ਮਿਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਨਾਲ ਸਧਾਰਨ ਰੰਗਾਈ ਬਨਾਮ ਗ੍ਰਾਮ ਰੰਗਾਈ: ਹਰ ਵਿਧੀ ਕੀ ਸਾਬਤ ਕਰ ਸਕਦੀ ਹੈ

ਇੱਕ ਵਿਦਿਆਰਥੀ E. coli ਲੇਬਲ ਵਾਲੇ ਕਲਚਰ ਤੋਂ ਸਮੀਅਰ ਤਿਆਰ ਕਰਦਾ ਹੈ, ਉਸ ਨੂੰ ਇੱਕ ਮਿੰਟ ਲਈ ਮਿਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਨਾਲ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਢੱਕਦਾ ਹੈ, ਧੋਂਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਤੇਲ-ਇਮਰਸ਼ਨ ਲੈਂਸ ਰਾਹੀਂ ਵੇਖਦਾ ਹੈ। ਦ੍ਰਿਸ਼-ਖੇਤਰ ਵਿੱਚ ਨੀਲੇ ਡੰਡਾਕਾਰ ਜੀਵ ਦਿਸਦੇ ਹਨ। ਲੈਬ ਰਿਪੋਰਟ ਵਿੱਚ ਲਿਖਿਆ ਹੈ: "ਗ੍ਰਾਮ-ਨੈਗੇਟਿਵ ਡੰਡਾਕਾਰ ਬੈਕਟੀਰੀਆ ਦੀ ਪਛਾਣ E. coli ਵਜੋਂ ਕੀਤੀ ਗਈ।" ਨਿਰੀਖਣ ਸਹੀ ਹੈ। ਪਰ ਇਹ ਸਲਾਈਡ ਉਸ ਨਤੀਜੇ ਲਈ ਸਬੂਤ ਨਹੀਂ ਦਿੰਦੀ।

ਗਲਤੀ ਤਕਨੀਕੀ ਨਹੀਂ, ਸੰਕਲਪਕ ਹੈ। ਵਿਦਿਆਰਥੀ ਨੇ ਸਧਾਰਨ ਰੰਗਾਈ ਨੂੰ ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ ਲਿਆ ਜਿਵੇਂ ਉਹ ਭੇਦਕ ਟੈਸਟ ਹੋਵੇ। ਸਧਾਰਨ ਰੰਗਾਈ ਅਤੇ ਗ੍ਰਾਮ ਰੰਗਾਈ ਵੱਖਰੇ ਸਵਾਲਾਂ ਦੇ ਜਵਾਬ ਦਿੰਦੀਆਂ ਹਨ, ਕਿਉਂਕਿ ਉਹ ਰੰਗਾਈ ਦੇ ਵੱਖਰੇ ਸਿਧਾਂਤਾਂ ਉੱਤੇ ਆਧਾਰਿਤ ਹਨ। ਇੱਕ ਪੁੱਛਦੀ ਹੈ: ਕਿਹੜਾ ਆਕਾਰ ਮੌਜੂਦ ਹੈ। ਦੂਜੀ ਪੁੱਛਦੀ ਹੈ: ਪਰਖੇ ਜਾਣ ਉੱਤੇ ਕੋਸ਼ਿਕਾ-ਭਿੱਤ ਕਿਹੋ ਜਿਹਾ ਵਿਹਾਰ ਕਰਦੀ ਹੈ। ਦੋਹਾਂ ਨੂੰ ਰਲਾਉਣ ਨਾਲ ਸਹੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਰੰਗੀ ਸਲਾਈਡ ਤੋਂ ਵੀ ਬਿਨਾਂ ਆਧਾਰ ਵਾਲੀ ਰਿਪੋਰਟ ਬਣ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।

ਇਹ ਤੁਲਨਾ ਦੋਹਾਂ ਵਿਧੀਆਂ ਨੂੰ ਵੱਖ ਰੱਖਦੀ ਹੈ, ਦਿਖਾਉਂਦੀ ਹੈ ਕਿ ਹਰ ਨਤੀਜੇ ਦੇ ਆਧਾਰ ਉੱਤੇ ਤੁਸੀਂ ਕਿਹੜਾ ਦਾਅਵਾ ਕਰ ਸਕਦੇ ਹੋ, ਅਤੇ ਵਿਦਿਆਰਥੀਆਂ ਦੇ ਦੋ ਸਭ ਤੋਂ ਆਮ ਸਵਾਲਾਂ ਦੇ ਜਵਾਬ ਦਿੰਦੀ ਹੈ: ਕੀ ਮਿਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਨੂੰ ਗ੍ਰਾਮ ਰੰਗਾਈ ਵਿੱਚ ਵਰਤਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ E. coli ਦੀ ਮਿਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਰੰਗਾਈ ਅਸਲ ਵਿੱਚ ਕੀ ਦਿਖਾਉਂਦੀ ਹੈ।

