿي سگهي ٿو. آڪسيجن جو وهڪرو، ATP جي ٺهڻ، ۽ جھليءَ جو پوٽينشل ٽي الڳ تصور آهن. اهي ساڳئي عضيي سان ائين لاڳاپيل آهن جيئن بيڪ اپ، هم وقت سازي، ۽ شيئرنگ ساڳئي ڪلائوڊ فولڊر سان لاڳاپيل هوندا آهن: هڪ ٻئي سان لاڳاپيل، پر مختلف اصولن جي تابع. هڪ کي ٻئي جي جاءِ تي سمجهڻ سان تشريح غلط ٿي وڃي ٿي، ڀلي هر ماپ فني طور صحيح هجي.

ميٿيلين بلو اهڙي مونجهاري جو امڪان وڌائي ٿو، ڇاڪاڻ ته اهو جنهن نظام کي ماپي ٿو، تنهن ۾ پاڻ به حصو وٺي ٿو. اهو ريڊوڪس چڪر هلائيندڙ مادو آهي، جيڪو رستي جي اڳئين حصي ۾ اليڪٽران قبول ڪري ٿو ۽ پوئين حصي ۾ ڏئي ٿو؛ اهو چرٻيءَ سان ميل رکندڙ ڪيٽائن آهي، جيڪو توانائيءَ واري حالت ۾ موجود مائيٽوڪانڊريا ۾ گڏ ٿئي ٿو؛ ۽ اهو گهرو نيرو مرڪب آهي، جيڪو عام پروبن جي ساڳين طيفي پٽين ۾ روشني جذب ڪري ٿو ۽ خارج ڪري ٿو. هڪڙي ماپ اهو سڄو بار نٿي کڻي سگهي. بڊاپسٽ جي مائيٽوڪانڊريائي مطالعي ۾ ڏيکاريل ڀروسي جوڳو طريقو اهو آهي ته آڪسيجن جو وهڪرو، ATP ٺهڻ جي شرح، جھليءَ جو پوٽينشل، ۽ هائيڊروجن پرآڪسائيڊ جو خارج ٿيڻ گڏ ماپيا وڃن، ۽ هر مرحلي تي رنگ لاءِ مخصوص ڪنٽرول رکيا وڃن.

ريسپائروميٽري آڪسيجن جو وهڪرو ماپي ٿي، توانائيءَ جي پيداوار نه

اعليٰ تفصيل واري ريسپائروميٽري، ڀلي Oroboros Oxygraph سان ڪئي وڃي يا Seahorse جي خليي کان ٻاهر واري وهڪري جي تجزيه ڪندڙ اوزار سان، هڪڙي ڳالهه ٻڌائي ٿي: آڪسيجن ڪيتري تيزيءَ سان ريڊيوس ٿي رهي آهي. اها نٿي ٻڌائي ته هر اليڪٽران جي بدلي ڪيترا پروٽان پمپ ٿيا، ڪيترو گريڊيئنٽ برقرار رهيو، يا ATP سنٿيز ان کي استعمال ڪيو يا نه.

اصطلاحن جي اهميت آهي. الڳ ڪيل مائيٽوڪانڊريا ۾ ADP کان سواءِ سبسٽريٽ ليڪ تنفس ڏئي ٿو، ڪافي مقدار ۾ ADP سان سبسٽريٽ آڪسائيڊيٽو فاسفوريليشن جي گنجائش ڏئي ٿو، ۽ اَن ڪپلر جي ٽائيٽريشن وڌ ۾ وڌ اليڪٽران منتقليءَ جي گنجائش ڏئي ٿي. سالم خلين ۾ Seahorse جا لاڳاپيل پيمانا بنيادي تنفس، اوليگومائيسن لاءِ حساس ATP سان ڳنڍيل تنفس، پروٽان ليڪ، FCCP سان مقرر ڪيل وڌ ۾ وڌ تنفس، ۽ روٽينون ۽ اينٽي مائيسن جي باوجود جاري رهندڙ غير مائيٽوڪانڊريائي آڪسيجن جو استعمال آهن. Seahorse جي نتيجن کي State 3 ۽ State 4 سڏڻ اهڙي درستيءَ جي دعويٰ آهي، جنهن جي هن نموني جي تياري حمايت نٿي ڪري، جيئن Agilent Mito Stress Test جو فريم ورڪ واضح ڪري ٿو.

