ਲੋਫ਼ਲਰ ਦੇ ਖਾਰੀ ਅਤੇ ਪੌਲੀਕ੍ਰੋਮ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਰੰਗਕਾਂ ਦੀ ਵਿਆਖਿਆ

ਰੰਗਾਈ ਵਾਲੇ ਮੇਜ਼ ਉੱਤੇ ਤਿੰਨ ਬੋਤਲਾਂ ਨਾਲੋ-ਨਾਲ ਪਈਆਂ ਹੋ ਸਕਦੀਆਂ ਹਨ, ਅਤੇ ਹਰੇਕ ਉੱਤੇ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਦੇ ਕਿਸੇ ਰੂਪ ਦਾ ਲੇਬਲ ਲੱਗਿਆ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ। ਇੱਕ ਉੱਤੇ ਜਲੀ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ 1% ਲਿਖਿਆ ਹੈ। ਇੱਕ ਉੱਤੇ ਲੋਫ਼ਲਰ ਦਾ ਖਾਰੀ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਲਿਖਿਆ ਹੈ। ਇੱਕ ਉੱਤੇ ਪੌਲੀਕ੍ਰੋਮ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਲਿਖਿਆ ਹੈ। ਰੁੱਝਿਆ ਹੋਇਆ ਕਰਮਚਾਰੀ ਸਭ ਤੋਂ ਨੇੜੇ ਪਈ ਬੋਤਲ ਚੁੱਕ ਲੈਂਦਾ ਹੈ। ਫਿਰ ਸਮੀਅਰ ਦਾ ਰੰਗ ਬਹੁਤ ਫਿੱਕਾ, ਜਾਂ ਹਰ ਥਾਂ ਇਕਸਾਰ ਨੀਲਾ, ਜਾਂ ਬੈਂਗਣੀ ਦੀਆਂ ਅਣਉਮੀਦੀਆਂ ਛਾਵਾਂ ਵਿੱਚ ਆਉਂਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਇਸ ਨਤੀਜੇ ਲਈ ਨਮੂਨੇ ਨੂੰ ਦੋਸ਼ ਦਿੱਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।

ਇਹ ਸੰਯੋਜਨ ਦੀ ਸਮੱਸਿਆ ਹੈ, ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਨਹੀਂ। ਤਿੰਨਾਂ ਘੋਲਾਂ ਵਿੱਚ ਆਪਸ ਵਿੱਚ ਸੰਬੰਧਿਤ ਰੰਜਕ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਪਰ ਉਨ੍ਹਾਂ ਦੀ ਰੰਗਾਈ ਦੇ ਸਿਧਾਂਤ ਵੱਖਰੇ ਹਨ। ਇੱਕ ਲਗਭਗ ਨਿਰਪੱਖ pH ਉੱਤੇ ਸਾਦਾ ਧਨ-ਆਇਨੀ ਰੰਜਕ ਹੈ। ਇੱਕ ਉਹੀ ਰੰਜਕ ਹੈ ਜਿਸ ਨੂੰ ਖਾਰ ਨਾਲ ਹੋਰ ਤੀਬਰ ਬਣਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ। ਇੱਕ ਹੁਣ ਇਕੱਲਾ ਰੰਜਕ ਰਿਹਾ ਹੀ ਨਹੀਂ, ਸਗੋਂ ਜਾਣਬੁੱਝ ਕੇ ਆਕਸੀਕ੍ਰਿਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਮਿਸ਼ਰਣ ਹੈ। ਗ਼ਲਤ ਘੋਲ ਵਰਤਣ ਨਾਲ ਤੁਹਾਡੇ ਹੱਥਾਂ ਹੇਠ ਰੰਗਾਈ ਦਾ ਸਿਧਾਂਤ ਹੀ ਬਦਲ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।