ਸੰਖੇਪ ਜਵਾਬ

ਮਿਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਨਾਲ ਸਧਾਰਨ ਰੰਗਾਈ ਹਰ ਰੰਗ ਫੜਨ ਵਾਲੀ ਕੋਸ਼ਿਕਾ ਨੂੰ ਇੱਕੋ ਨੀਲਾ ਰੰਗ ਦਿੰਦੀ ਹੈ। ਇਸ ਲਈ ਇਹ ਆਕਾਰ-ਰਚਨਾ (ਡੰਡਾਕਾਰ, ਗੋਲਾਕਾਰ, ਸਪਿਰਲ) ਅਤੇ ਵਿਵਸਥਾ (ਇਕੱਲੀਆਂ, ਜੋੜਿਆਂ ਵਿੱਚ, ਲੜੀਆਂ ਵਿੱਚ) ਦਿਖਾਉਂਦੀ ਹੈ, ਪਰ ਗ੍ਰਾਮ ਸ਼੍ਰੇਣੀ ਬਾਰੇ ਕੁਝ ਨਹੀਂ ਦੱਸਦੀ। ਗ੍ਰਾਮ ਰੰਗਾਈ ਵਿੱਚ ਆਇਓਡੀਨ, ਰੰਗ ਹਟਾਉਣ ਦਾ ਪੜਾਅ ਅਤੇ ਇੱਕ ਪ੍ਰਤਿਰੰਗਕ ਵੀ ਸ਼ਾਮਲ ਹੁੰਦੇ ਹਨ। ਇਸ ਲਈ ਇਹ ਬੈਕਟੀਰੀਆ ਨੂੰ ਉਨ੍ਹਾਂ ਦੇ ਕੋਸ਼ਿਕਾ-ਆਵਰਨ ਵੱਲੋਂ ਰੰਗਕ ਨੂੰ ਰੋਕ ਕੇ ਰੱਖਣ ਦੇ ਢੰਗ ਅਨੁਸਾਰ ਗ੍ਰਾਮ-ਪਾਜ਼ਿਟਿਵ (ਜਾਮਨੀ) ਅਤੇ ਗ੍ਰਾਮ-ਨੈਗੇਟਿਵ (ਗੁਲਾਬੀ ਜਾਂ ਲਾਲ) ਵਿੱਚ ਵੰਡਦੀ ਹੈ। ਮਿਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਨੀਲੀਆਂ ਡੰਡਾਕਾਰ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਦਾ ਮਤਲਬ ਹੈ "ਡੰਡਾਕਾਰ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਮੌਜੂਦ ਹਨ।" ਪੂਰੇ ਗ੍ਰਾਮ ਕ੍ਰਮ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਗੁਲਾਬੀ ਡੰਡਾਕਾਰ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਦਾ ਮਤਲਬ ਹੈ "ਗ੍ਰਾਮ-ਨੈਗੇਟਿਵ ਡੰਡਾਕਾਰ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਮੌਜੂਦ ਹਨ।" ਦੂਜਾ ਬਿਆਨ ਵਧੇਰੇ ਮਜ਼ਬੂਤ ਹੈ, ਕਿਉਂਕਿ ਉਸ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਵਾਧੂ ਟੈਸਟ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।

ਇਹ ਲੇਖ ਬੈਕਟੀਰੀਆ ਲਈ ਇੱਕ ਰੰਗਕ ਵਾਲੀਆਂ ਵਿਧੀਆਂ ਦੇ ਜਿਸ ਵੱਡੇ ਸਮੂਹ ਨਾਲ ਸੰਬੰਧਿਤ ਹੈ, ਉਸ ਬਾਰੇ ਜਾਣਨ ਲਈ ਮਾਈਕ੍ਰੋਸਕੋਪੀ ਰੰਗਾਈ ਐਟਲਸ ਵੇਖੋ।

ਸਧਾਰਨ ਰੰਗਾਈ: ਇੱਕ ਰੰਗਕ, ਇੱਕ ਸਵਾਲ

ਮਿਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਇੱਕ ਖਾਰੀ (ਧਨਾਯਨੀ) ਰੰਗਕ ਹੈ। ਇਸ ਦਾ ਰੰਗਦਾਰ ਆਇਨ ਧਨਾਤਮਕ ਚਾਰਜ ਰੱਖਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਕੋਸ਼ਿਕਾ ਦੀਆਂ ਰਿਣਾਤਮਕ ਚਾਰਜ ਵਾਲੀਆਂ ਬਣਤਰਾਂ ਨਾਲ ਜੁੜਦਾ ਹੈ, ਜਿਨ੍ਹਾਂ ਵਿੱਚ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਅਤੇ ਸਤਹ ਦੇ ਤੇਜ਼ਾਬੀ ਸਮੂਹ ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ। ਇਸ ਲਈ ਹਲਕੇ ਪਿਛੋਕੜ ਦੇ ਸਾਹਮਣੇ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਨੀਲੀਆਂ ਦਿਖਾਈ ਦਿੰਦੀਆਂ ਹਨ। OpenStax ਆਪਣੇ ਰੰਗਾਈ ਵਾਲੇ ਅਧਿਆਇ ਵਿੱਚ ਪਾਜ਼ਿਟਿਵ ਰੰਗਾਈ ਦੇ ਇਸ ਸਿਧਾਂਤ ਦਾ ਵਰਣਨ ਕਰਦਾ ਹੈ। ਰੰਗਕ ਦਾ ਧਨਾਯਨ ਖੁਦ ਇੱਕ ਛੋਟਾ, ਚਪਟਾ ਫੀਨੋਥਿਆਜ਼ੀਨ ਆਇਨ ਹੈ, ਜਿਸ ਦਾ ਵੇਰਵਾ ਮਿਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਦੇ ਰਸਾਇਣਕ ਹਵਾਲੇ ਵਿੱਚ ਦਿੱਤਾ ਗਿਆ ਹੈ; ਕਲੋਰਾਈਡ ਪ੍ਰਤੀਆਇਨ ਰੰਗ ਨਹੀਂ ਦਿੰਦਾ।