ميٿيلين بلو وڌيڪ آڪسيجن ۽ وڌيڪ توانائيءَ جي وچ ۾ فطري طور سمجهيل لاڳاپي کي ٽوڙي ٿو. گني پگ جي دماغ مان الڳ ڪيل مائيٽوڪانڊريا ۾ 100 nM کان 1 uM رنگ، گلوٽاميٽ ۽ ماليٽ، سڪسينيٽ، ۽ الفا-گليسرُوفاسفيٽ سبسٽريٽن سان آرام واري حالت ۾ آڪسيجن جو استعمال وڌايو؛ الفا-گليسرُوفاسفيٽ سان واڌ لڳ ڀڳ 64 سيڪڙو هئي. تنهن هوندي به، صحتمند مائيٽوڪانڊريا ۾ ADP سان تحريڪ ڏنل تنفس بنيادي طور اڻبدليل رهيو، جيئن الڳ ڪيل دماغي مائيٽوڪانڊريا جي مطالعي ۾ ڄاڻايو ويو آهي. ليڪ وڌڻ ۽ ADP سان تحريڪ ڏنل وهڪري جي ساڳئي رهڻ سبب، حساب ڪيل تنفسي ڪنٽرول جو تناسب گهٽجي ٿو. ان گهٽتائيءَ جو مطلب اهو ناهي ته رنگ مائيٽوڪانڊريا کي نقصان پهچايو. ان جو مطلب اهو آهي ته رنگ عام تنفس سان گڏ آڪسيجن استعمال ڪندڙ هڪ ريڊوڪس چڪر وڌايو. ميٿيلين بلو سان آڪسيجن جي استعمال جي اهڙي جاچ، جيڪا رڳو واڌ رپورٽ ڪري ٿي، حقيقي ڪيميائي عمل ته ماپي ٿي، پر توانائي محفوظ رهڻ بابت ڪجهه به نٿي ٻڌائي.

بحاليءَ جا تجربا وڏي پيماني تي به ساڳيو فرق ڏيکارين ٿا. ڪمپليڪس I بند ڪرڻ سان، آڪسيجن جو وهڪرو لڳ ڀڳ ٽي ڀيرا بحال ٿيو، جڏهن ته ATP جي ٺهڻ رڳو لڳ ڀڳ 1.5 ڀيرا بحال ٿي. وڌيڪ آڪسيجن اليڪٽروڊ تائين پهتي، پر ان جو گهٽ حصو ATP ٺاهڻ ۾ ڪم آيو. آڪسائيڊيٽو فاسفوريليشن ۾ بهتريءَ جي ڪنهن به دعويٰ لاءِ حساب ۾ ATP وارو پاسو به گهرجي؛ بهتر آهي ته ان کي في آڪسيجن ATP جي تناسب طور ڏجي ۽ واضح ڪجي ته تناسب جي مخرج ۾ آڪسيجن کي ڪهڙي طريقي سان ڳڻيو ويو آهي.

ATP جون جاچون ٺهڻ جي شرح ماپين ٿيون، جنهن جي جاءِ تي موجود مقدار نٿو رکي سگهجي

ATP جي جاچ هڪ مختلف سوال جو جواب ڏئي ٿي: وقت جي هر ايڪائيءَ ۾ ڪيترو ATP پيدا ٿئي ٿو. وقت سان تبديلي ماپيندڙ پڙهڻ، ڀلي منٽن تائين جگنوءَ جي لوسيفيريز جي روشنيءَ کي ڏسڻ سان هجي يا 340 nm تي پڙهيل ڳنڍيل هيڪسوڪائنيز ۽ گلوڪوز-6-فاسفيٽ ڊي هائيڊروجنيز جي جاچ سان، هڪ شرح ڏئي ٿو. هڪڙي آخري نقطي تي ڪل ATP جي ماپ موجود مقدار ڏئي ٿي، جيڪو ٺهڻ مان استعمال کي ڪٽڻ جو نتيجو آهي ۽ پنهنجي سر آڪسائيڊيٽو فاسفوريليشن بابت ٿوري ڄاڻ ڏئي ٿو.