ਸੰਖੇਪ ਜਵਾਬ

ਸਾਦਾ ਜਲੀ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਮੁੱਢਲਾ ਮਿਆਰ ਹੈ: ਪਾਣੀ ਵਿੱਚ ਲਗਭਗ 1% ਰੰਜਕ, ਜੋ ਬੈਕਟੀਰੀਆ ਦੀ ਆਕ੍ਰਿਤੀ ਅਤੇ ਆਮ ਸੂਖਮਦਰਸ਼ੀ ਅਧਿਐਨ ਲਈ ਇੱਕ ਸਧਾਰਨ ਧਨ-ਆਇਨੀ ਰੰਗਕ ਹੈ। ਲੋਫ਼ਲਰ ਦੇ ਖਾਰੀ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਵਿੱਚ ਪਾਣੀ ਨਾਲ ਪਤਲੇ ਕੀਤੇ ਅਲਕੋਹਲੀ ਸਟਾਕ ਘੋਲ ਵਿੱਚ ਪਤਲੇ ਖਾਰ ਦੀ ਥੋੜ੍ਹੀ, ਮਾਪੀ ਹੋਈ ਮਾਤਰਾ ਮਿਲਾਈ ਜਾਂਦੀ ਹੈ। ਇਸ ਨਾਲ pH ਵਧਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਧਨ-ਆਇਨੀ ਰੰਜਕ ਬੈਕਟੀਰੀਆ ਦੀਆਂ ਅਮਲੀ ਸੰਰਚਨਾਵਾਂ ਨਾਲ ਹੋਰ ਮਜ਼ਬੂਤੀ ਨਾਲ ਜੁੜਦਾ ਹੈ। ਪੌਲੀਕ੍ਰੋਮ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਉਹ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਹੈ ਜਿਸ ਨੂੰ ਖਾਰ ਵਿੱਚ ਆਕਸੀਕਰਨ ਰਾਹੀਂ ਜਾਣਬੁੱਝ ਕੇ ਪਰਿਪੱਕ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੋਵੇ। ਇਸ ਲਈ ਬੋਤਲ ਵਿੱਚ ਬਚੇ ਹੋਏ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਦੇ ਨਾਲ ਡੀਮੈਥੀਲੇਟ ਕੀਤੇ ਸਮਜਾਤੀ ਯੋਗਿਕਾਂ (azure A, azure B, azure C), ਥਾਇਓਨਿਨ ਅਤੇ ਮੈਥੀਲੀਨ ਵਾਇਲਟ ਦਾ ਮਿਸ਼ਰਣ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਇਹ ਮਿਸ਼ਰਣ ਵੱਖਰੀਆਂ ਸੰਰਚਨਾਵਾਂ ਨੂੰ ਵੱਖਰੇ ਰੰਗਾਂ ਵਿੱਚ ਰੰਗਦਾ ਹੈ।

ਜੇ ਸਿਰਫ਼ ਇੱਕ ਵਾਕ ਯਾਦ ਰੱਖਣਾ ਹੋਵੇ: ਖਾਰੀਕਰਨ ਰੰਗਾਈ ਦੀ ਤੀਬਰਤਾ ਬਦਲਦਾ ਹੈ, ਜਦਕਿ ਪੌਲੀਕ੍ਰੋਮਿੰਗ ਰੰਗਾਈ ਦੇ ਰੰਗ ਬਦਲਦੀ ਹੈ।

ਆਮ ਜਲੀ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ: ਤੁਲਨਾ ਦਾ ਮੁੱਢਲਾ ਆਧਾਰ

ਸਭ ਤੋਂ ਸਧਾਰਨ ਸੰਯੋਜਨ ਪਾਣੀ ਵਿੱਚ ਘੋਲਿਆ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਹੈ, ਆਮ ਤੌਰ ਉੱਤੇ 1% w/v, ਬਿਨਾਂ ਖਾਰ ਅਤੇ ਬਿਨਾਂ ਆਕਸੀਕਰਨ ਦੇ। ਰੰਗ ਵਾਲਾ ਰਸਾਇਣਕ ਰੂਪ ਮੈਥੀਲਥਾਇਓਨਿਨੀਅਮ ਧਨ-ਆਇਨ ਹੈ, ਜਿਸ ਦੇ ਨਾਲ ਕਲੋਰਾਈਡ ਵਿਰੋਧੀ ਆਇਨ ਹੁੰਦਾ ਹੈ। ਇਹ ਇੱਕ ਛੋਟਾ, ਸਮਤਲ ਫੀਨੋਥਾਇਜ਼ੀਨ ਰੰਜਕ ਹੈ, ਜਿਸ ਨੂੰ PubChem ਦੇ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਰਿਕਾਰਡ ਵਿੱਚ ਮੈਥੀਲਥਾਇਓਨਿਨੀਅਮ ਕਲੋਰਾਈਡ ਵਜੋਂ ਦਰਸਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ। ਧਨ-ਆਇਨ ਹੋਣ ਕਰਕੇ ਇਹ ਨਿਊਕਲਿਕ ਐਸਿਡਾਂ ਦੀ ਫਾਸਫੇਟ ਲੜੀ ਅਤੇ ਬੈਕਟੀਰੀਆ ਦੀਆਂ ਕੋਸ਼ਿਕਾ-ਕੰਧਾਂ ਦੇ ਅਮਲੀ ਸਮੂਹਾਂ ਨਾਲ ਜੁੜਦਾ ਹੈ, ਜਿਸ ਨਾਲ ਹਲਕੇ ਪਿਛੋਕੜ ਉੱਤੇ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਨੀਲੀਆਂ ਦਿਖਾਈ ਦਿੰਦੀਆਂ ਹਨ।