ਪੜ੍ਹਾਉਣ ਲਈ ਵਰਤਿਆ ਜਾਣ ਵਾਲਾ ਮਿਆਰੀ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ ਜਾਣ-ਬੁੱਝ ਕੇ ਸਾਦਾ ਰੱਖਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ: ਪਤਲਾ ਸਮੀਅਰ ਬਣਾਓ, ਹਵਾ ਵਿੱਚ ਸੁਕਾਓ, ਗਰਮੀ ਨਾਲ ਸਥਿਰ ਕਰੋ, ਲਗਭਗ 1% ਜਲੀ ਮਿਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਘੋਲ ਨਾਲ ਤਕਰੀਬਨ ਇੱਕ ਮਿੰਟ ਲਈ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਢੱਕੋ, ਪਾਣੀ ਨਾਲ ਹੌਲੀ ਜਿਹੀ ਧੋਵੋ, ਸੋਖ ਕੇ ਸੁਕਾਓ ਅਤੇ ਤੇਲ-ਇਮਰਸ਼ਨ ਨਾਲ ਜਾਂਚੋ। LibreTexts ਦਾ ਇੱਕ ਅਧਿਆਪਨ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ ਬਿਲਕੁਲ ਇਹੀ 1% ਅਤੇ ਇੱਕ ਮਿੰਟ ਵਾਲੀ ਵਿਧੀ ਦਿੰਦਾ ਹੈ, ਨਾਲ ਹੀ ਇਹ ਵੀ ਦੱਸਦਾ ਹੈ ਕਿ ਕੁਝ ਲੈਬਾਂ ਸਮਾਂ ਵਧਾਉਂਦੀਆਂ ਹਨ। ਨਾ ਕੋਈ ਰੰਗ-ਬੰਧਕ, ਨਾ ਰੰਗ ਹਟਾਉਣ ਵਾਲਾ ਅਭਿਕਾਰਕ, ਨਾ ਦੂਜਾ ਰੰਗਕ। ਇਨ੍ਹਾਂ ਦਾ ਨਾ ਹੋਣਾ ਹੀ ਮੁੱਖ ਗੱਲ ਹੈ। ਸਿਰਫ਼ ਇੱਕ ਰੰਗਕ ਅਤੇ ਚੋਣਵੇਂ ਢੰਗ ਨਾਲ ਰੰਗ ਹਟਾਉਣ ਦਾ ਕੋਈ ਪੜਾਅ ਨਾ ਹੋਣ ਕਰਕੇ, ਰੰਗਕ ਨਾਲ ਜੁੜਨ ਵਾਲੀ ਹਰ ਕੋਸ਼ਿਕਾ ਅੰਤ ਵਿੱਚ ਇੱਕੋ ਰੰਗ ਦੀ ਹੁੰਦੀ ਹੈ।

E. coli ਲਈ ਉਮੀਦ ਕੀਤਾ ਜਾਣ ਵਾਲਾ ਦ੍ਰਿਸ਼-ਖੇਤਰ ਨੀਲੀਆਂ ਡੰਡਾਕਾਰ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ (ਬੈਸਿਲਾਈ) ਦਾ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਜੋ ਇਕੱਲੀਆਂ, ਜੋੜਿਆਂ ਵਿੱਚ ਜਾਂ ਛੋਟੇ ਸਮੂਹਾਂ ਵਿੱਚ ਹੋ ਸਕਦੀਆਂ ਹਨ। ਨੀਲਾ ਰੰਗ ਰੰਗਕ ਤੋਂ ਆਉਂਦਾ ਹੈ। ਡੰਡਾਕਾਰ ਆਕਾਰ ਜੀਵ ਦਾ ਆਪਣਾ ਹੁੰਦਾ ਹੈ। ਪਰ ਇਹ ਮਿਲਾਪ ਜੀਵ ਦੀ ਪਛਾਣ ਨਹੀਂ ਕਰਦਾ, ਕਿਉਂਕਿ ਕਈ ਪ੍ਰਜਾਤੀਆਂ ਡੰਡਾਕਾਰ ਹੁੰਦੀਆਂ ਹਨ ਅਤੇ ਕਈ ਡੰਡਾਕਾਰ ਜੀਵ ਸਧਾਰਨ ਰੰਗਾਈ ਵਿੱਚ ਨੀਲੇ ਹੋ ਜਾਂਦੇ ਹਨ। ATCC ਆਪਣੀ ਸੂਖਮਜੀਵ-ਵਿਗਿਆਨ ਕਲਚਰ ਗਾਈਡ ਵਿੱਚ ਸਿਰਫ਼ ਆਕਾਰ-ਰਚਨਾ ਤੱਕ ਸੀਮਿਤ ਹੋਣ ਦੀ ਇਹ ਹੱਦ ਸਪਸ਼ਟ ਕਰਦਾ ਹੈ। ਸਹੀ ਰਿਪੋਰਟ ਵਿੱਚ ਲਿਖਿਆ ਹੋਵੇਗਾ: "ਨੀਲੇ ਬੈਸਿਲਾਈ ਦੇਖੇ ਗਏ।" ਆਕਾਰ ਅਤੇ ਵਿਵਸਥਾ ਤੋਂ ਅੱਗੇ ਕਿਸੇ ਵੀ ਦਾਅਵੇ ਲਈ ਹੋਰ ਸਬੂਤ ਚਾਹੀਦੇ ਹਨ।