بڊاپسٽ جي گروهه ايڊينائليٽ ڪائنيز کي دٻائي، ڳنڍيل اينزائيمي طريقو استعمال ڪيو ۽ ڏٺو ته 1 کان 2 uM تي ميٿيلين بلو، روٽينون ۽ اينٽي مائيسن سان عمل ڪيل مائيٽوڪانڊريا ۾ ATP جي پيداوار ٿوري، پر شمارياتي لحاظ کان نمايان حد تائين وڌائي. اها حقيقي بحالي آهي، ۽ اها جزوي آهي. TEGDMA جي زهريلي اثرن واري مطالعي هڪ مختلف ماڊل ۾ به ساڳئي نوعيت جو جواب ڏنو: ڏندن جي مواد ۾ استعمال ٿيندڙ 5 mM مونومر TEGDMA، ڪمپليڪس I سان ڳنڍيل تنفس کي لڳ ڀڳ 286 مان 28 وهڪري جي ايڪائين تائين ڪيرايو، ۽ 2 uM رنگ ان کي لڳ ڀڳ 86 تائين بحال ڪيو.

رنگدار ريڊوڪس مرڪب سان ٻه ڪنٽرول لازمي آهن. پهريون، اوليگومائيسن استعمال ڪري اهو طئي ڪريو ته ماپيل ATP جي ٺهڻ جو ڪيترو حصو ATP سنٿيز تي دارومدار رکي ٿو. ٻيو، معلوم مقدار واري ATP، مڪمل ريجنٽ، ۽ استعمال ڪيل رنگ جي عين ساڳين ڪنسنٽريشنن سان خليي کان سواءِ اسپائيڪ ريڪوري جاچ هلايو؛ گهٽ ۾ گهٽ 0، 100 nM، 300 nM، 1 uM، ۽ 2 uM تي. رنگ خارج ٿيل روشني جذب ڪري سگهي ٿو، رپورٽر اينزائم کي روڪي سگهي ٿو، يا ريجنٽ جي ريڊوڪس ڪيميا بدلائي سگهي ٿو، ۽ عام لوسيفيريز جاچ جي رهنمائي اهڙي ئي قسم جي مداخلت لاءِ حياتياتي ڪيميائي مقابلي واريون جاچون سفارش ڪري ٿي. اهو نه سمجهو ته 1 uM ماپ جي مصنوعي خلل کان پاڪ آهي، رڳو ان ڪري جو روشنيءَ جو گهٽجڻ عام طور وڌيڪ ڪنسنٽريشنن تي وڌيڪ هوندو آهي.

جھليءَ جي پوٽينشل جا پروب رنگ جي ورڇ ماپين ٿا، وهڪرو نه

سافرانين O، TMRM ۽ TMRE، روڊامين 123، ۽ JC-1 سڀ جھليءَ مان گذري سگهندڙ ڪيٽائن آهن. اهي برقي ڪيميائي توازن موجب منفي چارج واري ميٽرڪس ۾ گڏ ٿين ٿا، تنهنڪري مجموعي فلوريسنس، پروب جي جاءِ وسيلي، پوٽينشل جي اڻسڌي ماپ ڏئي ٿي. انهن مان ڪو به ATP يا اليڪٽرانن جو وهڪرو نٿو ماپي.

هر پروب لاءِ هڪ وڌيڪ موزون نموني جي تياري هوندي آهي. سافرانين O الڳ ڪيل مائيٽوڪانڊريا ۽ اهڙن خلين لاءِ موزون آهي، جن جي جھليءَ کي ٻاهرين مادن لاءِ گذرڻ جوڳو ڪيو ويو هجي؛ عام طور لڳ ڀڳ 2 uM تي، لڳ ڀڳ 495 nm تحريڪي روشني ۽ لڳ ڀڳ 585 nm اخراجي روشنيءَ سان. اهو روشني گهٽجڻ واري طريقي ۾ ڪم ڪري ٿو، جنهن ۾ پروب جي اندر وڃڻ سان مجموعي فلوريسنس بدلجي ٿي. TMRM ۽ TMRE سالم خلين لاءِ گهٽ نينومولر مقدار ۾، روشني نه گهٽجڻ واري طريقي سان، موزون آهن؛ ان حالت ۾ ڊي پولرائيزيشن رنگ کي ٻاهر ڪڍي ٿي ۽ مائيٽوڪانڊريائي فلوريسنس گهٽجي ٿي. وڌيڪ مقدار تي، پاڻ سبب روشني گهٽجڻ سان سگنل جي رخ ۾ ابتڙ تبديلي ٿي سگهي ٿي. JC-1 سائي ۽ ڳاڙهي روشنيءَ جو آسان تناسب ڏئي ٿو، پر اهو شامل ڪيل مقدار ۽ مائيٽوڪانڊريا جي مجموعي مقدار تي دارومدار رکي ٿو؛ ان ڪري عددي ڪم لاءِ اهو احتياط سان ڪنٽرول ڪيل TMRM کان ڪمزور آهي. اهي فائدا ۽ حدون هڪ وڏي پيماني تي استعمال ٿيندڙ مائيٽوڪانڊريائي جھليءَ جي پوٽينشل جي پروبن واري جائزي ۾ بيان ٿيل آهن.