ਇਸ ਦੀ ਖ਼ੂਬੀ ਅਨੁਮਾਨਯੋਗ ਨਤੀਜੇ ਦੇਣਾ ਹੈ। ਕੋਸ਼ਿਕਾ-ਕੇਂਦਰ ਅਤੇ ਬੈਕਟੀਰੀਆ ਨੀਲੇ ਦਿਖਾਈ ਦਿੰਦੇ ਹਨ। ਵਿਰੋਧਾਭਾਸ ਦਰਮਿਆਨਾ ਹੁੰਦਾ ਹੈ। ਘੱਟ ਸਪਸ਼ਟ ਜੀਵਾਣੂ ਹਲਕੇ ਰੰਗੇ ਜਾ ਸਕਦੇ ਹਨ, ਅਤੇ ਇਹੀ ਉਹ ਸੀਮਾ ਸੀ ਜਿਸ ਨੂੰ ਦੂਰ ਕਰਨ ਲਈ ਲੋਫ਼ਲਰ ਨੇ ਕੰਮ ਕੀਤਾ ਸੀ। ਬੈਕਟੀਰੀਆ ਦੀ ਸਧਾਰਨ ਰੰਗਾਈ ਦੇ ਜਿਸ ਵੱਡੇ ਸਮੂਹ ਵਿੱਚ ਇਹ ਘੋਲ ਆਉਂਦਾ ਹੈ, ਉਸ ਬਾਰੇ ਜਾਣਨ ਲਈ ਬੈਕਟੀਰੀਆ ਦੀ ਸਧਾਰਨ ਰੰਗਾਈ ਦਾ ਸੰਖੇਪ ਵੇਰਵਾ ਵੇਖੋ। ਇੱਥੇ ਵੀ ਪਛਾਣ ਵਿੱਚ ਸਾਵਧਾਨੀ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਹੈ: ਮੈਥੀਲ ਬਲੂ ਬਿਲਕੁਲ ਵੱਖਰਾ ਅਣੂ ਹੈ, ਜਿਵੇਂ ਮੈਥੀਲ ਬਲੂ ਬਨਾਮ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਵਿੱਚ ਸਮਝਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ। ਇਸ ਲਈ ਸਿਰਫ਼ ਰੰਗ ਦੇ ਨਾਂ ਨਾਲ ਕੈਟਾਲਾਗ ਵਿੱਚ ਖੋਜ ਕਰਨ ਨਾਲ ਗ਼ਲਤ ਵਰਗ ਦਾ ਰੰਜਕ ਮਿਲ ਸਕਦਾ ਹੈ।

ਲੋਫ਼ਲਰ ਦਾ ਖਾਰੀ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ: ਉਹੀ ਰੰਜਕ, ਵਧੇਰੇ ਤੀਬਰ ਅਸਰ

ਲੋਫ਼ਲਰ ਦੀ ਰਵਾਇਤੀ ਵਿਧੀ ਵਿੱਚ ਅਲਕੋਹਲੀ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਸਟਾਕ ਘੋਲ ਨੂੰ ਪਾਣੀ ਵਿੱਚ ਪਤਲੇ ਖਾਰ ਨਾਲ ਮਿਲਾਇਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ। ਪਾਠ-ਪੁਸਤਕਾਂ ਦੀਆਂ ਵਿਧੀਆਂ ਵਿੱਚ 30 mL ਦੇ 95% ਈਥਾਨੋਲ ਵਿੱਚ 0.3 g ਰੰਜਕ ਅਤੇ 100 mL ਦਾ 0.01% ਜਲੀ ਪੋਟਾਸ਼ੀਅਮ ਹਾਈਡ੍ਰੋਕਸਾਈਡ ਘੋਲ ਮਿਲਾਉਣ ਲਈ ਕਿਹਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ। ਇਸ ਦਾ ਸਮਤੁੱਲ ਵਿਕਲਪ 30 mL ਸੰਤ੍ਰਿਪਤ ਅਲਕੋਹਲੀ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ, 100 mL ਆਸਵਿਤ ਪਾਣੀ ਅਤੇ 1 mL ਦਾ 1% KOH ਘੋਲ ਹੈ। ਇਸ ਨਾਲ ਸਪਸ਼ਟ ਤੌਰ ਉੱਤੇ ਖਾਰੀ pH ਵਾਲਾ, ਲਗਭਗ 0.3% ਰੰਜਕ ਵਾਲਾ ਵਰਤੋਂਯੋਗ ਘੋਲ ਬਣਦਾ ਹੈ। ਵਪਾਰਕ ਸੰਯੋਜਨ ਵੀ ਇਸੇ ਸਿਧਾਂਤ ਉੱਤੇ ਚੱਲਦੇ ਹਨ, ਅਤੇ Thermo Fisher ਦਾ ਸੂਖਮਜੀਵ ਵਿਗਿਆਨ ਰੰਗਕ ਕੈਟਾਲਾਗ ਲੋਫ਼ਲਰ ਦੇ ਖਾਰੀ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ, ਪੌਲੀਕ੍ਰੋਮ ਅਤੇ ਜਲੀ ਰੂਪਾਂ ਨੂੰ ਵੱਖਰੇ ਉਦੇਸ਼ਾਂ ਵਾਲੀਆਂ ਵੱਖਰੀਆਂ ਕੈਟਾਲਾਗ ਵਸਤੂਆਂ ਵਜੋਂ ਦਰਜ ਕਰਦਾ ਹੈ।