ਗ੍ਰਾਮ ਰੰਗਾਈ: ਚਾਰ ਅਭਿਕਾਰਕ, ਵਿਹਾਰ ਦਾ ਇੱਕ ਟੈਸਟ

ਗ੍ਰਾਮ ਰੰਗਾਈ ਇੱਕ ਭੇਦਕ ਰੰਗਾਈ ਹੈ। ਇਹ ਸਾਰੀਆਂ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਉੱਤੇ ਇੱਕੋ ਕ੍ਰਮ ਲਾਗੂ ਕਰਦੀ ਹੈ ਅਤੇ ਵੇਖਦੀ ਹੈ ਕਿ ਕਿਹੜੀਆਂ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਪਹਿਲਾ ਰੰਗਕ ਰੋਕ ਕੇ ਰੱਖਦੀਆਂ ਹਨ ਅਤੇ ਕਿਹੜੀਆਂ ਉਸ ਨੂੰ ਗੁਆ ਦਿੰਦੀਆਂ ਹਨ। American Society for Microbiology ਦੇ ਗ੍ਰਾਮ ਰੰਗਾਈ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ ਮਿਆਰੀ ਚਾਰ-ਪੜਾਵੀ ਕ੍ਰਮ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰਦੇ ਹਨ: ਕ੍ਰਿਸਟਲ ਵਾਇਲਟ (ਮੁੱਖ ਰੰਗਕ), ਗ੍ਰਾਮ ਆਇਓਡੀਨ (ਰੰਗ-ਬੰਧਕ), ਅਲਕੋਹਲ ਜਾਂ ਐਸੀਟੋਨ-ਅਲਕੋਹਲ (ਰੰਗ ਹਟਾਉਣ ਵਾਲਾ ਅਭਿਕਾਰਕ), ਫਿਰ ਸੈਫਰੈਨਿਨ (ਪ੍ਰਤਿਰੰਗਕ)।

ਮਿਆਰੀ ਅਧਿਆਪਨ ਮਾਡਲ ਕੋਸ਼ਿਕਾ-ਆਵਰਨ ਦੀ ਬਣਤਰ ਰਾਹੀਂ ਇਸ ਵੰਡ ਨੂੰ ਸਮਝਾਉਂਦਾ ਹੈ। ਗ੍ਰਾਮ-ਪਾਜ਼ਿਟਿਵ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਦੀ ਪੈਪਟੀਡੋਗਲਾਈਕੈਨ ਭਿੱਤ ਮੋਟੀ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਜੋ ਅਲਕੋਹਲ ਨਾਲ ਧੋਣ ਦੌਰਾਨ ਪਾਣੀ ਗੁਆ ਕੇ ਕ੍ਰਿਸਟਲ ਵਾਇਲਟ-ਆਇਓਡੀਨ ਕੰਪਲੈਕਸ ਨੂੰ ਰੋਕ ਕੇ ਰੱਖਦੀ ਹੈ। ਗ੍ਰਾਮ-ਨੈਗੇਟਿਵ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਵਿੱਚ ਪੈਪਟੀਡੋਗਲਾਈਕੈਨ ਦੀ ਪਤਲੀ ਪਰਤ ਦੇ ਨਾਲ ਲਿਪਿਡਾਂ ਨਾਲ ਭਰਪੂਰ ਬਾਹਰੀ ਝਿੱਲੀ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਜਿਸ ਨੂੰ ਰੰਗ ਹਟਾਉਣ ਵਾਲਾ ਅਭਿਕਾਰਕ ਭੰਗ ਕਰ ਦਿੰਦਾ ਹੈ। ਇਸ ਲਈ ਕੰਪਲੈਕਸ ਧੁਲ ਕੇ ਨਿਕਲ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਫਿਰ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਸੈਫਰੈਨਿਨ ਲੈ ਲੈਂਦੀਆਂ ਹਨ। NCBI Bookshelf ਦੀ ਗ੍ਰਾਮ ਰੰਗਾਈ ਸਮੀਖਿਆ ਕੋਸ਼ਿਕਾ-ਭਿੱਤ ਉੱਤੇ ਆਧਾਰਿਤ ਇਹ ਵਿਆਖਿਆ ਦਿੰਦੀ ਹੈ। ਮਾਹਿਰ ਇਹ ਵੀ ਦੱਸਦੇ ਹਨ ਕਿ ਪੂਰੀ ਭੌਤਿਕ-ਰਸਾਇਣਕ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਸਿਰਫ਼ ਭਿੱਤ ਦੀ ਮੋਟਾਈ ਨਾਲੋਂ ਵੱਧ ਜਟਿਲ ਹੈ, ਪਰ ਲੈਬ ਬੈਂਚ ਉੱਤੇ ਨਤੀਜੇ ਦੀ ਵਿਆਖਿਆ ਲਈ ਵਿਹਾਰ ਦਾ ਨਿਯਮ ਲਾਗੂ ਰਹਿੰਦਾ ਹੈ: ਜਾਮਨੀ ਦਾ ਮਤਲਬ ਰੰਗ ਰੋਕ ਕੇ ਰੱਖਿਆ ਗਿਆ, ਗੁਲਾਬੀ ਦਾ ਮਤਲਬ ਪਹਿਲਾ ਰੰਗ ਗੁਆਇਆ ਅਤੇ ਫਿਰ ਪ੍ਰਤਿਰੰਗਕ ਨਾਲ ਰੰਗਿਆ ਗਿਆ।