ميٿيلين بلو عين استعمال ٿيندڙ ڪنسنٽريشنن تي بصري مداخلت ڪري ٿو. 600 کان 665 nm جي ويجهو ان جون جذب واريون پٽيون ڳاڙهي پروب جي اخراج سان ملي وڃن ٿيون، تنهنڪري اندروني فلٽر جا اثر، روشنيءَ جو گهٽجڻ، ۽ تحريڪي روشنيءَ جو جذب ٿيڻ، سڀ ممڪن آهن. رنگ پاڻ به ٻيو چرٻيءَ سان ميل رکندڙ ڪيٽائن آهي، جنهن جي پنهنجي ورڇ ان پوٽينشل سان بدلجي ٿي، جيڪو ماپيو پيو وڃي. بچاءَ جو طريقو هڪ کان وڌيڪ ماپن سان تصديق ۽ خالي ڪنٽرول آهن: رڳو پروب، رڳو رنگ، پروب سان رنگ جي هر ڪنسنٽريشن، صفر حوالي طور FCCP سان مڪمل ڊي پولرائيزيشن، ۽ بهتر هجي ته بصري لحاظ کان مختلف ٻيو پروب. ڪمپليڪس III کي پاسو ڪرڻ واري مطالعي اهو مثال قائم ڪيو: اينٽي مائيسن ۽ مائيڪسوٿائيازول سان روڪڻ کان پوءِ جھليءَ جي پوٽينشل جي بحالي سافرانين O ۽ TMRM ٻنهي سان ٻيهر ماپي وئي، ۽ ٻنهي سان ساڳئي نوعيت جي بحالي ملي. هڪ بصري رپورٽر اشارو آهي. ٻه آزاد رپورٽر ثبوت آهن.

نمونن جون ٽي تياريون، ٽي مختلف سوال

الڳ ڪيل مائيٽوڪانڊريا، گذرڻ جوڳي جھليءَ وارا خليا، ۽ سالم خليا هڪڙي جاچ جون هڪ ٻئي جي جاءِ تي استعمال ٿي سگهندڙ حساسيت جون سيٽنگون ناهن. اهي مختلف ڪم ڪندڙ اصولن وارا مختلف تصور آهن.

الڳ ڪيل مائيٽوڪانڊريا ۾ اليڪٽران ٽرانسپورٽ زنجير، اندروني جھلي، ۽ ميٽرڪس جو عمل ڪندڙ نظام برقرار رهن ٿا، جڏهن ته پلازما جھلي، سائيٽوسول، ۽ نيٽ ورڪ جي جوڙجڪ هٽايا وڃن ٿا. اهو هٽائڻ ئي مقصد آهي: سبسٽريٽ، ADP، روڪيندڙ مادا، ۽ رنگ جون ڪنسنٽريشنون بلڪل مقرر ٿين ٿيون، تنهنڪري ڪنهن مخصوص رستي کي سڃاڻي سگهجي ٿو. ان جي قيمت قدرتي سبسٽريٽ فراهمي، سگنلنگ، ۽ گهرج جو وڃائجي وڃڻ آهي.