ਇਸ ਦਾ ਕਾਰਗਰ ਸਿਧਾਂਤ ਖਾਰ ਹੈ। pH ਵਧਾਉਣ ਨਾਲ ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਕਾਰਬੋਕਸਿਲ ਅਤੇ ਫਾਸਫੇਟ ਸਮੂਹਾਂ ਤੋਂ ਪ੍ਰੋਟਾਨ ਹਟਦੇ ਹਨ, ਜਿਸ ਨਾਲ ਰਿਣਾਤਮਕ ਸਥਾਨਾਂ ਦੀ ਘਣਤਾ ਵਧਦੀ ਹੈ। ਇਸੇ ਦੌਰਾਨ ਅਲਕੋਹਲੀ ਸਟਾਕ ਘੋਲ ਰੰਜਕ ਨੂੰ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਘੁਲਿਆ ਰੱਖਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਜੋ ਉਹ ਇਨ੍ਹਾਂ ਸਥਾਨਾਂ ਤੱਕ ਮੋਨੋਮੇਰਿਕ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਪਹੁੰਚੇ। ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਬੈਕਟੀਰੀਆ ਦੀ ਰੰਗਾਈ ਨਿਰਪੱਖ ਜਲੀ ਰੰਜਕ ਨਾਲੋਂ ਤੇਜ਼ ਅਤੇ ਵਧੇਰੇ ਤੀਬਰ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਅਤੇ ਆਮ ਬੈਕਟੀਰੀਆ ਸਮੀਅਰ ਵਿੱਚ ਜਾਣੀਆਂ-ਪਛਾਣੀਆਂ ਗੂੜ੍ਹੀਆਂ ਨੀਲੀਆਂ ਡੰਡਾਕਾਰ ਅਤੇ ਗੋਲਾਕਾਰ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਦਿਖਾਈ ਦਿੰਦੀਆਂ ਹਨ। ਰੰਗਾਈ ਦਾ ਸਮਾਂ ਆਮ ਤੌਰ ਉੱਤੇ ਇੱਕ ਤੋਂ ਤਿੰਨ ਮਿੰਟ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਜਿਸ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਪਾਣੀ ਨਾਲ ਧੋਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।

ਇਸ ਦੀ ਰਵਾਇਤੀ ਵਰਤੋਂ ਲੋਫ਼ਲਰ ਸੀਰਮ ਮਾਧਿਅਮ ਉੱਤੇ ਉਗਾਏ ਕੋਰੀਨੇਬੈਕਟੀਰੀਅਮ ਡਿਫਥੀਰੀਏ ਲਈ ਹੈ: ਪਤਲੀਆਂ, ਅਕਸਰ ਗਦਾ-ਆਕਾਰ ਦੀਆਂ ਡੰਡਾਕਾਰ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ, ਜਿਨ੍ਹਾਂ ਵਿੱਚ ਸੰਗ੍ਰਹਿਤ ਪੌਲੀਫਾਸਫੇਟ ਦੇ ਤੀਬਰ ਰੰਗੇ ਹੋਏ ਮੈਟਾਕ੍ਰੋਮੈਟਿਕ ਬੇਬਸ-ਅਰਨਸਟ ਕਣ ਹੁੰਦੇ ਹਨ। ਮਾਧਿਅਮ ਅਤੇ ਰੰਗਕ ਦੀ ਇਹ ਜੋੜੀ ਇਤਿਹਾਸਕ ਹੈ; ਦੋਵਾਂ ਦਾ ਸਿਹਰਾ ਇੱਕੋ ਬੈਕਟੀਰੀਆ ਵਿਗਿਆਨੀ ਨੂੰ ਦਿੱਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਕਣਾਂ ਦਾ ਵਿਰੋਧਾਭਾਸ ਇਸ ਦਾ ਪਛਾਣ-ਸੰਬੰਧੀ ਲਾਭ ਹੈ। ਡਿਫਥੀਰੀਆ ਦੇ ਕੰਮ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਇਹ ਰੰਗਕ ਕਲਚਰਾਂ ਤੋਂ ਬਣੇ ਸਮੀਅਰਾਂ ਲਈ ਆਮ ਬੈਕਟੀਰੀਆ ਰੰਗਕ ਵਜੋਂ, ਕਲੀਨੀਕਲ ਸਮੀਅਰਾਂ ਵਿੱਚ ਨਾਈਸੀਰੀਆ ਦੀ ਆਕ੍ਰਿਤੀ ਦੇਖਣ ਲਈ, ਅਤੇ ਉਨ੍ਹਾਂ ਥਾਵਾਂ ਉੱਤੇ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਜਿੱਥੇ ਗ੍ਰਾਮ ਰੰਗਾਈ ਦੀ ਲੋੜ ਨਹੀਂ ਹੁੰਦੀ ਪਰ ਸਾਦਾ ਜਲੀ ਬਲੂ ਬਹੁਤ ਫਿੱਕਾ ਪੈਂਦਾ ਹੈ। ਇਹ ਇੱਕਰੰਗੀ ਰੰਗਕ ਹੈ। ਹਰ ਅਮਲੀ ਸੰਰਚਨਾ ਨੀਲੇ ਦੀ ਕਿਸੇ ਨਾ ਕਿਸੇ ਛਾਂ ਵਿੱਚ ਰੰਗੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ। ਜਦੋਂ ਕਿਸੇ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ ਵਿੱਚ ਵੱਖਰੇ ਰੰਗਾਂ ਰਾਹੀਂ ਭੇਦ ਕਰਨ ਦੀ ਲੋੜ ਹੋਵੇ, ਤਾਂ ਇਕੱਲਾ ਖਾਰ ਇਹ ਨਹੀਂ ਕਰ ਸਕਦਾ।