ਵਿਆਖਿਆਤਮਕ ਪੈਨਲ। ਵਿਧੀਆਂ ਦੀ ਤੁਲਨਾ ਲਈ ਸ਼ੈਲੀਬੱਧ ਚਿੱਤਰ, ਕੈਮਰੇ ਨਾਲ ਲਏ ਮਾਈਕ੍ਰੋਗ੍ਰਾਫ ਨਹੀਂ। ਤਰਕ ਸਮਝਾਉਣ ਲਈ ਰੰਗ ਸਾਦੇ ਰੱਖੇ ਗਏ ਹਨ: ਸਧਾਰਨ ਰੰਗਾਈ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਰੰਗ, ਗ੍ਰਾਮ ਵਿਧੀ ਦੇ ਰੰਗ ਹਟਾਉਣ ਵਾਲੇ ਪੜਾਅ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਦੋ ਰੰਗ।

ਕੀ ਮਿਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਨੂੰ ਗ੍ਰਾਮ ਰੰਗਾਈ ਵਿੱਚ ਵਰਤਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ

ਇਸ ਸਵਾਲ ਦੇ ਦੋ ਅਰਥ ਹੋ ਸਕਦੇ ਹਨ, ਅਤੇ ਦੋਹਾਂ ਦੇ ਜਵਾਬ ਵੱਖਰੇ ਹਨ।

ਪਹਿਲਾ ਅਰਥ: ਕੀ ਮਿਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਨਾਲ ਇੱਕ ਵਾਰ ਢੱਕਣਾ ਪੂਰੇ ਗ੍ਰਾਮ ਕ੍ਰਮ ਦੀ ਥਾਂ ਲੈ ਸਕਦਾ ਹੈ। ਨਹੀਂ। ਆਇਓਡੀਨ, ਰੰਗ ਹਟਾਉਣ ਵਾਲੇ ਅਭਿਕਾਰਕ ਅਤੇ ਪ੍ਰਤਿਰੰਗਕ ਤੋਂ ਬਿਨਾਂ ਕੋਈ ਭੇਦਕ ਪੜਾਅ ਨਹੀਂ ਹੁੰਦਾ, ਇਸ ਲਈ ਕਿਸੇ ਗ੍ਰਾਮ ਸ਼੍ਰੇਣੀ ਦੀ ਜਾਂਚ ਨਹੀਂ ਹੁੰਦੀ। ਸਿਰਫ਼ ਮਿਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਨੀਲਾ ਦ੍ਰਿਸ਼-ਖੇਤਰ ਸਧਾਰਨ ਰੰਗਾਈ ਦਾ ਨਤੀਜਾ ਹੈ, ਭਾਵੇਂ ਬੋਤਲ ਗ੍ਰਾਮ ਅਭਿਕਾਰਕਾਂ ਦੇ ਕੋਲ ਹੀ ਪਈ ਹੋਵੇ। ਇਸ ਨੂੰ ਗ੍ਰਾਮ ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਦਰਜ ਨਾ ਕਰੋ।