گذرڻ جوڳي جھليءَ وارن خلين ۾ مائيٽوڪانڊريا خليي جي گهڻي جوڙجڪ اندر رهندا آهن، جڏهن ته ٻاهران ڏنل سبسٽريٽ ۽ ADP کليل ڪيل پلازما جھليءَ مان لنگهي سگهندا آهن. خليي جي ماحول اندر سبسٽريٽ جي رستي جي خرابي سڃاڻڻ لاءِ اهي صحيح اوزار آهن. جھليءَ کي حد کان وڌيڪ گذرڻ جوڳو ڪرڻ سان ٻاهرين مائيٽوڪانڊريائي جھلي خراب ٿئي ٿي، ۽ سائيٽوسول واري ضابطي جا جزا ڌوپجي نڪري وڃن ٿا.

سالم خليا سڀ ڪجهه برقرار رکن ٿا: پلازما جھليءَ جي رڪاوٽ، سائيٽوسول جا ريڊيوس ڪندڙ مادا، اندروني سبسٽريٽ جي آمدرفت، مائيٽوڪانڊريائي نيٽ ورڪ، ۽ ATP جي گهرج. اهي جسماني عملن جي سڀ کان ويجهو ۽ ڪم ڪرڻ جي مخصوص طريقي کي الڳ سڃاڻڻ کان سڀ کان پري آهن، ڇاڪاڻ ته رنگ جو اندر وڃڻ، ريڊيوس ٿيڻ، ۽ الڳ هنڌن ۾ گڏ ٿيڻ، سڀ مائيٽوڪانڊريا تائين ان جي مؤثر پهچ کي شڪل ڏين ٿا.

TEGDMA واري مطالعي ڄاڻي واڻي ٽيئي سطحون استعمال ڪيون: رنگ سان آڪسائيڊيشن ۽ پوٽينشل جي بحاليءَ لاءِ الڳ ڪيل دماغي مائيٽوڪانڊريا؛ بنيادي طور خرابيءَ کي ڪمپليڪس I سان ڳنڍيل سبسٽريٽ جي آڪسائيڊيشن تائين محدود سڃاڻڻ لاءِ گذرڻ جوڳي جھليءَ وارا ڏندن جي پلپ جا اسٽيم سيل؛ ۽ دٻايل آڪسيجن جي استعمال تي 2 uM رنگ جي جسماني مجموعي اثر لاءِ سالم اسٽيم سيل. مختلف تيارين ۾ مائيٽوڪانڊريائي ماپن جو مقابلو ڪندڙ پڙهندڙن لاءِ، ميٿيلين بلو تنفسي زنجير ۾ اليڪٽران ڪيئن منتقل ڪري ٿو، ان بابت ساٿي وضاحتي مضمون رستي جو پسمنظر ڏئي ٿو، ۽ ميٿيلين بلو جي تنفسي مطالعي کي پڙهڻ واري رهنمائي مقدار ۽ روڪيندڙ مادن جي استعمال جو منطق بيان ڪري ٿي.

ريڊوڪس-فعال رنگ لاءِ گهربل ڪنٽرول

ريڊوڪس چڪر هلائيندڙ مادي لاءِ عام روڪيندڙ مادي کان وڌيڪ ڊگهي ڪنٽرول فهرست گهرجي، ڇاڪاڻ ته رڳو رنگ جي ڪيميا حياتياتي عمل جهڙو نتيجو ڏيکاري سگهي ٿي.

ريسپائروميٽري لاءِ، ماپ ۾ وقت سان ايندڙ سرڪڻ کي جانچڻ لاءِ رڳو بفر وارو چيمبر، حياتياتي مواد کان سواءِ بفر ۽ رنگ وارو چيمبر، رنگ سان گڏ جاچ ۾ موجود ڪو به خليي کان ٻاهر وارو ريڊيوس ڪندڙ مادو، ۽ سالم خلين ۾ غير مائيٽوڪانڊريائي آڪسيجن جو استعمال طئي ڪرڻ لاءِ آخر ۾ روٽينون ۽ اينٽي مائيسن هلايو. ياد رکو ته ريڊيوس ٿيل رنگ آڪسيجن ڏانهن اليڪٽران منتقل ڪري، هائيڊروجن پرآڪسائيڊ ٺاهيندي ٻيهر آڪسائيڊ ٿئي ٿو. تنهنڪري اليڪٽران ڏيندڙ مادي کان سواءِ رڳو رنگ وارو خالي ڪنٽرول، خليي کان سواءِ ٿيندڙ آڪسيجن جي ان استعمال کي گهٽ اندازو ڪري ٿو، جيڪو NADH يا NADPH دستياب ٿيڻ سان ظاهر ٿئي ٿو.