ਇੱਕ ਵਿਹਾਰਕ ਸਾਵਧਾਨੀ: ਖਾਰੀ ਰੰਜਕ ਘੋਲ ਸਟੋਰੇਜ ਅਤੇ ਕਾਰਬਨ ਡਾਈਆਕਸਾਈਡ ਸੋਖਣ ਨਾਲ ਖ਼ਰਾਬ ਹੁੰਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਉਨ੍ਹਾਂ ਵਿੱਚ ਤਲਛਟ ਬਣਦੀ ਹੈ। ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾਵਾਂ ਜਾਂ ਤਾਂ ਥੋੜ੍ਹੀ ਮਾਤਰਾ ਤਿਆਰ ਕਰਦੀਆਂ ਹਨ, ਜਾਂ ਕੈਟਾਲਾਗ ਵਾਲਾ ਘੋਲ ਖਰੀਦ ਕੇ ਉਸ ਦੀ ਵਰਤੋਂਯੋਗ ਮਿਆਦ ਦਾ ਪਾਲਣ ਕਰਦੀਆਂ ਹਨ। ਉਹ ਅਜਿਹੀ ਪੁਰਾਣੀ ਬੋਤਲ ਨੂੰ ਚਲਾਉਂਦੀਆਂ ਨਹੀਂ ਰਹਿੰਦੀਆਂ ਜੋ ਹੁਣ ਹਰ ਸਲਾਈਡ ਉੱਤੇ ਤਲਛਟ ਛੱਡਦੀ ਹੈ।

ਪੌਲੀਕ੍ਰੋਮ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ: ਇੱਕ ਨਾਂ, ਕਈ ਰੰਜਕ

ਪੌਲੀਕ੍ਰੋਮ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਦੀ ਸ਼ੁਰੂਆਤ ਉਸੇ ਰੰਜਕ ਤੋਂ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਪਰ ਉਸ ਨੂੰ ਖਾਰ ਵਿੱਚ ਨਿਯੰਤਰਿਤ ਆਕਸੀਕਰਨ ਵਿੱਚੋਂ ਲੰਘਾਇਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ। ਇਤਿਹਾਸਕ ਤੌਰ ਉੱਤੇ ਇਸ ਨੂੰ ਪਰਿਪੱਕ ਕਰਨਾ ਜਾਂ ਪੌਲੀਕ੍ਰੋਮਿੰਗ ਕਿਹਾ ਜਾਂਦਾ ਸੀ। ਖਾਰੀ ਅਵਸਥਾ ਵਿੱਚ ਸਮੇਂ ਨਾਲ ਹੋਣ ਵਾਲੀ ਤਬਦੀਲੀ, ਕਾਰਬੋਨੇਟ ਨਾਲ ਗਰਮ ਕਰਨਾ, ਜਾਂ ਡਾਈਕ੍ਰੋਮੇਟ ਵਰਗੇ ਕਾਰਕਾਂ ਨਾਲ ਆਕਸੀਕਰਨ ਡਾਈਮੈਥੀਲਅਮੀਨੋ ਪ੍ਰਤਿਸਥਾਪਕ ਸਮੂਹਾਂ ਤੋਂ ਕ੍ਰਮਵਾਰ ਮੈਥੀਲ ਸਮੂਹ ਹਟਾਉਂਦੇ ਹਨ। ਇਸ ਦਾ ਉਤਪਾਦ ਇੱਕ ਮਿਸ਼ਰਣ ਹੁੰਦਾ ਹੈ: ਬਚਿਆ ਹੋਇਆ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ, ਨਾਲ azure B (ਇੱਕ ਮੈਥੀਲ ਸਮੂਹ ਹਟਿਆ ਹੋਇਆ), azure A ਅਤੇ azure C (ਹੋਰ ਡੀਮੈਥੀਲੇਸ਼ਨ), ਥਾਇਓਨਿਨ (ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਡੀਮੈਥੀਲੇਟ ਕੀਤਾ ਹੋਇਆ), ਅਤੇ ਮੈਥੀਲੀਨ ਵਾਇਲਟ ਸਮੂਹ ਦੇ ਆਕਸੀਕਰਨੀ ਸਹਿ-ਉਤਪਾਦ। ਹਰ ਘਟਕ ਦਾ ਆਪਣਾ ਰੰਗ ਅਤੇ ਉਤਕ ਨਾਲ ਜੁੜਨ ਦੀ ਰੁਚੀ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਇਸ ਲਈ ਮਿਸ਼ਰਣ ਮੈਟਾਕ੍ਰੋਮੈਟਿਕ ਢੰਗ ਨਾਲ ਰੰਗਦਾ ਹੈ: ਕੋਸ਼ਿਕਾ-ਕੇਂਦਰ, ਕਣ, ਮਿਊਸਿਨ ਅਤੇ ਉਪਾਸਥੀ ਹਰੇਕ ਨੀਲੇ ਤੋਂ ਲਾਲ-ਬੈਂਗਣੀ ਤੱਕ ਵੱਖਰੀਆਂ ਛਾਵਾਂ ਧਾਰਨ ਕਰਦੇ ਹਨ।