ਦੂਜਾ ਅਰਥ: ਕੀ ਮਿਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਪੜਾਅ 4 ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਤਿਰੰਗਕ ਵਜੋਂ ਸੈਫਰੈਨਿਨ ਦੀ ਥਾਂ ਲੈ ਸਕਦਾ ਹੈ। ਕੰਮ ਦੇ ਪੱਖੋਂ ਇਹ ਰੰਗਹੀਣ ਕੀਤੀਆਂ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਨੂੰ ਰੰਗ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਪਾਠ-ਪੁਸਤਕ ਦੀ ਇੱਕ ਅਭਿਆਸ ਗਤੀਵਿਧੀ ਅਨੁਸਾਰ ਅਜਿਹੀ ਤਬਦੀਲੀ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਗ੍ਰਾਮ-ਪਾਜ਼ਿਟਿਵ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਜਾਮਨੀ ਅਤੇ ਗ੍ਰਾਮ-ਨੈਗੇਟਿਵ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਨੀਲੀਆਂ ਹੋਣ ਦੀ ਉਮੀਦ ਹੈ। ਤਰਕ ਸਹੀ ਹੈ, ਕਿਉਂਕਿ ਠੀਕ ਤਰ੍ਹਾਂ ਰੰਗ ਹਟਾਈਆਂ ਗ੍ਰਾਮ-ਨੈਗੇਟਿਵ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਲਗਭਗ ਰੰਗਹੀਣ ਹੁੰਦੀਆਂ ਹਨ ਅਤੇ ਕੋਈ ਹੋਰ ਧਨਾਯਨੀ ਰੰਗਕ ਲੈ ਲੈਣਗੀਆਂ। ਪਰ ਇਹ ਮਿਆਰੀ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ ਨਹੀਂ ਹੈ। ASM ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ ਸੈਫਰੈਨਿਨ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰਦੇ ਹਨ, ਅਤੇ ਕੁਝ ਰੂਪਾਂ ਵਿੱਚ ਬੇਸਿਕ ਫਿਊਕਸਿਨ ਵਰਗੇ ਮੰਨੇ-ਪ੍ਰਮੰਨੇ ਵਿਕਲਪ ਵੀ ਹਨ, ਪਰ ਮਿਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਨਹੀਂ। ਇੱਕ ਵਿਹਾਰਕ ਨੁਕਸਾਨ ਵੀ ਹੈ: ਜਾਮਨੀ ਦੇ ਨਾਲ ਨੀਲੇ ਨੂੰ ਪਛਾਣਨਾ, ਜਾਮਨੀ ਦੇ ਨਾਲ ਗੁਲਾਬੀ ਨੂੰ ਪਛਾਣਨ ਨਾਲੋਂ ਔਖਾ ਹੈ, ਖ਼ਾਸ ਕਰਕੇ ਨਵੇਂ ਸਿੱਖਣ ਵਾਲਿਆਂ ਲਈ ਅਤੇ ਖ਼ਾਸ ਕਰਕੇ ਮੱਧਮ ਪੈ ਚੁੱਕੀਆਂ ਮਾਈਕ੍ਰੋਸਕੋਪ ਲੈਂਪਾਂ ਹੇਠ। ਪਾਠਕ੍ਰਮ ਦੇ ਕੰਮ ਅਤੇ ਕਿਸੇ ਵੀ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਨਤੀਜੇ ਲਈ ਆਪਣੇ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ ਵਿੱਚ ਦੱਸਿਆ ਪ੍ਰਤਿਰੰਗਕ ਵਰਤੋ, ਜੋ ਆਮ ਤੌਰ ਉੱਤੇ ਸੈਫਰੈਨਿਨ ਹੁੰਦਾ ਹੈ। ਮਿਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਪ੍ਰਤਿਰੰਗਕ ਨੂੰ ਬਰਾਬਰ ਦੇ ਮਿਆਰੀ ਵਿਕਲਪ ਦੀ ਥਾਂ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਲਈ ਵਰਤਿਆ ਜਾਣ ਵਾਲਾ ਰੂਪ ਸਮਝੋ।

ਮਿਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਹੋਰ ਇੱਕ-ਰੰਗਕ ਵਾਲੇ ਵਿਕਲਪਾਂ ਨਾਲ ਕਿਵੇਂ ਤੁਲਨਾ ਕਰਦਾ ਹੈ, ਇਸ ਸੰਬੰਧਿਤ ਸਵਾਲ ਨੂੰ ਬੈਕਟੀਰੀਆ ਦੀਆਂ ਸਧਾਰਨ ਰੰਗਾਈਆਂ ਦੀ ਤੁਲਨਾ ਵਿੱਚ ਸਮਝਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ।

E. coli ਦੀ ਮਿਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਰੰਗਾਈ ਕੀ ਸਾਬਤ ਕਰਦੀ ਹੈ ਅਤੇ ਕੀ ਨਹੀਂ

E. coli ਇੱਕ ਗ੍ਰਾਮ-ਨੈਗੇਟਿਵ ਡੰਡਾਕਾਰ ਬੈਕਟੀਰੀਆ ਹੈ, ਪਰ ਇਸ ਵਾਕ ਵਿੱਚ ਕਈ ਵਿਧੀਆਂ ਤੋਂ ਮਿਲੇ ਤੱਥ ਇਕੱਠੇ ਹਨ: ਆਕਾਰ-ਰਚਨਾ ਮਾਈਕ੍ਰੋਸਕੋਪੀ ਤੋਂ, ਗ੍ਰਾਮ ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆ ਗ੍ਰਾਮ ਰੰਗਾਈ ਤੋਂ, ਅਤੇ ਪਛਾਣ ਕਲਚਰ ਦੇ ਨਾਲ ਜੈਵ-ਰਸਾਇਣਕ ਜਾਂ ਅਣੂ-ਪੱਧਰੀ ਟੈਸਟਾਂ ਤੋਂ। ਮਿਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਨਾਲ ਰੰਗਿਆ ਸਮੀਅਰ ਸਿਰਫ਼ ਪਹਿਲੇ ਹਿੱਸੇ ਵਿੱਚ ਯੋਗਦਾਨ ਪਾਉਂਦਾ ਹੈ। ਇਹ ਸਾਬਤ ਕਰਦਾ ਹੈ ਕਿ ਰੰਗੇ ਹੋਏ ਨਮੂਨੇ ਵਿੱਚ ਡੰਡਾਕਾਰ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਮੌਜੂਦ ਹਨ ਅਤੇ ਉਹ ਕਿਵੇਂ ਵਿਵਸਥਿਤ ਹਨ। ਇਹ ਗ੍ਰਾਮ ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆ ਸਾਬਤ ਨਹੀਂ ਕਰਦਾ, ਕਿਉਂਕਿ ਰੰਗ ਹਟਾਉਣ ਵਾਲੀ ਪਰਖ ਨਹੀਂ ਕੀਤੀ ਗਈ। ਇਹ ਪ੍ਰਜਾਤੀ ਦੀ ਪਛਾਣ ਵੀ ਨਹੀਂ ਕਰਦਾ, ਕਿਉਂਕਿ ਇਸ ਵਿਭੇਦਨ ਸਮਰੱਥਾ ਉੱਤੇ ਕਈ ਪ੍ਰਜਾਤੀਆਂ ਦੀਆਂ ਡੰਡਾਕਾਰ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਇੱਕੋ ਜਿਹੀਆਂ ਦਿਖਾਈ ਦਿੰਦੀਆਂ ਹਨ।