هائيڊروجن پرآڪسائيڊ لاءِ، غير چونڊيندڙ DCFDA رنگن بدران ڪئليبريٽ ڪيل Amplex UltraRed ۽ هارس ريڊش پرآڪسائيڊيز کي ترجيح ڏيو، ڪيٽاليز سان تصديق ڪريو، ۽ روشنيءَ تي دارومدار کي جاچيو، ڇاڪاڻ ته رنگ فوٽو سينسٽائيزر آهي. دماغي مائيٽوڪانڊريا واري مطالعي ۾ ڏٺو ويو ته رڳو 100 nM رنگ تي پرآڪسائيڊ جو بار چار ڀيرا کان وڌيڪ وڌيو، جڏهن ته ان جو ختم ٿيڻ سست ٿيو؛ پرآڪسائيڊ سڌو سنئون ريڊيوس ٿيل رنگ مان ٺهيو، وچ ۾ سپرآڪسائيڊ ٺهڻ کان سواءِ. پروب جي چونڊ ۽ روشنيءَ جي ڪنٽرولن جا تفصيل رنگن جي تجربن ۾ ردعمل ڪندڙ آڪسيجن قسمن جي ماپ بابت ساٿي مضمون ۾ آهن، ۽ پرآڪسائيڊ ڪڏهن سگنل طور ۽ ڪڏهن بار طور ڪم ڪري ٿو، ان جو وسيع سوال خلوي ريڊوڪس توازن ۽ اينٽي آڪسائيڊنٽ دعوائن سان گڏ بحث هيٺ آيل آهي.

رستي بابت دعوائن لاءِ، ڪمپليڪس III جي روڪيندڙ مادن جا ٻئي هنڌ جاچيو: Qi هنڌ تي اينٽي مائيسن A ۽ Qo هنڌ تي مائيڪسوٿائيازول، گڏوگڏ سائيانائيڊ سان ڪمپليڪس IV جو آخري نقطو به. چوهي جي دماغ تي اڳوڻي مطالعي ۾ ٻڌايو ويو ته رنگ، روٽينون سان بند ٿيل تنفس بحال ڪيو، پر اينٽي مائيسن سان بند ٿيل تنفس نه. بعد ۾ ٽن جاندارن جي قسمن تي ڪيل مطالعي ۾ ٻنهي روڪيندڙ مادن سان جزوي بحالي ۽ سائيٽوڪروم c جي سڌي ريڊڪشن جا ثبوت مليا. هن متبادل رستي کي نئين ڊيٽا سان ٺهڪندڙ سمجهو، نه حتمي طور ثابت ٿيل، ڇاڪاڻ ته رنگ جي ڪنسنٽريشن، روڪيندڙ مادي جو هنڌ، سبسٽريٽ جي حالت، ۽ رنگ جي ورڇ، سڀ مشاهدي ۾ ايندڙ رستي کي بدلائين ٿا.

جاچ جي چونڊ جو جدول

سوال جي بنياد تي ماپ چونڊڻ لاءِ هي جدول استعمال ڪريو، نه ته ماپ جي بنياد تي سوال چونڊيو.

گهٽ ۾ گهٽ قائل ڪندڙ دعويٰ لاءِ رنگ جون ساڳيون ڪنسنٽريشنون، 100 nM، 300 nM، 1 uM، ۽ 2 uM، سڀني ماپن ۾ استعمال ٿين: ليڪ، ADP، اوليگومائيسن، ۽ اَن ڪپلر جي حالتن هيٺ آڪسيجن جو وهڪرو؛ ATP ٺهڻ جي شرح؛ ترجيحي طور ٻن پروبن سان جھليءَ جو پوٽينشل؛ ۽ ڪيٽاليز توڙي خليي کان سواءِ ڪنٽرولن سان ڪئليبريٽ ڪيل پرآڪسائيڊ جو خارج ٿيڻ. ڳنڍيل ماپن جو پورو مجموعو رپورٽ ڪريو: آڪسيجن جو وهڪرو، ATP جي شرح، في آڪسيجن ATP، پوٽينشل، ۽ پرآڪسائيڊ. انهن مان ڪو به هڪ انگ اڪيلو، اهڙي ماپ آهي جيڪا پنهنجي معنيٰ جي ڳولا ۾ آهي.