ਇਹੀ ਰਸਾਇਣਕ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਪ੍ਰਸਿੱਧ ਖੂਨ ਰੰਗਕਾਂ ਦੇ ਪਿੱਛੇ ਵੀ ਹੈ। ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਖੋਜਕਰਤਾਵਾਂ ਨੇ ਦੇਖਿਆ ਕਿ ਖਾਰੀ ਕੀਤਾ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਮਲੇਰੀਆ ਪਰਜੀਵੀ ਦੇ ਕੋਸ਼ਿਕਾ-ਕੇਂਦਰਾਂ ਨੂੰ ਬੈਂਗਣੀ ਦੀਆਂ ਛਾਵਾਂ ਵਿੱਚ ਰੰਗਦਾ ਸੀ, ਪਰ ਉਨ੍ਹਾਂ ਦੇ ਪਰਿਪੱਕ ਕੀਤੇ ਜਲੀ ਘੋਲ ਅਸਥਿਰ ਸਨ ਅਤੇ ਕੁਝ ਦਿਨਾਂ ਵਿੱਚ ਤਲਛਟ ਬਣਾਉਣ ਲੱਗ ਪੈਂਦੇ ਸਨ। ਬੈਂਗਣੀ ਖੂਨ ਰੰਗਕ ਦੀ ਖੋਜ ਕਿਵੇਂ ਹੋਈ ਦੀ ਸਮੀਖਿਆ ਦੱਸਦੀ ਹੈ ਕਿ ਮਾਲਾਖੋਵਸਕੀ ਅਤੇ ਰੋਮਾਨੋਵਸਕੀ ਨੇ 1891 ਵਿੱਚ ਸੁਤੰਤਰ ਤੌਰ ਉੱਤੇ ਇਸ ਪ੍ਰਭਾਵ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਿਵੇਂ ਕੀਤੀ, ਰੰਜਕ ਦੀ ਤਲਛਟ ਨੂੰ ਸਥਿਰ ਕਰਨ ਅਤੇ ਬਿਨਾਂ ਗਰਮੀ ਦੇ ਸਮੀਅਰ ਪਰਤਾਂ ਨੂੰ ਸਥਿਰ ਕਰਨ ਲਈ ਮੈਥਾਨੋਲ ਕਿਵੇਂ ਵਰਤਿਆ ਜਾਣ ਲੱਗਾ, ਅਤੇ ਬਾਅਦ ਵਿੱਚ ਗੀਮਸਾ ਨੇ ਮਾਪੀ ਹੋਈ azure B ਅਤੇ ਈਓਸਿਨ ਦੀ ਮਾਤਰਾ ਨਾਲ, ਗਲਿਸਰੋਲ ਰਾਹੀਂ ਸਥਿਰ ਕਰਕੇ, ਮਿਸ਼ਰਣ ਨੂੰ ਮਿਆਰੀ ਕਿਵੇਂ ਬਣਾਇਆ। ਆਧੁਨਿਕ ਗੀਮਸਾ-ਕਿਸਮ ਦੇ ਰੰਗਕ ਸਿੱਧੇ ਤੌਰ ਉੱਤੇ ਪੌਲੀਕ੍ਰੋਮ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਅਤੇ ਈਓਸਿਨ ਤੋਂ ਵਿਕਸਿਤ ਹੋਏ ਹਨ; ਇਹੀ ਜੋੜ ਰੋਮਾਨੋਵਸਕੀ ਪ੍ਰਭਾਵ ਪੈਦਾ ਕਰਦਾ ਹੈ। ਈਓਸਿਨ ਨਾਲ ਇਸ ਜੋੜ ਅਤੇ azure B ਘਟਕ ਦੇ ਵਿਸਥਾਰ ਲਈ, ਰੋਮਾਨੋਵਸਕੀ-ਕਿਸਮ ਦੇ ਰੰਗਕ ਅਤੇ azure B ਤੇ ਈਓਸਿਨ ਦੀ ਪਰਸਪਰ ਕਿਰਿਆ ਵੇਖੋ।