ਇੱਥੇ ਰਿਪੋਰਟਾਂ ਅਕਸਰ ਇੱਕ ਅਨੁਮਾਨਯੋਗ ਢੰਗ ਨਾਲ ਗਲਤ ਹੋ ਜਾਂਦੀਆਂ ਹਨ। ਲਿਖਣ ਵਾਲਾ ਪਿਛੋਕੜ ਦੀ ਜਾਣਕਾਰੀ ("ਇਹ ਕਲਚਰ E. coli ਹੋਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ E. coli ਗ੍ਰਾਮ-ਨੈਗੇਟਿਵ ਹੈ") ਨੂੰ ਨਿਰੀਖਣ ਵਾਲੀ ਲਾਈਨ ਵਿੱਚ ਲਿਆ ਦਿੰਦਾ ਹੈ। ਇਸ ਨਾਲ ਲੱਗਦਾ ਹੈ ਕਿ ਸਲਾਈਡ ਨੇ ਉਸ ਗੱਲ ਦੀ ਪੁਸ਼ਟੀ ਕੀਤੀ ਹੈ ਜੋ ਅਸਲ ਵਿੱਚ ਮੰਨ ਲਈ ਗਈ ਸੀ। ਵਧੇਰੇ ਸਪਸ਼ਟ ਰਿਪੋਰਟ ਇਨ੍ਹਾਂ ਪੱਧਰਾਂ ਨੂੰ ਵੱਖ ਰੱਖਦੀ ਹੈ: "ਮਿਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਨਾਲ ਸਧਾਰਨ ਰੰਗਾਈ: ਨੀਲੇ ਬੈਸਿਲਾਈ ਦੇਖੇ ਗਏ; ਸਿਰਫ਼ ਆਕਾਰ-ਰਚਨਾ, ਕਿਸੇ ਗ੍ਰਾਮ ਸ਼੍ਰੇਣੀ ਦੀ ਜਾਂਚ ਨਹੀਂ ਕੀਤੀ ਗਈ।" ਫਿਰ, ਜੇ ਕੰਟਰੋਲਾਂ ਨਾਲ ਗ੍ਰਾਮ ਰੰਗਾਈ ਸਹੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ: "ਗ੍ਰਾਮ ਰੰਗਾਈ: ਗੁਲਾਬੀ ਡੰਡਾਕਾਰ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ, ਗ੍ਰਾਮ-ਨੈਗੇਟਿਵ ਨਾਲ ਮੇਲ ਖਾਂਦੀਆਂ ਹਨ।" ਪ੍ਰਜਾਤੀ ਦੀ ਪਛਾਣ ਬਾਅਦ ਵਿੱਚ ਪਛਾਣ ਦੀ ਕਾਰਜ-ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਤੋਂ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਸਿਰਫ਼ ਰੰਗ ਤੋਂ ਨਹੀਂ।

ਵਿਆਖਿਆ ਲਈ ਇੱਕ ਵਿਹਾਰਕ ਮਾਰਗਦਰਸ਼ਕ

ਲੈਬ ਬੈਂਚ ਉੱਤੇ ਫ਼ੈਸਲੇ ਦਾ ਇਹ ਨਿਯਮ ਵਰਤੋ। ਜੇ ਸਾਰੀਆਂ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਇੱਕੋ ਰੰਗ ਦੀਆਂ ਹਨ ਅਤੇ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ ਵਿੱਚ ਰੰਗ ਹਟਾਉਣ ਵਾਲੇ ਅਭਿਕਾਰਕ ਤੋਂ ਬਿਨਾਂ ਇੱਕ ਰੰਗਕ ਵਰਤਿਆ ਗਿਆ ਸੀ, ਤਾਂ ਤੁਸੀਂ ਸਧਾਰਨ ਰੰਗਾਈ ਕੀਤੀ ਹੈ। ਆਕਾਰ, ਆਕਾਰ ਦੇ ਮਾਪ ਦਾ ਅੰਦਾਜ਼ਾ ਅਤੇ ਵਿਵਸਥਾ ਦਰਜ ਕਰੋ। ਇੱਥੇ ਹੀ ਰੁਕੋ। ਜੇ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ ਵਿੱਚ ਜਾਣੇ-ਪਛਾਣੇ ਪਾਜ਼ਿਟਿਵ ਅਤੇ ਨੈਗੇਟਿਵ ਕੰਟਰੋਲਾਂ ਦੇ ਨਾਲ ਕ੍ਰਿਸਟਲ ਵਾਇਲਟ, ਆਇਓਡੀਨ, ਰੰਗ ਹਟਾਉਣ ਵਾਲਾ ਅਭਿਕਾਰਕ ਅਤੇ ਪ੍ਰਤਿਰੰਗਕ ਵਰਤੇ ਗਏ ਸਨ, ਤਾਂ ਤੁਸੀਂ ਗ੍ਰਾਮ ਰੰਗਾਈ ਕੀਤੀ ਹੈ। ਰੰਗ ਦੇ ਨਾਲ ਆਕਾਰ-ਰਚਨਾ ਦਰਜ ਕਰੋ: ਲੜੀਆਂ ਵਿੱਚ ਜਾਮਨੀ ਗੋਲਾਕਾਰ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ, ਗੁਲਾਬੀ ਡੰਡਾਕਾਰ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਆਦਿ।