ਮਿਸ਼ਰਣ ਹੋਣ ਕਰਕੇ, ਪੌਲੀਕ੍ਰੋਮ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਸੁਭਾਵਕ ਤੌਰ ਉੱਤੇ ਇਨ੍ਹਾਂ ਤਿੰਨਾਂ ਵਿੱਚੋਂ ਸਭ ਤੋਂ ਘੱਟ ਮਿਆਰੀਕ੍ਰਿਤ ਹੈ। ਇਸ ਦੇ ਰੰਗਾਂ ਦਾ ਸਟੀਕ ਸੰਤੁਲਨ ਆਕਸੀਕਰਨ ਦੇ ਢੰਗ ਅਤੇ ਮਾਤਰਾ ਉੱਤੇ ਨਿਰਭਰ ਕਰਦਾ ਹੈ। ਇਸੇ ਕਰਕੇ ਉਤਕ ਵਿਗਿਆਨ ਦੇ ਸਪਲਾਇਰ ਇਸ ਨੂੰ ਪੁਰਾਣੇ ਹੋ ਚੁੱਕੇ ਲੋਫ਼ਲਰ ਦੇ ਘੋਲ ਵਜੋਂ ਨਹੀਂ, ਸਗੋਂ ਆਪਣੀ ਕਾਰਗੁਜ਼ਾਰੀ ਜਾਂਚ ਵਾਲੇ ਵੱਖਰੇ ਉਤਪਾਦ ਵਜੋਂ ਵੇਚਦੇ ਹਨ। ਆਮ ਵਰਤੋਂ ਵਿੱਚ ਮਾਸਟ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਦੇ ਕਣਾਂ, ਮਿਊਸਿਨ ਅਤੇ ਉਪਾਸਥੀ ਨੂੰ ਮੈਟਾਕ੍ਰੋਮੈਟਿਕ ਢੰਗ ਨਾਲ ਦਰਸਾਉਣਾ, ਪਲਾਜ਼ਮਾ ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਦੇ ਵੇਰਵੇ ਦਿਖਾਉਣਾ, ਅਤੇ ਗੁੱਡਪਾਸਚਰ-ਕਿਸਮ ਦੀਆਂ ਪੌਲੀਕ੍ਰੋਮ ਵਿਧੀਆਂ ਰਾਹੀਂ ਉਤਕਾਂ ਦੇ ਪਤਲੇ ਕੱਟਾਂ ਵਿੱਚ ਹੈਲੀਕੋਬੈਕਟਰ ਪਾਈਲੋਰੀ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਣਾ ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ। ਜਦੋਂ ਸਵਾਲ ਰੰਗ ਰਾਹੀਂ ਭੇਦ ਕਰਨ ਦਾ ਹੋਵੇ, ਤਾਂ ਇਹ ਸਹੀ ਚੋਣ ਹੈ। ਜਦੋਂ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ ਬੈਕਟੀਰੀਆ ਦੀ ਸਾਫ਼ ਇੱਕਰੰਗੀ ਆਕ੍ਰਿਤੀ ਦੀ ਉਮੀਦ ਕਰਦਾ ਹੋਵੇ, ਤਾਂ ਇਹ ਗ਼ਲਤ ਚੋਣ ਹੈ।

ਸੰਯੋਜਨ ਅਤੇ ਉਦੇਸ਼ ਦੀ ਤੁਲਨਾ

ਸਾਰਣੀ ਨੂੰ ਫ਼ੈਸਲਾ ਕਰਨ ਦੀ ਵਿਧੀ ਵਜੋਂ ਪੜ੍ਹੋ। ਜੇ ਨਮੂਨਾ ਬਹੁਤ ਫਿੱਕਾ ਰੰਗਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ pH ਵਾਲਾ ਸਿਧਾਂਤ ਬਦਲੋ ਅਤੇ ਲੋਫ਼ਲਰ ਦਾ ਰੰਗਕ ਲਵੋ। ਜੇ ਸਭ ਕੁਝ ਰੰਗਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਪਰ ਕੁਝ ਵੀ ਵੱਖਰਾ ਨਹੀਂ ਦਿਸਦਾ, ਤਾਂ ਰੰਜਕ ਵਾਲਾ ਸਿਧਾਂਤ ਬਦਲੋ ਅਤੇ ਪੌਲੀਕ੍ਰੋਮ ਲਵੋ। ਜੇ ਲੋਫ਼ਲਰ ਨਾਲ ਰੰਗੇ ਸਮੀਅਰ ਵਿੱਚ ਕਣ ਬਹੁਤ ਸਾਫ਼ ਦਿਖਦੇ ਹਨ ਪਰ ਨਿਗਰਾਨ ਪੁੱਛਦਾ ਹੈ ਕਿ ਕੋਸ਼ਿਕਾ-ਕੇਂਦਰ ਅਤੇ ਕੋਸ਼ਿਕਾ-ਦ੍ਰਵ ਦੋਵੇਂ ਇੱਕੋ ਨੀਲੇ ਰੰਗ ਵਿੱਚ ਕਿਉਂ ਹਨ, ਤਾਂ ਜਵਾਬ ਇਹ ਹੈ ਕਿ ਕੋਈ ਵੀ ਖਾਰੀ ਇੱਕਰੰਗੀ ਰੰਗਕ ਉਨ੍ਹਾਂ ਨੂੰ ਵੱਖਰੇ ਰੰਗ ਦੇਣ ਦਾ ਕੰਮ ਨਹੀਂ ਕਰ ਸਕਦਾ। ਇਹ ਸਵਾਲ ਪੌਲੀਕ੍ਰੋਮ ਸਮੂਹ ਅਤੇ ਉਸ ਦੇ ਖੂਨ ਰੰਗਕ ਉਤਪੰਨਾਂ ਨਾਲ ਸੰਬੰਧਿਤ ਹੈ।

ਆਮ ਗ਼ਲਤਫ਼ਹਿਮੀਆਂ ਤੋਂ ਬਚਣਾ

ਜ਼ਿਆਦਾਤਰ ਉਲਝਣ ਦੋ ਗ਼ਲਤੀਆਂ ਕਾਰਨ ਹੁੰਦੀ ਹੈ। ਪਹਿਲੀ ਇਹ ਹੈ ਕਿ ਲੋਫ਼ਲਰ ਦੇ ਰੰਗਕ ਨੂੰ ਸਾਦੇ ਮੈਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਨਾਲ ਅਦਲ-ਬਦਲ ਕੇ ਵਰਤਣਯੋਗ ਮੰਨ ਲਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਕਿਉਂਕਿ ਬੋਤਲ ਵਿੱਚ ਦੋਵੇਂ ਨੀਲੇ ਦਿਖਦੇ ਹਨ। ਉਨ੍ਹਾਂ ਦਾ pH ਅਤੇ ਤੀਬਰਤਾ ਵੱਖਰੇ ਹਨ। ਜਿੱਥੇ ਲੋਫ਼ਲਰ ਦਾ ਰੰਗਕ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੋਵੇ, ਉੱਥੇ ਨਿਰਪੱਖ ਰੰਜਕ ਵਰਤਣ ਨਾਲ ਕਣਾਂ ਦਾ ਉਹੀ ਵਿਰੋਧਾਭਾਸ ਗੁਆਚ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਜਿਸ ਨੂੰ ਧਿਆਨ ਵਿੱਚ ਰੱਖ ਕੇ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ ਲਿਖਿਆ ਗਿਆ ਸੀ। ਦੂਜੀ ਗ਼ਲਤੀ ਕਿਸੇ ਵੀ ਪੁਰਾਣੇ ਜਾਂ ਅਣਜਾਣੇ ਵਿੱਚ ਸਮੇਂ ਨਾਲ ਬਦਲ ਚੁੱਕੇ ਖਾਰੀ ਬਲੂ ਨੂੰ ਪੌਲੀਕ੍ਰੋਮ ਮੰਨ ਲੈਣਾ ਹੈ। ਸਮੇਂ ਨਾਲ ਬੇਨਿਯੰਤਰਿਤ ਤਬਦੀਲੀ ਅਣਜਾਣ ਸੰਘਣਤਾ ਵਾਲਾ ਅਣਜਾਣ ਮਿਸ਼ਰਣ ਪੈਦਾ ਕਰਦੀ ਹੈ, ਜਦਕਿ ਅਸਲੀ ਪੌਲੀਕ੍ਰੋਮ ਘੋਲ ਨਿਰਧਾਰਤ ਆਕਸੀਕਰਨ ਵਿਧੀਆਂ ਨਾਲ ਤਿਆਰ ਕੀਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ ਅਤੇ, ਖੂਨ ਰੰਗਕਾਂ ਦੀ ਲੜੀ ਵਿੱਚ, ਮਾਪੀ ਹੋਈ ਈਓਸਿਨ ਨਾਲ ਮਿਲਾਏ ਜਾਂਦੇ ਹਨ। ਇੱਥੇ ਇਤਿਹਾਸ ਸਬਕ ਦਿੰਦਾ ਹੈ: 1890 ਦੇ ਦਹਾਕੇ ਦੇ ਅਸਥਿਰ, ਪਰਿਪੱਕ ਕੀਤੇ ਜਲੀ ਘੋਲਾਂ ਦੀ ਥਾਂ ਮੈਥਾਨੋਲ ਨਾਲ ਸਥਿਰ ਕੀਤੇ ਸੰਯੋਜਨਾਂ ਨੇ ਇਸੇ ਲਈ ਲਈ ਸੀ ਕਿ ਬੇਨਿਯੰਤਰਿਤ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਨੂੰ ਮੁੜ ਉਸੇ ਤਰ੍ਹਾਂ ਬਣਾਇਆ ਨਹੀਂ ਜਾ ਸਕਦਾ ਸੀ। ਅਣਨਿਸ਼ਚਿਤ ਉਮਰ ਵਾਲੀ ਬੋਤਲ ਨਾਲ ਨਿਦਾਨਕ ਸਲਾਈਡ ਰੰਗਣ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਇਹ ਸਬਕ ਯਾਦ ਕਰਨਾ ਲਾਭਦਾਇਕ ਹੈ।

ਨਾਂ ਦੀ ਸਹੀ ਪਛਾਣ ਇਸ ਉਲਝਣ ਨੂੰ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਦੂਰ ਕਰਦੀ ਹੈ। ਰੰਗ ਤੋਂ ਅੰਦਾਜ਼ਾ ਲਾਉਣ ਦੀ ਬਜਾਏ ਲੇਬਲ ਉੱਤੇ ਕੈਟਾਲਾਗ ਵਸਤੂ ਦੀ ਕਿਸਮ (ਜਲੀ ਬਨਾਮ ਲੋਫ਼ਲਰ ਬਨਾਮ ਪੌਲੀਕ੍ਰੋਮ), ਰੰਜਕ ਦੀ ਮਾਤਰਾ ਅਤੇ ਨਿਰਧਾਰਤ ਵਰਤੋਂ ਦੀ ਪੁਸ਼ਟੀ ਕਰੋ। ਤਿੰਨਾਂ ਸੰਯੋਜਨਾਂ ਦਾ ਕ੍ਰੋਮੋਫੋਰ ਮੂਲ ਇੱਕੋ ਹੈ। ਉਨ੍ਹਾਂ ਦਾ ਉਦੇਸ਼ ਇੱਕੋ ਨਹੀਂ ਹੈ।