ਜ਼ਿਆਦਾਤਰ ਉਲਝਣ ਤਿੰਨ ਗਲਤੀਆਂ ਕਾਰਨ ਹੁੰਦੀ ਹੈ। ਪਹਿਲੀ, ਨੀਲੀਆਂ ਡੰਡਾਕਾਰ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਨੂੰ E. coli ਦੀ ਪੁਸ਼ਟੀ ਮੰਨ ਕੇ ਨਤੀਜੇ ਤੋਂ ਵੱਧ ਅਰਥ ਕੱਢਣਾ। ਦੂਜੀ, ਨੋਟਬੁੱਕ ਵਿੱਚ ਮਿਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਸਲਾਈਡ ਨੂੰ "ਗ੍ਰਾਮ ਰੰਗਾਈ" ਸਿਰਲੇਖ ਹੇਠ ਦਰਜ ਕਰਨਾ, ਜਿਸ ਨੂੰ ਬਾਅਦ ਦੇ ਪਾਠਕ ਗਲਤ ਸਮਝਣਗੇ। ਤੀਜੀ, ਬਿਨਾਂ ਸੋਚੇ ਪ੍ਰਤਿਰੰਗਕ ਬਦਲਣਾ ਅਤੇ ਫਿਰ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਲੈਬਾਂ ਦੇ ਰੰਗਾਂ ਦੀ ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ ਤੁਲਨਾ ਕਰਨਾ ਜਿਵੇਂ ਵਰਤੇ ਰੰਗ ਇੱਕੋ ਹੋਣ। ਹਰ ਗਲਤੀ ਦਾ ਹੱਲ ਇੱਕੋ ਹੈ: ਅਸਲ ਵਿੱਚ ਕੀਤੀ ਗਈ ਵਿਧੀ ਦਾ ਨਾਮ ਦਿਓ ਅਤੇ ਸਿਰਫ਼ ਉਸੇ ਗੱਲ ਦਾ ਦਾਅਵਾ ਕਰੋ ਜਿਸ ਦੀ ਉਹ ਵਿਧੀ ਜਾਂਚ ਕਰਦੀ ਹੈ।

ਸਧਾਰਨ ਰੰਗਾਈ ਆਪਣੀ ਥਾਂ ਇਸੇ ਕਰਕੇ ਬਣਾਉਂਦੀ ਹੈ ਕਿ ਇਹ ਸੀਮਿਤ ਦਾਅਵਾ ਕਰਦੀ ਹੈ। ਇਹ ਤੇਜ਼ ਹੈ, ਛੋਟੀਆਂ ਤਕਨੀਕੀ ਗਲਤੀਆਂ ਨੂੰ ਸਹਿ ਲੈਂਦੀ ਹੈ ਅਤੇ ਉਸ ਵੇਲੇ ਕਾਫ਼ੀ ਹੈ ਜਦੋਂ ਸਵਾਲ ਆਕਾਰ-ਰਚਨਾ ਦਾ ਹੋਵੇ: ਕੀ ਉੱਥੇ ਕੁਝ ਮੌਜੂਦ ਹੈ, ਅਤੇ ਉਸ ਦਾ ਆਕਾਰ ਕੀ ਹੈ। ਜਦੋਂ ਸਵਾਲ ਵਰਗੀਕਰਨ ਦਾ ਹੋਵੇ, ਤਾਂ ਭੇਦਕ ਟੈਸਟ ਕਰੋ। ਨੀਲੀ ਸਲਾਈਡ ਦੱਸਦੀ ਹੈ ਕਿ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਕਿਹੋ ਜਿਹੀਆਂ ਦਿਖਦੀਆਂ ਹਨ। ਜਾਮਨੀ ਜਾਂ ਗੁਲਾਬੀ ਸਲਾਈਡ ਦੱਸਦੀ ਹੈ ਕਿ ਉਨ੍ਹਾਂ ਦੀਆਂ ਭਿੱਤਾਂ ਕਿਵੇਂ ਵਿਹਾਰ ਕਰਦੀਆਂ ਹਨ। ਇਕੱਲੀ ਕੋਈ ਵੀ ਸਲਾਈਡ ਪ੍ਰਜਾਤੀ ਨਹੀਂ ਦੱਸਦੀ।